植物苯丙氨酸解氨酶(PAL)在细胞分化中的作用

烟草、丹参和甜叶菊愈伤组织在分化过程中一般都出现两个PAL活性高峰。第一高峰在培养第一、二、三天中出现;第二高峰在第十一天前后出现。前者在分化或不分化培养基中都存在,似与组织分化无关,后者只在分化条件下才有,似可作为组织启动分化的指示酶。分化程度不同的组织,PAL活性有很大差异,即将或刚分化的组织活性最高,随着分化的进程活性趋于降低,老化的组织甚至丧失活性。PAL活性、木质素合成和管状份子形成之间有着紧密的相关性。     

离体培养下白杜木质部的形态发生研究

白杜(Euonymus bungeanus Maxim.)的离体木质部经过组织培养,成功地诱导出小植株,诱导率为8%。诱导过程经过3个阶段:1.诱导愈伤组织形成,以 H 培养基效果最好,但需附加不同浓度的2,4-D、NAA 或 BA。2.分化阶段,诱导小植株的形成,以 H 或 MS BA2mg/1 KT0.5—1mg/1 NAA0.2mg/1分化培养基为宜。3.小植株的成长,以 White NAA0.1mg/1 IAA0.1mg/1培养基最适。愈伤组织主要起源于木射线细胞。在愈伤组织中可以产生连续的或不连续的、呈带状排列的分生组织,其中有些分生组织最后可形成象茎中的形成层那样连成一圈,但它们不能产生正常的维管组织,只能向一侧分化出木质部的管状分子,而不能向另一侧分化出韧皮部的筛状分子。另外,在愈伤组织中还出现了一些鸟巢状管胞团。不定根发生在愈伤组织深处,为内起源;不定芽起源于愈伤组织表面,为外起源。     

Thidiazuron对苜蓿愈伤组织的乙烯生成及其体细胞胚胎发生的影响

苜蓿叶柄在Ｂ５Ｈ培养基上诱导并继代所形成的是无色、松软的胚性愈伤组织、内含许多有分生能力的细胞团,当Ｂ５Ｈ中的ＫＴ用ＴＤＺ替换时,愈伤组织变绿变硬,出现管状分子和芽原基的分化,其体胚发生能力失,而且其乙烯生成和ＰＡＬ活性升高。乙烯形成酶的抑制剂ＣｏＣｌ２可以抑制ＴＤＺ的上述作用,部分地恢复愈伤组织的体胚发生能力,ＴＤＺ对愈伤组织的这些作用可能与其乙烯生成有关。     

Thidiazuron对苜蓿愈伤组织的乙烯生成及其体细胞胚胎发生的影响

苜蓿叶柄在Ｂ５Ｈ培养基上诱导并继代所形成的是无色、松软的胚性愈伤组织,内含许多有分生能力的细胞团。当Ｂ５Ｈ中的ＫＴ用ＴＤＺ替换时,愈伤组织变绿变硬,出现管状分子和芽原基的分化,其体胚发生能力丧失,而且其乙烯生成和ＰＡＬ活性升高。乙烯形成酶的抑制剂ＣｏＣｌ２可以抑制ＴＤＺ的上述作用,部分地恢复愈伤组织的体胚发生能力。ＴＤＺ对愈伤组织的这些作用可能与其促进乙烯生成有关。     

棉花体细胞增殖和胚胎发生中的细胞程序性死亡

棉花组织培养中愈伤组织褐化可能与细胞程序性死亡(PCD)有关.对棉花组培中不同时期的愈伤组织DNA进行琼脂糖电泳,观察到:仅在第一次愈伤组织继代后10 d左右和愈伤组织第一次继代到分化培养基中培养10 d左右,愈伤组织的DNA产生了180 bp左右的片断或其整数倍片断大小的DNA带,呈DNA梯(DNA ladder)状电泳,说明在这两个时期PCD达到了高峰.在这两次PCD高峰后1周均出现愈伤组织大规模的褐化死亡.显微镜观察到第一次PCD发生高峰的愈伤组织存在许多管状、内含物少的细胞,这些细胞分布在愈伤组织的边缘和内部;第二次PCD发生高峰观察到体细胞胚胎分化、PCD细胞的木栓化和水渍化.对体细胞胚胎分化时期的原生质体进行荧光染色(DAPI),荧光显微镜下观察到发生细胞程序性死亡的细胞核浓缩、染色质凝聚、结块、边缘化和形成PCD小体.     

