从新型冠状病毒疫情看生物安全三级实验室的应急能力及内涵建设

面对突发疫情,生物安全三级（biosafety level 3,BSL-3）实验室是否能及时启动并稳定、安全运行,为科研攻关提供安全、可靠的技术平台,是对实验室应急能力的考验。针对2019年12月爆发的2019冠状病毒病疫情,复旦大学BSL-3实验室在接到任务后,立即按照国家规定,启动实验室冠状病毒新实验活动申请流程。经国家合格评定认可委员会（China National Accreditation Service for Conformity Assessment,CNAS）和国家卫生委员会批准,实验室在开展实验活动一周内就从来自上海患者标本中分离到新型冠状病毒毒株,体现了平时实验室内涵建设的重要性。BSL-3实验室的内涵建设包括实验室风险评估及管理、不同人员针对性培训、设施和设备管理等生物安全管理体系的建设。本文将介绍复旦大学BSL-3实验室在应急能力及内涵建设方面的经验和体会,期望对BSL-3实验室的建设和管理提供参考。     

生物安全三级实验室的工作满意度现状及其与职业紧张程度的关联

因生物安全三级(BSL-3)实验室工作人员需在特殊工作环境中对高致病性病原微生物进行操作,其心理健康状态可影响实验室生物安全。本研究以工作满意度作为早期心理健康状况的评估指标,对江苏、浙江、上海、福建、湖北5个省市6家BSL-3实验室工作人员进行调查,分析工作满意度与职业紧张程度的关联。调查结果显示,BSL-3实验室人员的工作满意率为32.2%。职业紧张程度与工作满意度呈负相关。工作要求-自主(JDC)模式中"社会支持"是提高工作满意度的因素,高社会支持组比数比(OR)值为4.60(95%CI为1.25~16.97)。付出-回报失衡(ERI)模式中"内在投入"是降低工作满意度的因素,高内在投入组OR值为0.03(95%CI为0.00~0.28)。分析结果提示,可通过加强"社会支持"和解除过度"内在投入"等措施,降低BSL-3实验室人员的职业紧张程度,从而提高工作满意度。     

上海市（复旦大学附属）公共卫生临床中心生物安全三级实验室

上海市(复旦大学附属)公共卫生临床中心生物安全三级实验室(简称中心BSL-3实验室)于2005年建造,同年通过国家建筑工程质量监督检验中心对实验室建筑结构的设计、实验室规范等各项指标的验收,获得<上海市公共卫生中心BSL-3实验室工程>检验报告.中心BSL-3实验室位于科研中心二楼北侧自成隔离区的建筑物内,周围最近的居民居住区在180m外.     

医学病毒学生物安全三级动物实验室的建立

目前国内多个机构已建立了BSL-3实验室,这些实验室能够满足细胞水平和动物水平的病原微生物实验活动.医学病毒学生物安全三级动物实验室(ABSL-3)可分为小动物实验室和中(大)动物实验室.小动物实验室主要开展小鼠、大鼠、仓鼠等啮齿类动物的感染性实验活动;中(大)动物实验室主要开展小型猪、猴等实验.动物三级实验室特别是开展中(大)动物实验的高等级实验室,其实验室布局,设备设施,管理体系及流程会有很大的差别.本文从使用者的角度,通过所在机构医学病毒学生物安全三级动物实验室(ABSL-3)的建设与实践,对于筹备和建立以及使用过程中的所面对的问题以及应对,进行了提炼和归纳,分析和探讨,旨在为建设和使用医学病毒学高致病性生物安全三级动物实验室提供借鉴和参考.     

传染病医院检验科生物安全管理及防护措施探讨

目的:探讨传染病医院检验科生物安全管理及防护措施.方法:对传染病医院检验科实验室相关人员的职责进行明确分工,使其进一步了解实验室生物操作风险的种类及来源,并在实验室配备必要的安全防护措施,对标本施行严格的管理制度.结果:严格施行检验科实验室生物安全管理,增加防护措施,可以有效的避免生物安全事故的发生.结论:对检验科实验室生物安全管理进行规范后可以有效地减少实验室工作人员的风险,同时也有效避免了病源微生物的外泄,最大限度的保障了实验室的生物安全.     

