菜心下胚轴原生质体培养和植株再生

以萌发３—４ 天（长约４ ｃｍ ）的菜心（Ｂｒａｓｓｉｃａ ｃａｍｐｅｓｔｒｉｓ ｖａｒ．ｐａｒａｃｈｉｎｅｓｉｓ）无菌苗苍白下胚轴为材料,酶解分离原生质体。经纯化的原生质体,在含０．５ ｍ ｇ／ＬＺＴ、０．５ ｍ ｇ／Ｌ２,４－Ｄ、１．０ ｍ ｇ／ＬＮＡＡ 和０．４ ｍ ｏｌ／Ｌ葡萄糖的Ｋ８ｐ 培养基中,进行微滴培养。在起始培养１４—１８小时,原生质体再生新的细胞壁。３６ 小时再生细胞开始第一次分裂。第三天分裂细胞频率可达３５％ 。培养第８—９ 天,可见含８—１６个细胞的小细胞团,植板率为１５％ —１８％ 。３ 周后将发育成直径为２ ｍ ｍ 的白色小愈伤组织,转到含０．３ ｍ ｇ／Ｌ ２,４－Ｄ并用ｇｅｌｒｉｔｅ半固化的培养基上,增殖成４—５ ｍ ｍ 直径的愈伤组织。在ＭＳ＋ ３．２（或１．６） ｍ ｇ／Ｌ ＢＡ＋ １．６（或０．８） ｍ ｇ／ＬＺＴ＋ ０．０１ ｍ ｇ／Ｌ ＮＡＡ＋ ０．１ ｍ ｇ／ＬＧＡ３ 和０．２％ 蔗糖的分化培养基上,获得芽的分化。切下约２ ｃｍ 长的芽苗,转移到含０．２ ｍ ｇ／ＬＩＡＡ 和２％ 蔗糖的培养基上,生根形成完整植株     

α_1肾上腺素能受体介导去甲肾上腺素促大鼠培养心肌细胞蛋白质合成效应

在无血清和含１．０％、５．０％血清培养的新生大鼠心肌细胞标本上,去甲肾上腺素（ＮＥ,２．０μｍｏｌ／Ｌ）使细胞蛋白质含量（Ｌｏｗｒｙ法）分别比相应对照组增加４０％、２６％、１９％（Ｐ均＜０．０１）;细胞３Ｈ－亮氨酸参入量与ＮＥ浓度呈正性剂量依赖性,最大效应浓度为２０．０μｍｏｌ／Ｌ;无血清培养体系中,０．２、２．０、２０μｍｏｌ／Ｌ的ＮＥ使参入量分别比对照增加１７．８％、３５３％、３７．７％;１．０％血清培养体系中分别比对照增加１６．２％、２７．９％、３１．６％（Ｐ均＜０．０５）;哌唑嗪（２．０μｍｏｌ／Ｌ）可阻断ＮＥ的促蛋白质合成作用,心得安（２．０μｍｏｌ／Ｌ）则无此效应。提示在无血清或低浓度血清培养体系中,ＮＥ可促进心肌细胞蛋白质合成,增加细胞蛋白质含量,该作用可能是通过α１肾上腺素能受体介导。     

链霉菌Z94-2碱性脂肪酶产生条件及酶学性质

在１５２ 株脂肪酶产生菌中,链霉菌Ｚ９４２ 产脂肪酶活力为５９６ｕ／ ｍＬ,其最适培养基（ｇ／Ｌ） 为：糊精１０ 、黄豆饼粉３０ 、尿素１０ 、Ｋ２ＨＰＯ４ ０－５ 、ＭｇＳＯ４ ０－５ 、ＮａＣｌ １ 和ＡＥＯ９ ０ ．５ ,产酶的最适条件为：初始ｐＨ９ ．５ ～１０－０ ,在２６ ℃培养４８ｈ 。用ＰＶＡ 橄榄油乳化系统测定该酶的最适ｐＨ９ ．８ ,最适温度３７ ℃,在ｐＨ８－６ ～１０－２ 于５ ℃存放２４ ｈ ,酶活力不变。０－１４ｍｏｌ／Ｌ 的氯化钙有较大的激活作用。     

