应用柱层析法纯制Vero细胞肾综合征出血热疫苗

从Vero细胞培养液中提纯培养的汉滩病毒,将细胞冻融后上清液过Sepharose4FF凝胶层析柱,经紫外线280nm波长检测到三个吸收峰,RPHA证实仅第一峰为病毒抗原峰,另二个峰为杂蛋白,实验说明Sepharose4FF凝胶过滤对于提纯HFRS汉滩病毒是非常有效的,能去除98%的杂蛋白。     

巧用DNA凝胶回收柱提纯种子RNA

禾谷作物种子中含有大量淀粉,由于多糖与RNA溶解性非常相似,所以很难提取和纯化其中的RNA。介绍一种用DNA凝胶回收柱快速、高效提纯富含多糖种子的RNA提纯方法．     

一种从重组质粒快速提纯DNA插入片段的方法

本文介绍一种从重组质粒中快速提纯ＤＮＡ插入片段的方法。质粒ＤＮＡ的制备简单、快速、分离的质粒ＤＮＡ可用于限制性酶切和转化大肠杆菌等。从琼脂糖凝胶中提纯ＤＮＡ插入片段的方法操作简单,回收效率高,提纯的ＤＮＡ片段可用于连接和制备杂交探针等。     

豌豆球蛋白及其亚基的分离提纯

本文详细地叙述了提取、分离、提纯豌豆球蛋白及其亚基的方法:用硼酸钠缓冲液提取豌豆球蛋白,用85%饱和度硫酸铵沉淀除去其它蛋白质杂质,再用凝胶柱进一步提纯;提纯的豌豆球蛋白通过DE_(52)-纤维素阴离子树脂柱(8M尿素作为变性分离试剂)和S_(200)凝胶柱(70%甲酸作为变性分离试剂)则可分离出豌豆球蛋白的各个亚基;试验结果还表明:在pH8.5时,33,000的亚基携带少量负电荷;而12,000的亚基携带大量负电荷。     

人前列腺特异抗原分离纯化

本文报道了一种从人精液中提纯前列腺特异抗原的方法,本方法仅需Affigel-Blue gel柱和凝胶HPLC二步层析,即可得到均一的PSA纯品。这是一个快速、有效的提纯方法。PSA是前列腺癌的特异肿瘤标志物。     

人前列腺特异抗原分离纯化

本文报道了一种从人精液中提纯前列腺特异抗原的方法,本方法仅需Ａｆｆｉｇｅｌ－Ｂｌｕｅ ｇｅｌ柱和凝胶ＨＰＬＣ二步层析,即可行到均一的ＰＳＡ纯品。这是一个快速,有效的提纯方法。ＰＳＡ是前列腺癌的特异肿瘤标志物。     

丁氏双鳍电鳐电器官烟碱样胆碱能受体的分离提纯

本文用湖南眼镜蛇神经毒素为配基偶联的AH-Sepharose 4B毒素型亲和凝胶从国产丁氏双鳍电鳐电器官中提纯了烟碱样胆碱能受体(N-ChR)。提纯123倍,产率5.4%,比结合力5.411nmole毒素结合部位/mg受体蛋白,每毫升湿胶可制备受体蛋白0.037毫克。AH-Sepharose 4B的亲和分离效能与CN-Sepharose 4B无明显差别。用AH-Sepharose 4B毒素型亲和凝胶提纯的N-ChR经聚丙烯酰胺凝胶电泳显示单一蛋白区带。SDS凝胶电泳主要显示四个亚基,分子量分别为4.1、4.7、5.6及6.7万道尔顿。丁氏双鳍电鳐电器官N-ChR与其他种属电鱼电器官N-ChR的亚基近似。     

侵染莜麦的大麦黄矮病毒的分离及提纯

用液氮或低温冷冻染病组织及差速离心和葡聚糖凝胶过滤的方法,提纯了自然侵染莜麦的大麦黄矮病毒(BYDV)。电镜照片中病毒呈多面体结构,大小均一,平均直径为23.66±1.2nm,且聚集较多。将提纯的病毒以三种无毒蚜为介体,经薄膜饲毒法回接到华北二号莜麦上,表明提纯的病毒能引起类似田间病株的症状。     

甲型流感病毒多肽放射免疫测定的研究I．应用Sephadex G-200凝胶柱层析提纯甲型流感病毒

鸡胚尿囊液中所含的甲型流感病毒经鸡红细胞吸附洗脱法部分纯化后,用蒸馏水透析沉淀浓缩,再通过Sephadex G一200凝胶柱层析纯化。提纯的流感病毒经电镜和聚丙烯酰胺凝胶电泳检测,以及对其结构多肽组成的分析和分离提纯,证明其纯度符合生物化学和免疫化学研究的要求。     

金黄色葡萄球菌C_1、C_2型肠毒素的提纯及某些理化性质的鉴定

金黄色葡萄球菌能产生多种胞外毒性物质,易引起人和少数动物的胃肠炎。故称做肠毒素。按照它们同特异性抗体的反应分为六个血清型:A、B、C、D、E和F.由于等电点的不同,C型又分为C_1及C_2型。C_1型由Borja(1965)首次提纯。C_2型由Avena等提纯。提纯方法是离子交换层析和凝胶过滤。近来还报道了用     

