钴~(60)γ照射及腹注醋酸氢化可的松的小鼠对伊氏锥虫多态现象的影响

以不同剂量的醋酸氢化可的松分别处理感染伊氏锥虫无动基体株和水牛株的白化小鼠,结果表明50毫克/公斤的剂量对两个虫株短型的比例都有明显的影响,其中无动基体株的短型从感染后第3天的0.73％上升到第5天的4.4％,对照组为0.67％—0.73％;相反,水牛株短型的比例则从感染后第3天的6.3％下降到第5天的0.73％,对照组为0.73％—0.2％。200毫克/公斤的剂量对无动基体株的变异型有显著的影响,从感染后第3天的0.2％上升到第5天的1.9％。两虫株在经过钴~(60)r照射后再用醋酸氢化可的松处理的小鼠中亦表现出相似结果。实验结果表明宿主的免疫功能与伊氏锥虫的多态现象无实质的关系,而动基体的存在与否对适量的醋酸氢化可的松有较明显的反应。     

狂犬病病毒CTNCEC25株的感染力和致病力特征分析

研究狂犬病病毒CTNCEC25株的增殖能力、病毒的感染力及致病力等表型特征,为将该毒株应用于疫苗生产提供基础信息。将CTNCEC25株及其母株CTN-1株分别接种非洲绿猴肾细胞(Vero细胞)、原代鸡胚成纤维细胞(Primary chicken embryo cell,CEC)和小鼠神经瘤母细胞(Mouse neuroblastoma N2acells,N2a),观察其细胞病变特性及其复制规律;以脑内注射的方式接种动物,观察其对乳鼠、小鼠、豚鼠及家兔等动物的致病力;同时还将CTNCEC25株在CEC上连续传20代,在乳鼠脑内传3代,观察其增殖能力、病毒感染力及致病力的稳定性。研究结果表明,与母株CTN-1株相比,CTNCEC25株在Vero细胞和N2a细胞上的增殖并没有显著差异,但在CEC上,CTNCEC25株具有明显优势,其72h滴度可达107.5~7.6 FFU/mL,而CTN-1株滴度只有105.8 FFU/mL;此外CTNCEC25株在N2a细胞、Vero细胞及CEC上均可产生明显的细胞病变。脑内致病力实验结果表明,CTNCEC25株虽然对1~3日龄的乳鼠仍然具有较强的脑内致病性,但对成年小鼠的脑内致病力大大减弱,对豚鼠和家兔不致病。经细胞和乳鼠脑内连续传代,CTNCEC25株在CEC上增殖稳定,其减弱的毒力并未回升,无弱毒返祖现象。综上所述,本研究初步证实CTNCEC25株是一株高度减毒、不易返祖的弱毒株,其在CEC上可稳定、快速增殖,病毒滴度高(107.0 FFU/mL),是一株安全性较高的狂犬病疫苗候选毒株。     

猪皮肤成纤维细胞PERV体外和体内感染性的研究

为了解猪皮肤成纤维细胞PERV在体外和体内的感染性,通过建立猪皮肤成纤维细胞系,将所建细胞系与人胚胎肾293细胞体外共培养,并移植于严重联合免疫缺陷鼠(SCID鼠)皮下进行猪皮肤成纤维细胞PERV的体外和体内感染性实验。结果表明,猪皮肤成纤维细胞与人胚胎肾细胞共培养过程中,猪内源性逆转录病毒感染人胚胎肾细胞,进一步证实和拓宽了猪细胞PERV感染人细胞的范畴;猪皮肤成纤维细胞移植SCID鼠皮下后,导致SCID鼠发生猪细胞微嵌合(78．57％)和PERV在体内感染(85．71％)并且波及远离移植部位的多种组织或器官,但是并未检测出SCID鼠组织中表达PERV env RNA。这就证实了猪皮肤成纤维细胞PERV的体外感染性和在小鼠体内的感染性,但未能找到PERV在体内活跃复制的明显证据。因而,在猪异种移植过程中PERV传播的潜在危险仍然是必须高度重视的生物安全性问题。     

