E.coli DNA抗肿瘤免疫的动态实验研究

５５只Ｂａｌｂ／ｃ小鼠,５只作为正常对照组,其余５０只荷瘤后随机分为１０组, ５组为 ＴＥＳ对照组, ５组为Ｅ． ｃｏｌｉＤＮＡ治疗组。荷瘤第４ｄ起,分别于治疗组和对照组小鼠皮下注射 ＤＮＡ（１００ｍｇ／Ｌ）或 ＴＥＳ（０． １ｍｏｌ／Ｌ）,０．３ｍｌ／只,隔日１次,共５次。于荷瘤第５,９,１３,１７,２１ｄ处置对照组和治疗组各一组小鼠,进行Ｅ．ｃｏｌｉＤＮＡ抗肿瘤免疫的动态研究。结果表明, Ｅ． ｃｏｌｉ ＤＮＡ体内抑瘤作用出现早、强且持久,主要是通过诱导肿瘤组织坏死所致,它可迅速持久地激活免疫系统,防止出现免疫低下或紊乱;对照组小鼠荷瘤早期可出现暂时的免疫功能增强,随荷瘤时间延长,逐渐降低至较低水平,并出现免疫紊乱。     

E.tenella感染鸡CD4+、CD8+T细胞的动态变化研究

用免疫组化ABC法检测了柔嫩艾美耳球虫(E.tenella)感染雏鸡后各免疫器官和盲肠局部的T淋巴细胞亚群CD4 淋巴细胞和CD8 T淋巴细胞数的动态变化。结果表明:(1)雏鸡初次感染E.tenella后,免疫器官盲肠扁桃体、脾脏、胸腺和盲肠黏膜中的CD4 T淋巴细胞均于第2天开始增殖,第6天~8天达到峰值;二次感染后第2天有短暂的下降,第5天开始缓慢回升,第8天二次达到峰值,但第二个峰值比第一个峰值低,说明CD4 T淋巴细胞积极参与启动免疫应答和抵抗初次感染。(2)雏鸡初次感染E.tenella后,免疫器官法氏囊、盲肠扁桃体、脾脏、胸腺和盲肠黏膜中的CD8 T淋巴细胞都于第2天开始增殖,第8天达到峰值;二次感染后立即回升,第5天达到峰值,然后缓慢下降,且第二个峰值比第一个峰值高,表明CD8 T淋巴细胞是抵抗再感染的主力。     

HBV感染中抗-(抗-HBs)独特型抗体的研究

1.75％聚乙二醇(MW6000)沉淀血清免疫复合物后,采用ELISA法检测上清中抗独特型抗体〔抗-(抗-HBs)〕。56例急性HBV感染患者血清IgM抗-(抗-HBs),第一周检出率最高(60.00％),1个月后大部分阴性,IgG抗-(抗-HBs)维持时间略长。IgM抗-(抗-HBs)较HBsAg/IgM和IgM抗-HBc消失早,将有利于急性HBV感染的诊断。27例CAH和29例CPH,IgM和IgG抗-(抗-HBs)阳性率约为38～52％,两型间无显著差异(p>0.5)。3例无症状HBsAg携带者和12例HBsAg血清疫苗接受者血清,抗-(抗-HBs)阴性。115例HBV感染者中,IgM抗-(抗-HBs)阳性者HBsAg阳性率(93.62)显著高于IgM抗-(抗-HBs)阴性者(52.31％),p<0.005;反之,HBsAg阳性血清IgM抗-(抗-HBs)阳性率(55.5S％)显著高于HBsAg阴性血清(9.68％),p<0.005;IgM抗-(抗-HBs)阳性和阴性血清的HBVDNA阳性率有显著差异(p<0.025),IgG反应到类似的结果。以上资料表明,抗-(抗-HBs)提示了一些HBV感染患者体内可能存在一种缺陷的反馈机制,导致抗-HBs产生不足而容许更活跃的HBV复制。本文证明了HBV感染患者血清中存在的抗-(抗-HBs)可能是共同决定簇“a”特异性的,还表明抗-HBs人抗-Id反应可能被纯化人血清HBsAg抑制,提示人抗-(抗-HBs)与抗-HBs结合的位点可能在HBsAg与抗-HBs结合位点内或在其附近,这和一些动物抗-(抗-HBs)的研究结果是一致的。     

