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纳豆激酶酶原基因和纳豆激酶基因的克隆及在大肠杆菌中表达 总被引:5,自引:0,他引:5
目的:构建可高效生产有活性的纳豆激酶的大肠杆菌工程菌。方法:将纳豆激酶酶原(pro-nattokinase,pro-NK)基因和纳豆激酶(natokinase,NK)基因,并分别克隆到表达融合蛋白的高效表达载体pJN上,构建出表达质粒pJNK1和pJNK2,并转化大肠杆菌BL21(DE3)。结果:IPTG诱导下,两个融合蛋白的表达量均达到30%,活性检测显示表达纳豆激酶酶原融合蛋白的菌株pJNK-1(BL)诱导后菌体破碎上清的溶栓活性比表达纳豆激酶融合蛋白的菌株pJNK-2(BL)高2-3倍,结论:纳豆激酶酶原融合蛋白部分自减切产生纳豆激酶成熟肽。 相似文献
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纳豆激酶 总被引:22,自引:0,他引:22
纳豆激酶 (nattokinase)是一种枯草杆菌蛋白激酶 ,是在纳豆发酵过程中由纳豆枯草杆菌 (Bacillussubtilis/natto)产生的一种丝氨酸蛋白酶。 1 987年由日本的须见洋行等首先发现[1~ 3] 。研究发现 ,纳豆激酶具有纤溶活性 ,可治疗和预防血栓病 ,它还可激活体内的纤溶酶原 ,从而增加内源性纤溶酶的量与作用[4] 。目前常用的及一些还在开发的治疗心脑血管栓塞疾病的药品 ,如链激酶 (strep tokinase ,SK)、尿激酶 (urokinase ,UK)、重组组织型纤溶酶原激活剂 (recombinant… 相似文献
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纳豆激酶基因的表达及纯化 总被引:5,自引:0,他引:5
利用PCR方法从分泌纳豆激酶的枯草杆菌基因组DNA中扩增得到纳豆激酶基因(NK),利用基因重组技术构建了纳豆激酶基因的表达载体pETNK。在诱导下,实现了在大肠杆菌中高效表达,经SDS-PAGE电泳分析和薄层扫描结果显示,表达的目的蛋白占菌体蛋白的21.5%。将表达产物经过DEAE-Cellulos-DE52和Sephedax-G100两个柱分离纯化,得到纯的纳豆激酶蛋白干粉,经琼脂糖-纤维蛋白平板法测出纳豆激酶干粉的溶栓活性相当于200u尿激酶。从基因工程角度研究纳豆激酶基因的克隆、表达及纯化,为用基因工程菌生产纳豆激酶奠定了基础。 相似文献
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血管性疾病是疾病谱中最主要的死亡原因之一,血栓栓塞是血管性疾病中的重要组成部分,而目前针对其预防和治疗手段非常有限。纳豆激酶(nattokinase,NK)是从纳豆中提取的活性成分,具有多种对心血管有益作用,如较强的纤溶活性、降压、降脂及抗凝血等。本文综述了纳豆激酶的生化特性、防治心血管疾病的功效及应用前景,通过总结最新文献重点完善了纳豆激酶在心血管疾病方面的药理作用,表明纳豆激酶可以作为预防和治疗血管性疾病的理想膳食补充剂,其药品开发同样前景广阔。 相似文献
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纳豆激酶基因工程研究进展 总被引:4,自引:0,他引:4
纳豆激酶是由纳豆芽孢杆菌(Bacillussubtillisnatto)分泌的一种具有纤溶作用的碱性丝氨酸蛋白酶。对纳豆激酶基因的克隆与表达,基因与蛋白质结构以及基因工程纳豆激酶的特性和功能进行了综述。 相似文献
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微生物木聚糖降解酶研究进展及应用前景 总被引:32,自引:0,他引:32
木聚糖是植物半纤维素的主要成分,它是除纤维素外,自然界中最为丰富的多糖。木聚糖的基本结构单元是由β-1.4或β-1.3糖苷键连接的多聚木糖链,在D-木糖的第二位氧上连接有D-葡萄糖醛酸或4-O-甲基葡萄糖醛酸或在第三位氧上连接有L-阿拉伯呋喃糖。有些木聚糖还在第二或第三位氧上发生乙酰化。不同来源的木聚糖在结构上有一定差异。木聚糖酶是一类木聚糖降解酶系(表1),对降解自然界大量存在的半纤维素起着重要作用。它们不但可以降解木聚糖生成木糖,而且能以农作物残渣中的半纤维素为原料生产经济价值较高的产品。由… 相似文献
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丝状真菌基因工程研究进展 总被引:1,自引:0,他引:1
本文评述了丝状真菌基因工程的研究进展,内容涉及已被转化成功的90余种丝状真菌种类及其所利用的选择标记,比较了几种外源DNA进入丝状真菌受体的方法,并较为详细地评述了丝状真菌复制型与整合型转化及其转化子的有性生殖与无性生殖的遗传稳定性,最后,展望了丝状真菌基因工程在农业、工业和医药方面的应用。表明了丝状真菌基因工程具有广阔的应用前景。 相似文献
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纳豆激酶溶解血栓机制 总被引:19,自引:0,他引:19
根据已有文献报道,综述了关于纳豆激酶溶栓机制的研究进展,将纳豆激酶的溶栓机制归纳为以下四点:直接溶栓作用;刺激血管内皮细胞产生内源tPA;激活体内尿激酶原转变为尿激酶;通过降解和失活纤溶酶原激活剂的抑制剂(PAI1)调控纤溶作用 。 相似文献
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纳豆激酶的纯化及活力测定 总被引:17,自引:0,他引:17
利用SephadexG—100s柱凝胶层析法从纳豆菌(BacillusNatto)提取液中分离纯化出具有体外活性的纳豆激酶,并通过纤维蛋白平板法测定其纤溶活力,发现其具有较强的促进纤维凝块溶解的作用。 相似文献
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Hepcidin是肝脏特异性表达的一种小分子抗菌肽,是铁代谢的负调节激素。与炎症性贫血、遗传性血色沉着病等疾病的发病机制密切相关。证据显示,Hepcidin直接抑制肠上皮细胞铁吸收和诱导单核巨噬细胞铁滞留。同时,Hepcidin还具有广谱抗菌活性,与固有免疫密切相关。铁超载、感染、炎症及细胞因子可诱导Hepcidin表达,而贫血和缺氧则抑制其表达。Hepcidin的发现及其相关的铁离子运输机制的研究,将为铁离子吸收及分配的铁稳态调节和炎症性贫血、遗传性血色沉着病中的铁代谢障碍的分子机制探索开辟新的途径。本文就Hepcidin的分子特征、表达调控及生物学功能等方面研究进展进行综述。 相似文献