奶油栓孔菌菌丝体多糖的提取工艺优化、结构表征及抗氧化活性

奶油栓孔菌Trametes lactinea是一种生物活性丰富的大型真菌。本研究在单因素试验的基础上,通过响应面法优化其菌丝体多糖的提取工艺,利用DEAE-Cellulose-52阴离子交换柱和Sephadex G-200层析柱对粗多糖进行分离纯化,获得TLMPS-0、TLMPS-1和TLMPS-3均一多糖组分。采用化学组成分析、UV-vis、FTIR、刚果红实验对3种多糖组分进行结构分析,并检测了多糖清除自由基的能力和还原力。结果表明,奶油栓孔菌菌丝体多糖最优提取工艺为：提取温度99℃、料液比1:30 (g/mL)、提取时间5h,提取次数2次。在此工艺条件下,多糖提取率为4.01%。TLMPS-0、TLMPS-1和TLMPS-3的糖醛酸含量分别为12.91%±0.44%、8.24%±0.22%、7.50%±0.66%,硫酸基含量分别为22.24%±1.88%、14.55%±0.56%、18.68%±0.69%,并且证明TLMPS-0是一种α-吡喃型多糖或β-吡喃型多糖,而TLMPS-1是一种β-吡喃型多糖,均不具备三螺旋空间构象,此外,3种多糖组分均具有一定的清除DPPH自由基、ABTS自由基、羟基自由基的能力和铁离子还原能力,其中TLMPS-0抗氧化活性最强。研究结果为奶油栓孔菌多糖的功能研究与挖掘提供了研究基础与理论依据。     

奶油栓孔菌子实体多糖的理化性质、抗氧化活性与保肝作用

本研究旨在探讨奶油栓孔菌子实体多糖（TLFPS）的化学性质和酒精性肝损伤的保护作用。首先用水提醇沉法提取得到多糖,通过化学组成分析、紫外吸收光谱法、傅里叶红外光谱法和刚果红染色法对多糖结构进行初步表征,以DPPH、ABTS、超氧阴离子自由基的清除能力和铁离子还原能力为指标评价了多糖体外抗氧化能力,在小鼠急性肝损伤之前连续灌喂多糖8d,比较各组小鼠血清和肝的相关生化指标以及组织病理切片来确定多糖对酒精性肝损伤小鼠的保护作用。结果显示：多糖具有β-吡喃糖环结构,含有较高含量的糖醛酸和硫酸根基团,空间构型不具备三股螺旋结构。在体外抗氧化活性方面,多糖对DPPH、ABTS和超氧阴离子自由基均有良好的清除活性,铁离子还原能力也呈良好的剂量依赖性。在小鼠保肝实验中,与模型组相比,多糖能够显著延长小鼠的醉酒时间和缩短醒酒时间,降低了酒精性肝损伤小鼠的肝指数,并且显著降低血清中谷丙转氨酶（alanine aminotransferase,ALT）、谷草转氨酶（aspartate aminotransferase,AST）、甘油三酯（triglyceride,TG）、总胆固醇（total cholesterol,TC）和肝脏中丙二醛（malondialdehyde,MDA）的含量,同时明显提高了肝脏中超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）和过氧化氢酶（catalase,CAT）的活性。结果证实奶油栓孔菌子实体多糖具有良好的抗氧化能力,可以减轻由酒精引起的急性肝细胞损伤,而且对机体的毒害作用很小。肝组织病理切片也进一步证实了奶油栓孔菌多糖的保肝活性。研究结果不仅丰富了奶油栓孔菌的药用价值,而且对多糖在功能食品领域的应用提供了药效基础。     

