神经颗粒素:一种脑特异性蛋白质

神经颗粒素(Neurogrann,Ng)是一种新发现的由78个氨基酸组成的脑特异性蛋白,主要分布于人类或动物的大脑皮层、海马和嗅球等脑区的神经突触后。作为Calpacitin蛋白家族中的一员,Ng是蛋白激酶C的天然作用底物及钙调蛋白(CaM)的储库。在生理状态下,Ng与CaM结合形成复合体,而在蛋白激酶C或氧化剂的作用下,Ng可被磷酸化、氧化及谷胱甘肽化等化学修饰,降低其与CaM的亲和力,从而参与对CaM及CaM-激活的蛋白酶,如CaM-依赖性NO合酶、CaM-依赖性蛋白激酶Ⅱ(CaMKⅡ)及CaM-依赖性腺苷酸环化酶的调节。同时,由于CaM-依赖性蛋白酶大多参与长时程增强(LTP)和长时程抑制(LTD)的诱导,并且Ng的基因表达和蛋白质合成与神经元的突触形成、分化同步,因此,Ng可能在学习、记忆、神经系统发育(可塑性)等生理性变化中具有重要作用。此外,一些研究表明,Ng还可能参与甲状腺机能减退、睡眠剥夺、衰老及脑低氧预适应等病理生理学变化所造成的神经系统功能的改变。     

钙／钙调素依赖性蛋白激酶对17.7kD和6kD胰腺蛋白的磷酸化

本文报导了胰腺提取物中两种可被钙／钙调素依赖性蛋白激酶磷酸化的热稳定蛋白。ＳＤＳ－ＰＡＧＥ测定其表观分子量分别为１７．７ｋＤ和６ｋＤ。经钙／钙调素依赖性蛋白激酶磷酸化后,其最大磷酸参入最为８．８μｍｏｌ／ｇ蛋白。同时磷酸化作用导致１７．７ｋＤ蛋白在ＳＤＳ－ＰＡＧＥ中迁移率发生变化。本文还进一步分析了各种阳离子对磷酸化的影响,并对此两种蛋白可能的生理功能进行了初步探讨。     

缺血与正常小鼠脑内蛋白磷酸化脱磷酸化的比较研究

以小鼠断头脑缺血为模型,研究缺血小鼠脑内蛋白磷酸化脱磷酸化的改变,对缺血１ｍｉｎ,５ｍｉｎ,１５ｍｉｎ和３０ｍｉｎ及对照小鼠脑内蛋白磷酸化脱磷酸化的研究表明,有些磷蛋白如１４５ｋＤ,８４ｋＤ,５９ｋＤ和５０ｋＤ 的磷酸化随缺血时间延长而减弱,还有些磷蛋白和如１１９ｋＤ,１０５ｋＤ,７８ｋＤ,５５ｋＤ的磷酸化随缺血时间延长而增加,对磷酸化程度变化显著的缺血１５ｍｉｎ小鼠脑内胞浆及膜上ＰＫＡ、ＰＫＣ、     

磷酸化蛋白质组学的新进展及其在肝脏生理和病理机制中的应用

蛋白质磷酸化是最常见的蛋白质翻译后修饰形式。由于蛋白质的磷酸化形式可以被磷酸酶和磷酸激酶进行可逆的调控,所以在众多的生命活动过程中蛋白质的磷酸化修饰起着重要的调控作用,因此对生物体内蛋白质磷酸化修饰的系统研究对于揭示生命科学的奥秘显得十分重要。近年来,随着质谱技术和生物信息学软件以及磷酸化肽段富集方法的发展,利用质谱对生物体内蛋白质磷酸化修饰研究的技术逐渐成熟。肝脏作为人体最重要的代谢和免疫器官,深入研究肝脏细胞内蛋白质磷酸化修饰形式对于理解其功能具有重要指导意义。目前,迅速发展的磷酸化蛋白质组学技术已经被广泛应用到肝脏功能的生物学研究中。这些研究加深了人们对肝脏的生理及病理状态的分子生物学机制的了解。本文综述了当前磷酸化蛋白质组学的研究进展和磷酸化蛋白质组学在肝脏中的研究。     

植物蛋白磷酸酶及其在植物抗逆中的作用

随着多种蛋白磷酸酶在植物中的发现,可逆磷酸化作用在植物各种生理活动中的研究有许多重要的进展。本文概述了蛋白磷酸酶的类型与特点,并着重介绍近年来植物中多种磷酸酶的活性、基因、蛋白等各个水平上的鉴定工作。讨论了几类主要蛋白磷酸酶参与植物抵抗逆境胁迫的有关研究成果。     

