戊型肝炎病毒感染激活补体系统

为了探究补体系统与戊型肝炎病毒复制的相关性,分别在HEV感染的A549细胞和BALB/c小鼠中检测C3aR、CD55和CD59蛋白的表达.利用RT-qPCR定量检测细胞和组织中补体的表达,采用免疫组化法检测HEV感染BALB/c小鼠中补体CD59及C5b-9的表达,ELISA检测补体相关炎症因子的变化.HEV感染可以激活补体蛋白C3aR、C5b-9、CD55和CD59的表达,引起补体蛋白相关炎症因子IL-10表达水平下降,IL-12和TNF-α的表达水平的上升,从而导致机体的炎症反应,加剧组织损伤.HEV感染激活补体系统并参与早期的抗病毒反应,HEV感染对补体的持续激活导致炎症因子过度表达,加重机体损伤.     

流行性出血热患者血清补体C3.C4的检测及其动态观察

对96例EHF患者血清补体C3、c4的检测及动态观察结果表明:EHF患者补体C3、C4均值都高于正常人,其中以C4增高较明显。根据EHF患者血清中补体含量的不同,可分为C3水平低下组,C3或C4水平增高组,C3或C4水平正常组。EHF患者补体水平的变化是极为复杂的,既存在有补体水平的下降,又存在有补体水平的升高。本文对此研究结果进行了讨论。     

分子佐剂C3d的研究进展

C3d是补体C3不可再被酶解的最小片段,在抗原特异性免疫建立之前,C3d可识别非已抗原并与之共价结合,增强了抗原递呈细胞的递呈能力、降低了B细胞的活化阈、提高特异性抗体的滴度、促进抗体亲和力成熟等。近年来研究显示,C3d还可以促进抗原特异性细胞免疫应答水平并改变机体免疫应答模式。所以,C3d是连接固有性免疫和获得性免疫的桥梁。本文对C3d的分子生物学特征、生物学功能以及作为分子佐剂可能的分子机制进行了简要总结。     

中华眼镜蛇蛇毒因子(CVF)对补体系统的作用及与人补体C[3]和其他蛇毒抗原性关系

中华眼镜蛇蛇毒经DEAE-Sepharose CL-6B、HPLC等多次柱层析分离出有抗补体及溶血活性的眼镜蛇蛇毒因子（Cobra venon factor,CVF)，纯化后的CVF在聚丙烯酰胺凝胶电泳图谱上呈单一区带，分子量为225000—230000，等电点为6.20。用二硫苏糖醇还原经SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳得三类亚基，其分子量总和为237000。体外抗补体及溶血试验表明，CVF的作用是通过补体旁路途经使总补体活力下降。双向免疫电沪鉴定，发现CVF与人血清作用后，其中补体成分C[3]分子的抗原性发生改变，则表明CVF的作用是通过激活补体成分C[3]而发挥的。给豚鼠腹腔注射CVF（0.15 μg/g体重）后，其血清总补本水平下降到正常值的3%以下，7天后回升，13天后恢复到正常水平。单相免疫电泳表明，CVF与人补体C[3]抗血清间无任何交叉免疫反应，但人血清与CVF抗血清间有微弱的免疫沉淀反应。另外，CVF的氨基酸组成与人补体C[3]也较为相似。鉴定还表明眼镜蛇科中四种蛇毒与CVF抗血清有强烈的免疫沉淀反应，蝰蛇毒及海蛇毒也有免疫沉淀反应，但只有眼镜蛇毒具有抗补体活性。     