桦褐孔菌多糖的提取工艺优化及抗氧化活性评价

目的：优化桦褐孔菌多糖的超声波法提取工艺,对比不同产地桦褐孔菌多糖的抗氧化活性。方法：采用正交试验法确定超声波法的最佳工艺流程,检测不同产地桦褐孔菌的多糖提取率和抗氧化活性。结果：超声波法的最佳提取条件为超声时间25min、料液比1∶40、超声温度50℃、提取3次,在此条件下多糖提取率高达8.61 g/100g,与水提醇沉法相比提高了17.3%,耗时缩短了3/4,大大提高了提取效率。抗氧化能力检测结果证明超声波法得到的桦褐孔菌多糖都具有抗氧化活性,并且抗氧化能力与多糖提取率之间的相关性极其显著。结论：通过优化提取条件,超声波法明显提高了多糖提取率,保持了桦褐孔菌多糖的抗氧化活性,是一种可行、实用和高效的真菌多糖提取方法。     

忍冬木层孔菌多糖的提取工艺优化及其体外抗氧化活性研究

忍冬木层孔菌(Phellinus lonicerinus(Bond.) Bond.et Sing)为湖北等地习用的桑黄品种,也是土家族常用药,多糖是其主要活性成分。为了研究忍冬木层孔菌子实体多糖(Phellinus lonicerinus polysaccharide, PLP)的提取工艺及其体外抗氧化活性,采用冷凝回流提取法在单因素实验结果的基础上,进行Box-Behnken响应面分析,确定PLP的最佳提取工艺,并通过测定忍冬木层孔菌多糖(PLP30、PLP60、PLP85、PLPA1和PLPA2)的还原能力、对DPPH、ABTS、羟基自由基的清除能力、对酪氨酸酶活性的抑制能力。结果显示PLP最佳提取工艺的参数为：料液比1∶20 g/mL、提取时间120 min、提取温度100℃,此条件下PLP提取率为(3.16±0.05)%;五种多糖对DPPH、ABTS和羟基自由基均具有较强的清除作用,且具有较强的还原力,其对ABTS自由基清除作用和还原力均与浓度呈量效关系。表明忍冬木层孔菌子实体多糖具有良好的体外抗氧化和一定的酪氨酸酶活性抑制能力。     

绣球菌多糖表征及其抗氧化和免疫活性

提取纯化绣球菌多糖(Sparassis latifolia polysaccharides,SCPs),研究其表征和功能活性,探索绣球菌多糖表征与其抗氧化及免疫活性之间的关系。以绣球菌子实体为原料,采用聚能超声波辅助水提醇沉法提取绣球菌多糖,经DEAE-52、SephadexG-100纯化,用高效凝胶渗透色谱法、离子色谱法、傅里叶红外色谱法、扫描电镜、原子力显微镜对绣球菌多糖进行初步表征,检测绣球菌多糖清除DPPH、·OH、O2^-·自由基能力以及总还原力,用MTT法检测绣球菌多糖对巨噬细胞RAW264.7增殖的影响。结果表明,SCPs分子量范围为215Da–393kDa,由葡萄糖、甘露糖、半乳糖、木糖、果糖构成,摩尔比13:4:1:2:3,其表观形貌为簇状堆积,交织,结构规律性不强,表面光滑,呈一定的网络状结构,分子呈现链状构象,具有高度的分支结构,链间形成小环且伴随一定的球形颗粒。SCPs具有一定的还原能力和清除DPPH、·OH、O2^-·自由基的能力,且能够促进巨噬细胞RAW264.7的增殖。绣球菌多糖的抗氧化及免疫活性可能与其分子量、单糖组成、糖链分支及分子构象有关。     

落叶松锈迷孔菌产多糖液体培养基的优化及其体外抗氧化活性

本研究通过响应面设计优化了落叶松锈迷孔菌产胞外多糖的液体培养基,并对其体外抗氧化活性进行了分析。结果显示,以落叶松锈迷孔菌胞外多糖产量为响应值,采用Plackett-Burman设计、最陡爬坡设计和Box-Behnken设计建立数学模型,获得落叶松锈迷孔菌产胞外多糖的最适培养基为：去皮马铃薯415.70g/L、蛋白胨10.80g/L、葡萄糖20.0g/L、吐温80 7.27mL/L、KH₂PO₄ 1.0g/L、MgSO₄?7H₂O 0.5g/L、CaCO₃ 0.57g/L、FeSO₄?7H₂O 0.3g/L、ZnSO₄?7H₂O 0.3g/L、维生素B₁ 0.01g/L、芦丁6.09g/L。在此优化条件下得到的多糖产量为3.07g/L,与理论值3.06g/L相近,相比于优化前提高了2.87倍,说明响应面法对于优化落叶松锈迷孔菌的液体培养基以提高多糖产量行之有效。此外,经过醇沉、透析和去蛋白等获得初步纯化的多糖可有效清除羟自由基、超氧阴离子、1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH）自由基和2,2?-连氮-双(3-乙基苯并噻唑-6-磺酸)[2,2?-azino-bis(3-ethylbenzthiazoline-6-sulphonic acid),ABTS]自由基。     