人孤雌胚胎干细胞在人包皮成纤维细胞饲养层上的生长状态

人孤雌胚胎干细胞(human parthenogenetic embryonic stem cells,hPESCs)体外培养常需饲养层的支持以保持干细胞特性.通过原代培养获得人包皮成纤维细胞(human foreskin fibroblasts,hFFs)并将其制备成饲养层,使hPESCs在hFFs上进行体外培养及传代.倒置显微镜下观察hPESCs的生长状态,采用碱性磷酸酶(alkalinephosphatase,AKP)检测、核型分析和体内分化实验研究hPESCs的生物学特性及分化潜能,以探索hFFs能否长期支持hPESCs的生长并维持其未分化状态.经原代培养成功获得了hFFs,通过形态学观察和免疫细胞化学染色鉴定符合成纤维细胞的生物学特性;在hFFs上生长的hPESCs克隆形态规则,不易分化;已成功在体外培养20余代,hPESCs仍能够保持基本生物学特性和正常核型,在裸鼠体内可形成含有3个胚层组织成分的畸胎瘤.作为人源性饲养层,hFFs可长期支持hPESCs的生长并维持其未分化状态.     

逆转录病毒载体构建的hNT-3基因在大鼠成纤维细胞中的表达

为了检验重组逆转录病毒对体外培养细胞的感染能力和效率 ,用逆转录病毒载体构建的人神经营养因子 3(pLXSN NT3)感染大鼠原代成纤维细胞 ,经G4 18筛选获得了稳定整合有外源hNT 3的工程细胞株 .RT PCR证实了外源基因hNT 3已整合到宿主细胞基因组 ,并可合成其mRNA ;PCR检测方法证明细胞株不含具有感染能力的病毒 ;Western印迹证明了细胞能正确表达hNT 3;大乳鼠背根神经节检测了细胞上清液中的NT 3生物活性 .体外感染实验的成功为进一步进行基因治疗动物实验打下了基础     

成纤维细胞对体外培养的骨胳肌细胞早期发育的影响

用无血清、无胚胎提取液的培养液培养由鸡胚腿肌制成的细胞悬液,在排除神经因素的条件下,研究成纤维细胞对体外培养的骨胳肌细胞早期发育的影响。实验组的培养液由2份培养过成纤维细胞的 Eagle's(MEM)液(条件培养液)和1份 Eagle's 液组成。对照组的培养液为 Eagle's 液。细胞悬液被稀释成7种密度(1×10~6—1×10~4细胞/ml)。所得结果如下;(1)成纤维细胞作为支架,肌母细胞在其上面分裂和融合。成纤维细胞的条件培养液维持肌细胞的存活,并促进其发育;(2)肌母细胞的融合与细胞密度有关。实验组肌母细胞融合所需的最低细胞密度是3×10~4细胞/ml,即30个细胞/mm~2,而对照组为3×10~5细胞/ml,即300个细胞/mm~2。实验结果提示,肌细胞早期发育可不依赖于神经因素,它能被胚眙肌肉中的成纤维细胞所促进。     

树鼩原代皮肤成纤维细胞的分离培养技术

建立稳定的树鼩(Tupaiabelangeri)皮肤成纤维细胞的体外培养体系,可为有关此类细胞的实验和疾病树鼩细胞模型提供技术支持。取树鼩大腿内侧皮肤用组织块贴壁法和胶原酶Ⅰ消化法分离皮肤细胞,胰蛋白酶差别消化法纯化细胞;用MEM(10%FBS)完全培养基和含低血清生长添加物(LSGS)的培养基培养细胞;免疫荧光和蛋白印迹法鉴定细胞,并测定细胞的生长、冻存和复苏特性。经树鼩皮肤细胞分离效果比较,胶原酶消化法比组织块贴壁法更适合用于树鼩原代皮肤细胞分离;对分离及冻存复苏后细胞生长状况观察比较发现,添加了LSGS的MEM培养基更利于细胞存活、生长;细胞形态观察、免疫荧光和蛋白印迹检测鉴定所分离的细胞为树鼩皮肤成纤维细胞。成功建立了树鼩原代皮肤细胞的分离、纯化方法,并优化了该细胞的培养条件。     

肿瘤相关成纤维细胞与肿瘤微环境

肿瘤的发展过程与肿瘤微环境密切相关,而肿瘤相关成纤维细胞(CAFs)是上述微环境中最主要的宿主细胞,CAFs是一类不同细胞源性的细胞群,可来源于多种细胞包括静止的成纤维细胞、上皮细胞、内皮细胞和间质干细胞的分化过程。体内和体外生物学实验均证实,成纤维细胞在肿瘤微环境中并不是被动的对肿瘤发展提供支持,而是发挥了至关重要的作用,所以靶向CAFs有望成为肿瘤治疗的新方向,对CAFs相关分子标记物和分子事件的进一步探索将为抗肿瘤的临床治疗提供新的思路。本文将对CAFs的来源以及CAFs对肿瘤发生发展、转移及VEGF耐受等方面的作用做一综述。     

