败血症休克大鼠肝脏内质网钙ATP酶磷酸化及去磷酸化的改变

本文观察了早期、晚期败血症休克大鼠肝脏内质网钙ＡＴＰ酶磷酸化的改变。败血症休克模型由结忾大鼠盲肠并穿孔的方法复制。采用蔗糖密度梯度离心法分离肝脏内质网。由聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定肝脏内质网钙ＡＴＰ酶磷酶化中间产物。     

CaMBP—10介导的质膜H^＋—ATP酶磷酸化对该酶活性的调节

ＣａＭＢＰ－１０在活体处理条件下,抑制ＩＡＡ诱导的质膜Ｈ＾＋－ＡＴＰ酶活性及其磷酸化,抑制作用可被ＩＡＡ逆转并在外加ＣａＭ时被消除,与前期ＢＰ－１０对ＩＡＡ生理应答的调节效应相吻合。并且在各项处理中,质膜Ｈ＾＋－ＡＴＰ酶活性与其磷酸化水平呈现极显著的正相关。     

败血症休克大鼠心肌毒蕈碱受体的变化

本实验在结扎大鼠盲肠并穿孔所复制的败血症休克模型上观察了早,晚期败血症休克时大鼠心肌Ｍ受体结构和功能的变化。结果发现：早期休克时Ｍ受体在质膜的分布增加,在轻囊的分布减少,表现为质膜＾３Ｈ－ＱＮＢ最大结合量增加３３．３％;轻囊Ｂｍａｘ降低了２６．９０％;晚期休克时Ｍ受体在轻囊的分布增加,在质膜的分布减少。     

大豆叶片质膜蛋白激酶的自身磷酸化反应

利用Ferrell和Martin（1991）设计的测定印迹在PVDF膜上的蛋白激酶活性方法研究大豆叶片质膜蛋白激酶自身磷酸化反应活性,结果表明：与Mg－ATP相比,Mn－ATP是更有效的57KD蛋白激酶自身磷酸化反应底物;钙离子可以促进该激酶的自身磷酸化反应活性,而且EGTA可以显著降低它在SDS电泳中的迁移率,说明57KD蛋白激酶为依赖于钙的蛋白激酶;预磷酸化反应实验证明57KD蛋白激酶具有多个自身磷酸化反应位点,其分子的自身磷酸化状态可调性暗示这一激酶可能具有重要的生理功能。     

败血症休克时心肌和心肌线粒体钙转运的变化

本实验在离体灌流败血症休克大鼠心脏模型上,观察到晚期败血症休克时,心肌和心肌线粒体钙含量分别增加190和332(P0.01),~LCa摄入量增加208和178。(P0.01),心肌钙释放量无明显变化 用10mol/L降钙素基因相关肽(CGRP)或10mol/L心房钠尿肽(ANP)灌流离体心脏明显减轻休克时心肌和心肌线粒体的钙超负荷,体外实验观察线粒体摄钙储备的能力,休克时心肌线粒体最大摄钙量减少31.6,摄钙速率降低33％,(P0.01)结论认为,晚期败血症休克,心肌净钙流入量显著增加和线粒体钙转运能力降低导致其对胞浆钙缓冲能力减弱是心肌细胞钙超负荷发生的重要环节CGRP,ANP可显著减轻休克时心肌和线粒体钙超负荷,在休克过程中可能对细胞有保护意义。     