云南孟加拉种眼镜蛇蛇毒因子在灵长类动物内应用的免疫原性研究

眼镜蛇蛇毒因子（CVF）能特异性清除机体循环中的补体C3,从而可能在防治补体介导的损伤或疾病中发挥重要的治疗作用。云南孟加拉种眼镜蛇蛇毒因子（Y-CVF）较文献报道的其他各种CVF具有更高的活性和较少的用药量。为探讨Y-CVF静脉使用是否诱导灵长类动物体内产生特异性中和抗体和异种天然抗体,给2只正常食蟹猴每两周静脉注射一次治疗剂量（0.05 mg/kg）的Y-CVF,共4次,检测注射前后不同时间点血清内补体C3水平、总补体活性（CH50）、抗Y-CVF抗体和抗猪内皮细胞异种抗体的变化。结果显示,前2次注射Y-CVF后均有良好的清除补体效果,第3次注射Y-CVF后补体仅被部分灭活,第4次注射Y-CVF后则基本无效。免疫印迹和酶联免疫吸附试验均证实特异性抗Y-CVF抗体产生,且其滴度随着Y-CVF注射次数增加而递增。多次注射Y-CVF后,并没有在血清内检测到明显的抗猪内皮细胞抗体的变化。因此,多次静脉注射Y-CVF能诱导灵长类动物产生特异性抗体,从而导致Y-CVF失效,但未发现抗α-Gal异种天然抗体明显增加     

大鲵补体C1q及其补体信号通路相关基因的生物信息学分析

[目的]对大鲵补体C1q及其补体信号通路相关基因进行生物信息学分析。[方法]利用BLAST软件从大鲵肝脏转录组中筛选获得其补体C1q cDNA全长,并进行了序列比对、系统进化树及3-D结构分析。对大鲵补体信号通路相关基因进行搜索并构建信号传导通路。[结果]大鲵补体C1q cDNA全长为990 bp,编码246个氨基酸。大鲵补体C1q与其他物种C1q的序列相似性为32.9%~73.4%。一系列补体系统相关基因在大鲵中被发现,包括补体C1r、C1s、C2、C3、C4、C7、C8、C9以及补体调节蛋白等。[结论]获得了大鲵补体C1q cDNA序列及其信号传导通路基因(C1r、C1s、C2、C3、C4、C7、C8、C9)及调节蛋白,为深入研究两栖类乃至低等脊椎动物的补体系统功能奠定了基础。     

云南孟加拉种眼镜蛇蛇毒因子在灵长类动物内应用的免疫原性研究

眼镜蛇蛇毒因子(CVF)能特异性清除机体循环中的补体C3,从而可能在防治补体介导的损伤或疾病中发挥重要的治疗作用.云南孟加拉种眼镜蛇蛇毒因子(Y-CVF)较文献报道的其他各种CVF具有更高的活性和较少的用药量.为探讨Y-CVF静脉使用是否诱导灵长类动物体内产生特异性中和抗体和异种天然抗体,给2只正常食蟹猴每两周静脉注射一次治疗剂量(0.05mg/kg)的Y-CVF,共4次,检测注射前后不同时间点血清内补体C3水平、总补体活性(CH50)、抗Y-CVF抗体和抗猪内皮细胞异种抗体的变化.结果显示,前2次注射Y-CVF后均有良好的清除补体效果,第3次注射Y-CVF后补体仪被部分灭活,第4次注射Y-CVF后则基本无效.免疫印迹和酶联免疫吸附试验均证实特异性抗Y-CVF抗体产生,且其滴度随着Y-CVF注射次数增加而递增.多次注射Y-CVF后,并没有在血清内榆测到明显的抗猪内皮细胞抗体的变化.因此,多次静脉注射Y-CVF能诱导灵长类动物产生特异性抗体,从而导致Y-CVF失效,但未发现抗α-Gal异种天然抗体明显增加.     