缺血与正常小鼠脑内蛋白磷酸化脱磷酸化的比较研究

以小鼠断头脑缺血为模型,研究缺血小鼠脑内蛋白磷酸化脱磷酸化的改变。对缺血１ｍｉｎ、５ｍｉｎ、１５ｍｉｎ和３０ｍｉｎ及对照小鼠脑内蛋白磷酸化脱磷酸化的研究表明,有些磷蛋白如１４５ｋＤ、８４ｋＤ、５９ｋＤ和５０ｋＤ的磷酸化随缺血时间延长而减弱,还有些磷蛋白如１１９ｋＤ、１０５ｋＤ、７８ｋＤ和５５ｋＤ的磷酸化随缺血时间延长而增加。对磷酸化程度变化显著的缺血１５ｍｉｎ小鼠脑内胞浆及膜上ＰＫＡ、ＰＫＣ、Ｃａ~（２＋）／ＣａＭＰＫ底物的磷酸化进行了研究,发现胞浆组分中与钙相关的ＰＫＣ、Ｃａ~（２＋）／ＣａＭＰＫ底物磷酸化在缺血鼠脑中明显减弱。同时研究了脑内唯一依赖于Ｃａ~（２＋）／ＣａＭ的钙调神经磷酸酶（Ｃａｌｃｉｎｅｕｒｉｎ,ＣａＮ）底物的变化,发现缺血小鼠脑内ＣａＮ的某些底物磷酸化降低。     

植物蛋白磷酸酶及其在植物抗逆中的作用

随着多种蛋白磷酸酶在植物中的发现,可逆磷酸化作用在植物各种生理活动中的研究有许多重要的进展。本文概述了蛋白磷酸酶的类型与特点,并着重介绍近年来植物中多种磷酸酶的活性、基因、蛋白等各个水平上的鉴定工作。讨论了几类主要蛋白磷酸酶参与植物抵抗逆境胁迫的有关研究成果。     

奇特的蛋白质

据估计生物界中的蛋白质可达 10 10 ～ 10 12 ,有的作为功能蛋白发挥着及其重要的生理功能 (酶蛋白、运输蛋白、运动蛋白、免疫球蛋白等 ) ;有的为不具活性功能的储藏蛋白 (鸟卵清蛋白、牛奶酪蛋白 )和结构蛋白 (毛发角蛋白、结缔组织中的胶原蛋白 )。其实除了这些蛋白质外尚有一类奇特的蛋白质 ,它们有的能发光 ,有的与抗冻有关 ,有的能提高酶的活性 ,有的与耐热性有关 ,有的有杀菌作用。1　绿色荧光蛋白绿色荧光蛋白 ( GFP)是 Douglas等在 1992年最早纯化得到的能发光的蛋白质 ,因其独特的发光特性引起人们极大的兴趣 ;它能在长波紫外光…     

八肽胆囊收缩素拮抗NDAP对大鼠脊髓钙调蛋白的作用

为探讨ＣＣＫ－８抗阿片作用的受体后分子机理，本实验观察了ＣＣＫ－８和κ受体激动剂ＮＤＡＰ对大鼠脊髓背柱突触小体钙调蛋白活性的影响。结果表明：（１）１０ｎｍｏｌ／Ｌ－１μｍｏｌ／ＬＮＤＡＰ显著低大鼠髓背侧部突触小体的ＣａＭ 活性（Ｐ均＜０．０保ǎ亮吭黾樱种谱饔貌欢霞忧浚庵肿饔每杀惶匾煨驭适芴遄瓒霞粒危铮颍拢危桑ǎ宝蹋恚铮欤蹋┩耆瓒稀＃ǎ玻茫茫耍冈诘团ǘ仁保ǎ保埃保埃埃睿恚铮欤蹋     

