病毒分离和PCR-RFLP法对急性结膜炎标本中腺病毒感染及其型别的分析

目的分析2003年下半年收集的哈尔滨医科大学第一临床医学院急性结膜炎标本中的腺病毒(Adenovirus,AdV)感染情况及其型别。方法采集59例临床确诊为急性结膜炎患者的结膜拭子标本,在观察和分析接种细胞的病变(CPE)情况的基础上,采用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性分析(PCR—RFLP)法,特异性检测CPE阳性细胞中腺病毒核酸的存在情况,并对PCR阳性扩增产物进行病毒型别的分析。结果70．7％(41／59)的急性结膜炎标本接种于培养细胞后可以引起明显的CPE;其中,53．6％(22／41)的CPE阳性标本可以扩增出腺病毒核酸,RFLP分析证实68．18％(15／22)的腺病毒感染为Ad3型,31．82％(7／22)的腺病毒感染为Ad7。结论2003年下半年哈尔滨市急性结膜炎主要以腺病毒3、7型感染为主。提示结合病毒分离培养和PCR—RFLP方法,可以广泛应用于急性结膜炎相关的病毒感染及其型别的进一步分析与研究。     

16S DNA用于结核性胸膜炎的快速诊断

目的建立聚合酶链反应—毛细管电泳（PCR-CE）的方法直接检测结核性胸膜炎患者胸水中的结核分枝杆菌,以达到快速诊断结核性胸膜炎的目的。方法在大连市结核病医院收集2006年11月至2007年2月结核性胸膜炎患者的胸水120份,所有标本都经过结核分枝杆菌抗酸染色镜检和结合菌培养,其中115份为阴性标本,5份为阳性标本。利用16S DNA集保守性和变异性于一体的特点,设计合成通用引物G1：5′-FAM-GGC GGACGG GTG AGTAA-3′,G2：5′-ROX-GGA CTG CTG CCTCCC GTA G-3′,然后将标本进行DNA提取并进行PCR扩增,扩增产物用限制性内切酶HaeⅢ消化,用毛细管电泳来检测结核分枝杆菌。结果115份阴性标本中检测出结核分枝杆菌的有19份,未检测出结核分枝杆菌的有96份,其阳性率为16.52%;5份阳性标本中检测出结核分枝杆菌的有5份,阳性率为100%。结论PCR-CE方法检测结核分枝杆菌具有快速、准确、灵敏的特点,可用于结核性胸膜炎的快速诊断。     

婴幼儿腹泻病原学及其快速诊断

目的探讨小儿腹泻标本病原学特点及流行病学特征,寻求小儿感染性腹泻的快速诊断方法。方法对我院2003年10月至2005年9月门诊及住院的1160例2个月-5岁腹泻患儿的腹泻标本进行细菌学检查及pH检测。结果(1)1160例患儿腹泻标本病原学阳性605例(52.16%),检出病原20种621株,外源性肠道病原菌、内源性肠道条件致病菌以及轮状病毒3种病原构成比依次为35.75%、32.69%、31.56%。主要病原:(1)轮状病毒196株(31.56%),志贺菌118株(19.00%),克雷伯菌86株(13.8%),枸橼酸杆菌67株(10.79%),致泻性大肠埃希菌60株(9.66%)。(2)1160例患儿腹泻标本6个月-2岁患儿占881例(69.91%)。轮状病毒腹泻多发于秋冬季、大便为水样、多见于2岁以内婴幼儿,志贺菌以夏秋季与脓血便检出率较高。(3)病原菌分离阳性腹泻标本pH>7占明显优势,轮状病毒阳性标本、病原检查阴性标本、健康体检对照标本pH<6占明显优势,前者pH与后三者pH统计学比较,差异有高度显著性(P<0.01)。结论引起小儿腹泻的病原种类繁多,轮状病毒居首位,内源性肠道条件致病菌在腹泻标本中的构成比已接近外源性肠道致病菌而成为腹泻的重要病原菌,大便pH可作为急性腹泻病早期简单、快速、准确、价廉的初步诊断及合理应用抗生素的重要指标。     

潍坊市小儿腹泻状况分析

为了掌握潍坊市冬、秋季节婴幼儿腹泻的病因,在2008年10月1日~12月9日期间,对城内四所市级医疗机构的门诊和住院腹泻病人进行了统计,对住院腹泻病人采样作了检测,并对其进行分析。结果显示,潍坊市秋冬季腹泻患者主要由轮状病毒所引起,接种轮状病毒疫苗可有效预防轮状病毒腹泻。     

