封面照片:龙眼裳卷蛾Cerace stipatana Walker

卷蛾科Tortricidae昆虫为中小型蛾类 ,世界已知 5 0 0 0余种 ,其区系以温、热带最为丰富 ,幼虫大多卷叶 ,取食叶肉、种子或蛀茎等 ,对林木造成危害。我国已知约有 5 0 0种。本期封面为龙眼裳卷蛾CeracestipatanaWalker,又名樟缀叶虫 ,摄于福建省武夷山。该卷蛾主要分布于云南、     

裳卷蛾变形孢虫SSU rRNA核心序列的克隆与系统发育分析

[目的]利用分子生物学手段探索裳卷蛾变形孢虫的遗传发育地位.[方法]微孢子虫的SSUrRNA序列是构建系统发育进化树的重要工具.试验通过T-A克隆法对裳卷蛾变形孢虫(Vairimorphaceraces)SSU rRNA核心序列进行了克隆,并采用近邻法构建了系统发育进化树.[结果]克隆得到了长为1228bp的核苷酸序列(GenBank EU267796).系统发育分析结果表明:裳卷蛾变形孢虫与分离于小菜蛾(Plutella xylostella)的Vairimorpha sp.Germany(GenBank AF124331)和Vairimorphaimperyecta(GenBank AJ131645)相似性最高,它们在系统发育进化树中与寄主为鳞翅目昆虫的Nosema属聚为一类,与纳卡变形孢虫(Vairimorpha necatrix)为代表的Vairimorpha属为相邻集.[结论]结合其生物学特征,裳卷蛾变形孢虫确实为Vairimorph a属的成员,但根据系统发育分析归入Nosematidae科可能更为合适.     

家蚕微粒子病母蛾序贯抽样检验方法研究

本文根据统计学理论,设计了一套家蚕微粒子病母蛾序贯抽样检验方案,用此方案进行的抽样检验,不仅保证了将不合格蚕种判为合格蚕种的概率控制在1.5％以内,而且大大减少了将合格蚕种判为不合格蚕种的概率．并且镜检蛾数一般随总体病蛾率ρ而变化。当ρ较低或较高（相对于0.5％）时,需检验的数量就较少.本方案的实际检验工作量并未比现行检验方案有明显增加.     

家蚕微粒子虫分泌蛋白己糖激酶NbHK对家蚕基因表达及相关通路的调控作用

【目的】微孢子虫是一种营专性细胞内寄生的微生物,它可以感染几乎所有动物种类,包括人类和重要的经济动物。本研究对家蚕微粒子虫分泌蛋白己糖激酶(Nosema bombycis hexokinase, NbHK)在家蚕胚胎细胞中表达特征、亚细胞定位、调控作用和宿主互作蛋白质进行了系统分析,为阐明该蛋白在侵染中的作用与机理提供参考。【方法】利用原核表达蛋白免疫小鼠,制备NbHK的多克隆抗体,并利用Western blotting和间接免疫荧光法分析家蚕微粒子虫在感染的家蚕胚胎细胞(Bombyx mori embryo, BmE)中的表达和定位;通过过表达和RNA干扰实验,分析NbHK对病原增殖的作用;利用RNA-seq分析NbHK调控的家蚕基因表达和通路;利用生物素-链霉亲和素系统和质谱技术,从NbHK::APEX2转基因细胞中分离鉴定NbHK的互作蛋白。【结果】在感染家蚕微粒子虫的BmE中,NbHK持续上调表达,主要被定位于宿主细胞核内。过表达NbHK显著促进了病原增殖,而敲低NbHK则明显抑制了病原增殖,说明在NbHK感染过程中发挥关键作用。利用RNA-seq分析鉴定了94个差异表达基因(differentially expressed genes, DEGs),其中58个基因上调,36个基因下调。DEGs的富集分析显示,细胞寿命和内质网蛋白加工通路受到显著激活,而线粒体自噬途径受到明显抑制。互作蛋白鉴定分析发现,NbHK可能与宿主细胞核内的核蛋白易位启动子区(nucleoprotein translocated promoter region, NTPR)等蛋白间存在相互作用。【结论】NbHK主要被定位至家蚕细胞核中,调控家蚕细胞寿命等多个重要通路的基因表达,以利于病原增殖。本研究为深入解析NbHK在感染过程中的功能及其调控机理提供了新的参考。     

