对经rDNA重组的微生物进行田间试验获得批准

美国环境保护局(EPA)首次批准将一种活的经遗传操作的微生物释放到环境中去。Advanced Genetic Sciences公司(简称AGS,奥克兰,加利福尼亚)要求对所设计的两种经遗传改变了的细菌进行小规模的田间试验以防止草莓受冻害,这一要求得到了批准。这两种细菌菌株,即丁香假单胞菌(Pseudomonas syringae)和同类的荧光假单胞菌(Pseudomonks fluorescens),看来似乎能保护植物表面免遭冻害。AGS公司利用遗传操作产生一种没有冰的细菌(一种天然存在的细菌菌株),这种菌缺少一些为一种成冰核蛋白(存在于有冰细菌中)编码的遗传物质。在植物上天然存在的这两种细菌中,有冰细菌占群体的99.9％,     

采用转导和重组DNA技术构建粘质沙雷氏菌的氨基酸高产菌株

<正> 粘质沙雷氏菌是一种兼性厌氧革兰氏阴性杆状肠道细菌。该细菌产生一种红色色素灵菌红素,且在普通的天然环境中出现。自1960年起田边制药公司采用野生型菌株和突变株工业生产氨基酸。此微生物的优点是:1)糖同化活性高;2)在简易培养基上生长快,细胞产量高;3)用大肠杆菌获得的生化、生理和遗传发现适用于用粘质沙雷氏菌构建菌株,因为两者均属于肠杆菌科;     

具有群体感应抑制活性的海洋细菌的筛选

【目的】从海洋环境中筛选出能有效抑制细菌群体感应的活性菌株,为以致病菌群体感应为靶点的新型疗法提供新的天然产物资源。【方法】以紫色杆菌(Chromobacteriumviolaceum)为报告菌,采用滤纸片法和双层软琼脂法相结合的筛选模型进行群体感应抑制活性菌的筛选。【结果】通过对美国圣璜岛海域海绵中分离出来的272株海洋细菌群体感应抑制活性的筛选,得到了具有抑制紫色杆菌素产生的细菌51株,其中74号菌株抑制效果最好,具有进一步研究的价值。【结论】海洋细菌中有很多具有抑制细菌群体感应效应的菌株,是天然群体感应抑制剂的潜在来源。     

基于细菌裂解酶的功能性生物材料及其应用

抗生素的广泛使用引起了耐药细菌的大量出现和传播,严重危害公共健康。细菌裂解酶作为一类天然存在的细菌细胞壁水解酶,对普通细菌及其耐药菌株具有高效、高特异性(选择性)的抗菌性能,被视为抗生素的一种潜在替代品。将细菌裂解酶的底物识别特异性或者选择性杀菌特性与某些材料结合,通过酶固定化的方法,可形成具有特定功能的生物材料,以选择性地识别或杀灭特定细菌。本文中,笔者综述基于细菌裂解酶的功能性生物材料的开发及其在食品、医药卫生等行业中的应用。     

放线共生放线杆菌粗糙型与光滑型菌落的主要外膜蛋白

目的：观察放线共生放线杆菌粗糙型与光滑型菌株菌体蛋白表达上的差异。方法：聚丙稀酶胺凝胶电泳观察两型细菌全细胞蛋白及超高速离心提取的细菌主要外膜蛋白差异。结果：全细胞蛋白电泳两型细菌蛋白带无明显差异;提取的主要外膜蛋白电泳粗糙型存在18、29、45kDa蛋白带,实验室参考菌株不存在,临床光滑型菌株存在少量,光滑型实验室参考菌株存在的蛋白带在所有实验菌株中均存在。结论：18、29、45kDa蛋白带可能与放线共生放线杆菌粗糙型菌株相关。     

生物防治因子

<正>对减少细菌引起的柔嫩植物冻害的策略进行了考察。有竞争力的草生欧文氏菌M23的采用并不降低番茄嫩茎的受害温度。番茄植株用0.5ml的草生欧文氏菌M232A培养液处理,24小时后用INA菌株接种处理,然后将植株进行24小时冰冻试验     

重组体的野外试验

美国威斯康星大学麦迪逊分校的研究组打算在栽培季节进行重组植物和细菌的野外试验. Eric Triplett试验带有细菌素基因的根瘤菌.这种菌与紫苜蓿根共生,由空气固定氮,供紫苜蓿作氮源.本实验的目的是评价作为抗生物质的细菌素是否可使根瘤菌对其他土壤微生物具有优势. 植物病理学部Susan Hirano等研究组对附着在豆荚上的产茶色斑点的细菌实施基因操作,培育非病原性菌株.通过对非病原性细菌株与天然的病原性细菌比较,调查致病力对细     

