利用菌体酯酶同工酶和可溶性蛋白SDS—PAGE鉴定链霉菌融合子

利用酯酶同工酶技术鉴定链霉菌融合子证实,融合子SP-7和SR-T19的酯酶同工酶谱表现为介于双亲的中间型,并互不相同。此外,融合子SR-7还出现1条双亲所没有的决要酶带。表明融合子在融合过程中发生了真正的遗传重组,而不是亲本遗传物质的简单加合。菌体可溶性蛋白SDS－PAGE显示,融合子SR-7和SR-T19与双亲具有总体上的相似性,且可分辨的谱带数目和强度都超过了双亲,同时相互之间又有明显的不同,支持了这2个融合子均是双亲重组的后代。     

SDS—PAGE电泳对小分子多肽的分析

对一些小分子多肽进行电泳分析时,在固定,染色,脱色过程中极易扩散丢失;即使用常规尿素－ＳＤＳ－ＰＡＧＥ系统测定寡肽分子量,银染色后小于８ＫＤａ的标准品也无着色带显示。     

甲型肝炎病毒衣壳蛋白SDS—PAGE免疫分析

从甲型肝炎病毒(HAV)持续感染的BGMK细胞中提取高纯度的HAV,病毒呈规则的结晶状排列,用~(125)I标记,以免疫沉淀与SDS—PAGE相结合的方法分析HAV病毒衣壳蛋白,并分离出能与抗HAV抗体起反应的Vp1、Vp2及Vp3。     

应用SDS—PAGE显示小分子多肽技术的探讨

为探讨显示小分子多肽技术,应用SDS－PAGE寻找更简单,快捷的分析小分子多肽的方法。采用8％,T,3％C的丙烯酰胺浓缩胶和含6mol/L脲（或含24％的甘油）的16％T,6％C的丙烯酰胺分离胶 的双层不连续SDS－PAGE和三羟基甘氨酸电泳缓冲液显示蛋白分子量标准（2．512－16．949KD）和待测样品,并对蛋白分子量标准在这两种分离胶中进行了回归分析。结果表明在这两种条件下均能显示分子量小至2．512KD的多肽;多肽样品在含脲和在含甘油的2L－T－SDS－PAGE中均有较好的显带,蛋白分子量标准的直线回归系数分别为r=-0.966和r=-0.964,它们是显示小分子多肽和估测其相对分 子质量及对多肽分子进行进一步分析和更为简便易行的方法。     

神经肽注射液多肽成份的分离及鉴定

本实验采用ＳｅｐｈａｄｅｘＧ２５及ＡＣＡ凝胶柱层析技术,对神经肽注射液中多肽成份进行过柱分离。将过柱后收集的不同洗脱峰的溶液通过紫外扫描,茚三酮显色,微量双缩脲试验及薄层层析等技术进行鉴定。此外还用ＳＤＳ—ＰＡＧＥ检测该注射液纯度及分子量。结果表明神经肽注射液含有一种主要多肽成份及大量小分子肽类,其主要多肽成份的分子量为１４,０００Ｄ。     

SDS可溶性菌体蛋白在分枝杆菌菌型鉴定中的应用研究

用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)技术,对比分析了未经超声破碎,而直接以SDS、2-巯基乙醇、EDTA提取的四种分枝杆菌菌体蛋白图谱,显示人型结核分枝杆菌H₃₇R_v株与牛型分枝杆菌BCG株的图谱极相似,尤其在95KD、85KD、67/66KD、60KD及50/49KD 5条主带上完全对应,而堪萨斯及鸟分枝杆菌具有自己独特图谱。从而证实电泳对分枝杆菌的分种具有实际意义。     

SDS电泳技术的实验考虑及最新进展

水平薄层SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳是测定分子量的好方法。本文简述了方法的原理,技术的实验考虑和最新进展。提供了制胶的方法。指出了配制SDS电泳样品的关键。同时介绍了新的银染色方法和不使用缓冲液和滤纸桥,而使用缓冲液凝胶条作电极的最新进展。     

TD—PAGE中若干技术的改进

本文介绍了ＴＤＰＡＧＥ实验操作中一些技术的改进,为得到较好的电泳效果提供了简单可行的方法。     

SDS—PAPGE法测定His—tag融合蛋白分子量产生偏差的原因

Ｈｉｓ－ｔａｇ／Ｎｉ－ＮＴＡ系统是新发展起来的一个亲和纯化重组蛋白有用工具,现常用于基因编码产物的特性研究中。ＳＤＳ－ＰＡＧＥ是实验室测定蛋白质分子量通常采用的方法,而许多实验室用此方法检测Ｈｉｓ－ｔａｇ融合蛋白时却常发现测得的分子量偏大,产生偏差的原因尚未阐明。为弄清这一问题,本实验室在研究一个Ｈｉｓ－ｔａｇ融合蛋白Ｐ７３－Ｈｉｓ时,首先用ＳＤＳ－ＰＡＧＥ法测得其分子量确实比理论计算值大,然后对     

