介绍两种简便的生化样品浓缩方法

在生理生化实验中,经常要将某些样品进行浓缩。现在介绍我们实验室中曾经用过的两种简便方法,以供大家参考。一真空减压透析浓缩法真空减压透析浓缩法的基本原理是利用浓缩装置内外的压力差,将所欲浓缩样品中     

核酸及蛋白质合成、提取、纯化

921598自动化引物延伸装置〔专,日〕/Toa一Fuel/Jo3154一869:13.11。89一JP一294369(02。07.91)13.11。89 as 294369.92一235530/32(10页)〔译自DBA,1991,10(21),91一12085〕 新装置能将荧光标记的DNA引物加入样品、退火、酶促引物延伸及浓缩。该系统包括:DNA样品容器支撑及定位装置、将样品、引物及缓冲液导人容器的设施、加盖去盖装置、加热及温控装置、样品冷却装置、容器振荡(混匀)装置、低速及高速顺序离心装置以及控制装置(使退火、延伸及浓缩等过程可自动进行)。通过应用混匀和离心过程,可完全消除粘连在管壁上的样品,并且,微…     

植物萜类合成酶1-脱氧-D-木酮糖-5-磷酸还原异构酶的分子结构特征与功能预测分析

采用生物信息学的方法和工具对已在GenBank上注册的拟南芥、玉米、岩蔷薇、水稻、黄花蒿、亚麻等植物的萜类合成酶1-脱氧-D-木酮糖-5-磷酸还原异构酶的核酸及氨基酸序列进行分析,并对其组成成分、转运肽、跨膜拓朴结构域、疏水性/亲水性、蛋白质二级及三级结构、分子系统进化关系等进行预测和推断。结果表明：该类酶基因的全长包括5′、3′非翻译区和一个开放阅读框,无跨膜结构域,是一个具转运肽的亲水性蛋白,包括两个功能DXR结合motif及两个功能NADPH结合motif,α-螺旋和不规则卷曲是蛋白质二级结构最大量的结构元件,β-转角和β-折叠散布于整个蛋白质中,蛋白质的功能域在空间结构上折叠成“V”形,“V”形的两臂由N-端与C-端构成,“V”形的底部,是N 端臂与C-端臂的结合域。     

一个多用途的垂直升降电泳装置

本电泳装置经过多次实验,表明仪器性能良好,可满足各种电泳的要求。它具有活动的上槽,能调节上下的距离直至250毫米,槽的两侧至少可同时做二块凝胶板,便于比较实验。凝胶板的大小和厚薄可用不同长度的玻板和不同规格的衬条(宽窄、长短、厚薄)来调节凝胶模框。本电泳槽不仅能做单向或双向电泳,还可作盘状电泳。因此是一种多用途的电泳装置。     

一种从琼脂糖凝胶中回收DNA片段的简单电洗脱装置

我们设计了一种简单电洗脱装置,从琼脂糖胶中回收ＤＮＡ。该装置由两个带旋盖的小管、两块透析膜和一个凝胶屏障组成。在电场作用下,ＤＮＡ从凝胶中迁移出来,通过凝胶屏障进入由凝胶屏障和透析膜组成的回收小仓。用微量吸样器收集ＤＮＡ,乙醇沉淀和清洗。该法ＤＮＡ的回收率约８５％;回收的ＤＮＡ可用于基因工程常规实验。     

云南曲靖张家营一肺鱼齿板

<正> 本文记述的肺鱼齿板是1979年在云南进行野外工作时采获的。标本产自云南曲靖张家营东山中泥盆统曲靖组。登记号V6257 经观察这一标本很可能属于双翼鱼科(Dipteridae),代表一新属、新种。特征一保存不完整的齿板,冠面呈扇形。具9条齿脊,彼此近于平行,脊上具有数目不等的齿突,表面具有琺琅质层。齿谷表面粗糙并缺失琺琅质层。靠近齿板外缘内侧,在齿板冠面上有一浅槽。描述一件保存不完整的左下齿板,仅前侧具脊的部分被保存下来,而后中光滑的台面部分则缺失。齿板中等大小,呈扇形。保存部分的最大长度21毫米,最大宽度16毫     

重组人绒毛膜促性腺激素嵌合肽12的聚丙烯酰胺凝胶电泳制备

利用板状聚丙烯酰胺凝胶电泳 (PAGE)方法 ,建立了一步分离纯化基因工程表达蛋白质的新技术。在构建的人绒毛膜促性腺激素嵌合肽 (CP1 2 )表达率约为 1 %的情况下 ,借助分析制备两用型板状PAGE装置 ,通过下行和上行两次电泳以及用透析膜隔离形成收集槽这两步改进 ,从包涵体抽提液中一步纯化了目的表达产物。结果表明 ,一次上样总蛋白质量为 3～ 4mg的PAGE ,可获得 5 0～ 1 0 0 μgCP1 2蛋白 ,其相对均一性达到 95 %。研究提示此改良的制备性PAGE新技术 ,是一种分离纯化低分子量目的蛋白质的好方法     

