铜锌超氧化物歧化酶与过氧化氢反应中羟自由基的形成

应用脱氧核糖降解法研究了离体条件一Ｃｕ,Ｚｎ－ＳＯＤ与Ｈ２Ｏ２反应产生．ＯＨ,并对其机理进行了探讨。Ｈ２Ｏ２可使Ｃｕ,Ｚｎ－ＳＯＤ失活,在失活过程中有．ＯＨ产生。甲酸钠和苯甲酸钠均能不同程度地保护Ｃｕ,Ｚｎ－ＳＯＤ和降低Ｈ２Ｏ２与ＣｕＺｎ－ＳＯＤ反应中。ＯＨ的产额,热失活ＳＯＤ也可和Ｈ２Ｏ２反应生成ＯＨ,且效能高于活性Ｃｕ,Ｚｎ－ＳＯＤ;     

铜锌超氧物歧化酶对几种羟自由基产生系统的影响

应用脱氧核糖降解法研究了ＣｕＺｎ－ＳＯＤ对几种·ＯＨ产生系统的作用机理．结果证明：ＳＯＤ对Ｆｅ（３＋）·Ｏ·Ｈ２Ｏ２系统中·ＯＨ的产生有明显的抑制作用,而失活ＳＯＤ或ＢＳＡ对它的抑制作用不大;在Ｆｅ（２＋）·Ｈ２Ｏ２和ＣＵ（２＋）·Ｈ２Ｏ２系统中,ＳＯＤ、失活ＳＯＤ和ＢＡＳ均能抑制·ＯＨ的产生;在Ｆｅ（２＋）·Ｏ系统中,ＳＯＤ对·ＯＨ产生作用不大,而失活ＳＯＤ或ＢＳＡ对它有明显的抑制作用．由此推测ＳＯＤ对·ＯＨ形成可能有三方面的影响：１．对Ｏ的清除作用,阻断Ｈａｂｅｒ－Ｗｅｉｓｓ反应;２．对金属离子的络合作用,降低·ＯＨ的产额;３．促进Ｈ２Ｏ２的积累,加快Ｆｅｎｔｏｎ反应．     

一株根霉产脂肪酶发酵条件的研究

通过对筛选出的一株根梅ＲｈｉｚｏｐｕｓＹ－９２产旨肪肪酶发酵２基组成（Ｃ,Ｎ,无机盐）及工艺条件的探索,并经正交实验,得到较优培养基配方为：蛋白胨６％,豆饼粉４％,葡萄糖１％,ＭｇＳＯ４·７Ｈ２Ｏ０．１％,ＫＨ２ＰＯ４０．３％,起始ＰＨ８．０,在此条件下,发酵液酶活可达９９．１５ｕ／ｍｌ,是初始酶活的１７８％。     

重组水蛭素HV2的稳定性

重组水蛭素ＨＶ２是凝血酶的特异性抑制剂,是一种非常稳定的蛋白质,温度的升高（１００℃水浴）和ＰＨ（１－１３）的改变不影响其活力,在某些变性剂（８ｍｏｌ／Ｌ素、１％ＳＤＳ和６ｍｏｌ／Ｌ盐酸胍）存在的条件下也非常稳定,０．１ｍｏｌ／Ｌ的ＤＴＴ在７０℃时使其部分失活,只有ＰＨ和温度同时升高其活力才开始下降,ＰＨ１３、８０℃处理１５ｍｉｎ即完全失活,氨基酸组成和活性分析发现失活样品的Ｃｙｓ和Ｌｙｓ被破坏。     

在吲哚乙酸不同位点偶联载体蛋白对其抗体特异性的影响

分别选择吲哚乙醇分子上的Ｃ１位羧基和吲哚环上的Ｎ位作为偶联载体蛋白的位点,用混合酸酐法和甲醛搭桥法分别合成了两种免疫原ＩＡＡ—ＣＯ—ＮＨ一ＨＳＡ和ＩＡＡ－Ｎ－ＢＳＡ,并进而制得了对吲哚乙酸侧链识别能力不同的两种多克隆抗体,分别可特异识别甲酯化ＩＡＡ和游离态ＩＡＡ;用碳化二亚胺法和甲醛搭桥法分别合成ＩＡＡ—ＣＯ—ＮＨ－ＢＳＡｂＩＡＡ—Ｎ—ＯＶＡ两种复合物,以之为包被物,建立了两种ＩＡＡＥＬＩＳＡ。其灵敏度分别为０．３５ｐｍｏｌ和１．８０ｐｐｍｏｌ;检测范围分别为０．７８～８００ｐｍｏｌ和１．９５～２０００ｐｍｏｌ;批内变异系数分别为４．４５％和４．７９％;批间变异系数分别为１．１５％和１．５０％。笔者用这两种ＥＬＩＳＡ检测了兰花气生根和桑树苗样品中ＩＡＡ的含量,发现两种检测结果相当一致。     