用聚丙烯酰胺凝胶电泳和微流体芯片电泳鉴别6种液态奶

目的:研究6种液态奶制品蛋白电泳图谱的区别,建立奶制品的蛋白质学鉴别方法。方法:以5种纯牛奶、羊奶、水牛奶、骆驼奶、牦牛奶、黄豆浆为研究对象,通过SDS-PAGE和Agilent 2100微流体芯片电泳法进行分析比较。结果:骆驼奶、黄豆浆与其他研究对象的图谱有明显区别,而牛奶、羊奶、水牛奶、牦牛奶的差异却不是很大;采用微流体芯片电泳可有效地对豆奶、骆驼奶进行区分,还可在一定程度上鉴别牛奶、羊奶、水牛奶和牦牛奶。结论:Agilent2100系统作为一种新型半自动微流体芯片技术,可以快速、高效、准确地应用于液态奶制品的蛋白成分分析及鉴别。     

Characterisation of Bacteroides from sheep periodontal disease by SDS-PAGE of outer membrane proteins

Isolates of Bacteroides species obtained from a longitudinal study of developing periodontal disease in sheep were analysed by SDS-PAGE. Protein profiles of Sarkosyl-insoluble outer membrane extracts were compared within groups of isolates which had already been defined by conventional biochemical techniques. Heterogeneity was exhibited within most groups. Isolates of B. gingivalis and B. asaccharolyticus shown to be similar to human isolates by conventional biochemical tests, gave different protein profiles from the respective type cultures. The sheep B. gingivalis-like isolates were however homogeneous, while the B. asaccharolyticus-like organisms could be divided into 3 subgroups. SDS-PAGE appears to be a useful tool for the examination of bacterial flora and recognition of subgroups of subspecies.     

植物绿叶粗蛋白在SDS-PAGE中向负极泳动的富含苯丙氨酸的碱性蛋白的测定

提取菜心(BrassicacampestrisL.ssp.chinensis(L.)Makinovar.utillisTsenetLee)和生菜(LactucasativaL.)绿叶粗蛋白,经SDS-变性后作醋酸纤维素薄膜电泳,证实这两种蔬菜含有分别向负极泳动和向正极泳动的蛋白。菜心绿叶粗蛋白经SDS-PAGE电泳后,从负极电泳缓冲液中获得向负极泳动的蛋白,其苯丙氨酸含量为57.05%,碱性/酸性氨基酸残基的比例为3.04,表明是富含苯丙氨酸的碱性蛋白。     

银杏不同器官蛋白质动态变化的电泳分析

利用SDS-PAGE电泳技术对不同季节银杏(Ginkgo bilobaL.)雌雄株叶片和枝条中的贮藏蛋白质组分和可溶性蛋白质含量进行了研究。结果表明,银杏叶片中的可溶性蛋白质含量从10月中旬开始逐渐减少,11月中旬降到最低;枝条中的可溶性蛋白质含量从秋末到整个冬季逐渐增加,进入早春后大幅度下降;同一季节内,叶片中的蛋白质含量明显高于枝条,且雄株叶片和枝条的蛋白质含量高于雌株。单向电泳结果表明,银杏雌雄株叶片中相对分子质量为55 000和32 000的蛋白质谱带均于11月中旬前消失,表明这些蛋白质在银杏落叶前发生了转移。在银杏雌雄株枝条中,相对分子质量为59 000、32 000和27 000的蛋白质谱带均在12月底染色最深,进入早春后消失;雄株枝条中相对分子质量为18 000的蛋白质谱带在12月底前稳定出现,进入早春后消失。表明银杏枝条中的这些蛋白质均表现出冬季积累而春季降解的动态过程。     

幽门螺杆菌全菌蛋白电泳影响因素的研究

本文比较研究了用反复冻融法及用含十二烷基磺酸衲(SDS)和β-巯基乙醇的样品缓冲液直接破碎法处理幽门螺旋菌对全菌蛋白电泳结果的影响,并观察了两种方法处理后的菌体裂解情况。实验表明,反复冻融法破碎细菌不够彻底,经离心后有较多的膜性结构被清除,引起膜性结构与胞浆内成份不均匀损失,对全菌蛋白电泳条带(特别是某些条带的含量)有明显的影响。提示在作细菌全菌蛋白电泳,特别是用于进行定量分析时,不宜采用冻融法处理细菌,可考虑用样品缓冲液直接破碎细菌。超声波破碎及压力破碎法是否存在对电泳结果的类似影响有待进一步研究。     