介绍一种从胶凝中回收DNA的方法

在基因的结构与功能的研究中,如基因的物理图谱,测定DNA序列,DNA杂交,DNA重组,都必须首先获得高纯度的足量的DNA片段。如何从凝胶中回收DNA组份则是比较困难而又关键的问题。从已发表的文献来看,目前尚没有一种公认满意的方法。我们根据本实验室的具体条件,摸索建立了一种“带前洗脱槽法”,用此法从凝胶中洗脱回收DNA取得了非常满意的效果。在紫外灯下确定DNA带的位置,在带前挖一个适当大小的凹形槽(图1)。用适当宽度的透析膜包被梳子的一面,两侧面和底面(图2)。将梳子置DNA带前,未包被透析膜的一面紧贴带的凝胶。凹形槽其余部分用较高浓度(1％)的琼脂糖凝胶填     

松辽盆地松科1井南孔晚白垩世介形类生物地层

松科1井是世界上第一口陆相白垩纪科学钻井,其南孔获取自泉头组三段顶部至嫩江组二段底部的连续地层记录。本文以松科1井南孔岩心样品介形类化石的系统鉴定和统计分析为基础,共建立15个介形类化石组合带,自下而上分别为：1）C ypridea subtuberculis perga-Mongoloc ypris longicau...     

蛋白质的肽质谱指纹图分析方法的优化

肽质谱指纹图分析是一种常用的蛋白质的鉴定方法.为了提高这种方法鉴定蛋白质时序列覆盖率和准确度,以6个标准蛋白质为分析样品,对几种不同的酶解肽段的浓缩、脱盐和点样方法进行了检验和优化.结果发现,将酶解肽段的浓缩体积控制在5μl以下和采用10mmolL柠檬酸铵缓冲液板上脱盐能提高蛋白质鉴定的准确度;在点样的时候,采用先点样品再点基质的方法能明显提高匹配肽段的个数和信噪比.这些优化的样品制备方法明显地提高了MALDITOF质谱肽质谱指纹图分析方法鉴定蛋白质的可靠性.     

五种槽缝叩甲超微形态结构的比较研究 (鞘翅目:叩甲科)

通过扫描电镜观察了槽缝叩甲属Agrypnus 5种的触角、前胸背板、中胸小盾片、鞘翅、前胸腹板、前胸侧板、中胸腹窝、跗节等部位的超微形态结构,提出了5种槽缝叩甲超微形态的区别特征,发现了槽缝叩甲体表鳞片毛上的纵脊数目和走向、中胸腹窝的结构与形状、体表刻点的形态等具有明显的种间差异,具有重要的分类学意义。讨论了硬结构昆虫扫描样品制备的程序,叩甲的叩头关节、触角槽、跗节槽的形成与功能,以及超微形态结构在叩甲分类上的价值等。     

植物萜类合成酶3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A还原酶的生物信息学分析

采用生物信息学的方法和工具对已在GenBank上注册的橡胶、烟草、辣椒、穿心莲等植物的萜类合成酶3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A还原酶的核酸及氨基酸序列进行分析,并对其组成成分、信号肽、跨膜拓朴结构域、疏水性/亲水性、蛋白质二级及三级结构、分子系统进化关系等进行预测和推断。结果表明该类酶基因的全长包括5′、3′非翻译区和一个开放阅读框,无信号肽,是一个跨膜的亲水性蛋白,包括两个功能HMG-CoA结合motif及两个功能NADPH结合motif,α-螺旋和不规则盘绕是蛋白质二级结构最大量的结构元件,β-转角和延伸链散布于整个蛋白质中,蛋白质的功能域在空间布局上折叠成“V”形,“V”形的两臂由螺旋状的N结构域和S结构域构成,中间部分由L结构域构成。     

一种垂直板凝胶电泳装置的简便胶封技术

垂直板凝胶电泳技术,在生物学和医学研究中使用日益普遍。然而,与水平电泳相比,由装置的垂直状态产生的液面高差,在制板电泳过程中易出现胶液或电极液渗漏,导致电泳失败。因此,发展一项简便可靠的防漏技术实有必要。本文介绍一种以聚丙烯酰胺凝胶(PAG)作为防漏介质的垂直板电泳装置和胶封技术,使用效果满意。一、电泳装置由上、下电泳槽(图1)和凝胶板模(图2)二部分组成。电泳槽用有机玻璃制作。下槽是一只上口敞开的     