丹皮酚对心肌细胞自律性和延迟后除极的影响

目的与方法：采用常规玻璃微电极技术研究丹皮酚对离体心肌细胞自律性（ＡＭ）、延迟后除极（ＤＡＤ） 及触发活动（ＴＡ）的影响。结果：１．８×１０－４ｍｏｌ／Ｌ丹皮酚灌流组,肾上腺素（Ａｄｒ）的阈浓度空白对照组为（１．２８±０．５７）μｍｏｌ／Ｌ,药后为（１．５６±０．５３）μｍｏｌ／Ｌ（ｎ＝９,Ｐ＞０．０５）;用（１．８×１０－ ３） ｍｏｌ／Ｌ丹皮酚（Ｐａｅ）灌流组,Ａｄｒ 浓度由空白对照组的（１．２２ ±０．６２）μｍｏｌ／Ｌ升高到（６．２２±２．１１）μｍｏｌ／Ｌ（ｎ＝９,Ｐ＜０．０１）。１．８×１０－３ｍｏｌ／Ｌ的Ｐａｅ 能明显抑制哇巴因（Ｏｕａ）诱发的ＤＡＤ的幅值,当基本刺激周长为５００,４００,３００ 和２００ ｍｓ 时,其ＤＡＤ幅值从（５．５±２．０）ｍＶ,（７．３±２．１）ｍＶ,（８．０ ±２．４）ｍＶ和（９．２±１．９）ｍＶ减小到（３．０±１．１）ｍＶ、（３．６±１．７）ｍＶ,（４．３±２．０） ｍＶ和（５．９ ±１．６） ｍＶ,Ｐ＜０．０１。当基本刺激周长为２００ ｍｓ时,ＴＡ 数目由５．５±１．０ 降至０．７±０．３（Ｐ＜０．０１）。结论：丹皮酚能抑制心肌细胞ＡＭ、ＤＡＤ及ＴＡ,具有抗心律失常作用     

东北虎血液成分的测定与分析

用氰化高铁血红蛋白法、改良纽鲍氏计算板法、显微测量法、低渗ＮａＣｌ试管法、微量毛细吸管离心法、血细胞计算板法和瑞特氏染色三区计数法，分别测得和算出８只东北虎血液中血红蛋白含量１３１±７．５ｇ／Ｌ、红细胞数７．１１±Ｏ．５３×１０１２／Ｌ、红细胞直径５．５８（４．６２—６．５５）μｍ、红细胞渗透脆性０．６０６±０．０６５—０．４３０±０．０４５％、红细胞压积容量３８．１±２．６８％、白细胞总数２３．３±７．５×１０９／Ｌ、嗜中性白细胞５７．９％、淋巴细胞３５．６％、单核细胞３．５％、嗜酸性粒细胞１．８％、嗜硷性粒细胞＜１％、平均红细胞体积５３．６±２．７５ｆＬ、平均红细胞血红蛋白含量１７．９±１．２５Ｐｇ、平均每个红细胞血红蛋白分子数１５８９±１１０×１０５个、平均红细胞血红蛋白浓度３３．５±２．７％；用全自动凯氏定氮法测定并计算得出血清总蛋白含量７３．６±１２．６ｇ／Ｌ、血清白蛋白含量４６．５±３．２％及血清球蛋白含量２７．１±１３．１ｇ／Ｌ。上述各项结果为保护东北虎提供了难得而有意义的生理参考值。     

链霉菌Z94-2碱性脂肪酶产生条件及酶学性质

在１５２株脂肪酶产生菌中,链霉菌Ｚ９４－２产脂肪酶活力为５９６ｕ／ｍＬ,其最适培养基（ｇ／Ｌ）为：糊精１０、黄豆饼粉３０、尿素１０、Ｋ２ＨＰＯ４０．５、ＭｇＳＯ４０．５、ＮａＣｌ１和ＡＥＯ９０．５,产酶的最适条件为：初始ｐＨ９．５～１０．０,在２６℃培养４８ｈ。用ＰＶＡ橄榄油乳化系统测定该酶的最适ｐＨ９．８,最适温度３７℃,在ｐＨ８．６～１０．２于５℃存放２４ｈ,酶活力不变。０．１４ｍｏｌ／Ｌ的氯     