固氮作用

<正> pRL是在R.leguminosarum248菌株中天然出现的质粒。它载有结瘤固氮作用,转移、产生细菌素和对介质中的细菌素免疫性,小细菌素抑制,产生和对其敏感性的基因。pRLI::Tn5与pRLI的特性相同,除此,由于Tn5易位子而抗卡那霉素。     

光合细菌H3菌株色素分析

H3菌株系由盐田微生物层中分离获得的光合细菌株。具有丰富的天然色素。经活细胞色素光谱吸收峰值测定,色素经有机溶剂提取、硅胶薄板层析、SDS－PAGE电泳等,结果表明H3菌株的主要色素包括细菌叶绿素a、细菌脱镁叶绿素（Bacteriophaeophytin）和三种类胡萝卜素。总胡萝卜素含量占细胞于重的0．6％,胡萝卜素蛋白复合体的分子量约11,000.培养条件的差异对色素形成及相对含量有不同程度的影响。     

作物遗传学公司获准开始重组杀虫菌田间试验

在经过了大量的宣传工作后,国际作物遗传学公司(Crops Genetics International)在今年五月二十四日宣布,它已获得美国环境保护署(EPA)的批准,允许它开始进行重组 DNA 杀虫菌的田间试验。与高级遗传系统公司的重组 DNA 抗冻害细菌的的批准情形不同,那次拖了好几年,而这次审批得相当快而且反对意见很少。这是不是预示着今后进行重组DNA微生物田间试验的申请都将很快获得批准并不再会遇到什么反对呢?这还很难断定。因为首先,这家公司所用的基因工程菌是一种寄生菌,即一种只能在植物体内生存的细菌。这就不同于能在经处理的植物体外存活的细菌。另外,这种细菌并不是喷施也不是施加到整     

用重组DNA技术大量生产尼龙66原材料

日本Asahi化学工业有限公司研制了一种rDNA细菌以大量生产己二酸,该酸是尼龙66的原材料,其前体环已醇是氧化节杆菌细菌的天然代谢产物. 反应涉及到四种酶,包括6-羟基己酸脱氢酶(HCADH),但在氧化节杆菌细菌中此HCADH量太低以至于不适于大量生产.Asahi公司通过对编码HCADH的基因修饰解决了此问题,从而使细菌产生了一种经过修饰的HCADH,在322位由异亮氨酸替代缬氨酸.这种经过修饰的HCADH比天然HCADH更有活性,且稳定性亦强两倍.当应用于生物反应器时,此改良细菌能显著提高环己醇向己酸的转化率.尽管该技术是非常成功的,但该公司尚未立即计划从目前Nobeoka工厂己酸生产转向别的方向.     

具有群体感应抑制活性海洋放线菌的筛选与鉴定

目的:从海洋放线菌中筛选得到具有群体感应抑制活性菌株,并对其进行鉴定。方法:利用紫色杆菌CV026指示菌株对放线菌发酵粗提物进行活性筛选。其次通过16Sr DNA序列比对进行菌种鉴定。结果:其发酵提取物经紫色杆菌CV026模型筛选后,发现放线菌J501提取物具有群体感应抑制活性,且在有效浓度时对细菌的生长没有影响。16Sr DNA分析表明J501属于Streptomyces属。结论:海洋放线菌中有具有抑制细菌群体感应效应的菌株,是天然群体感应抑制剂的潜在来源。     

细菌素的研究与应用进展

随着食品安全问题日益受到国际社会的重视,以食品腐败/致病菌为靶点的细菌素应用受到了广泛关注.细菌素作为安全的天然防腐剂,可通过成孔、抑制细胞壁/核酸/蛋白质合成等不同的作用方式有效地抵抗食源性病原体.然而,抗细菌素突变菌株的出现和传播正阻碍着食品安全,越来越多的人开始注意食源性病原体对细菌素的耐药性现象,这将有助于人们...     

生物技术可解决猪粪污染和饲养问题

和大多数工业国一样,荷兰也面临严重的污染问题。然而,导致问题发生的主要原因却不是工业,而是农业——即从猪和牛粪中挥发出的氨气。问题已变得如此严重,荷兰政府正准备拟定法规,来制止粪肥的产生。现在,Gist-Brocades(Delft,Netherlands)公司提出了解决这一问题的办法。即利用遗传改良细菌菌株把猪粪中所有的氨转换成氨基酸赖氨酸,然后,再用此氨基酸喂猪。该公司于1986年就已开始了寻找能把粪肥中的氨有效转变成赖氨酸的细菌菌株的工作,然后通过辐射     

产甲烷细菌的超微结构

用透射电子显微镜和扫描电子显散镜观察了7株产甲烷细菌的形态和细胞细微结构。这7株产甲烷细菌分别是嗜热自养甲烷杆菌CB一12菌株,布氏甲烷杆菌CS菌株、史氏甲烷短杆菌H一13菌株、索氏甲烷丝菌CT菌株、甲烷八叠球菌TH菌株、嗜热甲烷八叠球菌CB-8菌株、甲烷球菌。讨论了7株产甲烷细菌细胞壁结构的差异,产甲烷杆菌的细胞质内膜结构与其产能代谢的关系。     