牛胎儿成纤维细胞的分离与体外培养

分别用胶原酶Ⅲ和胰蛋白酶成功地分离了牛胎儿成纤维细胞,并对其进行了体外培养,同时探讨了两种酶消化分离牛胎儿组织的时间对牛胎儿成纤维细胞原代培养的影响。用组织块直接培养也成功得到了牛胎儿成纤维细胞,并探讨了不同组织块大小对牛胎儿成纤维细胞原代培养的影响。通过绘制生长曲线,可以研究牛胎儿成纤维细胞增殖规律;通过制备牛胎儿成纤维细胞的细胞染色体发现,经过传代(12代)、冷冻保存、解冻,牛胎儿成纤维细胞染色体数目不变。     

胰蛋白酶消化法和组织块法原代培养人包皮成纤维细胞的比较

小鼠胚胎成纤维细胞(MEFs)是目前国际上公认的人胚胎干细胞(hESCs)体外培养的饲养层细胞,但MEFs存在寿命短、动物源性污染等问题,需要探索适于hESCs体外培养且寿命长的人源性饲养层.采用胰蛋白酶消化法和组织块法分别原代培养人包皮成纤维细胞(hFFs),探索hFFs原代培养的最佳方法,为hFFs作为饲养层在hESCs研究中的应用提供可靠的科学依据;通过倒置显微镜下观察其生长状态和免疫细胞化学染色鉴定,结果显示两种原代培养方法获得的hFFs的形态及生物学特性均符合成纤维细胞;通过测定细胞生长曲线及MTT法检测,结果显示两种原代培养方法获得的不同代数的hFFs均具有较高的增殖活性,传代10余代仍能保持较好的细胞形态,可以制备成饲养层用于hESCs的研究.     

安徽蔷薇科新植物

<正> 与原变种的区别在于叶柄较长,长5—10厘米,顶生小叶柄长2厘米,顶生小叶先端长尾尖,基部心形,花梗较短,长1.5—3厘米,子房微具腺毛。     

中国姜科二新种

<正> 斑蝉姜 新种 图1 Zingiber monglaense Senjen et Z.Y.Chen sp.nov Species affinis Z.nudicarpo D.Fang a quo differt spica globosa velellipsoidea tantum dimidio minore longa,foliis illo 3-plo majoribus,nervislateralibus manifestis. Herba perennis 1.6-2 m alta.Folia 10-26;lamina elliptica vel longi-elliptica,30-70 cm longa,6-15 cm lata;petiolus 0-2 cm longus;ligula     

广西雀舌木属一新种

<正> 灌木,高达2米;小枝褐色,圆柱形,近无毛。叶互生,革质,圆形至卵形或卵状椭圆形,长2—5厘米,宽1.5—2.5厘米,先端圆形或钝,基部圆形或阔楔形,两面无毛,边全缘,中肋上面消凹,下面突起;侧脉不明显,3—5对;叶柄增厚,长3—4毫米,无毛;托叶微小。花单性;雌雄同株,单生于叶腋。雄花:花柄长2—2.5厘米,无毛;萼片5枚,     

东北地区乳菇属的初步研究

本文报道了东北地区乳菇属(Lactarius)的29种,其中包括新种2个,长白乳菇(L.chanbainensis Y.Wang et Xie sp.nov.)温泉乳菇(L.wenquanensis Y.Wang et Xie sp.nov.);国内新记录种5个:茶绿乳菇[L.necator(Pers.ex Fr.)Farst.],条纹乳菇[L.oculatus(Peck)Burl.],变红乳菇[L.acris(Bolt.ex Fr.)Gray],复生乳菇(L.repraesentaneus Britz.)和点柄乳菇(L.maculatus Burl.)。新种有汉文和拉丁文描述以及形态、显微构造图;国内新记录种有汉文描述。     

RECONSTRUCTION OF AN APPARATUS OF NEOSTRACHANOGNATHUS TAHOENSIS FROM ORITATE,JAPAN AND SPECIES OF NEOSTRACHANOGNATHUS FROM OMAN

Abstract: The apparatus of an Early Triassic conodont Neostrachanognathus tahoensis Koike, 1998 from Oritate, Kumamoto Prefecture, Japan, and a species of Neostrachanognathus from Oman were reconstructed. On the basis of five natural assemblages from the Oritate area, the three‐dimensional apparatus model of N. tahoensis is interpreted as bilaterally symmetrical and composed of 14 elements consisting of pairs of P₁, P₂, P₃, S₁, S₂, S₃, and S₄ elements. The P₁ and P₂ elements are coniform elements, the P₃ elements are digyrate forms, and the S elements are bipennate ramiforms. The S elements are arranged rostrally in the apparatus and the pairs of the P₁, P₂, and P₃ elements are subvertically arranged caudally and ventrally to the S array. One of the natural assemblages was formed by rostrocaudal collapse of the apparatus on the sea floor, whereas the other assemblages indicate that conodont animals came to rest nearly parallel with the substrate prior to burial. A collection of isolated elements from Jabal Safra, Oman, includes a second species of Neostrachanognathus with a comparable apparatus.     

