FISH检测宫颈脱落细胞与宫颈组织中hTERC基因制片方法的研究

目的:探讨FISH实验中用直接涂片法、盐水制片法、TCT制片法、低渗滴片法制片法和宫颈切片组织取材方法对于FISH成功率的影响.方法:收集2008年3月至2009年3月青岛大学医学院附属医院妇科162例宫颈脱落细胞标本及2008年5月至2009年3月手术切除或活检的宫颈组织63例,用荧光原位杂交(FISH)方法检测hTERC基因.结果:直接涂片法、盐水制片法、生理盐水法、TCT制片法和石蜡包埋组织切片法hTERC基因杂交成功率分别为58.3%,65%,55%,87.1%,85.7%,TCT制片高于其它四组;低渗滴片法背景干净度、细胞形态、裸核数量满意度最高;TCT制片法细胞数量满意率最高;石蜡包埋组织切片法荧光信号满意率最高.结论:在检测hTERC基因的宫颈癌筛查中,TCT制片法明显优于其他方法,而在指导宫颈病变及宫颈癌的治疗中,石蜡包埋组织切片法的染色体破坏最小,实际意义更大.     

四格小孔径包埋盒在常规病理技术中的应用改进

目的探讨四格小孔径包埋盒应用于胃肠镜活检组织病理标本取材和石蜡包埋过程中的改进方法,以提高制片效率和质量。方法将胃肠镜活检组织随机放入四格小孔径包埋盒内作为对照组,包埋盒上不记录(对照组A)或记录(对照组B)每例活检组织的数量;改进组对四格小孔径包埋盒的四个分区重新定义为I-IV四个象限,取材时将1-4个活检组织分别对应放入I-IV四个象限的小格中。对照组和改进组标本均进行常规石蜡包埋、切片以及HE染色,比较3组间病理组织取下后放入包埋盒内的耗时、石蜡包埋过程中收集标本的耗时以及显微镜观察标本数与实际标本数的符合率。结果改进组平均每例标本取材后放置标本和包埋收集标本耗时均显著短于对照组B;与对照组A相比,改进组放置标本耗时无显著差异,而收集标本耗时显著缩短。改进组镜检标本数量符合率为100%,显著高于两个对照组。结论对四格小孔径包埋盒的四个小格重新定义并赋予特定的数量关系,将该规则应用于病理组织取材过程和常规石蜡包埋过程中可提高胃肠镜活检组织的制片效率和质量。     

一种石蜡组织切片在载玻片上精准定位的方法

目的探讨改进包埋模具和改进载玻片应用于HE染色技术的改进方法,以满足病理医生对切片制作的要求及提高病理医生阅片的工作效率。方法应用传统方法与改进方法对阑尾、胆囊和肠壁的小组织块进行连续石蜡切片,分别比较两种方法对同一组织的HE染色制片效果在粘贴方向和粘贴位置的差异,以及在低倍显微镜下定位同一组织相同目标区域的耗时差异。结果应用传统方法同一组织的制片效果存在不同的角度差异或位置差异,应用改进方法同一组织的制片效果具有粘贴方向相对一致,粘贴位置相对固定的特点;改进方法在低倍显微镜下定位同一组织相同目标区域的耗时显著低于传统方法的耗时。结论改进方法的制片效果能够满足病理医生的要求,可提高病理医生阅片的工作效率。     

制作实验动物组织切片的质量控制

实验动物组织制片要比人体组织制片有一定难度,这是动物组织的性质和特点,因此我们多年来为了解决制片质量问题,而从动物的的固定、取材、脱水、透明、浸蜡、包理和染色环节中,进行了系列性反复实验,已形成了完整的动物制片改进方法。此法适用于大批动物组织制片质量的控制,是目前较为理想的动物制片方法。材料和方法一、组织固定与取材的方法:本室选用12%中性甲醛固定液,动物解剖时候,将各     

淋巴结组织切片HE染色的体会

目前,组织化学、免疫组织化学、电镜和ＰＣＲ等先进技术虽已用于淋巴系统疾病,尤其是淋巴系统肿瘤的诊断、鉴别诊断和研究,但是,石蜡切片ＨＥ染色仍然是临床病理诊断最常用的有效方法。由于淋巴组织结构复杂,组织处理不当时,常常难以获得理想的切片质量,给准确诊断带来许多困难,有时甚至造成误诊。影响淋巴结石蜡切片质量的因素较多,但我们认为关键应注意以下几个环节。１　淋巴结活检石蜡切片的应用淋巴结石蜡切片主要用于活检和穿刺组织的制片,为了获得准确的病理诊断、疗效判断和某些研究工作,需要高质量的ＨＥ染色切片。诊断…     

简介《病理组织制片和染色技术》一书

简介《病理组织制片和染色技术》一书龚志锦、詹洲编著的《病理组织制片和染色技术》已由上海科学技术出版社出版、发行。它是一本由作者多年来收集大量资料,对组织制片和染色进行了系统的实验性研究,不断总结经验和研究成果,而编写的内容全面、丰富、技术水平较高,实...     