金桔组织培养中愈伤组织和芽形成的组织细胞学观察

用金桔茎段为外植体,培养在附加1.0毫克/升BA和0.l毫克/升IBA的MS培养基上,诱导愈伤组织和芽形成。观察了愈伤组织和芽形成过程中的组织细胞学变化。培养一周后,在茎组织切口两端开始膨大,细胞增大和开始分裂。培养两周后,开始形成瘤状愈伤组织。在愈伤组织中有形成层状分生组织、维管组织结节和分生细胞团。培养四周后,表层的分生细胞团分化形成大量芽原基,同时愈伤组织深层也出现分生细胞团。带节茎段可从切口两端的愈伤组织分化形成芽,亦可从叶腋的潜伏芽直接形成芽。     

细枝木麻黄离体培养过程中愈伤组织和再生芽的细胞组织学观察

为探讨细枝木麻黄(Casuarina cunninghamianaMiq.)愈伤组织分化过程的细胞组织学,对离体培养条件下的愈伤组织进行扫描电子显微镜和石蜡切片观察,分析愈伤组织的细胞分裂、分化以及芽再生的发生过程。结果表明,新鲜外植体培养于愈伤组织诱导培养基上,伤口处的薄壁细胞开始脱分化,培养1周后形成明显的愈伤组织;继续培养2周后,胚性愈伤组织形成,且表层细胞启动分化形成芽原基;培养4周,可肉眼观察到胚性芽原基,数量增多并逐渐分化形成不定芽;培养至第6周,生成不定芽,并大量增殖和分化。因此,细枝木麻黄是通过愈伤组织分化形成胚状体的途径进行植株再生的,为建立细枝木麻黄组织培养高效再生体系提供了理论依据。     

光质对黄瓜及番茄愈伤组织培养中分化和有关酶的影响

黄瓜及番茄愈伤组织培养过程中的分化和生理生化过程明显地受到光质处理的影响,它们的过氧化物酶(POD)和苯丙氨酸解氨酶(PAL)的活性变化与组织及器官的分化都有一定的相关性。黄瓜愈伤组织培养中POD及PAL的第3个活性峰的出现与芽的分化一致,红光与绿光抑制黄瓜愈伤组织培养中芽的分化,不出现第3个活性峰。两种材料培养后培养物的生物重量在不同光质下也有明显差异,但含水率之间无差异。     

牡丹愈伤组织发生和分生结节形成的细胞组织学研究

以牡丹‘Golden era’叶柄薄层为外植体,结合外部形态,对愈伤组织发生,并分化为分生结节过程进行了细胞组织学研究,为进一步研究牡丹不定器官分化、实现离体微繁殖奠定基础。结果表明:愈伤组织的发生与发育经历了启动、分裂、形成和组织分化4个时期。启动期,外植体束中形成层最先去分化,表现为形态上变暗,内部细胞核变大,淀粉代谢增强。细胞旺盛增殖的分裂期,先后于外植体形成层和皮层薄壁细胞处产生了愈伤组织,形成了质地紧实的愈伤增殖团,愈伤细胞体积小、质浓、核位于中心,且具有绕核积累的淀粉粒。形成期,愈伤组织增殖速度减缓,只有接触培养基的周缘愈伤组织仍在增殖。组织分化期,愈伤组织内部分化出维管单元,可以作为生长中心,有的是以特化的薄壁细胞为生长中心,外围核大、质浓的薄壁细胞层形成了具有再生潜能的分生结节。     

番茄叶组织培养中愈伤组织形成和器官发生的细胞学和微形态学研究

以番茄叶外植体为材料,研究了不同的生长素和细胞分裂素及其浓度配比对叶外植体培养行为的影响;同时,利用细胞学和扫描电子显微镜技术观察了愈伤组织形成和器官发生过程。结果表明,不同种类及浓度配比的生长素和细胞分裂素直接影响愈伤组织的物理状态、大小和形成的速度以及器官分化的频率和速度。叶外植体切口处的叶肉细胞,维管薄壁细胞和维管束上方的少数叶肉细胞首先启动脱分化而开始分裂,这些细胞的活跃分裂和分化导致在外植体表层形成由薄壁细胞、维管组织和无分化状态的表层分生细胞团组成的愈伤组织。而不定芽则通过愈伤组织的薄壁细胞再次脱分化和再分化活动而形成,为“外起源”。认为存在由植物激素决定的“无分化活性”和“有分化活性”二种性质的愈伤组织。     