由药根碱合成四氢巴马丁的研究

从九连小檗细胞培养得到药根碱,经甲基化和氢化还原二步反应,得四氢巴马丁,收率约为43％。     

EVOLUTIONARY INFERENCES FROM RESTRICTION MAPS OF MITOCHONDRIAL DNA FROM NINE TAXA OF XENOPUS FROGS

Restriction endonuclease cleavage maps were prepared by the double digestion method for mitochondrial DNAs (mtDNAs) purified from Xenopus borealis, X. clivii, X. fraseri, X. muelleri, X. ruwenzoriensis, X. vestitus, X. laevis victorianus, X. l. laevis, and a variant of X. laevis designated X. laevis “davis.” An average of 21 cleavage sites per genome were mapped with 11 restriction endonucleases. Among the four invariant sites found are three conserved not only among the Xenopus mtDNAs tested but also among nearly all vertebrate mtDNAs examined to date. Two of these are Sac II sites in the 12S and 16S ribosomal RNA genes, and one is a Hpa I site in the gene for asparagine transfer RNA. These three sites permit the alignment and comparison of mtDNAs from different vertebrate classes. Although most of the differences observed among the Xenopus maps are attributable to point mutations causing gain or loss of restriction sites, the maps also differ by three large length mutations in or near the displacement loop. Phylogenetic analysis of 30 informative sites suggests that those members of the laevis species-group that have 36 chromosomes per somatic cell can be divided into three subgroups: 1) X. borealis, X. clivii, and perhaps X. fraseri (the “borealis” subgroup), 2) X. muelleri, and 3) the subspecies of X, laevis. The mtDNA of the hexaploid (2n = 108) species, X. ruwenzoriensis, is most similar to that of taxa in the latter two subgroups, which contrasts with the morphological similarity of this species to X. fraseri. X. ruwenzoriensis may be an allopolyploid with a mother (the contributor of the cytoplasmic mtDNA genome) on the X. laevis or X. muelleri lineage and a father on the X. fraseri lineage. We present a model showing how mtDNA and nuclear genomes can yield contrasting phytogenies for species-groups that have undergone several rounds of interspecific hybridization. Comparison of mitochondrial and nuclear sequence divergences suggests that Xenopus mtDNA, like that of mammals and birds, evolves faster than nuclear DNA. Genetic distances among mtDNAs of Xenopus species are very large, generally approaching or exceeding one substitution per nucleotide.     

广西大戟科植物资料

<正> 广西的大戟科植物种类众多。作者对广西中草药原植物研究过程,将已采集的标本及华南植物所标本室(SCBI)和广东、广西主要标本室(均有注明)收藏的广西及其邻近地区的大戟科标本进行整理;现报道(一)、三宝木属植物摘记;有5种和3个新变种,其中广西产5种、1变种。(二)、广西白大凤属植物;1种。     

云南牛毛藓属的分类

本文对牛毛藓属(Ditrichum Hamp.)的几次调动及模式种的变更情况作了较详细的报道,并在系统研究了昆明植物所及云南大学生物系历年从云南各地所采标本后,发现云南现有该属植物7种,其中3种:D. brevidens Nog., D. darjeelingense Ren. et Card.和D. tortuloides Grout为云南新分布种。     

ISOLATION OF NUCLEI FROM YEAST

A method for isolation of nuclei from Saccharomyces cervisiae in high yield is described. The DNA/protein ratio of the isolated nuclei is 10 times higher than that of whole cells. Examination of these nuclei in phase and electron microscopes has shown them to be round bodies having a double membrane, microtubules, and a dark crescent at one end. The optimum conditions for extraction and resolution of histones of these nuclei on acrylamide gels have been investigated. The nuclei have an active RNA polymerase (E.C. 2.7.7.6) and are able to synthesize RNA in vitro. They are also readily stainable with Giemsa's, Feulgen's, and acridine orange methods.