番茄灰霉病内生拮抗细菌的分离筛选初报

采用常规法对番茄植株进行内生细菌的分离 ,结果表明 ,不同品种不同生长时期 ,内生细菌的数量有所不同 ;同一品种不同生长时期不同部位 ,内生细菌的数量也存在变化。在所分离的 96个菌株中 ,有 7个菌株对番茄灰霉病有拮抗性 ,其中菌株x 9和x 1 5的拮抗效果较为明显 ,对番茄灰霉病防病效果达到 40 %和2 5 %。此 7个菌株对番茄植株无致病性 ,且对番茄苗无明显促生长作用。     

土壤样品中粘细菌的分离鉴定及其生物活性检测

【目的】从土壤样品中分离粘细菌,对其进行纯化、归类与鉴定,以丰富粘细菌菌种资源;对纯化得到的粘细菌进行抑菌、杀虫及抗肿瘤生物活性的分析,为粘细菌次级代谢产物的开发奠定基础。【方法】采用灭活大肠杆菌和滤纸片诱导子实体法从土样中分离粘细菌,结合形态观察、生理生化特征和16S r DNA基因序列同源性分析,对分离到的各菌株进行鉴定并归类。通过平板扩散法、昆虫口服毒性测试、肿瘤细胞毒性实验等方法,检测粘细菌代谢产物生物活性。【结果】共分离得到35株粘细菌,初步分类为:粘球菌属(Myxococcus)9株;珊瑚球菌属(Corallococcus)9株;侏囊菌属(Nannocystis)11株;堆囊菌属(Sorangium)6株。从其中纯化得到8株粘细菌,对其进行了鉴定并命名。发现了具有高效且广谱的肿瘤细胞毒性效应菌株S22,S51和S55也具同样的细胞毒性;另外,还发现具有肿瘤细胞毒性的菌株S20和S22对枯草芽胞杆菌和白色念珠菌也具有较好的抑菌活性。【结论】土壤中存在丰富的粘细菌资源,发现了具有肿瘤细胞毒性的弱小珊瑚球菌与具有抑菌和强抗肿瘤活性的大孢珊瑚球菌,粘细菌是活性天然产物与新药开发的重要资源。     

微生物暗物质分离培养——以CPR和DPANN类群为例

候选门级辐射类群(candidate phyla radiation, CPR)细菌和DPANN超门古菌是重要的微生物暗物质，约占地球细菌和古菌多样性的一半。目前对于CPR和DPANN的研究处于起步阶段，仅获得了少数的实验室培养菌株，代表着丰富的菌种资源和基因资源的潜力；同时其生态功能还未知，预示着未来新发现的巨大机遇。本文在总结现有微生物分离培养方法以及CPR和DPANN菌株共性特征的基础上，对已实现实验室培养的CPR和DPANN菌株进行归纳和分析，提出该类群菌株分离培养的几点建议，以期为今后对该类群菌株的分离培养提供参考。CPR细菌和DPANN古菌的可培养研究有助于加深对该类群菌的认识，阐明其生活方式、进化及演变规律并揭示其独特的代谢途径及功能基因，发现新的天然活性产物，具有重要的科学意义及应用价值。     

细菌纤维素的合成与调控进展

细菌纤维素是1种天然的高纯度生物多聚物,与木质纤维素相比,其生产和加工过程更为方便和环保,因此已成为1种极有潜力的生物材料。葡糖酸醋杆菌是目前已知的产纤维素能力最高的菌株。综述了葡糖酸醋杆菌的细菌纤维素合成和调控机制以及为提高产量所进行的基因工程手段和培养方法。     

泽普油田石油降解功能菌株的分离与鉴定

目的:在研究泽普油田产区菌株多态性的基础上,对石油降解功能菌株进行探讨。方法:通过稀释平板涂布法分离微生物;采用TLC和HPLC方法对分离菌株进行多糖成分鉴定,并进行16S rRNA和18S rRNA序列分析;采用溶血圈实验、排油圈法、石油黏度测定等方法,测定石油降解菌株降解能力。结果:分离菌株中有5株细菌和4株真菌,且菌株多糖的TLC分析结果与形态学鉴定结果基本相同;5株分离细菌中,2株细菌隶属于Bacillus属,3株细菌隶属于Enterobacter。另外4株真菌被鉴定为隶属于Penicillium属;分离菌株B2能降解石油。结论:泽普油田石油产区微生物的群落中存在一定丰度的细菌和真菌,含有B2的原油发酵液黏度为0.67±0.20 mPa.s.和原油在0.05水平上有显著性差异。推断B2对石油具有一定的降解能力。