用微波技术改进的PAM染色

ＰＡＭ染色法是一种显示肾小球基底膜的六胺银染色与Ｍａｓｓｏｎ三色法结合起来应用的复合染色法,它可在同一切片上显示多种组织成分,是肾穿活检中必不可少的方法。但它步骤多,耗时长,严重影响制片速度,为此,我们用微波技术对ＰＡＭ染色法进行改进（简称为ＭＷ－Ｐ...     

华中五味子染色体制片优化及核型分析

比较不同预处理和解离方法对华中五味子染色体制片的影响,采用华中五味子的萌发芽、新枝茎尖、幼叶等不同部位进行染色体制片,观察500个细胞,比较不同部位中期细胞和适宜核型分析的中期细胞所占比例,结果显示,0.1%秋水仙素预处理1 h、1 mol/L盐酸常温解离12 min制片所得染色体分散效果最佳。5~15 mm幼叶侧边组织制片最适宜华中五味子核型分析。核型公式为2n=2x=28=26 m 2sm,核型不对称系数(As.k)为56.30%,属于1B类型,核型对称性程度高,表明华中五味子在进化中处于比较原始类型。     

微小组织冰冻快速制片技术

目的摸索提高微小组织冰冻快速制片质量的方法。方法针对小组织冰冻切片中常常出现组织切完、多粒组织切片不全、冰晶、染色不均匀等问题,采用预先制作冷冻平台、快速冷冻等方法来制作优质的冰冻切片。结果组织铺平可使组织切片完整,快速冷冻可减少冰晶形成,使组织结构更清晰,及时固定和加温染色可使细胞核染色更鲜艳,核、质对比明显。结论组织铺平、速冻、固定、染色等都是提高微小组织制片质量的关键。     

半夏倒苗前后的细胞组织结构

探讨高温胁迫下半夏倒苗前后的组织学结构的变化,为揭示半夏倒苗的生物学机理提供参考依据。在半夏植株高15cm左右时,给予(32±1)℃的高温胁迫,于不同胁迫天数取半夏叶柄,经爱氏苏木精染液染色,用石蜡切片法制片,在显微镜下观察并照相。结果表明,随着高温胁迫时间的延长,半夏叶柄的维管组织结构被破坏越来越严重,细胞壁、细胞膜破裂,原生质外渗,核膜破裂,核仁溢出,有的细胞内核仁消失。     

甲状腺组织冷冻切片的优化

目的优化冷冻切片的关键条件,以期提高甲状腺组织冷冻制片效率、切片质量与染色效果。方法收集术中新鲜送检的甲状腺标本,通过对比实验,比较冷冻切片制作环节中取材厚度、速冻方法与染色方法等因素对制片质量的影响。结果甲状腺组织冷冻切片取材厚度以0.2~0.3cm为佳;预先制作“冰垫”的托头并于上方加盖冷冻冰锤,有利于提高速冻效率、提高组织结构清晰度、减少组织块崩裂、减少冰晶、减少裂隙;机染有利于提高染色优良率并减少染色时间。结论选择适当的取材厚度、优化速冻方法、采用优质的染色方法,可显著提高甲状腺组织冷冻切片的制片质量,为精准的术中病理诊断奠定基础。     

超声快速石蜡病理切片免疫组织化学染色的分析讨论

超声快速石蜡病理制片方法简便快捷,切片质量好,组织染色清晰,与常规制片无明显差别,是目前国内手术中快速制片常用方法之一。手术中快速病理检查常常因为肿瘤组织较小而全部做成快速石蜡切片,在临床没有后续标本送检的情况下,使得赖以诊断的免疫组织化学就必须在快速石蜡切片上进行。因此,超声快速石蜡切片对免疫组化染色的影响是一个值得探讨的问题。     