^15N标记蛋白GAL4（62）的2D NMR实验

利用自编的脉冲程序,采用预饱和和自旋锁定对水峰进行双重抑制的方法,得到了＾１５Ｎ标记蛋白ＧＡＬ４（６２）的２Ｄ＾１Ｈ－＾１５ＮＨＳＱＣ、ＨＳＱＣ－ＮＯＥＳＹ、ＨＳＱＣ－ＴＯＣＳＹ谱,并对这几个谱在蛋白质＾１Ｈ谱的归属中所到的作用作了讨论。     

幽门螺杆菌L型培养基的研究

根据细菌Ｌ型的一般特点,以布氏肉汤为基础,利用正交试验方法和统计分析,研制出适合ＨＰ－Ｌ型生长的液体培养基,其成份包括：蛋白胨１％,胰蛋白陈１％,葡萄糖０．１％酵母粉０．２％,小牛血清１０％,Ｄ－蛋氨酸０．０２％,ＮａＣｌ１．５％,ＭｇＳＯ４·７Ｈ２Ｏ１５ｍＭ,ＣａＣｌ２１０ｍＭ。ＨＰ－Ｌ型固体培养基则在此液体培养基的基础上,除去小牛血清另加０．８％琼脂和１５％羊血浆,ＨＰ－Ｌ型在此培养基上诱导成功,形成典型的“油煎蛋”菌落,在常规Ｓｋｉｒｒｏｗ平板上则不能生长。     

一氧化氮抑制内皮素促血管平滑肌细胞增殖作用的信号转导途径

培养的家兔胸主动脉血管平滑肌细胞（ＶＳＭＣ）分别以内皮素（ＥＴ－１）、一氧化氮（ＮＯ）前体Ｌ－Ａｒｇ和ＮＯ供体ＳＩＮ－１刺激,或用ＥＴ－１＋Ｌ－Ａｒｇ、ＥＴ－１＋ＳＩＮ－１联合刺激,测ＶＳＭＣ＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入、丝裂素活化蛋白激酶（ＭＡＰＫ）活性及蛋白激酶Ｃ（ＰＫＣ）活性的改变,以研究ＮＯ抑制ＥＴ－１促ＶＳＭＣ增殖作用的信号转导途径。结果表明：（１）ＥＴ－１ １０＾－８ｍｏｌ／Ｌ单独刺激,＾３Ｈ－     

6—BA诱导的带正电荷的葡萄叶过氧化物酶

河岸葡萄叶的带正电荷过氧化物酶可受６－ＢＡ诱导,但盐,Ｈ２Ｏ２或Ｆｅ＾２＋＋Ｈ２Ｏ２均使叶片ＣＯＰＤ活性明显下降,而高浓度的无机盐明显刺激纯ＣＯＰＤ活性增加。在以愈创木酚为底物时ＣＰＯＤ最适ｐＨ为４．６０－５．７５,对Ｈ２Ｏ２的表面Ｖｍａｘ和Ｋｍ值分别为１１０Ｕ／ｍｇ蛋白和１．１５ｍｍｏｌ／Ｌ。     

对与缺失铁钼辅基的固氮酶钼铁蛋白重组的原子簇的结构要求

棕色固氮菌（Ａｚｏｔｏｂａｃｔｅｒ ｖｉｎｅｌａｎｄｉｉ）钼铁蛋白与邻菲口罗啉和Ｏ２ 保温并经凝胶柱层析后,成为部分缺失Ｐ－ｃｌｕｓｔｅｒ和ＦｅＭｏｃｏ 的失活蛋白。由３ 个－ ＯＣＨ３－ 连结于Ｍｏ原子间的２ 个１Ｍｏ∶３Ｆｅ∶４Ｓ结构单位组成的原子簇与４Ｆｅ∶４Ｓ原子簇的混合液,以及由ＫＭｎＯ４、高柠檬酸铁、Ｎａ２Ｓ和二硫苏糖醇组成的重组液均可使这种失活蛋白明显恢复Ｃ２Ｈ２ 还原活性,但都不能使可被ＦｅＭｏｃｏ 激活的ｎｉｆＥ和ｎｉｆＨ 基因缺失突变种及ＵＷ ４５的Ａｐｏ－ＭｏＦｅ 蛋白得到激活。表明,不能合成ＦｅＭｏｃｏ 的固氮菌突变种蛋白只能与具有ＦｅＭｏｃｏ相似或基本相似结构的原子簇进行体外重组,而部分缺失金属原子簇的钼铁蛋白能与具有一定结构和组成的原子簇进行体外重组,变为具有催化氮还原能力的各种固氮酶组分蛋白。