Sorghum lysine-rich cultivar verification by SDS-PAGE and Southern blot

The aim of this study was to assess the genetic variability among lysine-rich cultivars of sorghum (IS 21702; CVS B65, G 1058, G205 and CVS 549) and to compare with low lysine cultivar White Martin and a chemically induced high lysine mutant P721O. The lysine-rich cultivars contain approximately 1.5 to 2 times more lysine when compared to low-lysine cultivar. Sodium-dodecyl sulphate-polyacrylamide gel electrophoresis (SDS-PAGE) analysis of kafirins showed the absence of both 25.3 kD and 25.9 kD α-kafirins in lysine rich cultivars IS 21702, G 1058 and CV 365 and only the 25.9 kD protein was not present in G 205 compared with a low-lysine cultivar White Martin and with a chemically induced high-lysine mutant P721O. Southern blot analysis with RsaI enzyme gave significantly different banding pattern indicating the absence of 1.0 kb band in lysine-rich cultivars IS 21702, G 1058 and CVS 365 compared to White Martin indicating genetic variability among these cultivars. The detected variability among kafirins both in SDS-PAGE and Southern blot could be effectively used as markers in selection of lysine-rich cultivars for further use in breeding programme.     

不同浓度和梯度的SDS-PAGE胶对双向电泳中蛋白分离的影响

目的：探讨双向电泳中不同浓度和梯度的SDS-PAGE胶对肠道菌蛋白分离效果的影响。方法：制备弗氏2a志贺菌2457T野生株37℃晚期全菌蛋白质样品,进行不同浓度及梯度的SDS-PAGE,研究分离肠道菌蛋白最适宜的SDS-PAGE胶浓度。结果：获得了3个不同浓度（10%、12.5%和15%）的均一胶电泳图谱和3个不同梯度（4%～15%、10%～20%和12%～14%）的电泳图谱,并比较了这些图谱的分离效果;同时,为了分析肠道菌天然表达蛋白的相对分子质量范围,鉴定了8个极端相对分子质量蛋白。结论：对于肠道菌蛋白质的分离来说,12.5%的均一胶或12%～14%的梯度胶较为适宜。     

Determination of the molecular weight of DNA-binding proteins using UV-crosslinking and SDS-PAGE

We describe the use of UV-crosslinking in combination with SDS-PAGE to determine the approximate molecular weight of DNA-binding proteins. A 5-bromo-2′-deoxyuridine (5-BrdU)-substituted, radioactively labeled double-stranded oligonucleotide representing the protein binding site is incubated with a crude nuclear extract containing the protein of interest. Following irradiation with a UV light source, the DNA/protein complex is subjected to SDS-PAGE and its molecular weight determined by comparison with appropriate protein standards.     

Characterization of Cyanobacteria by SDS-PAGE of whole-cell proteins and PCR/RFLP of the 16S rRNA gene

Planktonic, filamentous cyanobacterial strains from different genera, both toxic and nontoxic strains, were characterized by SDS-PAGE of whole-cell proteins and PCR/RFLP of the 16S rRNA gene. Total protein pattern analysis revealed the mutual relationships at the genus level. Restriction fragment length polymorphism (RFLP) of the 16S rRNA gene with reference strains proved to be a good method for the cyanobacterial taxonomy. The nonheterocystous strains outgrouped from the nitrogen-fixing ones. With both methods, Aphanizomenon clustered with Anabaena, and Nodularia with Nostoc. In the RFLP study of Anabaena, the neurotoxic strains were identical, but the hepatotoxic ones formed a heterogeneous group. Genetic distances found in the RFLP study were short, confirming that close genotypic relationships underlie considerable diversity among cyanobacterial genera. Received: 16 December 1996 / Accepted: 14 May 1997     

大熊猫精浆蛋白的SDS-PAGE电泳研究

本试验采用SDS-PAGE对大熊猫精浆进行电泳并对电泳条带进行分析,探讨特异条带与大熊猫精液质量的关系。结果显示：大熊猫精浆SDS-PAGE电泳共分离得到12条蛋白谱带,其中6个条带为所有个体大熊猫精浆样品所共有,共有条带的相对量在不同个体之间不存在差异（P〉0．05）。试验中部分大熊猫精浆出现的特异蛋白带和共有带蛋白含量与精液质量无相关性。