α肾上腺素能受体介导去甲肾上腺素促大鼠培养心肌细胞蛋白…

在无血清和含１．０％、５．０％血清培养的新生大鼠心肌细胞标本上,去甲肾上腺素（ＮＥ,２．０μｍｏ１／Ｌ）使细胞蛋白质含量（Ｌｏｗｒｙ法）分别比相应对照组增加４０％、２６％、１９％（Ｐ均＜０．０１）;细胞＾３Ｈ－亮氨酸参入量与ＮＥ浓度呈正性剂量依赖性,最大效应浓度为２０．０μｍｏ１／Ｌ;无血清培养体系中,０．２．２．０、２０μｍｏ１／Ｌ的ＮＥＷ使参入量分别比对照增加１７．８％、３５．３％、３７．７％     

α受体激动对绵羊心脏浦肯野纤维延迟后除极的影响

用乙酰毒毛旋花子成元０．２μｍｏｌ／Ｌ诱发绵羊心脏浦肯野纤维产生延迟后除极（ＤＡＤ）,采用细胞内微电极记录。在用普奈洛尔１．０μｍｏｌ／Ｌ阻断β受体条件下,苯肾上腺素１．０μｍｏｌ／Ｌ使ＤＡＤ幅值由８．１±２．２ｍＶ增至９．５±２．８ｍＶ,时程由２４０±４７ｍｓ延长到２７３±４７ｍｓ（ｎ＝１３,ＰＭ＜０．０１）,ＤＡＤ上升速率由０．０３９±０．０２３Ｖ／ｓ增至０．０５１±０．０２６Ｖ／ｓ（ｎ＝１３,Ｐ＜０．０５）,ＤＡＤ在动作电位后出现的时间提前了３０±４７ｍｓ（ｎ＝１３,Ｐ＜０．０５）。用去甲肾上腺素１．０μｍｏｌ／Ｌ增强ＤＡＤ引起触发活动时,酚妥０拉明１．８μｍｏｌ／Ｌ不能抑制触发活动,普奈洛尔１．０μｍｏｌ／Ｌ能抑制之。上述结果表明α受体激动对ＤＡＤ有轻度增强作用,但由ＤＡＤ引起的触发活动,α受体阻滞剂的抑制作用不如β受体阻滞剂有效。     

比色法测定复合氨基酸注射液中的N-乙酰-L-半胱氨酸

根据Ｎ－乙酰－Ｌ－半胱氨酸与氯化钯（ＰｄＣｌ２）反应,生成一种稳定的黄色化合物,我们建立了比色测定复合结晶氨基酸注射液中的ＮＡＣ的方法。测定波长为３７５ｎｍ,检测结果重现性好,变异系数是３．９％,回收率范围在９３．１％～１００．２％之间,检测下限为０．１６３μｇ／ｍｌ。该方法比经典的电量滴定法灵敏度高、精确性好,较高压液相色谱法操作简便、费用低。     

巴氏醋杆菌纤维素发酵培养基成分研究

通过试验探索出氏醋杆菌合成醋酸菌纤维素的适宜培养基成分为蛋白胨１．０％,酵母膏０．５％,蔗糖２％,乙醇１％,Ｎａ２ＨＰＯ４　０．２％,ｐＨ６．０;３０℃时静置培养６ｄ,醋酸菌纤维素产量可达９．８５ｇ／Ｌ。     

巴氏醋酸杆菌纤维素合成条件初探

通过试验探索出巴氏醋酸杆菌在蛋白胨１．０％、酵母浸膏０．５％、蔗糖２．０％、柠檬酸０．１１５％,乙醇１％、Ｎａ２ＨＰＯ４０．５％,ｐＨ６．０培养基中,合成纤维素的最佳条件：３０℃,静置培养６ｄ,细菌纤维素最大产量可达９．８５ｇ／Ｌ。     

阿的平对热环境中行军战士血液某些生化指标的影响

利用比色法、竞争性蛋白结合技术及放射性免疫分析法,分析热环境中负重行军战士血液乳酸含量、ｃＡＭＰ、ｃＧＭＰ及皮质醇含量,以探讨热应激过程中机体的生化变化特点,并观察阿的平对这些变化的影响。结果表明：行军后战士血液乳酸浓度、皮质醇含量（２．０８±０．１８ｍｍｏｌ／Ｌ、１６．２５±１．０５μｇ／１００ｍＬ）较行军前（１．６２±０．１６ｍｍｏｌ／Ｌ、１４．９８±０．９μｇ／１００ｍＬ）明显升高,而行军后血浆ｃＡＭＰ浓度（１８．８±３．９ｐｍｏｌ／ｍＬ）则较行军前（３２．９±６．０ｐｍｏｌ／ｍＬ）显著降低,ｃＧＭＰ在行军前后无明显变化;行军前预服阿的平,具有减弱或逆转上述变化的作用。     