特异性卵黄抗体(IgY)对小鼠内毒素血症的保护作用

目的:研究特异性卵黄抗体(Egg yolk immunoglobulin,IgY)对小鼠内毒素血症的保护作用.方法:以灭活的E.coli O111免疫产蛋母鸡制备特异性IgY抗体.ELISA法检测对E-coli O111及内毒素(Lipopolysaecharide,LPS)的结合活性.腹腔注射LPS(2mg/m1),0.1 ml/10g体重,建立小鼠内毒素血症模型.小鼠随机分为5组,分别给药保护:空白组(生理盐水)、阴性对照组(非特异性IgY,20mg/ml)、阳性对照组(头孢哌酮钠,20mg/ml)、高剂量组(特异性IgY,40mg/m1),低剂量组(特异性IgY,20mg/ml).给药剂量为:攻毒前,0.15 ml/l0 g体重,24 h一次,共两次;攻毒后,0.25 ml/10 g体重,24 h一次,共7次.观察小鼠一般情况,体重变化,外周血中白细胞(WBC)和血小板(PLT)数的变化及各组小鼠的死亡率.结果:特异性IgY与E.coli O111及LPS均有体外结合活性.LPS感染后,各组小鼠外周血中WBC和PLl均有不同程度的下降,体重下降.特异性抗体保护组各指标较快恢复到正常水平,其他组恢复缓慢.各组小鼠七天内死亡率分别为:空白组,100%;阴性对照组,85%;阳性对照组,30%;低济量组,30%;高剂量组,0%.结论:特异性IgY对内毒素血症小鼠有保护作用.     

甲型H1N1流感病毒感染年轻和老年C57BL/6小鼠诱导肺组织CD8+T细胞特异性免疫应答的比较研究

目的 比较甲型H1N1流感病毒PR8毒株感染老年和年轻C57BL/6小鼠诱导肺组织CD8+T细胞特异性免疫应答的能力.方法 使用490 PFU的PR8病毒分别滴鼻感染年轻(3月龄)和老年(24月龄)C57BL/6小鼠,连续14 d每日记录其体重变化及死亡情况.在感染后第8天分离小鼠肺组织细胞,使用流式细胞术(fluor...     

特异性高免卵黄抗体与鸡柔嫩艾美尔球虫致病关系的研究

为了探讨体液免疫在鸡球虫病中的作用,通过制备柔嫩艾美尔球虫(E.tenella)特异性高免卵黄抗体,检测卵黄抗体在鸡盲肠中的代谢规律,对E.tenella进行体内外抑制和杀灭实验,观察特异性高免卵黄抗体对E.tenella的作用。结果表明:(1)口服的卵黄抗体在鸡消化道较稳定;(2)口服卵黄液可使感染E.tenella鸡的死亡率降低33.34%,增重率和抗球虫指数分别提高39.19%和73.50;(3)特异性高免卵黄抗体对E.tenella的子孢子具有明显的溶解和致弱作用,但对卵囊的孢子化速率和孢子化球虫卵囊的致病性没有明显影响。     

特异性IgG抗体在异种/同种异株疟原虫感染治愈后P.y17XL再感染中的保护作用

为探讨特异性IgG抗体在异种/同种异株疟原虫治愈后再感染过程中的作用,用不同种/株疟原虫感染BALB/c小鼠,经治愈后用P.y17XL再感染。通过计数红细胞感染率和检测再感染后血清中特异性IgG抗体的水平变化,发现P.y17XNL感染治愈组小鼠几乎不出现原虫血症,其余异种疟原虫感染治愈组小鼠出现了不同程度的虫血症发生时相延迟和水平降低,部分生存率有所延长;不同虫种/株感染治愈后P.y17XL再感染的小鼠IFN-γ水平均明显低于同时间点P.y17XL初次感染的小鼠;P.v、P.y17XNL感染治愈小鼠血清中P.y17XL特异性IgG抗体水平出现显著增加(P<0.05),且以IgG1亚类升高为主。表明特异性IgG抗体可在宿主抗同源疟原虫再感染中发挥着重要作用,而对异种疟原虫再感染保护性有限。     