急性高原病患者血清和支气管肺泡灌洗液炎性反应物的改变

目的：探讨炎症反应在急性高原病发病中的作用。方法：采用支气管-肺泡灌洗法及单向免疫扩散测量法。结果：HAPE患者外周血中C-反性蛋白及免疫球蛋白(IgG、IgA、IgM)含量均显著高于HAAR组及对照组,补体C3、C4与对照组差别无显著性;HAPE患者肺泡灌洗液中含有大量蛋白质、红细胞及白细胞,含有C-反应蛋白,大量的免疫球蛋白(IgG、IgA、IgM)和补体C3-C4。结论：在HAPE发病过程中,除了肺动脉高压是其发病的重要因素外,炎症损伤亦起一定作用;而HAAR发病过程中,未见炎性反应发生。     

补体C3促进HIV-1感染的作用

补体是天然免疫的重要组成部分。C3是补体经典途径、旁路途径及甘露糖结合凝集素(MBL)途径的共同通路,在补体清除1型人免疫缺陷病毒(HIV-1)的过程中发挥重要作用。同时,C3在促进病毒黏膜进入、传播与储存、感染免疫细胞等方面也起重要作用。     

补体成分C3的系统发生

补体系统是先天免疫系统的重要组成部分,在宿主抗感染防御过程中起着关键作用.补体成分C3（complement component 3）是补体激活途径的中心成分,其通过3条补体激活途径参与免疫监督和免疫应答过程.虽然补体成分C3的基因和蛋白已在许多不同物种中被克隆和鉴定,对其基因的结构、功能和表达也进行了很多研究,但对C3分子的演化进程目前还不清楚. 本文对近年来补体成分C3系统发生进行了分析,同时对C3的结构、作用机制和功能进行了综述.     

补体调节蛋白作为靶向补体抑制剂的研究进展

补体是机体免疫系统的重要组成部分,补体系统的过度激活,会直接或间接地导致机体自身组织损伤。补体抑制剂是一类具有调节补体功能的调节蛋白,能够抑制补体过度激活,减轻机体的免疫损伤。将补体抑制剂应用于某些疾病的治疗已经有十多年的历史,但人们已经认识到补体的某些抑制物由于其特异性不强,可能会导致机体系统性的补体抑制,产生副作用。目前,通过利用具有靶向作用的补体抑制剂来抑制补体级联反应中特定蛋白的功能或干扰中性粒细胞同血管内皮细胞的黏附等在许多动物模型中已获得了成功,其中有一些研究成果已经开始应用于临床。本文对补体调节蛋白家族中部分成员作为靶向补体抑制剂的研究进展作一综述。     

黄芪和酸应激对中华鳖幼鳖血清补体C3和C4含量的影响

首次探讨了黄芪和酸应激对中华鳖（Pelodiscus sinensis)幼鳖血清补体C3和C4含量的影响。实验设对照组和实验组,实验组在饵料中按5％添加黄芪原料粉。持续饲喂中华鳖幼鳖4周后取一半样,其余作酸处理24h后再取样,测定补体C3和C4的含量。结果表明,黄芪对补体C3和C4的合成有明显的促进作用;酸应激可导致血清补体C3和C4的含量下降,而黄芪能抵抗酸应激所致的下降。提示黄芪具有抗酸应激的作用。     

无花果多糖对鲫鱼非特异性免疫功能的影响

实验研究了无花果多糖对鲫鱼非特异性免疫功能的影响。将鲫鱼分成A0、A1、A2、A3和A4五个组,其中A0组投喂基础饵料,设为对照组,而A1、A2、A3和A4分别投喂添加0.1%、0.2%、0.4%、0.8%无花果多糖的基础饵料,并在试验的第0、第7、第14、第21、第28、第35天检测鲫鱼血清补体C3含量、总蛋白含量、溶菌酶活力、SOD活性和血液白细胞吞噬活性。结果表明,A2组的补体C3含量、总蛋白含量、溶菌酶活力、SOD活性和血液白细胞吞噬活性显著高于A0组(P3组补体C3含量、SOD活性和血液白细胞吞噬活性极显著的高于A0组(P1组、A4组(P3组补体C3含量、总蛋白含量、溶菌酶活力、SOD活性和血液中白细胞吞噬活性与A2组相比差异不显著。A0组、A1组和A4组之间的补体C3含量、总蛋白含量、溶菌酶活力、SOD活性和血液白细胞吞噬活性无显著差异(P>0.05)。       