乙型肝炎血源疫苗皮内接种4年效果观察

为了解乙型肝炎血源疫苗皮内接种的持久效果,选ＨＢｓＡｇ、抗－ＨＢｓ和抗－ＨＢｃ均（－）的９～１１岁儿童１０３名,随机分成４组,分别皮内接种１μｇ×４和３μｇ×４（均按０,１,２,５月程序）和肌肉接种１０μｇ×３和３０μｇ×３（各按０,１,２月程序）。首针后４８月时,１μｇ、３μｇ、１０μｇ和３０μｇ组抗－ＨＢｓ≥１０ｍＩＵ／ｍＩ者各为６９．２％,８０．０％、９２．３％和８１．８％;ＧＭＴ则为１４．５,７９．０,４４．８和７０．９ｍＩＵ／ｍｌ,３μｇ×４皮内免疫的近期和远期效果与肌肉组３０μｇ×３相似,宜于某些人群采用     

呋喃那斯对暴发性鱼病的防治方法研究

呋喃那斯对暴发性鱼病的ＢＳＫ－１０菌株的最低抑制浓度为０．０１９ｍｇ／Ｌ,比呋喃唑酮的用量低３２倍。用０．２和０．５ｍｇ／Ｌ浸泡药浴病鱼的治愈率为９０％和１００％;５０ｍｇ／Ｌ呋喃唑酮的治愈率为０。１０ｍｇ／Ｌ和２０ｍｇ／Ｌ药浴１０分种的死鱼时间比５０ｍｇ／Ｌ呋喃唑酮迟１天。以０．５和４．０μｇ／ｇ腹腔注射给药的防治效果也优于同剂量的呋喃唑酮。对鲢以１００ｍｇ／Ｌ药浴２小时或白鲫ｉｐ６００ｍｇ／ｋ     

陆地棉胚性愈伤组织原生质体的制备,培养及植株再生

以陆地棉栽培品种“鲁棉６号”下胚轴的胚性愈伤组织为材料,制备并培养原生质体。采用继代培养７￣９ｄ、活力旺盛的胚性愈伤组织,在１％纤维素酶、１％果胶酶、０．７ｍｍｏｌ／Ｌ ＫＨ２ＰＯ４、２．５ｍｍｏｌ／Ｌ Ｃａ＾２＋、０．５ｍｏｌ／Ｌ甘露醇、ｐＨ５．８、３０℃的条件下,具活力的原生质体得率最高。经分离纯化后,原生质体在含有０．４５ｍｏｌ／Ｌ葡萄糖的Ｋ３无机盐、ＮＴ有机物并附加０．１ｍｇ／Ｌ,２,４－     

内循环气升式生物反应器培养甘草细胞

自行设计研制了７Ｌ,９Ｌ及２５Ｌ内循环气升式生物反应器,并应用于甘草细胞的放大培养研究。在接种量为８％（Ｗ／Ｖ）通气率为０．２—０．２５ｖｖｍ的条件下,甘草细胞在反应器中生长迅速。其中在９Ｌ反应器中生长最好,最高生物量达１６．２５ｇ／Ｌ,生长速率达０．９ｇ／Ｌ．ｄ,均高于摇瓶培养。培养过程中ｐＨ值、溶氧状况通过电极自动显示记录,说明设计的气升式生物反应器适合于甘草细胞的大规模培养。     

常用口服营养液中游离氨基酸的测定与分析

我科实验室于９５年对全国市售的８种富含氨基酸成份的口服液进行了游离氨基酸测定,结果显示：１号液总量为８８９０．９８μｍｏｌ／Ｌ,支／芳比值３．６６;２号液总量为４２９５．９６μｍｏｌ／Ｌ,支／芳比值２．９９;３号液总量为１０４４５．８８μｍｏｌ／Ｌ,支／芳比值３．１０;４号液总量为２５８２０．５μｍｏｌ／Ｌ,支／芳比值２．８１;５号液总量为５５３．５μｍｏｌ／Ｌ,支／芳比值３．７０;６号液总量为１１６８．５６μｍｏｌ／Ｌ,支／芳比值１．３８;７号液总量为３３９１．７１μｍｏｌ／Ｌ,支／芳比值２．４９;８号液总量为２８５１．１４μｍｏｌ／Ｌ,支／芳比值０．２２。正常人血清中游离氨基酸总量为２９６２．８μｍｏｌ／Ｌ,支／芳比值３．２７±０．５８。     

