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1.
由凝胶电泳酶谱检测到黑曲霉149发酵液中存在两型木聚糖酶,依次为X-Ⅰ和X-Ⅱ.通过硫酸铵分级沉淀及DEAE-SephadexA50柱层析分别将X-Ⅰ、X-Ⅱ纯化到凝胶电泳均一。由SDS一凝胶电泳和浓度梯度凝胶电泳测得X-Ⅰ和X-Ⅱ的分子量分别为37kDa,76kDa,24kDa和23kDa,X-Ⅰ具有亚基。二者的含糖量分别为276%和7.3%。X-Ⅰ和X-Ⅱ最适反应温度分别为50℃和55℃,pH为46和5.2。在pH4.6~9.2和pH4.0~10.0之间X-Ⅰ、X-Ⅱ活力稳定。50℃保温24h,X-Ⅰ活力仍为100%,而X-Ⅱ的活力已降为2.8%。HgCl2和AgNO3显著抑制X-Ⅰ、X-Ⅱ的活力。X-Ⅰ与X-Ⅱ水解不同来源的木聚糖,其产物有所不同。 相似文献
2.
经SephadexG-75凝胶过滤,QAE-SephadexA-50和CM-SephadexC-25离子交换层析的步骤,从湖南产尖吻蝮(Dienagkistrodonacutus)蛇毒中纯化出两个出血毒素(DaHT-1和DaHT-2).SDS-PAGE测得分子量均为23.5kD,IEF-PAGE测得等电点分别为5.6和5.2,两者具有相似的氨基酸组成,其中酸性氨基酸(Asx,Glx)分别占23%和24%,DaHT-1和DaHT-2的最小出血剂量(MHD)分别为0.5μg和0.8μg。都具蛋白水解酶活性,无对TAME,BAEE的水解活性和PLA2酶活性.两者的蛋白水解酶活力与出血活性并非正相关.DaHT-1和DaHT-2的最适温度分别为35℃和40℃,最适pH为6-9,对热均不稳定,温度高于60℃活性完全丧失。金属离子的分析显示每摩尔毒素蛋白约含0.5mol的Zn,1mol的Ca,较多的Na、K、Mg,不含Co。 相似文献
3.
链霉菌Z94-2碱性脂肪酶产生条件及酶学性质 总被引:2,自引:0,他引:2
在152 株脂肪酶产生菌中,链霉菌Z942 产脂肪酶活力为596u/ mL,其最适培养基(g/L) 为:糊精10 、黄豆饼粉30 、尿素10 、K2HPO4 0-5 、MgSO4 0-5 、NaCl 1 和AEO9 0 .5 ,产酶的最适条件为:初始pH9 .5 ~10-0 ,在26 ℃培养48h 。用PVA 橄榄油乳化系统测定该酶的最适pH9 .8 ,最适温度37 ℃,在pH8-6 ~10-2 于5 ℃存放24 h ,酶活力不变。0-14mol/L 的氯化钙有较大的激活作用。 相似文献
4.
芽孢杆菌E2菌株纤维素酶性质的研究 总被引:5,自引:0,他引:5
芽孢杆菌E2菌在55℃下生长良好,在培养液中能大量积累胞外纤维素酶(190mu/mL培养液),所产生的纤维素普单一的羧甲基纤维素酶(CMCase)。羧甲基纤维素钠(CMCNa)为其专一性底物。该酶作用的pH为4.5-8.0;最适pH为6.5-7.0;在pH4.0-8.0范围内较稳定,酶作用的最适温度为55℃;在60℃处理10,30,60,90以及120分钟后,残余酶活分别为95%,80.3%,40 相似文献
5.