阿泰宁治疗冷凉、喝酒性腹泻35例疗效观察

目的观察和评价阿泰宁（酪酸梭菌CGMCC0313．1制剂）治疗冷凉、喝酒性腹泻的临床疗效。方法选择受凉、吃凉食和喝酒后就腹泻的患者,口服阿泰宁胶囊,一次3粒,一天2～3次,疗程14～60d。治疗期间观察患者的临床症状、服药情况,治疗结束后评价药物的疗效。结果35例冷凉、喝酒性腹泻患者治疗后腹泻、腹痛和腹部不适等症状有显著的改善（P〈0．01或P〈0．001）;治愈率为97．14％（34／35）,总有效率为100％（35／35）,治疗中未见不良反应或副作用。结论阿泰宁治疗冷凉、喝酒性腹泻疗效显著。     

Enteropathogens associated with acute diarrhea in community and hospital patients in Jakarta,Indonesia

The prevalence of bacteria, parasite and viral pathogens in 3875 patients with diarrhea in community and hospital settings from March 1997 through August 1999 in Jakarta, Indonesia was determined using routine bacteriology and molecular assay techniques. Bacterial pathogens isolated from hospital patients were, in decreasing frequency, Vibrio cholerae O1, Shigella flexneri, Salmonella spp. and Campylobacter jejuni, while S. flexneri, V. cholerae O1, Salmonella spp. and C. jejuni were isolated from the community patients. V. cholerae O1 was isolated more frequently (P<0.005) from the hospital patients than the community patients. Overall, bacterial pathogens were isolated from 538 of 3875 (14%) enrolled cases of diarrhea. Enterotoxigenic Escherichia coli were detected in 218 (18%) of 1244 rectal swabs. A small percentage of enterohemorrhagic E. coli (1%) and of Clostridium difficile (1.3%) was detected. Parasitic examination of 389 samples resulted in 43 (11%) positives comprising Ascaris lumbricoides (1.5%), Blastocystis hominis (5.7%), Giardia lamblia (0.8%), Trichuris trichiura (2.1%) and Endolimax nana (0.5%). Rotavirus (37.5%), adenovirus (3.3%) and Norwalk-like virus (17.6%) were also detected. Antimicrobial resistance was observed among some isolates. Bacterial isolates were susceptible to quinolones, with the exception of some isolates of C. jejuni which were resistant to ciprofloxacin, nalidixic acid and norfloxacin. Data obtained from this community- and hospital-based study will enable the Indonesian Ministry of Health to plan relevant studies on diarrheal diseases in the archipelago.     

人腺病毒B、D亚种基因组中简单重复序列分析

本文以人腺病毒B亚种31条基因组序列及D亚种39条基因组序列为研究材料,利用ImperfectMicrosatelliteExtractor和DNAMAN软件对这些基因组序列中简单重复序列(SSR)的分布情况进行了系统性分析和比较。分析结果显示:人腺病毒B、D亚种基因组中简单重复序列的平均相对密度是十分接近的,但在不同类型SSR中分布情况又有所不同。D亚种中二型SSR明显高于B亚种,在两亚种一型SSR中(A)n、(T)n都是比较多的,而在两亚种二型SSR中的(CG/GC)n表现出了较高的偏好性。在同亚种多序列比对分析中,D亚种表现出了更高的稳定性。B、D亚种中SSR的这种特异性分布可能与它们的进化机制和致病性有关。     

Bacterial, viral and parasitic enteric pathogens associated with acute diarrhea in hospitalized children from northern Jordan

To determine the etiology of acute diarrhea in Jordanian children under 5 years of age, we examined stool samples from 265 children admitted to the pediatric ward at Princess Rahma Hospital for Children, Irbid, Jordan, for parasites, rotavirus and enteric bacteria. Using both traditional and molecular diagnostic techniques, we detected enteropathogens in 66.4% of patients with diarrhea. A single enteric pathogen was detected in 50.9% of the children, and multiple pathogens were detected in 15.5%. The prevalence of enteropathogens identified was as follows: rotavirus (32.5%), enteropathogenic Escherichia coli (12.8%), enteroaggregative E. coli (10.2), enterotoxigenic E. coli (5.7%), Shigella spp. (4.9%), Entamoeba histolytica (4.9%), Salmonella spp. (4.5%), Campylobacter jejuni/coli (1.5%), Cryptosporidium spp. (1.5%), enteroinvasive E. coli (1.5%), eae-, Ehly-positive E. coli (0.8%), Giardia lamblia (0. 8%) and Yersinia enterocolitica (0.4%). No Vibrio cholerae, Shiga toxin-producing E. coli, microsporidia, adenovirus or small round virus were detected. Findings from this study demonstrate that rotavirus and several types of diarrheagenic E. coli, which are not screened for during routine examinations of stool samples in public health laboratories, were the most frequently detected enteropathogens in these children. Our findings highlight the value of using a combination of traditional and molecular techniques in the diagnosis of diarrheal disease in this population.     