金鱼草愈伤组织过氧化物酶活性及其同工酶变化

在不同激素比例的MS培养基上 ,金鱼草 (Antirrhinummajus)茎愈伤组织主要有三种分化状态 :a愈伤组织不分化 ;b以器官发生途径分化出不定芽和不定根 ;c通过胚胎发生途径形成胚状体。过氧化物酶活性与愈伤组织分化程度呈正相关。未分化愈伤组织与分化芽、分胚状体及分化芽和根的愈伤组织酶活性呈线性递增关系 ,相对酶活力为 1:3:5 :6。在其同工酶谱中 ,三种状态的愈伤组织都具有酶带I和II,表明这两种同工酶与细胞的增殖生长有联系。分化的愈伤组织比未分化愈伤组织多出现酶带Ⅲ、Ⅳ和Ⅴ ,说明这三条酶带是影响分化的特异蛋白质。在分化芽的愈伤组织中 ,还存在酶带Ⅳ ,说明它是催化器官发生途径的特有同工酶。     

油橄榄(Olea europaea L.)组织培养的细胞组织学研究 Ⅱ.组织分化和器官发生

油橄榄愈伤组织转入分化培养基进行继代培养后,在它外围部分的局部表面可以由愈伤形成层发生周皮。同时在它内部有星散的管胞和维管束分化,这些维管组织并不构成维管系统,与器官发生无任何联系。此外,愈伤组织内有由薄壁细胞不规则地发生胚性细胞,它具有分生细胞的性质,以它不同的细胞分裂形式,产生两种分生组织的结构,即分生细胞团和分生组织结节。分生组织结节形成生长中心而无任何分化,但可分化为维管组织结节,它有以形成层状细胞围绕着许多管胞的结构,在它具有单向极性时,从它发育成根原基,而芽原基则由愈伤组织近表面的分生细胞团分化形成。并初步观察到在愈伤组织中有再次胱分化的过程。对维管组织结节在构造上的差异和根与芽的起源问题,根据观察结果作了简要的讨论。     

在分化条件下水稻花粉愈伤组织超微结构的变化

对分别生长在含有2,4-D2毫克/升的诱导培养基上和生长在不含2,4-D 而含有激动素0.5毫克/升、萘乙酸0.2毫克/升的分化培养基上的水稻花粉愈伤组织进行了透射电子显微镜的对比观察。发现当愈伤组织由诱导培养基上转移到分化培养基上之后,细胞发生了一定的超微结构上的变化。处于旺盛分裂状态有可能分化成芽原基的某些愈伤组织表层细胞中的线粒体、质体、核糖核蛋白体的数量增多了。愈伤组织内部薄壁细胞的液泡化程度变小,类脂体、淀粉粒等贮藏物质大大减少或完全消失。愈伤组织中除了有导管分子的分化外还发生了筛管分子的分化。细胞的类型增多了,出现了一些电子密度极高的细胞。虽然愈伤组织转移到分化培养基上之后所发生的上述变化是明确的,但我们认为这不一定是细胞分化的特异标志。为了进一步揭露细胞分化的实质,需要在细胞化学和分子生物学方面进行更多的工作。     

金鱼草愈伤组织过氧化的酶活性及其同工酶变化

在不同激素比例的MS培养基上,金鱼草（Antirrhinum majus）茎愈伤组织主要有三种分化状态：a愈伤组织不分化;b以器官发生途径分化出不定芽和不定根;c通过胚胎发生途径形成胚状体。过氧化物酶活性与愈伤组织分化程度呈正相关。未分化愈合组织与分化芽,分胚状体及分化芽和根的愈伤组织酶活性呈线性递增关系,相对酶活力为1：3：5：6。在其同工酶谱中,三种状态的愈伤组织都具有酶带和Ⅰ和Ⅱ,表明这两种同工酶与细胞的增殖生长有联系。分化的愈伤组织经未分化愈伤组织多出现酶带Ⅲ,Ⅳ和Ⅴ,说明这三条酶带是影响分化的特异蛋白质。在分化芽的愈伤组织中,还存在酶带Ⅳ,说明它是催化器官发生途径的特有同工酶。     