两种败血症休克模型大鼠心肌细胞一氧化氮合酶活性的改变

目的：观察两种败血症休克模型大鼠的血流动力学及心肌细胞一氧化氮合酶活性变化的异同,探讨一氧化氮合酶参与败血症休克性心肌抑制的机制。方法：采用注射脂多糖（LPS）诱导及盲肠结扎穿孔（CLP）致腹膜炎诱导败血症休克模型,测定血流动力学指标以及心肌细胞胞浆一氧化氮合酶（NOS）活性。结果：①CLP模型大鼠的血流动力学指标随时间呈先上升后下降的趋势,LPS模型直接表现为类似于CLP模型晚期的动力学状态。在使用NOS抑制剂N-硝基-L精氨酸甲酯（L-NAME）后,CLP模型晚期及LPS模型的心室动力学指标均有明显改善。②CLP模型大鼠心肌细胞胞浆NOS活性在败血症中期达到最大。与假手术组相比,LPS模型、CLP模型晚期心肌细胞胞浆NOS活性均有明显增加,但是LPS模型与CLP模型晚期两组之间无明显差异。③使用L-NAME后,CLP晚期组与LPS组亚硝基及硝基化合物生成量均明显降低（P〈0.01）。其中,LPS组与CLP晚期组相比,前者固定表达型NOS生成亚硝基及硝基化合物生成量明显高于后者（P〈0．01）。结论：在LPS与CLP诱导的败血症休克模型中,心肌NOS是引起心室动力学变化的主要因素;在两种模型,心肌NOS亚型的表达不同,在LPS模型中主要为iNOS,而在CLP模型中则可能是cNOS和iNOS共同发挥作用。     

CaMBP-10介导的质膜H~ -ATP酶磷酸化对该酶活性的调节

CaMBP－10在活体处理条件下,抑制IAA诱导的质膜H －ATh酶活性及其磷酸化,抑制作用可被IAA逆转并在外加CaM时被消除,与前期BP－10对IAA生理应答的调节效应相吻合。并且在各项处理中,质膜H -ATh酶活性与其磷酸化水平呈现极显著的正相关。结果表明,质膜H －ATh酶活性受其磷酸化的调节,CaMBP－10参与了这一调节过程,它通过介导该酶磷酸化调节其活性,在IAA应答反应中发挥调节功能。     

败血症休克过程中心肌肌浆网钙摄取功能的变化及其机理探讨

本工作在大鼠盲肠结扎加穿孔（ＣＬＰ）腹膜炎败血症休克模型上休克不同阶段心肌肌浆网（ＳＲ）钙摄取功能的变化,并探讨了其变化机制。结果显示：败血症休克早期,心肌ＳＲ摄钙初速率降低,但ＳＲ最大摄钙量及Ｃａ＾２＋－ＡＴＰａｓｅ活性没有明显变化;败血症休克晚期,心肌ＳＲ摄钙初速率、最大摄钙量以及Ｃａ＾２＋－ＡＴＰａｓｅ活性显著降低。测定Ｘａ＾２＋,Ｍｇ＾２＋和ＡＴＰ对早、晚期要克大鼠心肌ＳＲ钙泵的亲和力以及     

实验性脾虚证大鼠肝细胞ATP酶的组织化学研究

用Ｗｉｓｔａｒ雄性成年大鼠２８只,分为对照组、脾虚组、自然恢复组和中药治疗组,每组７只。每组各取５只,麻醉处死后取肝右叶小块组织,恒冷箱切片,按Ｗａｃｈｓｔｅｉｎ－Ｍｅｉｓｅｌ法显示Ｍｇ２＋－ＡＴＰａｓｅ,光镜观察。每组另２只经心脏灌注多聚甲醛混合固定液固定,取肝右叶小块组织,制振动切片,采用Ｒｏｂｉｎｓｏｎ和Ｋｏｒｎｏｖｓｋｙ法显示Ｍｇ２＋－ＡＴＰａｓｅ,以常规电镜法包埋和切片,透射电镜观察。本文见到,光镜下Ｍｇ２＋－ＡＴＰａｓｅ位于胆小管,电镜下存在于胆小管微绒毛质膜上。脾虚组Ｍｇ２＋－ＡＴＰａｓｅ活性低于对照组;“自然恢复组”Ｍｇ２＋－ＡＴＰａｓｅ活性介于对照组与脾虚组之间。中药治疗组酶活性与对照组相近。本文对脾虚证肝细胞Ｍｇ２＋－ＡＴＰａｓｅ变化的意义进行了讨论。     