枣镰翅小卷蛾性信息素诱芯颜色对诱虫效果的影响

关于性信息素诱捕器诱虫效果的评价,人们对性信息素的结构、成分及其比例研究众多,而关于性信息素诱芯（下面简称性诱芯）颜色对诱捕器诱虫量的影响,未见专门报道。本试验选用在山西晋中枣区发生量大,危害严重的枣镀翅小卷叶峨A。cyl。s（A。c》yloPerO。at。。aL山（又称零粘虫）为研究对象,初步探讨了性诱芯颜色对诱捕器诱虫效果的影响。现将结果整理如下。是材料与方法1．l时间与场地：试验干1992年4月S～22日在山西省太谷县白城村西枣园进行,此时正值越冬代成虫发生期。枣园面积约10000m‘,结果枣树70O余株。1．2性诱芯;由山…     

杀虫剂对三角新小卷蛾的毒力与田间防效

研究了常用杀虫剂对三角新小卷蛾Olethreutes leucaspis Meyrick的室内毒力与田间防效.按照毒力降低的顺序,所测定杀虫剂对三角新小卷蛾毒力顺序为甲氨基阿维菌素苯甲酸盐>氟虫腈>三氟氯氰菊酯>溴氰菊酯>阿维菌素>、高效氯氰菊酯>氟虫脲>氰戊菊酯>氟啶脲>毒死蜱>敌百虫.但在田间条件下,各试验药剂均能有效控制三角新小卷蛾的为害.结果表明,敌百虫对三角新小卷蛾的毒力最低,LC50为186.16 mg·L-1,甲氨基阿维菌素苯甲酸盐和氟虫腈的毒力最高,LC50分别为0.67、0.83 mg·L-1,是敌百虫毒力的279.52、224.86倍;三氟氯氰菊酯、溴氰菊酯、阿维菌素、高效氯氰菊酯、氟虫脲和氰戊菊酯亦具有较高的毒力,LC50分别为1.24、1.37、1.60、3.75、5.17、6.71 mg·L-1;毒死蜱和氟啶脲的毒力低于其它药剂.各试验药剂均能有效控制三角新小卷蛾的为害.     

不同消毒方法对家蚕微粒子的存活和侵染力影响

家蚕微粒子病是家蚕Bombyx mori的重要病害,探索其消毒杀灭方法对蚕业生产具有重要意义。本研究采用微粒子染色法和添食家蚕侵染法测试了温度、紫外线和消毒剂处理108个/mL家蚕微粒子后对家蚕微粒子的消杀作用,结果表明：温度对家蚕微粒子虫灭活温度为60℃处理30 min以上;使用20 wx功率紫外灯距离50 cm照射12 min及以上时,微粒子死亡率为47.70%,对家蚕侵染率为0;三氯异氰脲酸800 mg/L及以上浓度处理6 min以上家蚕微粒子死亡率为100%,对家蚕的侵染率为0;戊二醛癸甲溴铵200 mg/L及以上浓度处理6 min以上家蚕微粒子死亡率为100%,对家蚕的侵染率为0。3种消毒方法中温度法主要用于小型蚕具消杀微粒子;紫外线用于蚕业辅助设施的表面微粒子的消杀;三氯异氰脲酸和戊二醛癸甲溴铵均表现出较好的消杀效果,其中戊二醛癸甲溴铵较含氯的消毒剂三氯异氰脲酸稳定性强,刺激性小,对养蚕的金属腐蚀性小,可作为含氯消毒剂的部分替代使用。本研究结果可为蚕业生产中消杀微粒子提供参考。     

