稻瘟病菌群体的分子遗传学研究Ⅱ.广东省2000年度稻瘟病菌群体遗传结构的时空特性

利用随机扩增多态性DNA技术对广东省2000年度稻瘟病菌群体的遗传结构进行了分析。以相似性系数为0．62阀值时，可将采集于广东省三大生态稻作区、早稻和晚稻生长季节的104个菌株划分为14个遗传宗谱：其中宗谱5和宗谱8的菌株数各占总数的25％，为优势宗谱；宗谱4和12的菌株数各占总数的14．4％和9．6％，为亚优势宗谱；其余的29个菌株，分别归属于其它10个宗谱，其中有5个宗谱是单菌株宗谱。本年度稻瘟病菌群体的遗传结构呈现明显的区域性特性；遗传结构呈由北向南多样化的趋势；各个稻作区甚或亚区有其特异性的宗谱。本文度稻瘟病菌群体的遗传结构也显示分明的生长季节特性：来源于旱稻和晚稻生长季节的菌株完全分属于宗谱图的上下两个半区，彼此之间不存在共同的宗谱；而且后者的遗传宗谱要比前者的复杂、多样。研究还表明，虽然稻瘟病菌群体的遗传结构2000年度与1998－1999年度的比较存在较大的差异，但是两者仍然具有良好的相承性和可比性。如何进一步验证和把握稻瘟病菌群体的遗传结构所表现出的时空特性是值得我们进一步探讨的重要课题。     

产单核细菌李氏菌毒力因子的分子遗传学研究进展

产单核细菌李氏菌（ＬＭ）是重要的食品卫生污染菌，其毒力由多基因决定。本文就其已发现的产毒基因们点、基因克隆、重组和表达、毒力 调控以及基因产物的功能作一简介 。     

稻瘟病菌群体的分子遗传学研究Ⅲ：广东省2001年度稻瘟病菌群体的遗传结构分析以及两个假说的提出

利用随机扩增多态性DNA技术(random amplified polymorphic DNA,RAPD对广东省2001年度稻瘟病菌群体的遗传结构进行了分析。以相似性系数为0．70阈值时,可将采集于广东省三大生态稻作区、早稻和晚稻生长季节的96个菌株划分为12个遗传宗谱;其中宗谱8和9的菌株数各占总数的25％和18．8％,为优势宗谱。从稻作区来看,宗谱3和8为各个稻作区的共同宗谱;而宗谱1和2,7和11,以及9、10和12则依次是粤北、粤中和粤南稻作区的特异性宗谱。从生长季节来看,来源于早、晚季的菌株完全分属于宗谱图的上、下两个半区,彼此之间不存在共同的宗谱;而且两个优势宗谱都集中于晚季供试亚群体。结合前两次实验的结果,作者提出了如下两个假说来解释广东省稻瘟病菌群体所表现的遗传特性：一个地区或生长季节的病原菌群体,其优势宗谱所占的比例越高,该地区或生长季节病害发生就越严重;在长期的水稻栽培历史中,稻瘟病菌群体可能逐步地形成了早季宗谱(小种)和晚季宗谱(小种)的遗传分化。如何进一步验证上述两个假说是值得我们进一步探讨的重要课题。     

稻瘟病菌无毒基因研究进展

水稻与稻瘟病菌之间的特异互作符合基因对基因假说。本文将从稻瘟病菌与水稻抗病基因间的互作特点、稻瘟病菌的分子标记、已克隆的稻瘟病菌无毒基因三个方面对稻瘟病菌无毒基因研究进展作简要介绍     

稻瘟病菌侵入机理

猪瘟病广泛分布于水稻栽培的国家和地区,几乎每年都可以调查到该病发生,给生产造成严重损失。研究稻瘟病菌与水稻之间相互作用,特别是近年来开展猪瘟病菌致病的分于生物学研究成了一个热点。1病害循环（1）病菌分生抱于尖端的粘胶和孢子发芽使得孢子粘着在寄主表面;（2）芽     

蓝藻分子遗传学十年研究进展

蓝藻遗传学研究始于60年代,其间经历了大约20年的徘徊,随着分子生物学、分子遗传学研究的进展,特别是重组DNA技术的广泛应用,为蓝藻遗传学研究提供了转机和新的洞察力,绕过应用经典遗传学技术方法所遇到的困难,另辟新径,直接分离基因,加速了研究工作的步伐。随着蓝藻本身一些重要而独特的生理特性逐渐为人们所认识,研究者日增,最近十年,蓝藻分子遗传学研究进展迅速,不仅在藻类学研究中处     