动态

全国生物安全实验室工作会议要求确保P3万无一失全国防治非典型肺炎指挥部科技攻关组副组长、科技部副部长李学勇在日前举行的“全国生物安全实验室管理工作会议”上表示 ,今后要采取更加严格的措施 ,确保我国P3实验室生物安全万无一失 ,保障SARS科技攻关的顺利进行。到目前为止 ,我国内地没有发生由于实验室生物安全管理工作不到位而被感染的生物安全案例 ,这说明P3实验室从总体上看生物安全管理的各项措施的落实和执行情况是有成效的。李学勇说 ,一定要汲取新加坡和台湾发生SARS病毒感染事件的教训 ,防微杜渐 ,查找和消除各种隐患 ,…     

关于高级别生物安全实验室若干管理要素的探讨

目前,我国已有两家生物安全四级实验室和五十多家生物安全三级实验室完成建造并通过实验室认可。生物安全管理体系的技术要素和管理要素是确保高级别生物安全实验室生物安全的关键。本文探讨了高级别生物安全实验室区别于其他体系实验室(如ISO 17025检测和校准实验室与ISO 15189医学实验室)的若干个特征性管理要素,这些要素包括潜在污染的周期性评估、失活验证实验、分子诊断实验的无生物风险的阳性对照、微生物的不同封闭措施及生物安全文化。潜在污染的周期性评估与失活验证实验是高级别生物安全实验室日常管理的强制性措施。分子诊断实验的无生物风险的阳性对照与微生物的不同封闭措施应用于微生物实验(尤其是病毒学实验)从而降低暴露风险。生物安全文化应全面施行,以预防生物安全事件的再次发生。     

血站实验室生物安全与防护

血站实验室每天要检测大量无偿献血者的血液样本,而血液样本都具有潜在的生物危害,如乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒、梅毒和艾滋病病毒等。最新研究表明,血站检验人员存在职业暴露的危险因素,极易通过采血针刺伤、试管划伤、血液或粘膜污染等途径感染病毒[1]。随着社会的发展,医疗卫生与健康问题已成为社会关注焦点。所谓实验室生物安全是指在从事病原微生物实验活动的实验室中避免病原微生物对工作人员和相关人员的伤害。为保障实验室工作人员及献血者的安全,血站必须建立符合生物安全要求的实验室,对实验室进行生物安全管理的同时还要重视实验室生物安全防护[2]。本文就血站实验室生物安全及防护措施在人员培训、关键物料、环境和制度等方面提出自己的一些思考和建议。     

实验室生物安全备案及管理系统模型的建立与应用研究

目前对BSL-1和BSL-2级病原微生物实验室国家规定需向市级政府卫生主管部门或者兽医主管部门备案,对其实验操作内容、仪器设备情况、人员培训考核等均有相应的考核监督机制,但强调不够。病原微生物实验室生物安全管理工作是关系到经济发展、社会稳定、人民群众身体健康和生命安全的大事,任何疏忽都可能造成难以弥补的损失。本研究借鉴、整合目前国际上较有效的病原微生物实验室生物安全管理方法、制度等,根据国内病原微生物实验室的实际情况,利用先进的计算机技术,针对BSL-1和BSL-2级病原微生物实验室建立一套能够对实验室生物安全进行规范化管理的系统模型,根据本单位内部考核相关指标验证体系,使得病原微生物实验室的生物安全问题得到统一规范管理。     

北美国家大动物生物安全实验室的建设与管理

目的 为提高动物实验室生物安全意识,供大动物生物安全实验室设计、施工、使用和管理借鉴.方法 采用考察和分析的方法了解了北美国家大动物生物安全实验室的设计理念、设备、设施、动物试验及动物实验室管理.结果 大动物生物安全实验宝与我国畜牧业健康发展和社会稳定密切相关,我国与国外大动物生物安全实验室存在较大的差距.结论 我国应借鉴国外大动物生物安全实验室设计的理念,完善大动物实验室基础设施,增设相应的设备和提升动物实验室工作人员的生物安全意识.     

