直接免疫荧光技术对腺病毒所致儿童流行性“咽结合膜热”的快速诊断

腺病毒是儿童时期病毒性呼吸道疾病的主要病原,在腺病毒的34个型别中,3、7型腺病毒又占首位,危害甚大。近几年来,关于直接免疫荧光技术在婴幼儿腺病毒肺炎早期快速诊断方面的应用,国内曾有些报道。对于有效地防治腺病毒肺炎起到了积极作用。但有些报告对采用咽脱落细胞直接涂片检查腺病毒抗原与病毒分离、血清学试验方面的符合率仍较低,仅为70—80%。而咽标本转种玻片法     

脱落细胞涂片免疫组织化学技术有关问题的探讨

脱落细胞涂片免疫组织化学技术最需要注意的问题是背景染色和涂片粘附的牢固程度。因为背景的存在会影响对阳性结果的判断,尤其是抗原表达少的弱阳性的病例,而涂片涂的不好,厚薄不均,粘贴不牢都将会在操作时把涂上的细胞冲掉,造成染色的失败。因此我们采用了敏感性高,效果好的免疫组织化学真空负压ＬＳＡＢ法进行标记,ＡｒｔｃｒａｙｏｔａＡｒｔ和Ｃｒａｆｔｇｌｕｅ等涂于载玻片上,干后再涂片。经多次反复的实验证明,获得的结果好,背景清晰,阳性物明显突出,易于判断,涂片上的细胞黏附牢固,未出现细胞被冲洗脱落的现象。保证…     

小鼠发情周期卵泡发育动态及其对超数排卵的影响

该文探讨了小鼠发情周期中阴门状态、阴道脱落细胞类型变化规律、卵泡发育规律及其相互关系,并比较了发情周期不同阶段的超排效果。结果表明,采用阴门状态观察法和阴道脱落细胞涂片法,能有效判断小鼠发情周期阶段。卵巢组织切片观察结果表明,在发情周期不同阶段,小鼠的卵泡发育和黄体的生成与消退存在明显的规律性变化;小鼠发情周期中,其阴门状态、阴道脱落细胞种类及卵泡发育动态之间存在相关关系;发情周期不同阶段开始超排的小鼠,其配种见栓率和回收胚胎平均数均存在明显差异,发情前期显著优于发情后期与间情期(P<0.05),并高于发情期,但差异不显著(P>0.05),即阴门状态观察法与阴道脱落细胞涂片法均可用于小鼠发情周期阶段的判断,发情前期为最适宜的小鼠超排时期。     

改良离心集菌法检测痰内抗酸杆菌的研究

目的研究改良离心集菌法,测定其是否能使抗酸杆菌的诊断更为安全简便。方法选取传统的抗酸杆菌直接涂片法1＋和1＋以下的阳性标本100例,用改良离心集菌法复检;再配制浓度为10000、5000、1000和100条／mL的痰菌液各100份,分别用直接涂片法和改良离心集菌法检测其检出限和检出率;最后以日常门诊标本1036例分别用两种方法进行临床应用检测和分析。结果100例直接涂片法1＋和1＋以下的阳性标本改为改良离心集菌法复检,结果为4＋有93例、3＋为7例;直接涂片法和改良集菌法的检出限分别为1000和100条／mL;10000、5000、1000和100条／mL的痰菌液用直接涂片法和改良离心集菌法检测其检出率分别为97％、53％、5％、0％和100％、100％、94％、7％。1036例日常标本用直接涂片法和改良集菌法检测的阳性率分别12．74％和16．47％。结论改良离心集菌法的阳性率高于直接涂片法,检出限低于直接涂片法,不但大大改善了实验室和实验人员生物安全,还弥补了直接涂片法中对结核杆菌在痰液中分布不均一性带来的漏检的方法局限性,因此改良离心集菌法是安全、简便的抗酸杆菌实验室值得推广使用的新诊断方法。     

细胞DNA倍体分析和EBERs原位检测在鼻咽癌早期诊断中的应用

目的　探讨鼻咽脱落细胞进行DNA倍体和EB病毒编码RNA (EBERs)检测在鼻咽癌诊断中的应用。方法　对 38例经细胞学诊断为鼻咽癌和 8例为正常的鼻咽细胞涂片分别进行图像分析测定细胞DNA含量和EB病毒EBERs原位杂交检测。结果　与病理细胞学诊断相比 ,DNA异倍体分析和EBERs检测诊断癌的敏感性分别为 5 0 %和 92 %,其特异性均为 10 0 %;其阴性预测值分别为 30 %和 72 %。结论　与EBERs检测相比 ,DNA异倍体分析的诊断敏感性和阴性预测值较低 ,差异具有显著性 (分别为P <0 0 0 1和P <0 0 5 )。证明在鼻咽细胞学涂片应用EB病毒原位杂交检测诊断鼻咽癌优于应用DNA异倍体分析诊断。与细胞DNA图像分析相比 ,EB病毒原位杂交检测具有客观、实验条件简单等优点 ,在鼻咽癌可疑病人的早期诊断和鉴别诊断上具有重要的实用价值。     