稻瘟病菌群体遗传结构的研究进展

稻梨孢引起的稻瘟病是世界水稻生产的最重要病害,严重影响水稻的产量和米质。文中综述了分子标记技术在稻瘟病菌群体遗传结构研究上的应用,分析了病原菌遗传宗谱的特点及其与致病谱的关系,探讨了导致稻瘟病菌群体遗传结构发生变化的相关因素。     

以潮霉素抗性为选择标记的稻瘟病菌原生质体转化

稻瘟病菌对潮霉素（ＨｙｇｒｏｍｙｃｉｎＢ,简写为ＨｍＢ）较为敏感,当不含无机盐的再生培养基中ＨｍＢ浓度达到１００μｇ／ｍｌ时,稻瘟病菌２５３９ｗ原生质体的再生即被完全抑制。我们利用带有ＨｍＢ抗性基因的质粒（ｐＡＮ７－１）,通过ＰＥＧ②融合法对其原生质体进行转化,获得了ＨｍＢ抗性转化子。转化子以两类形式出现：一类为大而生长稳定的菌落,另一类为小而生长不稳定的菌落,两类菌落产生频率分别为每μｇＤＮＡ３－４个和１０－２０个。将大菌落转化子转接到含有ＨｍＢ的新培养基上,仍可正常生长,但小菌落转化子却不能,说明前者为真正的转化子而后者为流产转化子。ＤＮＡ杂交分析显示转化是由于质粒ＤＮＡ整合到了２５３９ｗ的染色体ＤＮＡ上,整合可在染色体ＤＮＡ的不同位点上发生。受试的７个转化子尽管各自的整合形式不同,但均在选择与非选择性培养中保持稳定。     

稻瘟病菌侵染诱导的水稻早期反应基因的cDNA片段克隆与序列分析

以稻瘟病菌感染水稻,利用ｍＲＮＡ 差异显示技术分离了稻瘟病菌侵染诱导的水稻早期反应基因ＥＲ１（ｅａｒｌｙ ｒｅｓｐｏｎｓｉｖｅ ｇｅｎｅ） 的ｃＤＮＡ 片段。Ｎｏｒｔｈｅｒｎ ｂｌｏｔ 分析表明,ＥＲ１ 基因在稻瘟病菌侵染水稻叶片６ ｈ 后开始表达,８ ｈ 最强,１０ ～１２ ｈ 开始减弱,１６ ｈ 消失。Ｓｏｕｔｈｅｒｎ ｂｌｏｔ 分析表明,ＥＲ１ 基因属于水稻基因组。对ＥＲ１ 基因片段（２１９ ｂｐ） 进行了克隆和序列分析。经查询,在ＧｅｎＢａｎｋ 中没有与ＥＲ１ 同源的基因序列。     

稻瘟病菌群体遗传结构的研究进展

稻梨孢引起的稻瘟病是世界水稻生产的最重要病害,严重影响水稻的产量和米质。文中综述了分子标记技术在稻瘟病菌群体遗传结构研究上的应用,分析了病原菌遗传宗谱的特点及其与致病谱的关系,探讨了导致稻瘟病菌群体遗传结构发生变化的相关因素。     

Construction of a Binary Vector for Knockout and Expression Analysis of Rice Blast Fungus Genes

We developed an efficient method to analyze gene function and expression of the rice blast fungus. We constructed a GATEWAY binary vector, which generates a gene-targeted disruptant carrying a green fluorescent protein gene under the native promoter of the target gene. Using this method, the knockout efficiency and expression patterns of two hypothetical genes were determined.     

Establishment of a New Cross of the Rice Blast Fungus Derived from Japanese Differential Strain Ina168 and Hermaphroditic Rice Pathogen Guy11

Mating experiments between Magnaporthe grisea Japanese rice pathogens and Guy11, a hermaphroditic fertile rice pathogen, were done aimed at identification of avirulence genes. A cross named cross 2107 with thirty-six random progenies was obtained. Segregation analyses of genetic markers found that the cross was less suitable for genetic analysis. Backcrosses with cross 2107 progenies and Guy11 were done and another cross named cross 5307 with sixty-five progenies was obtained. A locus controlling kasugamycin resistance named Ksg1R was identified and used for a model case of genetic mapping. Bulked segregant analysis was done to find adjacent RAPD markers for mapping of the gene. Three adjacent markers to Ksg1R were obtained and a genetic map around the Ksg1R was made, but these markers were not located on a single chromosome. These results suggest that genetic analysis to identify a gene locus is available in cross 5307. Infection assay of parental strains of cross 5307 to Japanese differential rice cultivars suggested the possibility of genetic analysis of cultivar specificity toward four rice cultivars: Aichiasahi, Kusabue, Tsuyuake, and K59.