油菜花序轴、叶片组织培养中形态发生的细胞组织学研究

油菜花序轴、叶片在MS培养基上经诱导可产生愈伤组织并形成再生植株。愈伤组织形成可分3个时期:细胞启动期、分裂期和分化期。实验证明:花序轴启动部位多发生在皮层薄壁细胞、髓部薄壁细胞、韧皮薄壁细胞和木薄壁细胞。叶片主要是叶肉细胞、叶脉薄壁细胞和表皮细胞启动。细胞分裂期的特点是启动细胞反复增殖,形成连续的分生细胞层。细胞分化期的特点是一部分细胞保持分裂能力,一部分细胞分化形成薄壁细胞和输导分子。观察了愈伤组织中器官发生的部位和方式。实验证明,根的发生多为内起源,芽的发生多为外起源。     

绿豆子叶切段形成愈伤组织过程中蛋白质代谢的变化(简报)

前人有关植物外植体脱分化形成愈伤组织的生理生化变化的研究表明,植物切块脱分化形成愈伤组织过程中,呼吸作用、核酸和     

结球甘蓝离体下胚轴愈伤组织的维管组织及管状分子

结球甘蓝离体下胚轴培养初期,在切口较深层发现的维管组织结节,是由外植体维管组织衍化的。愈伤维管组织既可由愈伤薄壁细胞分化,也可由愈伤形成层分化。愈伤形成层向内分化导管分子,向外没有发现筛分子的分化。愈伤维管组织有不同的形态,起初常各不相连,后和外植体维管组织衔接。芽的再生起初和愈伤维管组织没有直接的联系,后原形成层自上而下分化,逐渐与愈伤维管组织相连接。不定根发生于维管组织结节的单向极性分化,始终     

水稻OsRab5a基因功能的初步分析

水稻OsRab5a基因在根、茎、叶、根茎结合部和颖片及愈伤组织中均有表达;OsRab5a蛋白主要参与细胞内吞过程的早期膜泡运输,GFP—OsRab5a主要存在于细胞膜上和早期内吞小体中,而GFP—OsRab5aCA则大多存在于细胞膜上。OsRab5a RNA干涉载体转化水稻愈伤组织后,导致愈伤组织在分化过程中死亡,OsRab5a基因的表达略受细胞分裂素的诱导,在分化过程中表达增强,从而推测OsRab5a可能参与激素的信号转导而在愈伤分化过程中发挥重要作用。     

水稻花药培养中小孢子形成植株的组织分化和器官建成的初步观察

以 N_6为基本培养基培养水稻花药,用压片法及石蜡制片法,对小孢子形成植株的过程进行组织分化和器官建成的观察。结果表明,从小孢子到花粉植株形成分两个阶段:愈伤组织的形成和不定根、不定芽的分化。小孢子(花粉)第一次有丝分裂形成两个均等细胞,而后这两个细胞再经过多次分裂,形成愈伤组织。由愈伤组织中发生的不定根是内生源的。芽是外生源的,即愈伤组织表面的一部分细胞,经过反分化形成分生组织,而后这种分生组织再进一步分化成芽。不定根和不定芽在开始时是独立发生的,它们之间没有维管组织联系。从外部形态上看,当花粉形成植株时,都是先出芽而后出现根。但从解剖上看,可能也有不定根发生早于不定芽的现象。     

在分化条件下甜菊愈伤组织分生区细胞超微结构研究

对甜菊（Ｓｔｅｖｉａｒｅｂａｕｄｉａｎａ）愈伤组织中尚未发生器官分化的分生细胞团进行了超微结构研究．结果表明,在器官分化条件下,愈伤组织中形成的分生区域的细胞体积小,细胞核大,核仁明显,且具核仁泡,部分细胞核中含有核内含物．大量小液泡分布在细胞的边周或散布于整个细胞中．液泡中通常含有陷入的细胞质成分和膜状物．部分液泡的形成与内质网膨大有密切关系．同时也观察到由内质网形成的多圈膜和双层膜包围细胞质成分的同心环结构．高尔基体及其小泡丰富,有时聚集分布在细胞某一区域．核糖体密集,有的聚集成多聚核糖体．因此,愈伤组织中分生区的细胞与分生组织中的液泡化和分裂的细胞类似．分生区细胞的另一明显特征是出现质膜内陷．推测这些超微结构特征可能反映了甜菊愈伤组织器官分化前的某些形态变化。