FISH检测宫颈脱落细胞与宫颈组织中hTERC基因制片方法的研究

目的:探讨FISH实验中用直接涂片法、盐水制片法、TCT制片法、低渗滴片法制片法和宫颈切片组织取材方法对于FISH成功率的影响.方法:收集2008年3月至2009年3月青岛大学医学院附属医院妇科162例宫颈脱落细胞标本及2008年5月至2009年3月手术切除或活检的宫颈组织63例,用荧光原位杂交(FISH)方法检测hTERC基因.结果:直接涂片法、盐水制片法、生理盐水法、TCT制片法和石蜡包埋组织切片法hTERC基因杂交成功率分别为58.3%,65%,55%,87.1%,85.7%,TCT制片高于其它四组;低渗滴片法背景干净度、细胞形态、裸核数量满意度最高;TCT制片法细胞数量满意率最高;石蜡包埋组织切片法荧光信号满意率最高.结论:在检测hTERC基因的宫颈癌筛查中,TCT制片法明显优于其他方法,而在指导宫颈病变及宫颈癌的治疗中,石蜡包埋组织切片法的染色体破坏最小,实际意义更大.     

薄层细胞涂片新方法在宫颈细胞学检查中应用的研究

目的：研究一种新的宫颈细胞薄层涂片方法,以提高传统手工涂片方法的制片质量。方法：随机选择的妇科门诊病人100例,随机分成2组,薄层细胞涂片组和手工涂片组,其中薄层细胞涂片组的刮片标本经过我们设计的双层滤网的过滤和分离液离心的步骤去除标本中的黏液、炎细胞和血细胞。这两组得到的涂片根据其细胞分布的均匀度及细胞重叠的多少,把涂片的结果分为满意、基本满意和不满意。结果：薄层细胞涂片组的涂片质量满意率（98％）高于手工涂片组的涂片质量满意程度（32％．P〈0．01）。讨论：薄层细胞涂片法在宫颈细胞学检查中的满意程度明显好于传统手工涂片（P〈0．01）,有统计学意义。效果稳定,适合在大范围内推广。薄层细胞涂片法相对于传统手工涂片有5大优点,大大提高了宫颈细胞学诊断的准确性。     

利用改进的荧光染色法对宫颈涂片脱落细胞学诊断的探讨

吖啶橙（ａｃｒｉｄｉｎｅｏｒａｎｇｅ,简称ＡＯ）荧光染色法能显示细胞和病原微生物的形态结构及微生物的大小和分布,又能观察细胞内两种核酸（ＤＮＡ和ＲＮＡ）的含量变化,从而可以清楚地了解细胞的增生状态。根据细胞的形态学和细胞化学两方面的变化进行脱落细胞学观察,有利于较早期地发现癌细胞。本文应甩改进的ＡＯ荧光染色法对２０Ｄ００例宫颈涂片进行了脱落细胞学诊断,并对天津市各种妇科疾病所占的百分率进行了统计。该染色法染色结果稳定可靠、速度快、图象鲜明。     

检测脂阿拉伯甘露聚糖诊断结核病

结核病的诊断是靠直接痰涂片抗酸染色和培养。然而,直接涂片的敏感性仅22～43％,培养虽比直接痰涂片法敏感,但又耗时较长,而且只限于具备培养条件的实验室。 结核病的快速诊断方法主要有两类:一是检测结核糖菌的抗原,如结核性脑膜炎的诊断;二是采用探针技术检测结核杆菌的核酸。采用聚合酶链反应(PCR)技术诊断结核病确属一种理想的方法,     

NOD/SCID雌性小鼠动情周期的观察

目的观察NOD/SCID小鼠动情周期及卵巢切除术后阴道涂片的变化。方法连续观察9 d NOD/SCID鼠,每日进行两次阴道涂片,计算动情周期时间及发生率。卵巢切除后,阴道涂片并观察阴道涂片变化。结果NOD/SCID小鼠动情周期为4~6 d。有规律动情的小鼠占80%。阴道口状态与动情周期无明显相关。卵巢切除术后,阴道涂片呈动情后期或动情间期改变。结论采用阴道脱落细胞涂片法可判断NOD/SCID雌性小鼠的动情周期及特点,NOD/SCID雌性小鼠卵巢切除手术有效。     