Tau蛋白在阿尔茨海默病中的作用

阿尔茨海默病(AD)是非常普遍的神经变性性疾病并且是老年人痴呆的主要原因。AD患者的症状特点包括进行性的认知障碍、记忆丧失和行为障碍,与大脑中的病理变化密切相关。AD现成为全球最严重的健康和社会经济问题。在AD患者脑中神经纤维网或神经营养障碍的过程中存在tau蛋白的异常。tau蛋白丧失其促微管组装的生物学功能,导致细胞骨架的破坏、丝状物形成和神经缠结,轴突运输损害,进而导致突触蛋白失去功能和神经退行性病变。其数量和结构的改变将会影响其功能而且会出现异常聚集。调节Tau蛋白的异常聚集的分子机制主要是一些翻译后修饰使其结构及构象发生变化。因此,异常磷酸化和截断的tau蛋白作为tau蛋白病理过程的关键机制而引起学者关注。本文描述了tau蛋白的结构和功能及其在AD中的主要病理变化,同时在本文中还涉及到磷酸化的tau蛋白是神经元对氧化应激的代偿反应这一观点。对tau蛋白进行更加全面的解读。     

蛋白磷酸酶在离子通道调控中的作用

蛋白质可逆磷酸化是调节细胞生理功能的主要机制之一。任何状态下的蛋白质磷酸化水平实际上反映了催化该过程的蛋白激酶（ＰＫ）和蛋白磷酸酶（ＰＰａｓｅ）相对活性之间的平衡。尽管ＰＫ激活的信号传导途径及它们调控离子能道的机制比较清楚,但ＰＰａｓｅ的作用却长期被忽视。近年来,随着特异ＰＰａｓｅ抑制剂的发掘和利用,ＰＰａｓｅ在膜通道调控中的重要性逐渐被认识并引起人们重视。研究通道电流和ＰＰａｓｅ的关系不仅可阐明     

APOE4通过Calpain/p35-p25/Cdk5增加tau蛋白磷酸化

摘要 目的：探究载脂蛋白APOE4对小鼠海马组织中tau蛋白磷酸化的作用。方法：采用6月龄人载脂蛋白APOE3,APOE4转基因纯合小鼠,用Western Blot检测小鼠海马组织中tau蛋白的磷酸化程度及Calpain蛋白、p35/25、CDK5等蛋白表达水平。使用脑立体定位术向小鼠侧脑室注射Ca²⁺螯合剂EGTA或二甲基亚砜DMSO两次,给药时间间隔4小时,第二次给药结束后两小时内处死小鼠。检测海马中Calpain蛋白、CDK5、p35/25及tau蛋白的磷酸化的变化情况。结果：①与野生型小鼠和APOE3-TR小鼠相比,APOE4-TR小鼠海马中tau蛋白在Ser396,Thr181及Thr231位点的磷酸化均显著性增高,同时Calpain2、p35/25和CDK5的表达水平也增加。②使用Ca²⁺螯合剂EGTA后,与对照DMSO给药组相比,Ca²⁺螯合剂EGTA给药组小鼠海马组织中tau蛋白在Ser396位的磷酸化显著下降,但未检测到tau蛋白在Thr181及Thr231位点的磷酸发生显著性变化,同时Calpain 2蛋白、p35/25和CDK5的表达水平降低。结论：人载脂蛋白APOE4引起小鼠海马tau蛋白磷酸化异常增高,并且可能是通过Calpain/p35-p25/CDK5信号通路调控tau蛋白Ser396位点磷酸化。     

钙调蛋白在植物发育中的功能

钙调蛋白(CaM)在植物生长和发育中有着多种功能,它参与了一系列的发育过程如细胞分裂、细胞代谢、胁迫、花药和雌蕊以及胚胎的发育等．对钙调蛋白功能的了解将有助于更深入研究钙/钙调蛋白介导的信号网络,为研究植物体内各类代谢的信号转导奠定基础．     

植物体内蛋白质磷酸化及其在信息传递中的作用

本文概述了蛋白质磷酸化作用及其在细胞信息传递中的作用以及目前植物体内发现的蛋白激酶类以及经受磷酸化作用的蛋白质和酶类。     

钙离子及钙调蛋白对不同温度型冬小麦盐分吸收与累积的影响

以4种不同温度类型的冬小麦品种'小偃6号'、'NR9405'、'陕229'和'RB6'为材料,在0～250 mmol/L NaCl胁迫条件下,采用水培试验研究了钙调蛋白抑制剂(CPZ)、钙离子通道阻断剂(LaNO3)和钙离子螯合剂(EGTA)等对冬小麦盐分吸收的影响及其作用机理.结果显示:在中盐(150 mmol/L NaCl)胁迫下3种制剂均显著增加了各品种小麦植株对Na+的吸收,减少了K+吸收,且其作用依次表现为CPZ>EGTA>LaNO3.中盐胁迫下,各种制剂对冷型小麦'陕229'和'RB6'盐分吸收的影响大于暖型小麦'小偃6号'和‘NR9405',而高盐(250 mmol/L)胁迫下这种差异缩小.研究表明,Ca2+对小麦Na+吸收的调节作用主要通过钙调蛋白(CaM)来完成, CaM不但控制小麦Na+净吸收和累积,而且在小麦K+吸收中也起重要作用;在盐胁迫下冷型小麦 '陕229'和'RB6'对Ca2+和CaM活性的要求大于暖型小麦'小偃6号'和'NR9405'.     