新生儿肠道双歧杆菌数量影响因素与其婴儿期腹泻关系

目的探讨新生儿肠道双歧杆菌数量的相关影响因素,并明确它们与婴儿期腹泻的关系。方法以120例新生儿为研究对象,生后5-7 d均做大便双歧杆菌定量培养,并做相关因素的准确登记,同时严密观察随访至1岁,准确记录其发生腹泻情况。结果母亲分娩方式、临产期及产后是否使用抗生素、母亲妊娠期饮食习惯以及新生儿黄疸期长短与新生儿肠道双歧杆菌数量有相关性。新生儿黄疸期长、母亲临产期及产后使用抗生素均是婴儿腹泻的危险因素;阴道分娩、母亲喜发酵制品及喜素食均是婴儿腹泻的保护因素。结论为避免导致新生儿肠道双歧杆菌数量不足的影响因素,提倡阴道分娩、临产期及产后不用抗生素、妊娠期多食发酵制品和素食,并尽量设法缩短新生儿黄疸时间,以减少婴儿腹泻的发生。     

婴幼儿腹泻轮状病毒和腺病毒检测结果分析

目的了解本地区婴幼儿腹泻患者中轮状病毒和腺病毒的感染情况,为临床治疗提供依据。方法收集2013年1月-12月门诊和住院腹泻患儿的粪便,进行轮状病毒和腺病毒抗原检测,并对结果进行统计学分析。结果在检测的2 579例婴幼儿腹泻中轮状病毒阳性为616例,阳性率为23.89%,高发季节为1月、11月和12月,高发年龄组为13-24月婴幼儿,腺病毒阳性共102例,阳性率为3.96%,程散发状况,高发年龄组为7-12月的婴幼儿。结论轮状病毒和腺病毒都能引起婴幼儿腹泻,但是轮状病毒为最主要的病原体,及时检测轮状病毒抗原,为临床治疗和疾病监测提供参考。     

儿童细菌性腹泻病原菌分布及耐药性分析

目的 了解小儿细菌性腹泻的病原菌分布及耐药情况。方法 对773例临床上疑为细菌性腹泻病的患儿的粪便标本进行培养、鉴定及药物敏感试验、超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）检测。结果 773例标本中分离出阳性菌株671株,总检出率为86．6％。其中埃希菌属、志贺菌属及耶尔森菌3种致病性细菌占阳性菌株的54．5％,肠杆菌属、非发酵菌群、酵母样真菌、肠球菌属、变形杆菌属、克雷伯菌属和枸橼酸杆菌属等条件致病菌占阳性菌株的45．5％。埃希菌属及志贺菌属对头孢他啶及氨曲南耐药率低（16．4％以下）,而肠杆菌属等条件致病菌对常用抗生素耐药率均较高。G^-杆菌中ESBLs的检出率为38．3％,其中大肠埃希菌占66．7％。结论 埃希菌属是儿童细菌性腹泻病的主要致病菌（50．2％）,且耐药率及ESBLs产生率高,但肠杆菌属等条件致病菌检出率也较高（45．5％）,且耐药率高,可能与抗生素广泛使用,肠杆菌群失调有关,应引起高度重视。     

腹泻及其微生态防治的相关进展

益生菌可能对不同病因引起的不同类型的腹泻有预防的疗效.已经成功的通过调查各种各样的益生菌和确立益生菌性质来证明其对健康的益处和预防、治疗(或缓和)腹泻的作用.其它有益生作用的微生物、某些双歧杆菌、肠球菌以及益生菌酵母菌属的酵母菌作为单个株或复合益生菌在其药用方面的价值也得到肯定.本文主要综述了益生菌在腹泻方面的治疗作用和机制.