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本实验采用酶联免疫分析法检测猪主动脉内皮细胞培养液中tPA抗原、tPA活性和PAI活性,并观察了LDL和L精氨酸对tPA和PAI的影响。结果表明:LDL能明显降低tPA抗原含量。同时伴有tPA活性的降低和PAI活性增高;L精氨酸能增加tPA抗原含量伴tPA活性增高,但对PAI活性无明显影响。实验提示L精氨酸能保护血管内皮细胞,增加其tPA合成,并能部分地拮抗LDL降低tPA合成的作用,可能对动脉粥样硬化早期防治有重要应用价值。 相似文献
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L—精氨酸L—门冬氨酸盐对血小板功能的抑制 总被引:3,自引:0,他引:3
用血小板聚集、粘附、释放实验和出血时间测定观察L-精氨酸*L-门冬氨酸盐(DR)对血小板功能的作用。实验结果显示DR15mg/kg静脉给药,可明显抑制腺苷二磷酸(ADP)诱导的大鼠血小板聚集(P<0.01);15mg/kg单次口服给药可明显抑制ADP诱导的家兔血小板聚集;其药效可持续8h以上(P<0.01);DR7.5、15、30mg/kg灌胃给药(Bid×3.5d),可明显抑制ADP、胶原或凝血酶诱导的大鼠血小板聚集(P<0.01),并延长出血时间(P<0.05)。DR30mg/kg可明显抑制大鼠血小板粘附,并促进血管内皮释放前列环素(PGI2),但对活化的血小板释放血拴素(TXA2)无明显影响。本研究发现,DR可抑制血小板聚集和粘附功能,其作用机制不同于阿司匹林。这些作用部分是由于DR增加了血管内皮PGI2的释放。此结果为血小板功能的调节提供了新线索。 相似文献
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自发性高血压大鼠血管平滑肌细胞的精氨酸转运和脂质体对转运的影响 总被引:3,自引:1,他引:2
本工作在培养的自发民生高血压大鼠和对照WKY大鼠的主动脉平滑肌细胞上,观察细胞L-精氨酸转动转征,并观察脂质体作为L-Arg载体对L-Arg细胞转运的影响。 相似文献
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利用大肠杆菌表达的重组纤溶酶原激活物抑制因子-1(rPAI-1)具有许多与天然PAI-1相同的性质,rPAI-1对u-PA抑制活性研究的内容包括:几种化学物质(盐酸胍,尿素,硫氰酸钾,SDS,氯化钠等)对rPAI-1的激活作用,盐酸胍激活rPAI-1的浓度与温度效应,显色底物法和SDS-PAGE纤维蛋白自显影对rPAI-1活性的测定,活性态rPAI-1向潜状态的转变及其与盐浓度和pH值的关系。 相似文献
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t—PA昆虫细胞表达及特性分析 总被引:2,自引:0,他引:2
With the RT-PCR technique, human tissue-type plasminogen activator (t-PA) cDNA was amplified from human melanoma cells. The sequence was proved to be the same as those reported by foreign researchers. The t-PA cDNA containing whole reading frame was inserted into the transfer vector pBacPAK8. The constructed pBac-tPA and the linear BacPAK6 virus DNA were cotransfected with Tn-5B-1 insect cells by lipofectin-mediated transfection method. Eleven pure recombinant viruses were isolated by plaque assay, and one of them, nominated BactPA3, was selected by PCR identification and biological activity comparison. The t-PA activity expressed in serum-containing media reach the highest level at 72 h postinfection. The activity was 3.04 x 10(3) IU/ml, e.g. 1.8 x 10(4) IU/10(6) cells. The highest expression level in serum-free media was almost the same, but needed more time (at 132 h postinfection). SDS-PAGE fibrin autography showed that the molecular weight of the expressed t-PA was about 68 kDa. Its stimulation by fibrinogen, affinity with fibrin and inactivation in plasma were almost the same as the native t-PA purified from human melanoma cell culture. The half-life of t-PA expressed in serum-free media was seven minutes. 相似文献
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大鼠延髓腹面降压区微量注射L—精氨酸对心血管活动的影响 总被引:1,自引:0,他引:1
目的:观察NO前体L-精氨酸(L-Arg)微量注入大鼠延髓腹面降压区(VSMd)对心血管活动的影响及其和L-谷氨酸(L-Glu)降压作用的关系。方法:采用延髓腹外侧部微量注射法,以整体灌流肾为模型观察与NO有关的药物对心血管活动的影响。结果:①VSMd内微量注入L-Arg,动脉血压(AP)呈剂量依赖性升高,肾灌流压(PPK)与AP同步上升,与注入生理盐水对照,差异均具有显著意义,但L-Arg对心率无显著影响;②预先在VSMd内注入甲基蓝可取消L-Arg的升压、升PPK作用;③VSMd内注入L-Glu,AP下降。如预先注入L-Arg后5min再注入L-Glu,L-Glu的降压效应被衰减,其衰减程度依赖于L-Arg剂量。结论:VSMd的L-Arg-NO通路参与延髓心血管中枢对AP的调控,其机制之一可能是通过cGMP抑制VSMd内的谷氨酸能神经突触。 相似文献