去窦弓神经对大鼠脑细胞线粒体氧化磷酸化功能的影响

目的:探讨去窦弓神经对脑细胞线粒体氧化磷酸化功能的影响。方法:用氧电极法及华氏减压法测定线粒体的耗氧量、呼吸控制率(RCR)和二磷酸腺苷/氧比值(ADP/O)。结果:线粒体结构完整性和氧化磷酸化效率明显降低(P0.01),且随时间延长逐渐降低(P0.05或P0.01)。结论:去窦弓神经使脑细胞线粒体的结构和功能遭到一定程度的破坏,且随时间延长日益严重。     

质膜H~＋－ATP酶在玉米叶片渗透调节中的作用

干早胁迫下,玉米幼叶生长部位质膜Ｈ＋－ＡＴＰ酶活性显著上升,游离脯氨酸、可溶性糖和无机离子亦同时在玉米叶片生长部位大量积累,二者之间呈明显的正相关．质膜Ｈ＋－ＡＴＰ酶的专一性抑制剂Ｎａ３ＶＯ４在干旱胁迫下强烈抑制游离脯氨酸的积累,说明ＰＭＨ＋－ＡＴＰａｓｅ参与了玉米叶片的渗透调节过程．     

经渗透胁迫高梁根的质膜囊泡K~＋_－ATP酶及其运输特征

经ＰＥＧ－１０００处理的高粱根,用不连续蔗糖密度梯度制备获得反转密闭的纯化质膜囊泡,显示一种特殊的ＡＴＰ酶活力,它不同于Ｈ＋－ＡＴＰ酶,其最适ＰＨ为７．５,具有高ＡＴＰ亲和力和较低的Ｋ＋转运能力。环己酰亚胺和钒酸钠能抑制其活力,表明它是新合成的Ｐ－型ＡＴＰ酶。     

铝和铝+钙对小麦幼苗根尖质膜、液泡膜微囊ATP酶和膜流动性的影响

研究了铝和铝 钙对小麦幼苗根尖质膜、液泡膜微囊H ATP酶、Ca2 ATP酶、Mg2 ATP酶活性及其动力学参数和膜流动性的影响。在质膜和液泡膜微囊制剂中加入 1.0mmol/L的Al3 (AlCl3)时 ,H ATP酶、Ca2 ATP酶、Mg2 ATP酶活性和酶促反应的Vmax及膜流动性下降 ,而酶促反应的最适pH和Km 均不受影响。提高酶促反应介质的Ca2 (CaCl2 )浓度可以缓解Al3 对膜ATP酶活性和膜流动性的影响。推测Al3 可能通过与膜的结合而抑制膜ATP酶的活性     

茉莉酸甲酯处理对绿豆下胚轴质膜H+-ATPase水解活力及磷酸化水平的影响

运用γ-32P示踪、蛋白激酶和磷酸酶抑制剂药理实验探讨茉莉酸甲酯(MeJA)对质膜H -ATP酶水解活力及磷酸化水平的影响.结果如下:MeJA可促进H -ATP酶水解活力30%;斑蝥素和岗田酸促进了MeJA对质膜H -ATP酶的刺激作用;星形孢菌素和白屈菜红碱削弱了MeJA对质膜H -ATP酶的刺激作用.H -ATP酶活力变化同时,其上的γ-32P标记量发生变化.Ca2 对H -ATP酶水解活力有很大的刺激作用,但对MeJA促进H -ATP酶活力的作用没有进一步的影响.根据这些结果可以得出结论:MeJA刺激质膜H -ATP酶水解活力的变化与H -ATP酶磷酸化水平呈正相关,并且催化这一作用的蛋白激酶可能不依赖于Ca2 ,而蛋白磷酸酶依赖于Ca2 .     

液体复苏对失血性休克肝细胞线粒体的损伤

液体复苏是失血性休克恢复组织灌注,缓解组织细胞缺氧最重要的手段.失血性休克液体复苏时由于内源性或外源性损伤因素使肝细胞线粒体结构发生改变,出现代谢功能障碍,诱发或(和)调节细胞凋亡,促进细胞凋亡、坏死的进程,进而出现肝脏功能障碍和肝衰竭.     