黑曲霉木聚糖酶的纯化与性质 总被引:15,自引:0,他引:15
由凝胶电泳酶谱检测到黑曲霉149发本酵液中存在两型木聚糖酶,依次为X-Ⅰ和X-Ⅱ。通过硫酸铵分级沉淀及DEAE-Sephadex A50柱层析分别将X-Ⅰ、X-Ⅱ纯化到凝胶电泳均一。由SDS-凝胶电泳和浓度梯度凝胶电泳测得X-Ⅰ和X-Ⅱ的分子量分别为37kDa,24kDa和23kDa,X-Ⅰ具有亚基。二者的含糖量分别为27.6%和7.3%。X-Ⅰ和X-Ⅱ最适返应温度分别为50℃和55℃,pH为4. 相似文献
6.
地衣芽孢杆菌β-甘露聚糖酶的纯化及酶学性质 总被引:6,自引:0,他引:6
地衣芽孢杆菌(Bacilluslicheniformis)NK-27菌株发酵产生的β-甘露聚糖酶(β-mannanase)经硫酸铵盐析沉淀,两次DEAE纤维素和SephadexG-100离子交换柱层析以及制备PAGE筹步骤,获得了凝胶电泳均一的样品。用SDS-凝胶电泳测得纯化后的β-甘露聚糖酶分子量为26kD,用凝胶聚焦电泳测得等电点PI为5.0。酶反应的最适pH为9.0,最后温度为60℃,稳定pH为6.0—9.0,稳定温度为40℃。金属离子中Mg ̄(2+)、Ca ̄(2+)、Fe ̄(2+)、Ni ̄(2+)对该酶有一定的激活作用;而Sn ̄(2+)、Zn ̄(2+)、Al ̄(3+)、Ag ̄+和Hg ̄(2+)对该酶有强烈的抑制作用。NK-27菌株的β-甘露聚糖酶对魔芋葡萄甘露聚糖和角豆胶半乳甘露聚糖的Km值分别为7.14和5.56mg·ml ̄(-1);V_(max)分别为200.53和157.45μmol·mg ̄(-1)·min ̄(-1)。 相似文献
7.
链霉菌Z94-2碱性脂肪酶产生条件及酶学性质 总被引:2,自引:0,他引:2
在152株脂肪酶产生菌中,链霉菌Z94-2产脂肪酶活力为596u/mL,其最适培养基(g/L)为:糊精10、黄豆饼粉30、尿素10、K2HPO40.5、MgSO40.5、NaCl1和AEO90.5,产酶的最适条件为:初始pH9.5~10.0,在26℃培养48h。用PVA橄榄油乳化系统测定该酶的最适pH9.8,最适温度37℃,在pH8.6~10.2于5℃存放24h,酶活力不变。0.14mol/L的氯 相似文献
8.
用分子筛(岛津DIOL-150柱)和阳离子交换(岛津WCX-1柱)高效液相色谱从虎纹捕鸟蛛(Selenocosmiahuwena)毒液中分离提纯透明质酸酶(Hyaluronidase,EC3.2.1.35).经等电聚焦电泳为一条带,pI=7.2.经SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳测得分子量为40kD,经凝胶过滤测得分子量为40.7kD。以透明质酸为底物时在pH3.5─5.5范围内有较大活性,最适pH值为4.0;在pH4.5─6.0范围内稳定,在反应温度为30─60℃时有较大活性,最适温度为50℃;对热稳定,0.15mol/L的NaCl对酶活性有一定的稳定作用.3%的肝素、500μmol/L的Hg~(2+)、Fe~(2+)、Cu~(2+)对酶活性有明显的抑制作用。 相似文献
9.
从埋麻土壤中分离到放线菌298株,经初筛和复筛得到产酶活性较高的一株放线菌5-71。最适产酶条件是:果胶0.5%,葡萄糖0.5%,蛋白胨0.5%,酵母粉0.1%,K2HPO4 0.1%,KH2PO4 0.1%,NaCl0.1%,MgSO4·7H2O0.05%,pH8.0。25℃培养3天达产酶高峰。通气量对产酶影响不大。酶促反应最适条件是:pH9.6,45℃,底物果胶浓度0.75%,作用时间90mi 相似文献
10.