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The morphology of t-PA mutant engineered cell line FSGGI48 is similar to that of CHO-dhfr- cell in polygon. When aminopterin (MTX) concentration is 5 x 10(-6) mol/L, a part of cells become slim, but they are still in polygon. Therefore, the morphology of FSGGI48 cell line is normal. The expression level is 4000 IU/10(6) cells/24 h in serum-free medium. The cell line is bequeathed for three months in vitro and revived after freezing three months, the greater part of cells are stable. The expression level is 3000-4000 IU/10(6) cells/24 h. The assay of tumorigenesis shows that the cells, cellular DNA and purified products don't form tumors in nude mice. The cell line hasn't been contaminated by mycoplasma. The results of chromosomal analysis show that the chromosomal number of CHO-dhfr- cell is 20 and the abnormal rate is 6%. FSGGI48 cell line is same as CHO-dhfr- cell in chromosomal number and the abnormal rate is 15%-18%, it is normal in scope. Therefore, the engineered cell line FSGGI48 is excellent. 相似文献
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大鼠延髓尾端加压区微量注射L—精氨酸对血压、心率和肾灌流压的影响 总被引:1,自引:0,他引:1
目的:研究NO前体L-Arg微量注入大鼠延髓尾端加压区(CPA)对心血管活动的影响。并探讨其可能的机制。方法:采用延髓腹外侧部微量满面主射法,以整体灌流肾为模型观察与NO代谢有关的试剂对心血管活动的影响。结果:(1)CPA内微量注入L-Arg(60-100nmodl)。动脉血压与心率呈剂量依赖性下降,肾灌流压下降,与生理盐水对照,差异有显著意义;(2)预先在CPA内注入鸟苷酸环化酶抑制剂甲基蓝可取消L-Arg的降压降肾灌流压作用;(3)CPA内注入lu,AP上升,如预先注入L-Arg后5min再注入L-Glu,L-Glu的升压效应被衰减,期衰减程度与L-Arg是剂量依赖性关系。结论:CPA内的L-Arg-NO通路参与延髓心血管中枢对AP的调控,其机制之一可能是通过cGMP抑制CPA内谷氨酸能神经突触。 相似文献
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应用经PMA诱导衍生的THP-1巨噬细胞为模型,以单克隆抗体C7B封闭oxLDL上的LDL受体结合位点,结果发现,正常细胞在摄取oxLDL时LDL受体与清道夫受体起协同作用;但C7B作用于蓄积了脂质的THP-1巨噬细胞时,对细胞脂质蓄积程度无明显影响,清道夫受体活性不但不降低反而有所升高,说明由于脂质蓄积LDL受体的作用减弱. 相似文献
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半衰期延长获得PAI-1抗性的t—PA突变体的构建、表达及特性分析 总被引:3,自引:1,他引:2
用基因重级及定位突变技术成功地构建了t-PA的K1区缺失突变体t-PAdelK1、PAI-1结合位点缺失突变体t-PAdel(296-302)及两的组合突变全t-PAdel(K1,296-302),并在COS-7细胞中实现三的暂时性表达,在CHO细胞中实现了t-PAdel(K1,296-302)的稳定性表达。对表达产物的生物学特性分析表明,t-PAdel(296-302)及t-PAdel(K1 相似文献
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L-精氨酸对兔心肌缺血/再灌注损伤的影响 总被引:1,自引:0,他引:1
心肌缺血后的早期再灌注是防止心肌损害的有效手段.但是,心肌缺血-再灌注并不都是有益的.缺血-再灌注可导致一氧化氮(NO)分泌减少,损伤内皮细胞功能.最近研究发现,作为NO生成前体的L-精氨酸,在保持和重建血管内皮功能等方面有重要作用.但是,也有与此相悖的研究报道.为此,我们以新西兰兔为实验性心肌梗塞模型,探讨缺血-再灌注期补充L-精氨酸对心肌结构和功能的影响. 相似文献
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利用大肠杆菌表达的重组纤溶酶原激活物抑制因子-1(rPAI-1)具有许多与天然PAI-1相同的性质,rPAI-1对u-PA抑制活性研究的内容包括:几种化学物质(盐酸胍、尿素、硫氰酸钾、SDS、氯化钠等)对rPAI-1的激活作用、盐酸胍激活rPAI-1的浓度与温度效应、显色底物法和SDS-PAGE纤维蛋白自显影对rPAI-1活性的测定、活性态rPAI-1向潜状态的转变及其与盐浓度和pH值的关系。 相似文献
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为了获得半衰期延长,特异活性提高及具有PAI-1抗性的新型t-PA溶性剂,利用基因重组及定位突变技术构建了t-PA的K1、K2区糖基化位点消除,PAI-1结合位点缺失,F与E区连接序列His44 ̄Ser50置换为纤粘蛋白I型F区间连接序列Glu Ser Lys Pro Glu Ala Glu Glu的t-PA组合突变体FrGGI,并在中国仓鼠卵巢细胞中获得了高效表达,对表达产物的生物学特性分析表明 相似文献