三级生物安全实验室感染性废弃物处理相关问题的探讨

在生物安全管理的各环节中,感染性废弃物的处理是控制实验室生物安全的关键环节.为此,我国制定了关于感染性废弃物处理的法律、法规,以避免污染实验室或环境.本三级生物安全实验室运行的3年中,在处理感染性废弃物时遇到了若干需要认真对待的细节,如固体感染性废弃物处理过程中的灭菌环节、消毒剂使用对压力蒸汽灭菌器的损伤、液体感染性废...     

Prevention of Contamination by Xenotropic Murine Leukemia Virus-Related Virus: Susceptibility to Alcohol-Based Disinfectants and Environmental Stability

Xenotropic murine leukemia virus-related virus (XMRV) represents a novel γ-retrovirus that is capable of infecting human cells and has been classified as a biosafety level 2 (BSL-2) organism. Hence, XMRV represents a potential risk for personnel in laboratories worldwide. Here, we measured the stability of XMRV and its susceptibility to alcohol-based disinfectants. To this end, we exposed an infectious XMRV reporter virus encoding a secretable luciferase to different temperatures, pH values, and disinfectants and infected XMRV-permissive Raji B cells to measure residual viral infectivity. We found that 1 min treatment of XMRV particles at 60°C is sufficient to reduce infectivity by 99.9%. XMRV infectivity was maximal at a neutral pH but was reduced by 86% at pH 4 and 99.9% at pH 10. The common hand and surface disinfectants ethanol and isopropanol as well as the cell fixation reagent paraformaldehyde abrogated XMRV infectivity entirely, as indicated by a reduction of infectivity exceeding 99.99%. Our findings provide evidence of specific means to inactivate XMRV. Their application will help to prevent unintended XMRV contamination of cell cultures in laboratories and minimize the risk for laboratory personnel and health care workers to become infected with this biosafety level 2 organism.     

An evaluation of the role and effectiveness of institutional biosafety committees in providing oversight and security at biocontainment laboratories

Institutional biosafety committees (IBCs) have been charged with the oversight and review of biosafety at thousands of biocontainment labs nationwide, hundreds of which are high-level BSL-3 and BSL-4 labs. In light of the recent rapid proliferation of BSL-3 and BSL-4 facilities and the increases in research in the areas of biodefense, select agents, recombinant DNA, and synthetic biology and dual-use research, questions have been raised about whether IBCs are fulfilling their oversight responsibilities. This article reviews information on the responsibilities and expectations of IBCs as currently constituted and provides an analysis of IBC performance from survey data of hundreds of research institutions over the past several years. The findings highlight serious ongoing problems with IBCs' adherence to NIH Guidelines. This raises questions about the current voluntary governance framework as an effective system to monitor and oversee U.S. research facilities, including high-containment facilities, and their research activities. The findings strongly suggest the need for immediate improvement or replacement of the IBC system.     

新冠疫情防控常态化下的病原微生物实验室备案管理平台建设与思考

针对山东省内病原微生物实验室备案管理的问题和需求,开发了山东省生物安全实验室备案管理平台,通过该系统对病原微生物实验室备案工作进行网络化集成,以实现病原微生物实验室备案活动的数字化和流程化管理。该平台能在很大程度上提高备案效率,已在山东省内推广使用。本文从功能和架构两方面对比国内已有的病原微生物实验室及实验活动备案管理平台现状,分析并探讨新型冠状病毒肺炎疫情常态化下实验室备案管理平台的建设建议和思考,期望为其他省市的相关平台建设提供参考。     