钙调磷酸酶对阿尔茨海默病中tau蛋白异常磷酸化的作用

100年前,阿尔茨海默病（Alzheimer disease,AD）被首次报道,它是一种以进行性认知障碍和记忆力损伤为主要临床特征的中枢神经系统退行性疾病,是最常见的一种老年性痴呆.由异常磷酸化的tau蛋白构成的神经元纤维缠结（neurofibrillary tangle,NFT）是AD最重要的病理学改变之一.钙调磷酸酶（calcineurin,CN）是脑组织中含量最高的一种丝氨酸/苏氨酸蛋白磷酸酶,其活性依赖于Ca2＋和钙调蛋白.最近的研究显示,CN在脑中与NFT共定位,CN活性的下降能够导致tau蛋白在多个AD特征性位点的异常磷酸化,进而形成NFT.因而,CN活性的缺陷与AD的发生密切相关.CN活性缺陷导致的tau蛋白异常磷酸化具有可逆性,CN激活剂有望在其中扮演重要的角色.     

缺氧缺糖对培养海马神经细胞中一氧化氮和钙离子的影响

在缺血性脑损伤中 ,NO起着重要作用。研究了原代培养的海马神经细胞中 ,缺氧缺糖对NO合成的影响。利用激光共聚焦显微镜和荧光指示剂 ,对胞内钙离子和NO的变化进行实时检测 ,并用HPLC检测了缺氧缺糖导致的谷氨酸释放。结果表明 ,缺氧缺糖引起胞内钙离子浓度升高和NO合成增加。经过 2 0min缺氧缺糖处理后 ,胞外谷氨酸的浓度比对照组高出约10 0 %。N 甲基 D 天冬氨酸 (N methyl D aspartate,NMDA)的拮抗剂MK 80 1对缺氧缺糖引起的细胞内钙离子和NO的升高有明显抑制作用。去除细胞外液的钙离子和加入钙调蛋白抑制剂三氟拉嗪都可以抑制缺氧缺糖引起的NO升高。以上结果提示 ,缺氧缺糖引起神经细胞NO合成增加 ,这种合成受谷氨酸释放 ,胞内钙离子浓度和钙调蛋白的调控。     

重组水母发光蛋白及其在植物钙离子信号检测中的应用

重组水母发光蛋白作为检测植物细胞钙信号的手段是近十几年发展起来的新方法,该文介绍了重组水母发光蛋白作为Ca2+检测探针的发展过程、测钙原理、Ca2+浓度检测方法、Ca2+浓度换算方法、优点与不足、及在植物细胞钙离子信号检测中的研究进展。并利用国外实验室提供的方法在国内首次得出冷激条件下植物细胞内细胞质中([Ca2+]cyt)和液泡膜附近([Ca2+]md)钙离子浓度动力学变化曲线。     

水稻类钙调磷酸酶亚基B蛋白质在叶片生长和白叶枯病抗性反应中的表达

钙信号介导植物对多种外部刺激的反应并参与调控广泛的生理学过程。钙离子结合蛋白质, 如类钙调磷酸酶亚基B蛋白质(calcineurin B-like protein, CBL), 对感受和传递钙信号具有重要作用。根据基因组测序及注释分析, 水稻(Oryza sativa)基因组中有10个CBL家族成员。采用基于抗体的蛋白质组学策略, 利用免疫印迹方法研究了水稻CBL蛋白质在叶片生长不同时期的表达, 揭示了其在正常发育过程中的表达模式。然后对Xa21介导的水稻白叶枯病抗性反应不同时间点的蛋白质表达进行检测, 发现OsCBL-1、OsCBL-3、OsCBL-5、OsCBL-9和OsCBL-10这5个蛋白质的表达发生了变化; 进一步比较它们在抗病、感病和对照处理中的表达情况, 发现其在不同反应间的表达也有区别, 提示了CBL蛋白质在水稻-白叶枯病菌互作过程中的功能。该研究为深入了解水稻CBL蛋白质的功能提供了有价值的线索。