桦褶孔菌多糖的分离纯化及清除自由基活性

利用水提醇沉法对桦褶孔菌Lenzites betulina粗多糖HZKJc进行提取,随后经Sevage法和酶法联合脱蛋白,再经DEAE‐Sephadex A‐25,G‐100柱层析纯化后得到多糖纯品HZKJv。通过高效液相色谱(HPLC)测定上述纯化多糖的纯度和相对分子量分布;经纸层析(PC)、气相色谱(GC)、红外光谱(IR)进行单糖组成分析;并研究其清除自由基活性。分离纯化后得到的HZKJv为纯多糖,相对分子质量约为11 687。当HZKJv溶液浓度为3.0mg/m L时,其DPPH自由基清除率可达82%;浓度为2.0mg/m L时,对?OH自由基的清除率可达85%。表明HZKJv对?OH与DPPH自由基存在很好的清除作用。     

金针菇菌渣中多糖的微波辅助提取工艺及其抗氧化活性研究

本文以金针菇菌渣为原料,在单因素实验的基础上,以微波时间、微波功率和料液比为变量,以金针菇菌渣中多糖得率为响应值,应用响应面分析法,确定了提取工艺的最佳参数:微波时间115 s、微波功率640 W、料液比1∶26。在此条件下金针菇菌渣中多糖得率为7.53%,比热水浸提的多糖得率提高了15.14%。提取得到的多糖具有一定还原力,且对ABTS+自由基和羟基自由基均有一定的清除作用,其IC50值分别为8.40、1.01mg/m L和1.95 mg/m L,证明金针菇菌渣中多糖具有一定的抗氧化活性。     

羊肚菌多糖提取及其抗氧化活性研究

为了探讨碱法提取羊肚菌多糖的工艺条件并测定其抗氧化活性,该研究以四川北川羊肚菌为原料,采用碱法提取羊肚菌多糖,利用苯酚-硫酸法对羊肚菌多糖得率进行测定,并通过单因素探讨提取温度(70、80、90、100℃)、提取时间(2、4、6、8 h)、碱液浓度(0.4、0.6、0.8、1.0 mol·L~(-1))、料液比(1∶15、1∶20、1∶25、1∶30 g·mL~(-1))对羊肚菌多糖得率的影响,同时采用正交试验优化提取工艺,对其抗氧化活性进行测定。结果表明:在提取温度90℃、提取时间5 h、碱液浓度0.7 mol·L~(-1)、料液比1∶20(g·mL~(-1))条件下得到的羊肚菌多糖得率为5.39%。羊肚菌多糖具有较强的清除DPPH自由基、羟自由基、超氧阴离子的能力和较好的还原能力,其IC50分别为0.468、0.208、0.022、0.014 mg·mL~(-1),抗氧化能力依次为还原能力超氧阴离子清除能力羟自由基清除能力DPPH自由基清除能力。优化后的羊肚菌多糖提取工艺合理、可行,且羊肚菌多糖具有较强的抗氧化活性。     