长爪沙鼠发情周期规律与判定方法

目的研究长爪沙鼠发情周期,揭示发情规律,优化判定方法。方法连续18 d采集50只长爪沙鼠阴道上皮脱落细胞涂片,采用角化细胞计数法研究长爪沙鼠发情周期规律。比较瑞氏染色、HE染色和直接镜检判定发情周期4个时相的优缺点。结果长爪沙鼠的发情周期有稳定型、不稳定型、假孕三种类型。其中稳定型占68.6%,发情周期为(106.3±35.0)h,可分为4个时相。4个时相角化细胞的比例分别为发情前期(13.5±7.8)%、发情期(86.7±9.9)%、发情后期(27.9±12.8)%和发情间期(3.3±2.8)%。结论角化细胞计数能准确地判定长爪沙鼠的发情周期及各个时相。直接镜检法能快速反映阴道脱落细胞的形态。     

宫颈脱落细胞中HCCR的表达及意义

目的研究人宫颈癌基因(HCCR)在宫颈脱落细胞中的表达情况,探讨其对宫颈癌及癌前病变诊断的意义。方法采用Western blot及免疫组化SP法对79例宫颈脱落细胞中HCCR蛋白进行检测,其中正常宫颈上皮脱落细胞11例、宫颈上皮内瘤样病变(CIN)53例、宫颈癌(CCa)15例。所有标本均来自中国医科大学附属第一医院。结果HCCR基因在正常宫颈脱落细胞中不表达或阳性率较低,在宫颈上皮内瘤变及宫颈癌中表达阳性率随病变加重而逐级升高。结论HCCR与宫颈上皮内瘤变及宫颈癌的发生密切相关,检测宫颈脱落细胞中HCCR蛋白的水平对宫颈癌的筛查和诊断可能具有重要意义。     

一种酶标板转子低速离心细胞制片方法

常规培养悬浮细胞Jurkat,离心收集细胞后,通过载玻片直接涂片、细胞涂片离心机和酶标板转子低速离心机3种方法制备细胞涂片,经瑞氏-姬姆萨染色后,显微镜下观察拍照。发现直接涂片中细胞图像难以观察,效果差,而细胞涂片离心机和酶标板转子低速离心机制备的细胞涂片,细胞图像清晰,均可达到细胞制片要求。酶标板转子低速离心细胞制片是一种便捷的新方法。     

散发性大肠癌组织及粪便脱落细胞p53蛋白的检测

为了解大肠癌组织及粪便脱落细胞中 p5 3蛋白表达对大肠癌诊断的临床意义 ,采用 S- P法对 38例大肠癌患者的癌组织及其中的 30例患者的粪便脱落细胞 p5 3蛋白进行检测。大肠癌组织中 p5 3蛋白阳性表达率为 39.47% (15 / 38) ,p5 3蛋白阳性与癌组织的分化程度及是否存在淋巴结转移均无相关性 (P>0 .0 5 )。粪便脱落细胞 p5 3蛋白阳性表达率为 36 .6 7%(11/ 30 ) ,脱落细胞与相应患者的癌组织中的 p5 3表达一致率为 83.33% (2 5 / 30 )。表明粪便中脱落细胞 p5 3蛋白的表达忠实反映了相应癌组织的 p5 3突变情况 ,对其检测有望成为大肠癌诊断及筛查的无创分子途径。同时表明粪便中脱落细胞核保持了肿瘤抗原决定簇的主要结构及生物特征 ,进行免疫细胞化学检测是可行的 ,为进行脱落细胞核其它肿瘤标志物或其它生物研究奠定了可行性的基础     

应用H.E染色的鼻咽癌细胞涂片进行DNA含量测定和EB病毒基因原位杂交的研究

分析鼻咽癌常规 H.E染色细胞涂片分别作 Feulgen染色检测 DNA含量和原位杂交检测 EB病毒编码 RNAs(EBERs)的效果 ;将常规 HE染色的 9例正常鼻咽细胞涂片和 38例鼻咽癌细胞涂片用 1%酸性酒精褪色 ,然后作 Feulgen染色 ,应用图象分析仪测定涂片细胞 DNA含量 ,并将 38例鼻咽癌细胞病例的阳性涂片进行 EBERs原位杂交检测 ;结果显示正常鼻咽细胞均为 DNA二倍体核型 ,38例癌阳性涂片中呈 DNA二倍体者 6例 ,DNA非二倍体者 32例 (84.2 % ) ,癌细胞核 EBERs阳性者 35例 (92 .1% ) ;结果表明 HE染色的鼻咽癌细胞学涂片经褪色后作 Feulgen染色和原位杂交检测 ,能较满意进行 DNA和 EBERs分析 ,表明常规 H.E染色和褪色处理均不影响 Feulgen染色和 EB病毒原位杂交的质量效果。本检测方法可靠、可行 ,适用于常规染色细胞学样本的回顾性研究和随访研究 ,并可用于鼻咽癌可疑病人的诊断和鉴别诊断     