黑曲霉A3木聚糖酶酶学性质研究 总被引:8,自引:0,他引:8
黑曲霉A3(Aspergillus niger A3)的固体培养物浸出液,经过多步分离纯化后,获得三个组份的木聚糖酶,称为xⅠ、xⅡ和xⅢ。经7%凝胶浓度的盘状电泳分析均为单一组份。经等电聚焦电泳测xⅠ、xⅡ和xⅢ。的等电点分别为6.8、5.5和6.1。SDS-PAGE测得亚基分子量(Da)分别为xⅠ,42000;xⅡ,20000;xⅢ,31000。三个酶组份的最适反应温度分别为xⅠ,40℃;xⅡ 相似文献
11.
香石竹的叶片培养及植株再生 总被引:14,自引:0,他引:14
1植物名称香石竹(Dianthuscaryophy-llus),别名康乃馨。2材料类别无菌苗叶片。3培养条件以MS为基本培养基。分化培养基附加:(1)6-BA1.0mp·L-1(单位下同)+NAA0.3;(2)6-BA1.0+NAA0.1;(3)6-BA1.0+NAA0.05。增殖培养基附加6-BA0.5+NAA0.1。分化和增殖培养基均加蔗糖3%、琼脂0.7%,pH5.8。生根培养基为1/2MS附加NAA0.1,蔗糖2%,琼脂0.6%,pH5.8。培养温度为(25±1)℃,光照12h·d-1,… 相似文献
12.
柑叶片蔗糖酶的分离纯化及其部分性质的研究 总被引:8,自引:0,他引:8
唐云明 《Acta Botanica Sinica》1995,(8)
柑(Citrusreticulata Blanco)幼叶中存在高活性的酸性蔗糖酶。经硫酸铵盐析、DEAE-琼脂糖离子交换层析、SephacrylS-200 凝胶层析纯化,活性回收率6.4% ,纯化倍数179.2 倍。纯化的酶经聚丙烯酰胺凝胶电泳显示单一蛋白带,SDS-PAGE显示1 条蛋白带,其亚基分子量40 kD。用SephacrylS-200 凝胶层析法测得分子量为80 kD。推测该酶由两个相同亚基构成。以蔗糖为底物测定该酶的表观Km 为1.6×10- 2 m ol·L- 1,Vm ax为100 m g 还原糖·m g- 1蛋白质·h- 1。最适pH 5.0,酸碱稳定区在pH 4.5—5.5 之间。最适温度55℃ 相似文献
13.
中温碱性脂肪酶的研究:Ⅲ.扩展青霉PF868变株碱性脂肪酶的纯化及其… 总被引:7,自引:1,他引:7
扩展青霉PF868变株发酵液经硫酸铵盐析和Sephadex-G-200及Sepharose4B柱层析纯化,获得纯化倍数为32.4的酶粉。该酶分子量为23442Dal,酶学特性表明:该酶的最适作用温度为32℃,50℃保温30min仍保留50%酶活性,最适pH为9.0,作用pH稳定范围在7.0-10.0之间,Ca^2+和Mg^2+对酶有激活作用,Fe^2+,Cu^2+和Mn^2+酶活力有抑制作用。 相似文献
14.
芽孢杆菌M_(50)产生β甘露聚糖酶的条件研究 总被引:3,自引:0,他引:3
从土壤中分离到9 株产生β甘露聚糖酶的芽孢杆菌( Bacillus sp .) 。Bacillussp . M50250m L三角瓶摇瓶培养试验,以4 % 的魔芋粉为碳源,1-0 % ( NH4)2SO4 为氮源,0-35 %Na2CO3 ,30 ~34 ℃培养60h 产酶达到高峰。酶活力为180 ~200u/m L。100L 罐发酵,在30 ~32 ℃,1∶0 .75vvm 通气量,200r/min 条件下,发酵液酶活力高达330u/m L。酶的最适反应温度和pH 分别为50 ℃和6-0 ,低于50 ℃,pH5 .0 ~7 .0 酶稳定。Fe3+ 、Al3+ 、EDTA、Hg2+ 对酶有抑制作用,而Ba2+ 、Mn2+ 对酶有激活作用。发酵粗酶液对苎麻精干麻精练,显示对精干麻的半纤维素残胶具有降解作用。 相似文献
15.