茯苓皮多糖和三萜类物质提取及其抗氧化活性研究

采用超声辅助提取法分别从茯苓皮中提取多糖和三萜类物质。考察提取溶剂、超声功率、液料比、提取温度、提取时间等对茯苓皮多糖和三萜类物质的影响。结果表明,选用乙醇提取多糖,选用乙酸乙酯浸提三萜类物质,最佳提取条件为:超声功率450 W,液料比为45 m L/g,提取温度80℃,提取时间35 min。通过对DPPH自由基清除作用、还原力、羟基自由基清除作用的测定,评价茯苓皮中多糖和三萜类物质的抗氧化活性。结果表明,抗氧化能力与质量浓度存在量效关系。在质量浓度达到0.4 mg/m L时,茯苓皮多糖和三萜类物质提取液对DPPH和羟基自由基的清除能力均高于VC;茯苓皮三萜类物质提取液还原力与VC相当。茯苓皮提取物作为一种天然的抗氧化剂具有良好的应用前景。     

乳孔硫磺菌的化学成分和抗氧化活性

对乳孔硫磺菌子实体不同极性提取物进行了DPPH和ABTS自由基清除能力的测定,并对氯仿和乙酸乙酯提取物进行了分离纯化。结果表明,乳孔硫磺菌的石油醚、氯仿、乙酸乙酯和甲醇提取物均有一定的抗氧化活性,各提取物对两种自由基的清除能力均表现为甲醇提取物＞乙酸乙酯提取物＞氯仿提取物＞石油醚提取物,甲醇提取物对DPPH自由基的清除率最高可达到93.78%;对ABTS自由基的清除率最高可达到62.06%;从氯仿和乙酸乙酯提取物中分离得到10个化合物,分别是：(22E,24R)-5α,8α-过氧麦角甾-6,22-二烯-3β-醇（1）,阿里红酸 A（2）,麦角甾-7,22-二烯-3β-醇（3）,啤酒甾醇（4）,硫色多孔菌酸（5）,(4E,8E)-N-d-2′-hydroxypalmitoyl-1-O-β-d-glycopyranosyl- 9-methyl-4,8-sphingadienine（6）,麦角甾醇（7）,N-(2′-羟基二十四碳酰基)-1,3,4-三羟基-2-氨基-十八烷（8）,烟酸（9）和齿孔酸（10）。其中,化合物2、6、8和9为首次从硫磺菌属真菌中分离得到。     

日本虫草子实体多糖抗氧化及免疫调节作用

为明确日本虫草子实体多糖（CJPs）的抗氧化活性及免疫调节作用,本研究以子实体为原料,采用热水浸提法得多糖,通过对ABTS自由基、DPPH自由基、·OH自由基清除能力评价CJPs的体外抗氧化活性;探讨CJPs对氢化可的松诱导的免疫抑制小鼠的免疫调节作用。结果表明,CJPs对ABTS、DPPH、·OH自由基均有明显的清除效果,且存在量效关系,IC₅₀分别为0.165、0.098、0.253mg/mL;灌胃CJPs的小鼠与模型组相比,免疫器官指数、巨噬细胞吞噬指数、血清中细胞因子水平、免疫球蛋白含量均有所提高,脾脏中乳酸脱氢酶（LDH）和酸性磷酸酶（ACP）的活力显著增强（P<0.05或P<0.01）。该研究表明CJPs是一种潜在的抗氧化剂,并能显著提高免疫低下小鼠的免疫功能,为其进一步研究和应用提供了科学依据。     

狭果茶藨子果实多糖提取及其抗氧化和流变特性

以狭果茶藨子果实为原料,多糖提取量为考察指标,通过单因素试验及响应面试验对多糖提取工艺进行优化,结果表明最佳多糖制备工艺条件为:提取温度40℃,时间30 min,料液比1∶30 g/mL,此时狭果茶藨子中多糖提取量达115.32 mg/g;流变学特性研究表明狭果茶藨子果实多糖溶液属于非牛顿流体,多糖溶液表现出剪切稀化的现象,当多糖质量浓度为1.0%时,其流变学特性与0.1%的羧甲基纤维素钠溶液相似,且过酸、过碱的环境均不会改变狭果茶藨子果实多糖溶液的流变学特性;抗氧化试验结果表明狭果茶藨子果实多糖具有潜在的抗氧化能力,对DPPH自由基的清除能力低于抗坏血酸,而对羟自由基的清除能力显著高于抗坏血酸。本研究结果可为狭果茶藨子果实多糖在食品领域的开发利用提供理论依据。     