6-BA延缓大豆叶片衰老的作用与膜蛋白磷酸化状态的关系

蛋白激酶（proteinkinase,PK）和蛋白磷酸酯酶（pIDt6inphOSpha～,PP）是生物体内催化蛋白质磷酸化／脱磷酸化过程的两种重要酶类。目前已有越来越多的实验证据表明：这种可逆的磷酸化／脱磷酸化过程所导致的蛋白质（酶）活性的改变是生物体内信号传导过程中的重要环节（Hunter1995）。已有一些实验系统涉及了植物激素对于植物蛋白磷酸化过程的影响（Mi－zogUchi等1994,Sano和Youssefian1994）,并有一些与此相关的蛋白激酶和蛋白磷酸酯酶的基因被克隆（kleber等1993,temp等1994）。细胞分裂素延缓植物叶片衰老的作用早已被各种实…     

大鼠失血性休克后肠道微生态的改变

本研究对无特殊致病菌大鼠失血性休克后肠道微生态的改变及肠道细菌易位进行了动态观察。结果表明,失血性休克复苏后5小时,肠道微生态即发生改变,表现为回肠内肠杆菌菌量增多,肠道内类杆菌与肠杆菌菌量比值下降,而后这一改变随时间推移逐渐恢复;肠道细菌易位率也有类似变化,易位细菌以肠杆菌为主。结果提示,大鼠失血性休克后肠道细菌易位与肠道微生态的改变有密切关系。     

去唾液酸糖蛋白受体和脂质素协同介导原代大鼠肝细胞基因转移

以阳离子脂质素作为DNA运载体 ,以肝细胞去唾液酸糖蛋白受体 (ASGPR)的天然配体去唾液酸胎球蛋白 (ASF)作为导向配体 ,用于介导原代大鼠肝细胞基因转移 .结果表明转染复合物中加入ASF可明显提高肝细胞转染率 ,并且明显降低高比例脂质素 DNA复合物转染细胞时对细胞的毒性作用 ,ASGPR的化学合成配体半乳糖基白蛋白在基因转移中亦与ASF具有同样的作用 .因此ASGPR可与阳离子脂质素协同介导肝细胞基因转移 ,为原代肝细胞基因转移提供了一种更为简便、实用、有效的方法 ,有应用于肝基因治疗的前景 .     

失血性休克引起大鼠肠系膜动脉平滑肌依钙K~ 通道活动改变

在由股动脉放血制备的失血性休克大鼠模型急性分离的肠系膜动脉平滑肌细胞上 ,利用膜片箝单通道记录技术观察了血管平滑肌依钙K 通道 (BKCa)的活动。发现在对去甲肾上腺素 (NE)反应性增高的休克代偿期 ,BKCa的开放概率 (Po)和单位电导都显著较正常动物的低 ,Po 的改变主要是由通道的慢关闭时间常数 (τcs)增大引起关闭时间延长所致 ;而处于对NE反应性降低的休克失代偿期 ,BKCa的Po 和单位电导都高于正常动物 ,Po的变化也主要是τcs减小所致。     

ABA、IAA和CaM对发育菜豆子叶质膜H~＋－ATPase活力的效应

以亲水性两相分配法从发育菜豆子叶制备的质膜制剂经冻融循环操作,部分膜微囊可转变成密闭的翻转型。取冻融４次的质膜微囊用于Ｈ＋－ＡＴＰａｓｅ试验表明,ＡＴＰａｓｅ活力为ＡＢＡ和ＣａＭ显著地激活,但受ＩＡＡ显著抑制;质子泵活力被ＡＢＡ显著促进,但为ＣａＭ显著抑制,ＩＡＡ对质子泵活力无显著效应。可以认为：ＡＢＡ促进发育菜豆子叶吸收光合同化物可能是通过促进质膜Ｈ＋－ＡＴＰａｓｅ活力,从而促进质子／蔗糖同向运输而获得;ＩＡＡ则可能对菜豆子叶的质膜Ｈ＋－ＡＴＰａｓｅ无显著效应。在激素信号传导途径中,ＣａＭ对质膜Ｈ＋－ＡＴＰａｓｅ活力可能无直接影响。