用硫酸铵分级沉淀、DEAE-纤维素离子交换层析、免疫亲和层析、SephadexG100凝胶柱层析从人胃组织中提取出腺苷脱氨酶,酶纯化19324倍,比活力为5797U/mg蛋白.提取酶液经PAGE、SDS-PAGE和等电聚焦只呈现一条区带。测得该酶的分子量为41.2kD,等电点为pH4.8.氨基酸组成分析表明该酶由388个氨基酸残基组成,N端氨基酸为精氨酸。酶的最适pH为6.5,pH小于5.0或大于9.0时不稳定;最适温度为37℃,对热不太稳定,以腺苷及2-脱氧腺苷作为底物,其Km分别为87μmol/L和41μmol/L。 相似文献
16.
银王亮丝草的试管微繁殖 总被引:2,自引:0,他引:2
1植物名称银王亮丝草(Aglaonema com-mutatumcv."SilverKing”),又名银王粗肋草、银王万年青、银皇帝。2材料类别带腋芽的茎段。3培养条件以MS为基本培养基。芽诱导培养基附加6-BA2.0~2.5mg·L-1(单位下同);芽增殖培养基附加6-BA4.0~4.5及NAA0.01~0.02;生根培养基采用3/4MS附加IBA3.0~3.5及GA33,0。所有培养基蔗糖及琼脂含量分别为3%和0.75%,pH值均调至5.8。培养温度26~28℃,光照8~10h·d-1,光照… 相似文献
17.
18.
地衣芽孢杆菌β—甘露聚糖酶的纯化及酶学性质 总被引:9,自引:1,他引:9
地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)NK-27菌株发酵产生的β-甘露聚糖酶(β-mannanase)经硫酸铵盐析沉淀,两次DEAE纤维素和Sephadex G-100离子交换柱层析以及制备PAGE等步骤,获得了凝胶电泳均一的样品。用SDS-凝胶电泳测得纯化后的β-甘露聚糖酶分子量为26kD,用凝胶聚焦电泳测得等电点P1为5.0。酶反应的最适pH为9.0,最适温度为60℃,稳 相似文献
19.
人血红细胞酷氨酸蛋白磷酸酶(PTPP)的研究:Ⅱ.胞浆PTPP的分离纯… 总被引:1,自引:0,他引:1
人血红细胞胞浆部分经(NH4)2SO4沉淀,DEAE-纤维素(DE2)柱层析,磷酸纤维素柱层析(P11)得到部分纯化的PTPP,产率;5.7%,提纯1075倍。以^32P-Tyr-Poly(G4:T)作底物,测得其表征Km约为0.5-0.8μmol/L。该酶的最适pH和最适温度分别为7.0-7.8及37-40℃。Zn^2+等二价金属离子及Na3VO4等酸根基团对其活性有明显的抑制作用;EDTA、甘 相似文献
20.
何首乌(PolygonummultiflorumThunb.)叶Cu·ZnSOD经硫酸铵盐析、离子交换柱层析及葡聚糖凝胶过滤等步骤,被分离成两组SOD同工酶(SOD1,SOD2),它们被纯化到均一程度。SOD1分子量为32.4kD,亚基分子量为16.2kD,最适pH值为50,在60℃和65℃时的半衰期分别为14min和8min;SOD2分子量为305kD,亚基分子量为159kD,最适pH值为60,在60℃和65℃时半衰期分别为32min和16min,它由274个氨基酸残基组成,不含Cys、Tyr和Try。SOD1和SOD2每mol酶都含有2molCu和2molZn,它们在紫外区最大吸收波长均为275nm。 相似文献