硬粒小麦单倍体原生质体培养及植株再生

由硬粒小麦（Ｔｒｉｔｉｃｕｍ ｄｕｒｕｍ Ｄｅｓｆ．）×玉米（Ｚｅａ ｍａｙｓＬ．）建立的单倍性胚性愈伤组织,在继代培养４ 个月后置于含２．０ ｍ ｇ／Ｌ２,４－Ｄ、３％ 蔗糖、２００ ｍ ｇ／Ｌ水解酪蛋白、１４６ ｍ ｇ／Ｌ谷氨酰胺和３００ ｍ ｇ／Ｌ天冬氨酸的ＭＳ液体培养基中进行悬浮培养,４ 个月后形成了生长迅速、由大小不同（０．５ ～５ ｍ ｍ ）的愈伤组织块组成的愈伤组织悬浮系。酶解试验表明,２．０％ 纤维素酶ＲＳ和０．５％ 的离析酶效果最好,而液体悬浮培养物和固体培养的愈伤组织（在酶解时用锋利的解剖刀片切成１ ｍ ｍ 左右的小块）都能释放出大量原生质体,但悬浮培养物释放出的原生质体状态较好,胞质更浓厚,用ＫＭ８ｐ 培养基以琼脂糖包埋培养方式培养时分裂频率可达５％ 左右。由原生质体再生的小愈伤组织经增殖、筛选后可获得胚性愈伤组织,将其转移至分化培养基Ⅰ（０．２ ｍ ｇ／Ｌ ２,４－Ｄ、１．０ ｍ ｇ／Ｌ ＢＡＰ、０．１ ｍ ｇ／ＬＮＡＡ、３％ 蔗糖、２００ ｍ ｇ／Ｌ 水解酪蛋白、１４６ ｍ ｇ／Ｌ谷氨酰胺和３００ ｍ ｇ／Ｌ天冬氨酸的ＭＳ固体培养基）和Ⅱ（不含２,４－Ｄ,其它成分同Ⅰ）上进行分步分化培养可再生出完整植株,分化频率约为２０％     

血清岩藻糖测定方法学研究

本文对血清岩藻糖测定方法进行了系统研究。血清用量由２００μＬ减至５０μＬ,显色反应４ｈ内稳定。吸收峰在３９６ｎｍ。岩藻糖浓度４０μｇ／ｍＬ内线性良好,批间ＣＶ＝２．１％。以Ｓｅｐｈａｄｅｘ－Ｇ２００层析,血清岩藻糖主要存在于分子量为５００ｋＤ的组分中。以本法测得３０例健康人血清岩藻糖浓度为５８８．１±１７２．０μｍｏｌ／Ｌ。     

绿豆苯丙氨酸解氨酶的性质及抗肿瘤作用研究

本文参照Ｈａｖｉｒ的方法,从绿豆中分离纯化了苯丙氨酸解氨酶（ＰＡＬ）。纯化的ＰＡＬ经ＳＤＳ聚丙烯酰胺凝胶电泳及等电聚焦电泳鉴定为单一的蛋白质区带,并测得亚基分子量为７６ＫＤ,等电点为５．４５。在ＰＡＬ对Ｌ１２１０小鼠淋巴细胞白血病细胞株的体外抑制实验观察到：ＰＡＬ对该瘤株的抑制作用随作用时间的延长和药物剂量的增加而增强,０．２Ｕ／ｍｌ、１．０Ｕ／ｍｌ、２．０Ｕ／ｍｌ、４．０Ｕ／ｍｌ、６．０Ｕ／ｍｌ、１０．０Ｕ／ｍｌ的ＰＡＬ作用癌细胞７２ｈ,其抑制率分别为２５．８％、４０．０％、５５．３％、７２．６％、７７．９％、８２．９％。