海南发现椰子织蛾的重要天敌褐带卷蛾茧蜂

椰子织蛾是棕榈植物的重要入侵害虫,在印度和斯里兰卡严重危害椰子树。2013年在海南省万宁市首次发现椰子织蛾。目前,该虫已在海南多个市县及广东和广西危害,对我国棕榈科植物的安全生产构成严重威胁。2014年11月,作者等人在万宁兴隆和三亚海棠湾镇调查椰子织蛾危害时,发现其重要天敌昆虫——褐带卷蛾茧蜂。为了进一步了解褐带卷蛾茧蜂,本文对其形态特征、分布、寄主和生物学习性进行了报道,以便更好地用于椰子织蛾的生物防治。     

危害黄杉球果的实小卷蛾属一新种(鳞翅目：卷蛾科)

记述了实小卷蛾属 (小卷蛾亚科,花小卷蛾族)的一个新种,黄杉实小卷蛾Retinia pseudotsugaicola Liu et Wu, sp. nov.。其幼虫危害黄杉Pseudotsuga sinensis Dode的球果,在云南省禄劝县云龙乡球果受害率达80%～90%。该新种雄性外生殖器的抱器瓣在腹面中央凹陷很深,抱器腹拐角几乎呈直角,抱器端的腹角尖,可与该属其它种相区别。该新种的雌性外生殖器与松实小卷蛾R.cristata很相似,但成虫的花纹完全不同,该新种前翅的中横带很宽,且布满了灰绿色和灰黄色的云状纹,而松实小卷蛾前翅的中横带则较窄,翅端有明显的肛上纹。在昆明禄劝县一年发生1代,以蛹在球果中越冬。越冬蛹于翌年3月下旬开始羽化。4月上旬至7月下旬是幼虫危害期。老熟幼虫7月下旬开始陆续化蛹越冬。提供了成虫外形、翅脉、雌雄外生殖器解剖图及幼虫的毛序图。模式标本保存在中国科学院动物研究所。     

寄生于龙眼裳卷蛾的微孢子虫一新种(微孢子虫门,布雷孢虫科)

本种于2000年从四川阆中林木害虫龙眼裳卷蛾幼虫体内发现分离.孢子卵圆形(3.1μm±0.3μm×1.6μm±0.2μm),孢子发育中呈现出八孢子囊孢子和二孢子母细胞类型,为变形孢虫属的典型特征,分别形成单核孢子和双核孢子,极丝圈数分别为7～9圈和10～12圈;从宿主、大小、极丝、发育等的差异检索表明:为微孢子虫门变形孢虫属Vairimorpha Pilly,1976 1新种,定为裳卷蛾变形孢虫Vairimorpha ceraces sp.nov..     

THE DIAPAUSE FACTOR FROM THE SILKWORM, BOMBYX MORI L.: PURIFICATION AND INACTIVATION EXPERIMENTS

The diapause factor, which is responsible for the induction of èmbryonic dia pause in the silkworm ( Bombyx mori L.), has been partially purified from the extract of adult heads by means of protein purification procedures, including the use of gel filtration of Sephadex, column chromatography on Dowex 1, isoelectric focusing and phenol extraction.
Two species of the diapause factor could be recognized in respect to their molecular weight. They were separated by Sephadex G-25 and their molecular weights were estimated to be about 2,000 and 5,000 from the gel filtration results. The smaller species was purified about 90-fold in specific activity, and its isoelectric point was determined by isoelectric focusing to be at about pH 4.5.
The biological activity of the partially purified principle could be abolished by incubation with several proteolytic enzymes (trypsin, α-chymotrypsin and pronase), or by treatment with amino acid-modifying reagents such as tyrosinase, N-bromosuccinimide or 2-hydroxy-5-nitrobenzyl bromide, but was not affected by incubation with neuraminidase, cyanogen bromide or photooxidation in the presence of methylene blue.     

ENDOCRINOLOGICAL STUDIES ON SPERMATOGENESIS IN THE SILKWORM, BOMBYX MORI L.