中性甲醛液微波预固定在病理活检技术中的应用

活检是病理科的常规检验工作 ,既快又准确地做出病理诊断对指导临床和估计预后有着十分重要的意义。病理制片质量的提高和制片速度的加快对提高病理诊断效率起决定性的作用。我们将微波技术应用于常规活检病理中 ,取得了令人满意的效果。1　材料和方法1 .1　材料 :手术送检未经固定的新鲜标本。1 .2　试剂 :中性甲醛液 :(甲醛 1 2 0 ml,蒸馏水 880 ml,磷酸二氢钠 4g,磷酸氢二钠 1 3g)。1 .3　仪器 :济南仪器厂生产的 WBG- 60 0 A型家用微波炉 ,设有温度探针 ,温度范围 2 8～ 98℃ ,没有恒温控制功能。1 .4　方法 :将手术送检的新鲜标本取…     

微小组织石蜡切片制作体会

目的探讨提高微小组织石蜡制片质量的方法,明确微小组织的内涵。方法针对微小组织石蜡切片制作过程中常常出现组织遗漏、切完和多粒组织切片不全等问题,通过伊红标记、预包埋等方法来精心制作切片。结果伊红标记可避免微小组织遗漏,预包埋可以使多粒微小组织处于同一水平面来防止切不全或切完组织的情况发生,整个制片过程中仔细操作也是必不可少的条件。结论伊红标记和预包埋等方法能够很好地解决微小组织切片制作中的遗漏、切完和"切不全"等问题,并进一步明确了微小组织的内涵。     

一种适合针刺活检样品的蛋白质组学分析方法

针刺活检样品是一种重要的临床组织样品,其蕴涵的蛋白质信息,对了解人类疾病极为重要.然而,由于该样品的体积极小,其研究受到很大限制.本文建立和优化了适合针刺活检样品的基于双向电泳的蛋白质组学分析平台：通过直接抽提获得针刺活检组织的蛋白质样品;用24 cm 固定梯度干胶条(pH 3-10NL)等电聚焦及12.5% SDS-PAGE分离获得蛋白质样品;感兴趣的蛋白质点经过胰酶酶解后用MALDI TOF/TOF质谱分析.运用所建立的平台对3例来自3只不同大鼠的肝脏针刺活检样品进行分析,获得了多于2500个蛋白质点的高重复性的二维凝胶银染图谱.应用该方法分析人前列腺针刺活检样品的蛋白质组,同样获得了高质量、高重复性的结果.其中随机选取的包括低丰度点在内的57个蛋白质点,经胰酶酶解后进行MALDI串联质谱分析,均获得了高确定性的鉴定结果.通过建立针刺活检样品的蛋白质组学分析方法,为研究人类疾病的分子机制提供了必要的前提保障.     

巴西橡胶制片法

巴西橡胶(Hevea brasiliensis)是生产天然橡胶最优良的橡胶植物,国内外很多人曾做过树皮解剖的研究,探讨结构与产胶量的关系。但是这一种植物乳管组织的形态结构比较特别,由于制片方法没有改进,研究成果一直未在生产上应用。作者经过多年摸索,研究出一套制片方法,即:乳管层临时制片法,乳管层永久制片法和切片制片法三种。前两种方法比较简单,不需要切片机之类的设备,只要通过简单的处理,便能把大     

绦虫成虫染制方法的改进

本文对传统的绦虫制片染色法作了改进,应用哈里斯氏苏木精液和１％伊红酒精液对羊曲子宫绦虫成虫制片染色。结果表明,用此法制成的玻片标本具有简便、快速、清晰,不易退色、质量高、效果好等优点,适用于各种绦虫成虫玻片标本的制作。     

植物组织中光合产物的放射自显影定位

植物光合产物,都为水溶性,不能用常规石腊制片技术进行放射自显影研究。为了定位研究这类水溶性化合物在植物组织中的分布,参考Appleton、Stumpf等的方法,利用我国现有条件,试验了冰冻制片、冻装核4乳胶干板技术,取得了自显影定位照片。其方法如下。     

植物材料快速石蜡制片方法

真空干燥箱已越来越广泛地应用于现代生物学研究领域。该文利用真空干燥箱温度和负压的可控制性能,将固定、脱水、透明和石蜡渗透等过程在真空干燥箱中进行,建立起一套可行的植物组织快速石蜡制片方法。结果显示,真空干燥箱的应用加速了多种试剂的渗透速率,提高了切片质量,达到了优化实验步骤、节省实验时间和减少室内有毒化学气体污染的目的。     

蚊虫连续石蜡切片制备及染色

本研究利用塑化石蜡进行了吸血前后白纹伊蚊整个蚊虫的石蜡包埋、制片及 HE染色 ,获得了染色清晰 ,组织完整的连续石蜡切片 ,并讨论了有关蚊虫石蜡包埋及制片染色的一些注意事项。为进一步利用免疫组化、原位 PCR等技术研究虫媒病毒在蚊虫体内的分布规律提供了可能