用单克隆抗体荧光抗体法快速诊断带状疱疹

<正>病毒感染的快速诊断对治疗很有意义。据报告,用抗水痘·带状疱疹病毒(VZV)单克隆抗体荧光抗体直接法,能检出局部病变中的VZV特异性糖蛋白抗原。作者用直接法对带状疱疹、水痘和单纯性疱疹的诊断和鉴别等进行探讨,现报告如下。 材料和方法 带状疱疹60例,水痘16例,单纯性疱疹19例。采集病变处水疱底部的细胞成分、痂皮、角膜擦拭物和脑脊液等。另采集46例带状疱疹血清,进行血清补体结合反应。方法系将采集的材料涂于载玻片上,痂皮在生理盐水中溶解30分钟后涂片,或立即冰冻后用恒冷切片机切片后贴附于玻片上。使其与VZV特异的糖蛋白异硫     

幼儿舌脱落细胞形态与口气关系的研究分析

目的：比较分析高口气值组和低口气值组幼儿舌脱落细胞形态计量学参数及分类计数上的差异,探讨口气是否影响舌粘膜上皮细胞的角化、凋亡过程。方法：3—5岁幼儿40名,其中高口气值纽幼儿20名,低口气值纽幼儿20名,取舌背中1／3脱落细胞,制作细胞涂片、H．E染色。应用计算机图像分析系统对舌脱落细胞进行形态计量学检测和分类计数。结果：高口气值组幼儿的舌脱落细胞的各类细胞的细胞形态较低口气值组幼儿小,且细胞核也更小。中层细胞、完全角化细胞计数在两组间的差异无统计学意义（P〉0．05）,高口气值组角化前细胞计数明显高于低口气值纽（P〈0．01）,而高口气值组不全角化细胞计数明显低于低口气值组（P〈0．01）。结论：高口气值组幼儿的舌脱落细胞较小,细胞角化程度较低,凋亡速度较慢。     

幼儿舌脱落细胞形态与口气关系的研究分析

目的:比较分析高口气值组和低口气值组幼儿舌脱落细胞形态计量学参数及分类计数上的差异,探讨口气是否影响舌粘膜上皮细胞的角化、凋亡过程。方法:3-5岁幼儿40名,其中高口气值组幼儿20名,低口气值组幼儿20名,,取舌背中1/3脱落细胞,制作细胞涂片、H.E染色。应用计算机图像分析系统对舌脱落细胞进行形态计量学检测和分类计数。结果:高口气值组幼儿的舌脱落细胞的各类细胞的细胞形态较低口气值组幼儿小,且细胞核也更小。中层细胞、完全角化细胞计数在两组间的差异无统计学意义(P>0.05),高口气值组角化前细胞计数明显高于低口气值组(P<0.01),而高口气值组不全角化细胞计数明显低于低口气值组(P<0.01)。结论:高口气值组幼儿的舌脱落细胞较小,细胞角化程度较低,凋亡速度较慢。     

91份精液检测结果

目的对91份精液标本进行常规检测．并对两种方法检测白细胞结果作对比分析。方法直接涂片镜检和经特殊处理后瑞-姬氏染色镜检精液中细胞和精子形态分析。精子体外活体染色测精子的活率。结果直接涂片镜下均查到自细胞,占100％,经染色后确定为自细胞者25例,占27．5％,其中非自细胞60份,占66％,有5例检出阴道毛滴虫。检出率5．5％。假死精子检出率25．3％。结论直接涂片镜检精液具备了感染性特征,尚不能确诊,对精液有形成分。精囊感染的确诊,必须染色,仔细检测。     

非免疫抑制患者内源性土曲霉眼内炎1例及实验研究

目的报道1例非免疫抑制患者内源性土曲霉眼内炎及实验研究。方法采集本院收治的1例非免疫抑制内源性眼内炎患者的玻璃体液,进行直接涂片镜检、培养,并进一步对分离到的菌株进行表型分析,分子鉴定及E-test法体外抗真菌药敏试验。结果直接涂片镜检可见真菌孢子及有隔真菌丝,培养7d后生长菌落较小,形态不典型,经分子鉴定及多次转种观察形态确定为土曲霉。E-test法测得MIC值(μg/mL):伊曲康唑0.250,伏立康唑0.125,两性霉素B 2.000。结论早期诊断性和治疗性玻璃体切割术有利于获得足够的样本用于微生物鉴定,并可以减少玻璃体中微生物量及炎性物质。直接涂片迅速报告镜检结果对临床最初选择抗菌药物有重要意义。对于直接分离自临床标本的形态不典型的丝状真菌,采用ITS序列分析等分子生物学鉴定有助于尽早定种,缩短鉴定时间。