When embryonic testes 1 or 2 days before hatching were transplanted into 5 kinds of hosts (5th instar larvae, “fresh” pupae just after pupation, isolated pupal abdomens and 3-day-old pupae with and without their original corpora allata), the testes transplanted into 5th instar larvae grew most conspicuously and spermiogenesis began in many cysts. A few spermatidal cysts were observed in the testes transplanted into fresh pupae. No signs of maturation were observed in the testes transplanted into other hosts. It is concluded that prothoracic gland hormone might be responsible for the precocious maturation of young testes. On the other hand, the initiation of spermiogenesis was delayed, in comparing with controls, in the 3rd instar larval testes as follows: the testes transplanted into 3-day-old pupae, the testes transplanted into isolated pupal abdomens together with adult corpora allata and the testis into which corpus allatum of a 3rd instar larva was inserted. It is concluded that corpora allata hormone exerts an inhibitory effect on spermatogenesis.     

桑蚕金属硫蛋白基因在大肠杆菌中的克隆和表达

用\%Bam\%HⅠ和\%Sac\%Ⅰ双酶切质粒pCM1\|1,获得酵母的MTI基因片段,用非放射性地高辛标记作为探针。提取桑蚕肥苏蚕卵的总DNA,分别用\%Eco\%RⅠ、\%Bam\%HⅠ和\%Hin\%dⅢ酶切,与MTI探针进行Southern杂交,出现较强的杂交信号。然后用\%Eco\%RⅠ完全酶切桑吞的总DNA,电洗脱法回收1～6kb的染色体片断,与\%Eco\%RⅠ酶切的M13-载体以3∶1比例连接,转化受体菌DH5α。筛选到4 000多个白色转化子,与探针MTI进行Southern杂交筛选阳性转化子,选择到有强杂交信号的三个转化子［编号为T1(pZHC\|1)\,T5(pZHC\|5)\,T7(pZHC\|7)\]。用12种限制性内切酶对pZHC\|5重组质粒进行酶切分析表明插入片段约12kb,在基因内有一个\%Hin\%dⅢ位点。抗性测定表明受体菌DH5α在含有50mmol/L CuSO\-4的培养基上生长,在含有52mmol/L CuSO\-4的培养基上不生长,而转化子确能在含有52mmol/L CuSO\-4以上的培养基上生长。上述研究结果表明12kb左右的插入片段含有桑吞的金属硫蛋白基因。     

蓖麻蚕微孢子虫的超微结构研究

用电镜技术研究蓖麻蚕微孢子虫各发育阶段的超微结构,发现其裂殖体和母孢子具双核,其细胞核由双层单位膜所包裹,核具半圆形的纺锤空斑,细胞质中有内质网和丰富的核糖体,但无线粒体。成熟的孢子壁由外壳、内壳及孢子膜组成,孢子器具有片层结构的极质体和后液泡,极丝为10—11圈,孢质含有核糖体和一对细胞核。     

家蚕血液过氧化氢酶活力及其与蚕体抗逆性的关系

家蚕召Bombyx mori(L.)血液过氧化氢酶(CAT)活力随发育时期呈现有规律的动态变化。在幼虫期,CAT活力以龄初、龄末较高,而龄中较低;化蛹后,CAT活力迅速上升,至中期达到峰值,随后迅速下降直至羽化。不同性别间CAT活力均以雄性较高;不同蚕品种间CAT活力有很大差异;饲料对CAT活力有一定影响,人工饲料育蚕CAT活力略大于桑叶育的;高温冲击和氟化物添食都能引起CAT活力的显著变化,但变化的幅度因品种、性别、时期和添食剂量而有所不同。研究认为,家蚕血液CAT活力与其发育变态、体内代谢均具有密切关系,逆境条件下CAT活力变化幅度的大小可以作为家蚕抗逆性强弱的一个重要生理指标。     

AFLP标记在研究家蚕遗传多态性方面的应用

AFLP是一种多态检出效率很高的分子标记技术,在构建遗传图谱,遗传多态性研究,重建分子系统演化树,品种鉴定,基因克隆等众多研究领域有着其它分子标记技术不可比拟的优势。本文在前人用AFLP技术对植物多态性研究的基础上,将AFLP用于家蚕的遗传多态性研究,结果发现在家蚕中同样具有丰富的AFLP标记的多态性。由此暗示AFLP技术亦适合研究家蚕等昆虫类动物的遗传多态性,构建遗传图谱,或用于其分子生态学,分子进化和分类等方面的研究。此外本文还探讨了适合于家蚕等昆虫的AFLP分析的实验条件。