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RAPD技术及其在微生物学方面的应用 总被引:4,自引:0,他引:4
198 0年 ,Botsein提出DNA限制性片段长度多态性 (RFLP)可以作为遗传标记 ,从此开创了直接应用DNA多态的新阶段。 80年代后 ,DNA多聚酶链式反应 (PCR)的发展 ,使直接扩增DNA的多态性成为可能 ,并在此基础上产生了许多种新型分子标记 ,诸如扩增片段多态性 (ALFR)、串联重复序列(VNTR)、单链构型多态性 (PCR SSCP)、序列特异扩增区域 (SCAR)、随机扩增多态性DNA(RAPD)等。而RAPD是较为突出的一种。RAPD是由Williams和Welsh在 1 990年各自独立发现的一种DNA多态检… 相似文献
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RAPD在植物育种上的应用及其技术校正 总被引:1,自引:0,他引:1
RAPD(RandomAmplifiedPolymorphicDNA) ,是在PCR的基础上发展起来的一种DNA多态性检测技术 ,由Willams[1] 和Welsh[2 ] 于 1990年建立 ,原理是以一系列不同的 ,少数碱基组成的随机核甘酸序列为引物 ,对样本基因组DNA进行PCR扩增 ,每个RAPD片段的产生要求在可增范围内存在与引物匹配的反向互补序列。引物结合位点DNA序列的改变以及两扩增位点之间碱基的缺失插入或转换都能导致扩增片段的数目和长度的差异 ,经PAGE或琼脂糖凝胶电泳分离和EB染色来检测DNA片段的多态… 相似文献
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提高RAPD稳定性的几点经验与探讨 总被引:8,自引:0,他引:8
随机扩增多态DNA(RAPD)技术自 1990年由Williams和Welsh建立以来 ,因其特异、快速、操作简便、敏感的优点 ,在微生物分型和检测[1 ,2 ] 、生物亲缘关系的鉴定[3] 以及遗传育种[4 ] 中已得到广泛应用 ,其原理与常规PCR基本相同 ,但RAPD采取的引物多为一条随机的十聚寡核苷酸序列 ,这种引物不属于已知遗传位点 ,它能通过PCR介导所有与其互补的基因区段进行扩增 ,产生一系列大小不同的片段 ,并通过琼脂糖凝胶电泳而呈现不同的DNA指纹图。由于RAPD不需要知道模板的序列 ,且引物序列无种属特异性 ,在对遗传… 相似文献
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AFLP标记在果树遗传育种研究中的应用 总被引:8,自引:0,他引:8
1993年 ,Zabeau等发明了一项专利技术 ,扩增片段长度多态性 (amplifiedfragmentlengthpolymorphism ,AFLP) ,该技术结合了RFLP技术和PCR技术的优点 ,以其高效性和高重复性等特点 ,被广泛应用于多种植物的遗传育种研究。1 .AFLP技术的原理和特点AFLP技术是基于对限制性片段的选择性扩增 ,基因组DNA被限制性内切酶切割后 ,将限制性片段末端连上双链接头 ,根据接头序列和相邻的限制性位点序列设计引物对限制性片段进行扩增。扩增产物经电泳检测后再比较其谱带的差异。AFLP… 相似文献
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微卫星DNA和AFLP标记在水稻分子标记连锁图上的分布 总被引:31,自引:0,他引:31
以一个栽培稻(OryzasativaL.sp.indica)和野生稻(O.rufipogonGrif)杂交的F2作图群体以及由该群体构建的RFLP标记连锁图,分析了微卫星DNA和AFLP标记的多态性、遗传行为及其在染色体上的分布。共定位了28个微卫星DNA标记和172个AFLP标记。28个微卫星DNA标记中有6个为华中农业大学作物遗传改良国家重点实验室根据数据库中序列而设计,其余22个来自美国Cornel大学已发表的结果。172个AFLP标记出自25对引物扩增得到的228个多态性带的片段。这些标记分布于水稻的12条染色体。将此200个PCR标记与华中农业大学作物遗传改良国家重点实验室构建的RFLP连锁图整合,得到一张含612个分子标记位点的遗传连锁图。 相似文献
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DNA分子标记在柑桔中的应用 总被引:3,自引:1,他引:2
DNA分子标记是最为理想的遗传标记 ,依其多态性检出所用的分子生物学技术 ,大致可分为Southem杂交技术为核心的分子标记和PCR技术为核心的分子标记。前者的代表性技术有RELP(restrictionfragmentlengthpolymorphism)和DNA指纹技术 (DNAfingerprintingtechniques)。后者的代表性技术有RAPD(randomamplifiedpolymorphicDNA)、SCAR(sequencecharac teristicamplifiedregion)… 相似文献
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RAPD(RandomAmplifiedPolymorphicDNA),即随机扩增多态DNA,是1990年由威兰斯(Wilams)和韦尔什(Welsh)两个研究小组几乎同时建立和发展起来的一种新型遗传标记技术。由于其具有独特的检测DNA多态性的方式及... 相似文献
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提高RAPD稳定性的几点经验与探讨 总被引:18,自引:0,他引:18
RAPD技术自 1 990年由Williams和Welsh建立以来 ,因其特异、快速、操作简便、敏感的优点 ,在微生物分型和检测[1,2 ] 、生物亲缘关系的鉴定[3 ] 以及遗传育种[4] 中已得到广泛应用 ,其原理与常规PCR基本相同 ,但RAPD采取的是引物多为一条随机的十聚核苷酸序列 ,这种引物不属于已知遗传位点 ,它能通过PCR介导所有与其互补的基因区段进行扩增 ,产生一系列大小不同的片断 ,并通过琼脂糖凝胶电泳而呈现不同的DNA指纹图。由于PAPD不需要知道模板的序列 ,且引物序列无种属特异性 ,在对遗传背景所知甚少的物种的… 相似文献
10.
快速克隆RAPD片段方法的研究 总被引:3,自引:0,他引:3
RAPD (RandomAmplifiedPolymorphismDNA ,RAPD)标记是由Williams等于 1 990年提出的 ,一种检测DNA多态性的方法 ,由于该方法中所选用引物的碱基是随机的 ,所用引物可达成百上千 ,所检测到的是生物体的整个基因组 ,既能检测有功能的基因编码区 ,又能检测到重复序列区 ,用同一套引物可对多个群体或物种进行分析 ,其所用引物的随机性和其所检测的结果具有更为可靠的统计性和更好的代表性 ,使RAPD标记在重要基因的标记、定位、系统进化、群体多样性和遗传演化等方面得到了广泛的应用。但… 相似文献