维生素C和酸应激对中华鳖幼鳖血清补体C3和C4含量的影响

为研究维生素C对中华鳖(Pelodiscus sinensis)血清补体C3和C4的影响及其在酸应激条件下的变化,我们设置了6个实验组,饵料中维生素C的添加量依次为0、250、500、2500、5000和10000mg／kg,喂食4周后取其血清,用透射比浊法测定酸应激前后中华鳖血清补体C3和C4的含量。结果表明,维生素C添加量为250mg／kg时,血清补体C3的含量与对照组间没有明显不同;维生素C添加量为500、2500、5000和10000mg／kg的4组,血清补体C3的含量明显高于对照组和维生素C添加量为250mg／kg组;维生素C添加量为500mg／kg的一组,血清补体CA含量明显高于其它5组;维生素C添加量为250mg／kg组明显高于10000mg／kg组。酸应激后,补体C3的含量没有明显下降,将维生素C添加量为0、250和500mg／kg的三组并为一组处理,则应激后有明显下降。维生素C添加量为0、250和500mg／kg的3组,血清补体CA的含量在酸应激后明显下降,而维生素C添加量为2500、5000和10000mg／kg的3组,应激后血清补体C4没有明显变化。维生素C和酸应激对中华鳖血清补体C3和CA含量的影响没有交互作用。这说明,维生素C在一定剂量范围内,能提高中华鳖血清补体C3和CA的水平,酸应激能导致其含量降低,而高剂量的维生素C对其下降有颉颃作用[动物学报49(6)：769～774,2003]。     

罗非鱼补体C3基因的克隆及其表达分析

[目的]获得罗非鱼补体C3并了解其在罗非鱼免疫前后各组织中的表达特征。[方法]通过PCR扩增获得补体C3片段,通过DNA Star、MEGA 6.06等分析其序列及理化特性;将经纯化获得的Scp B蛋白以5μg/g的剂量免疫罗非鱼,利用实时荧光定量PCR测定C3在各组鱼体的表达变化。[结果]补体C3基因c DNA序列6 994 bp,ORF全长5 361 bp,共编码1 786个氨基酸。其在罗非鱼肝脏中表达量最高,且免疫组肝脏中C3表达量在感染后4h时显著高于对照组(p0.05);此外,感染前(0 h)免疫组头肾和脾脏中C3表达量均显著低于对照组(p0.05),但在感染后4~12h,免疫组表达量均呈升高趋势,而对照组则呈降低趋势。[结论]抗原免疫可提高罗非鱼感染无乳链球菌后组织中补体C3的表达量,补体C3在罗非鱼抵御无乳链球菌感染过程中发挥重要作用。     

酵母多糖对中华条颈龟非特异性免疫机能的影响

本研究旨在探讨饲料中添加不同水平的酵母多糖对中华条颈龟(Mauremys sinensis)非特异性免疫机能的影响。选取体重为134.7±19.1 g的中华条颈龟,随机分成Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ四个组,各组饲料中酵母多糖的添加量分别为每千克龟重0 mg、800 mg、1200 mg和1600mg,并在第15d、30d检测各组免疫器官指数、白细胞数目、血清中溶菌酶及补体C3、C4活性等免疫指标。结果表明,各实验组脾脏指数和肝脏指数与对照组之间差异均不显著(p>0.05);各实验组白细胞数目相比对照组显著增多(p<0.05);在第15d血清中溶菌酶和C3、C4活性均显著高于对照组(p <0.05),在添加量为1200 mg/kg时活性最高,在第30d 各实验组溶菌酶和补体C4活性与同剂量组相比显著下降,补体C4活性与对照组差异不显著(p>0.05)。由此得出,饲料中添加酵母多糖可提升中华条颈龟的非特异性免疫机能,以1200 mg/kg添加水平的效果最佳,且投喂时间不宜过长。     