Aseptic laboratory techniques: plating methods

Microorganisms are present on all inanimate surfaces creating ubiquitous sources of possible contamination in the laboratory. Experimental success relies on the ability of a scientist to sterilize work surfaces and equipment as well as prevent contact of sterile instruments and solutions with non-sterile surfaces. Here we present the steps for several plating methods routinely used in the laboratory to isolate, propagate, or enumerate microorganisms such as bacteria and phage. All five methods incorporate aseptic technique, or procedures that maintain the sterility of experimental materials. Procedures described include (1) streak-plating bacterial cultures to isolate single colonies, (2) pour-plating and (3) spread-plating to enumerate viable bacterial colonies, (4) soft agar overlays to isolate phage and enumerate plaques, and (5) replica-plating to transfer cells from one plate to another in an identical spatial pattern. These procedures can be performed at the laboratory bench, provided they involve non-pathogenic strains of microorganisms (Biosafety Level 1, BSL-1). If working with BSL-2 organisms, then these manipulations must take place in a biosafety cabinet. Consult the most current edition of the Biosafety in Microbiological and Biomedical Laboratories (BMBL) as well as Material Safety Data Sheets (MSDS) for Infectious Substances to determine the biohazard classification as well as the safety precautions and containment facilities required for the microorganism in question. Bacterial strains and phage stocks can be obtained from research investigators, companies, and collections maintained by particular organizations such as the American Type Culture Collection (ATCC). It is recommended that non-pathogenic strains be used when learning the various plating methods. By following the procedures described in this protocol, students should be able to: Perform plating procedures without contaminating media. Isolate single bacterial colonies by the streak-plating method. Use pour-plating and spread-plating methods to determine the concentration of bacteria. Perform soft agar overlays when working with phage. Transfer bacterial cells from one plate to another using the replica-plating procedure. Given an experimental task, select the appropriate plating method.     

过氧化氢干雾对生物安全柜微环境表面消毒效果的研究

生物安全实验室微环境消毒是控制实验室污染的重要环节。过氧化氢广泛用于病原微生物实验室微环境消毒,但其对不同病原微生物的消毒效果有待研究。本文研究了过氧化氢干雾（粒径％10μm）以不同消毒程序对生物安全柜表面常见微生物的消毒效果。结果显示,在生物安全柜内采用优化的消毒程序（发散循环8次,每次1min,达60ppm后,静置消毒2h）,过氧化氢干雾可完全杀灭1×106CFU枯草芽胞杆菌、嗜热脂肪芽胞杆菌、金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、耻垢分枝杆菌,以及1×106CFU大肠埃希菌。然而,当金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、耻垢分枝杆菌浓度达1×107CFU时,过氧化氢干雾无法完全杀灭。因此,建议在进行过氧化氢干雾消毒时,应先用消毒剂处理,以期彻底杀灭生物安全柜微环境中污染的病原微生物。     

Developing a behavioral health screening program for BSL-4 laboratory workers at the National Institutes of Health

The events and aftermath of September 11, 2001, accelerated a search for personnel reliability test measures to identify individuals who could pose a threat to our nation's security and safety. The creation and administration of a behavioral health screen for BSL-4 laboratory workers at the National Institutes of Health represents a pioneering effort to proactively build a BSL-4 safety culture promoting worker cohesiveness, trust, respect, and reliability with a balance of worker privacy and public safety.     

“医学微生物学”本科实验教学中生物安全的落实与实践

"医学微生物学"实验课的主要实验材料是病原微生物,因此实验室生物安全是本课程区别于其它实验课程的重要特征之一。因条件限制,我校以前的"医学微生物学"实验课只能安排在不具备生物安全防护等级的普通实验室中进行,不仅存在安全隐患,也使一部分内容不能正常进行,使医学微生物实验教学的发展遇到了瓶颈。为解决这一矛盾,本研究通过医学微生物学教学师资队伍的培训、实验室硬件条件升级改造以及对课程内容涉及的菌(毒)种及其配套软件建设等一系列措施,建立了具有北京大学医学特色的"医学微生物学"实验教学新体系,保证了微生物实验室生物安全相关法规条例的落实及实验教学的正常进行。