灰树花多糖的提取及抗氧化活性

采用单因素和正交试验法对热水浸提、超声波辅助和微波辅助提取灰树花多糖的工艺进行研究,分别获得了3种方法的最佳条件,并发现微波辅助法最佳,其最优条件为:微波功率800 W、微波时间3 min,浸提2h,多糖得率为13.05％,比热水浸提法提高了51.22％.利用提取的灰树花多糖进行抗氧化性研究,发现灰树花多糖对O2-·和·OH都具有一定的清除作用,且多糖浓度与其对O2-·的清除作用存在量效关系,但不如·OH明显.     

红托竹荪菌托多糖提取工艺及抗氧化降血糖活性

为利用红托竹荪菌托,采用酶解法提取菌托多糖,优化多糖提取工艺,并测定多糖分子量、单糖组成、抗氧化及降血糖活性。结果表明,最佳酶解法提取工艺为纤维素酶2.5%、果胶酶0.4%、木瓜蛋白酶1.5%,50 ℃酶解1 h,料液比1:60、提取温度80 ℃、时间3 h,该条件下多糖提取率达15.37%,比热水浸提法提高39.60%。酶解法多糖分子量为3 344 Da (Mn)、522 208 Da (Mw)、2 929 Da (Mp),主要由葡萄糖、甘露糖、葡萄糖醛酸、半乳糖和岩藻糖等组成,葡萄糖占最高,达48.82%。菌托多糖为2.0 mg/mL时,DPPH·清除率为93.83%,Fe³⁺还原能力为0.140 7,α-葡萄糖苷酶活性抑制率为54.62%、α-淀粉酶活性抑制率为56.45%,与热水浸提法相比差异极显著或显著。酶解法提取红托竹荪菌托多糖,提取率较高,具有较高的抗氧化、降血糖活性,具有推广应用价值。     

枸杞色素及多糖的不同提取次序对其得率及抗氧化活性的影响

为探究先后提取枸杞多糖及枸杞色素时对各自得率的影响。本研究通过分别考察这两种成分在提取过程中的提取溶剂、提取温度、料液比、提取次数及提取时间等因素对枸杞色素和枸杞多糖的得率影响,确定枸杞色素和枸杞多糖在提取次序不同时,两者的最佳提取工艺以及对DPPH·和·OH自由基清除率。结果表明,首先提取枸杞多糖后,枸杞色素的最佳提取工艺为采用正己烷,80℃时,料液比1∶10,提取2次,每次1 h,枸杞色素得率为2.48%,此时枸杞多糖得率为7.45%;而首先提取枸杞色素后,采用了超声辅助提取的方式提取枸杞多糖,发现超声效率为25%,料液比1∶10,提取20 min,枸杞多糖得率为5.23%,此时枸杞色素得率为3.93%。因此,首先提取枸杞多糖,使其平均得率为7.45%,而后提取枸杞色素,其平均得率为2.48%;总体上,枸杞色素1和枸杞多糖1对DPPH·自由基清除率都较高,枸杞多糖1对·OH自由基清除率较高,其抗氧化活性都接近Vc。     

Biochemical characteristics and antioxidant activity of crude and purified sulfated polysaccharides from Gracilaria fisheri

Sulfated polysaccharides (SPs) from Gracilaria fisheri of Thailand, which were extracted in low-temperature (25 °C) water showed the highest content of phenolic compounds compared with those extracted at high temperature (55 °C). Crude SP antioxidant activity was evaluated by measuring the DPPH free radical scavenging effect which is directly related to the level of phenolic compounds. The sulfate content, total sugar, and SPs yield were also directly related to the extraction temperature. All extracts contained galactose as a major monosaccharide. High antioxidant activity of crude SP, positively correlated with the phenolic compound contents (R² = 0.996) contributed by the existence of sulfate groups and phenolic compounds. In purified SP, F1 fraction exhibited strong radical scavenging ability, but it was not significantly different compared to crude SP extracted at 25 °C. This indicated that the appropriate density and distribution of sulfate groups in the SP extract showed the best antioxidant activity.