酵母多糖对中华条颈龟幼体非特异性免疫机能的影响

本研究旨在探讨饲料中添加不同水平的酵母多糖对中华条颈龟(Mauremys sinensis)幼体非特异性免疫机能的影响。选取体重为(134.7±19.1)g的中华条颈龟幼体,随机分成Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ4个组,按照龟体重各组饲料中酵母多糖的添加量分别为0 mg/kg(对照组)、800 mg/kg、1 200 mg/kg和1 600 mg/kg,并在第15天、30天检测各组的免疫器官指数、白细胞数目及血清中溶菌酶和补体C3、C4含量等免疫指标。结果表明,各实验组脾指数和肝指数与对照组之间差异均不显著(P0.05);各实验组白细胞数目比对照组显著增多(P0.05);在第15天血清中溶菌酶和C3、C4含量均显著高于对照组(P0.05),在添加量为1 200 mg/kg时活性最高;在第30天各实验组溶菌酶和补体C4含量与第15天同剂量组相比显著下降,补体C4含量与对照组差异不显著(P0.05)。由此得出,饲料中添加酵母多糖可提升中华条颈龟幼体的非特异性免疫机能,以1 200 mg/kg添加水平的效果最佳,且投喂时间不宜过长。     

脂多糖通过补体途径诱导小鼠产生白三烯B4

目的:研究脂多糖(LPS)对人血清中补体系统的激活及在小鼠模型中诱导产生白三烯B4(LTB4)。方法:LPS包被ELISA板,利用血清中补体C4、C3沉积实验检测补体成分被LPS活化的情况,通过尾静脉注射小鼠LPS后不同时间点ELISA定量检测LTB4,评价补体系统的活化和炎症因子的产生。结果与结论:血清系统ELISA检测发现LPS可以激活补体系统,且以凝集素途径为主;动物实验中LTB4被LPS诱导后1～3 h达到峰值,之后回落。C1INH对血清补体活化和动物模型中LTB4的产生均有显著抑制。     

饵料维生素E含量对酸应激中华鳖幼鳖血清补体C3和C4的影响

为探讨维生素E(VE)对中华鳖(Pelodiscus sinensis)幼鳖血清补体C3和C4的影响及补体在酸应激下的变化,在6组(对照组,实验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ和Ⅴ组)幼鳖的饵料中依次添加0、50、250、500、1000和5000mg／kg的VE,喂食4周,每组取半数幼鳖经酸应激处理24h。取幼鳖血清,用透射比浊法测定血清补体C3和C4的含量。经和未经酸应激的实验Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ组幼鳖血清补体C3的含量均明显高于对照组,实验Ⅰ和Ⅱ组C4含量也明显高于对照组;经酸应激的幼鳖与未经酸应激的比较,对照组和实验Ⅰ组C3和C4的含量显著下降,其余4组没有变化。分析说明,VE在一定剂量范围内能促进血清补体C3和C4的合成,酸应激能导致其下降;而高剂量的VE对酸应激导致的不利影响有拮抗作用。     

鱼类补体系统成分及补体特异性和功能的研究进展

补体系统由30多种可溶性蛋白和膜蛋白组成,在先天性免疫和适应性免疫中均起着重要作用。补体存在三条激活途径即经典途径、凝集素途径和替代途径,并共用一条终末（或溶解）途径（图1）。经典途径是第一个被发现的补体激活途径,由结合在细胞表面的抗体激活,其作用具特异性且同时需要Ca2＋和Mg2＋参与。替代途径不依赖于抗体,可直接由C3或微生物表面的特定结构激活,只需要Mg2＋。1995年后才明确了通过MBL识别的凝集素途径,此途径也不依赖于抗体且仅需要Ca2＋。