鸡新城疫副眼和副鼻器官微环境局部免疫机理的研究——Ⅰ.血清学和免疫荧光研究

本文研究了用新城疫B_1系疫苗免疫后的SPF雏鸡的泪液、唾液,气管粘液和血液中的血凝抑制(HI)抗体的性质和动态变化规律;同时采取哈德泪腺、气管、肺脏、脾脏、胸腺和法氏囊,作低温组织切片间接免疫荧光试验。结果证明:泪液、唾液和气管粘液中存在着HI抗体.经过两次免疫后,这种抗体至少可持续71天,而且在免疫初期(泪液在一免后的第26天前,唾液和气管粘液在一免后的第29天前)这些外分泌液中的HI抗体滴度要比血液中相应的抗体滴度高.说明这些抗体主要是由局部免疫组织产生的,而不是由血液中机械性渗透来的。哈德泪腺是以B淋巴细胞为主的外周免疫器官,它是在局部产生抗体的主要部位,同时气管、肺脏的局部淋巴组织也参与抗体的合成。参与局部免疫的抗体主要属于IgA。局部免疫反应以体液免疫为主,并由体液免疫和细胞免疫共同完成。     

Maternal Immunization Confers Protection to the Offspring against an Attaching and Effacing Pathogen through Delivery of IgG in Breast Milk

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鸡新城疫副眼和副鼻器官微环境局部免疫机理的研究——Ⅱ.免疫组织学和电镜研究

本文研究了以点眼和滴鼻途径接种了新城疫 B_1系疫苗后的不同时期 SPF 雏鸡的哈德泪腺、气管、肺脏、脾脏、胸腺和法氏囊的免疫组织学及其在电子显微镜下的变化规律。证明在哈德泪腺的腺导管、腺泡间质、气管粘膜的固有层和粘膜下层、肺各级支气管粘膜固有层和粘膜下层及附近肺泡壁中、肺间质中都以聚集或弥散形式存在着比对照组多的淋巴细胞,这些淋巴细胞有时形成淋巴小结样结构,还可看到较多的浆细胞。这些淋巴细胞在电子显微镜下主要表现为线粒体、粗面内质网和核糖体等细胞器增多,细胞呈旺盛的活动状态,同时哈德泪腺、气管粘膜杯状细胞和单泡腺分泌增多,气管粘膜上的纤毛也增多,这有利于将产生的抗体及时排出和防止病毒粘附。     

Effect of mild heat stress and mild infection pressure on immune responses to an E. coli infection in chickens

Outdoor or organic farming demands robust chickens that are able to combat common infections before they spread to the flock. Priming the immune system of the chickens early in life with micro-organisms that they will encounter later in life prepares chickens to a life in environments where they are subjected to a more natural level of infection pressure. Also, exposure to non-infectious stressful situations may prepare the immune system to combat infectious challenges. The present study investigated whether the immune system could be primed by applying small doses of infective material to the chicken flock or by exposure to short-term non-infectious stimulation, and whether the effect of those stimuli would depend on the genetic material chosen. The effect of the stimulations was examined on selected immunological variables in two chicken strains, using small amounts of manure and litter from other chickens or short-term heat stress, respectively. After 6 weeks of treatment, all chickens were subjected to an Escherichia coli infection and followed for another 3 weeks. Measures of body weight gain, chicken mannan-binding lectin (cMBL), percentage of CD4+ and MHCII+ lymphocytes, mean fluorescence intensity (m.f.i.) of CD4 on CD4+ cells and MHCII on MHCII+ cells and antibody titres to E. coli were taken. In conclusion, the chickens redistribute lymphocyte populations in peripheral blood in response to potentially infectious agents as well as to stressful non-infectious treatments. Responses to stress situations were dependent on the frequencies of stress exposures and on the chicken breed. This may reflect the superiority of one breed over another in adapting to treatments or in discriminating whether a treatment is harmless or dangerous. However, the differences did not influence the disease resistance to infection with a mixture of E. coli O2, O11 and O78 in the present study.     