山东日照发现象化石

2002年3月,山东省日照市在修筑同三高速公路时,于东港区日照街道黄家河大桥工地挖掘出1枚象臼齿化石。这是首次在日照市范围发现象化石。该象臼齿齿冠面轮廓近长圆形,保留齿板9个,咀嚼面9个,后边若干齿板未保存。齿板频率6。从咀嚼面上看,前4个齿板已磨蚀呈长条形,第5、6两个齿板已磨蚀呈“·—·”形,第7、8、9三个齿板呈“……”形。釉质层2mm,后边具强烈褶皱,第2、3、4三个齿板中央后面有中尖突。咀嚼面中部微凹,约比两边下陷1·5mm。保留齿板长155mm,宽79mm(第3脊),重2900g。在挖掘现场,还有3片散落的齿板,尚难断定是否来自上述臼齿。现…     

中国单趾轮虫属─新纪录(轮虫纲:单巢目:腔轮科)

1990年6月和9月,作者对山西运城附近的三个盐水湖泊进行了调查,共采集了浮游动物定性样品48个,定量样品38个。经鉴定发现轮虫共有34种（赵文,何志辉,1993）,其中包括中国新纪录种。描述如下。薄片单趾轮由MonostylalamellataDaday,1893被甲较透明,长卵圆形;如不包括趾在内,宽度约相当于长度的2／3。背甲和腹甲前端边缘彼此并不凑合一致。背甲前端边缘系新月形,下凹比较深且狭,腹甲前端边缘系一很阔而呈“V”形凹陷,两侧形成一对刺状尖端。背甲卵圆形,后端浑圆。腹甲长卵圆形,比背甲略狭,近前端略形紧缩;它表面上的刻纹具…     

土大蚊的生物学特性观察

土大蚊Nephrotomasp·是鲁西北地区首先发现的一种地下害虫,主要危害粮食作物等。自1981年始,先后在聊城地区高唐县、冠县和聊城市相继发现,其危害日趋严重。我所于1985～1992年对其进行了室内饲养和野外调查,现将结果整理如下。1形态特征成虫：体黄褐色。体长：雌虫19～22mm,雄虫14～18mm。头小,复眼发达黑色,额前上方有1个菱形黑褐斑。上唇基基短,中部有1黑褐色突起,上生鬃毛,下唇发达,呈两瓣状。下额须4节,第4节长,相当前3节之和。触角丝状,互5节。胸部发达,背面隆起,有川1”字形黑斑,中胸背板的盾前为呈“V”形。翅狭…     

简单、快速、灵敏的微型凝胶电泳装置

为了满足核酸、蛋白质极微量样品分析的需要,本室根据Ogrita等介绍的方法自制了比原设计更简单的微型双垂直板凝胶电泳装置。该装置由三块有机玻璃、四块窗玻璃和一个培养皿构成。胶室容量6.5毫升,点样量1微克(或更少)至10微克,每块胶板可点12个样品,电泳时间约2小时,两个垂直板的电泳条件完全相同。一、制作及组装取三块有机玻璃,长×宽×厚分别为:A_1=110×25×5毫米,A_2=90×25×5     

组合式电渗析装置

从大分子样品溶液中去除小分子盐类成分主要是利用膜分离技术。其原理是利用样品溶液中溶质分子的大小、形状和性质等的差别对各种薄膜表现出不同的可透过性而达到分离的目的。主要包括透析法、超滤法、反渗透法和电渗析法等。其中电渗析法是在透析膜的两侧加电极,使可透过膜的与不可透过膜的带电溶质在电场中相对移动而彼此分开的方法。这种方法用于大分子溶液的脱盐和纯化具有快速简便的优点。本实验室根据上述原理及实际工作需要,研制出一套组合式电渗析装置,具体制作方法如下:     

测报用分层水架黑光灯介绍

我们试制了测报用的分层木架黑光灯,经试用效果很好。 1.灯伞 为木板或油毡制成52×55厘米呈屋脊形的罩,中间加一6×3×39厘米的横梁,镇流器、启动器和开关安装在横梁上,两边的木柱为3×2.5×120厘米。 2.漏斗 方形,上口内径为39×39厘米,高24厘米,下口内径为4.5×4.5厘米,漏斗框用三角形木条钉成方形,固定在两边的木柱上。并于木柱两边各加“人”字形支柱,固定位置视挡虫板与灯管长度确定。漏斗用木制,也司用塑料布剪成长三角形制成,上端用     

茎和根几个次生结构的探讨——植物学教材质疑(九)

一些植物学教材中,被子植物的几个次生结构长期被误解。木材(次生木质部)切向切面上的年轮呈“倒V”形,但几乎所有植物学教材都描述其为“V”形结构。几年生茎的横切面会在形成层外方产生一些“倒三角”形结构,其多被教材当作韧皮射线,实际上这是次生延长的髓射线的外侧段。横切次生生长的根,可观察到“倒三角”形的次生射线,此结构被一些植物学教材忽略或当作韧皮射线。周皮模式图常有错误标注或误绘;分析这些错误,有助于学生更好地理解周皮的起源和发育。笔者设计了两个探究性实验,帮助学生识别次生结构,并且根据结构与功能的关系去判断器官类型。