海枣曲霉β-半乳糖苷酶的提纯与性质

 通过过聚乙二醇6000-磷酸钾缓冲液双相分离、Sephadex G-100凝胶过滤、DEAE-Sephadex A-50离子交换层析、羟基磷灰石层析及SephadexG-100凝胶过滤等提纯步骤,从海枣曲霉(Aspergillus phoenicis)麦麸培养物抽提液中提纯得到凝胶电泳均一的β-半乳糖苷酶。该酶的最适pH为3.5—4.0,最适温度为60℃(反应15分钟),在pH5.0—8.5之间及60℃以下稳定。在65℃和70℃保温时失活50％的时间分别为27和2分钟。用SDS凝胶电泳法和梯度凝胶电泳法分别测得该酶的分子量为115,000和118,000。薄层凝胶等电聚焦法测得其等电点为pH4.6。     

红曲霉葡萄糖淀粉酶肽段P_A的提纯及性质的研究

红曲霉葡萄糖淀粉酶能水解淀粉产生葡萄糖。我们已对它进行了提纯、结晶,及电子显微镜观察,并测定了它的一些基本性质。该酶的两个主要分子型E_3和E_4的肽图谱绝大部分是相同的,只有个别肽段不同。我们用胰凝乳蛋白酶水解红曲霉葡萄糖淀粉酶的两个型,两者的产物中都有一个P_A肽段,其凝胶电泳迁移率和纸层析R_f值相同。本文报道我们用垂直板型凝胶制备电泳及凝胶层析法提纯P_A肽段,并对其性质进行的研究结果。     

用中性盐分离和提纯蛋白质

在毛主席革命路线的指引下,在批林批孔运动的推动下,全国各地正进一步广泛开展关于常见病、多发病(如气管炎、冠心病、肿瘤等)的研究。在研究这类疾病时,经常需要分离和提纯一些蛋白质(特别是免疫球蛋白)。国内有些实验室在分离和提纯蛋白质时,一般采用离子交换、凝胶过滤、亲合层析、区带电泳、超速离     

用壳聚糖作为配基载体亲和层析提纯淀粉糖化酶的研究

以自制的壳聚糖作配基载体,植物血球凝集素(PHA)作配基,通过戊二醛交联研制成一种用于淀粉糖化酶提纯的新型亲和吸附剂。对淀粉糖化酶的亲和层析研究表明:提纯倍数为1.8,酶活性收率达80％,纯度经聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦电泳(IEF-PAGE)鉴定为一条带,没有非特异性吸附作用。具有简单、安全、快速和高收率等优点。     

大豆花叶病毒（SMV）抗原及抗血清制备

大豆花叶病毒（ＳＭＶ）汁液经正丁醇、氯仿混合液澄清，ＰＥＧ沉淀，差速离心提取病毒粗提液。再经琼脂糖凝胶层析柱纯化，得到病毒提纯液。电镜观察病毒粒子为线条状，长７３０－７５０ｎｍ，宽１３ｎｍ。提纯液用紫外分光光度计扫描，得到一条典型的核蛋白吸收曲线，同时以波长２６０ｎｍ的ＯＤ值计算病毒含量。用病毒提纯液免疫兔子，制得抗血清。通过回接试验在寄主植株显症，确认为大豆花叶病毒。     

柱层析法制备乙型脑炎纯化疫苗的研究

为制备纯化乙型脑炎灭活疫苗,以地鼠肾细胞培养并经灭活的乙型脑炎病毒液,浓缩后上Sepharose 4FF凝胶层析柱,用紫外线280nm波长检测得到三个吸收峰。ELISA法证实第一峰为病毒抗原峰,另两个峰为杂蛋白峰。试验证明Seoharose 4FF凝胶过滤对于提纯乙型脑炎病毒是有效的,能去除99％的杂蛋白。     

海枣曲霉β-葡萄糖苷酶的提纯与性质

通过聚乙二醇6000一磷酸钾缓冲液双相分离,Sephadex G—100凝胶过滤、DEAE-Sephadcx A-50及SE-Se phadex C-50离子交换柱层析等提纯步骤,从海枣曲霉(Aspe rgillutphoenlcis)麦麸培养物抽提液中提纯到凝胶电泳均一的β-葡萄糖苷酶。该酶的最适pH5．0,最适温度60℃,在pH 4．0--7．5之间及55℃以下稳定。Ag+及Hg2+对该酶有强烈的抑制作用。用SDS-凝胶电泳法及梯度凝胶电泳法测得该酶均分子量分别为118000及195000薄层凝胶等电聚焦法测得其等电点为pH 3.95。     

人血清IgD的分离与提纯

本文描述了用DEAE-纤维素、Sephadex G-100凝胶过滤以及免疫吸附剂从IgD 型骨髓瘤患者血清中分离提纯IgD 的全部过程,并对其纯度及特异性进行了鉴定。本文所用的方法都比较简单,而产品IgD 又十分纯净。     

人血清IgD的分离与提纯

本文描述了用DEAE-纤维素、Sephadex G-100凝胶过滤以及免疫吸附剂从IgD型骨髓瘤患者血清中分离提纯IgD的全部过程,并对其纯度及特异性进行了鉴定。本文所用的方法都比较简单,而产品IgD又十分纯净。     

低聚木糖分离纯化的研究进展

综述了低聚木糖分离纯化的研究进展。低聚木糖是一种非消化性寡糖 ,能选择性增殖肠道内双歧杆菌 ,可广泛应用于食品工业和饲料工业。低聚木糖的分离纯化技术主要包括层析分离技术 (包括凝胶过滤层析、离子交换层析和吸附层析 )和膜分离技术 (包括超滤、纳滤和反渗透 )。低聚木糖的提纯主要采用膜分离技术和层析分离技术 ,低聚木糖单一组分的分离主要采用凝胶过滤层析和吸附层析