基于多聚化重组抗原的检测戊型肝炎病毒IgM与IgG抗体的ELISA的建立及初步评估

建立并评估分别检测戊型肝炎（戊肝）病毒IgM与IgG抗体的捕获法及间接法ELISA。以原核表达的多聚化重组HEV蛋白为抗原,建立戊肝捕获法IgM ELISA(E2-IgM)和间接法IgG ELISA(E2-IgG).利用29只实验感染猴系列血清及多份临床急性肝炎血清、正常人血清以及单克隆抗体评估所建立的方法的敏感法与特异性,并与商品化试剂（Genelabs公司抗－HEV IgG和IgM试剂,GL－IgM/GL-IgM)进行比较。29只恒河猴E2－IgM和E2－IgG的阳转率均为100％,其中75％在感染后4周内阳转,均早于ALT异常时间。E2－IgM持续2－14周,平均6周;E2－IgG在70周时仍无一阴转。GL－IgG阳转率为79．3％（23／29）,多数晚于ALT异常时间,平均持续约18周,但最长为1只在感染后70周时仍为阳性。用E2－IgM试剂盒检测928份正常人血清,仅2份OD值略高于0．2。检测510份临床急性肝炎血清,可明显将其区分为2个部分,一个部分OD值小于0．2,其OD值分布与正常人相似;另一个部分OD值大于0．4,共131份,其中109份大于1．0。可能分别对应于急性肝炎中的非戊肝患者和戊肝患者。119份非甲－丙急性肝炎中,E2－IgM阳性57份,GL－IgM阳性29份（E2－IgM均阳性）。5060份普通人群血清的E2－IgG OD值在0．2以下,形成一个近似对数正态峰,均值为0．022,在OD值0．4以上则分布均匀。用E2－IgG试剂检测200份临床急性肝炎血清,结果OD值0．2以下也形成一个与普通人群类似的近似对数正态峰,但OD值在大于1．0－4．0间形成另一个尖峰（峰值在OD2．5处）,其中多数E2－IgM阳性。抗－HEV单抗可明显阻断E2－IgM及E2－IgG,单抗Fab段的阻断效果与完整抗体类似,提示这种阻断是表位特异的。建立的戊肝IgM试剂和IgG试剂具有良好的敏感性与特异性。IgM试剂适用于临床戊肝诊断,IgG试剂适用于既往戊肝感染诊断。     

Effect of Diclazuril on the Bursa of Fabricius Morphology and SIgA Expression in Chickens Infected with Eimeria tenella

The effects of diclazuril on the bursa of Fabricius (BF) structure and secretory IgA (SIgA) expression in chickens infected with Eimeria tenella were examined. The morphology of the BF was observed by hematoxylin and eosin staining, while ultrastructural changes were monitored by transmission electron microscopy. E. tenella infection caused the BF cell volumes to decrease, irregularly arranged, as well as, enlargement of the intercellular space. Diclazuril treatment alleviated the physical signs of damages associated with E. tenella infection. The SIgA expression in BF was analyzed by immunohistochemistry technique. The SIgA expression increased significantly by 350.4% (P<0.01) after E. tenella infection compared to the normal control group. With the treatment of diclazuril, the SIgA was relatively fewer in the cortex, and the expression level was significantly decreased by 46.7% (P<0.01) compared with the infected and untreated group. In conclusion, E. tenella infection in chickens induced obvious harmful changes in BF morphological structure and stimulated the expression of SIgA in the BF. Diclazuril treatment effectively alleviated the morphological changes. This result demonstrates a method to develop an immunological strategy in coccidiosis control.