142例支气管肺泡灌洗液真菌免疫荧光染色检测结果与G/GM试验结果对比分析

目的探讨真菌免疫荧光染色检测支气管肺泡灌洗液(brondioalveolar lavage fluid,BALF)在肺部真菌感染诊断中的意义。方法对2019年1月至12月送检至本所的142例BALF标本进行G/GM试验及真菌免疫荧光染色检测。结果142例BALF中免疫荧光染色检测阳性为52例(占36.62%),G试验同时阳性者为49例,GM试验同时阳性者为11例。免疫荧光染色检测阳性例数与KOH湿片镜检阳性27例(占19.01%)比较检出率明显提高。结论真菌免疫荧光染色检测作为一种快速方便高效直观的真菌常规检测方法,是BALF标本中真菌检测的1个重要补充,为临床肺部真菌感染的诊断提供了1种快速检测方法。     

通用PCR法在痰标本真菌检测中的临床应用价值分析

目的:探讨通用PCR法在痰标本真菌检测中的临床应用价值。方法:选择2015年9月至2017年9月本院收治的免疫力低下患者178例作为研究资料,各收集痰标本2份,其中一份用于PCR扩增,另一份经培养后若观察到真菌或可疑菌落,则提取后在此进行PCR扩增测序。比较3种方法对真菌的检出情况、真菌阳性率,与组织病理学结果进行比较,分析3种方法的诊断效能。结果:178份痰标本经平板培养可观察到107份真菌生长,其余71份未见真菌生长。挑取真菌及可疑菌落行PCR结果显示阳性、阴性分别115、63份。对痰标本直接PCR结果显示,阳性、阴性分别124、54份。PCR扩增产物测序结果显示大多是白色念珠菌感染,仅3份是曲霉菌感染。内对照扩增验证结果显示有1份阴性标本存在扩增抑制现象。3种方法的真菌阳性率:直接PCR法痰培养后PCR法痰培养,但组间无显著差异(P0.05)。3种方法诊断效能总体趋势:直接PCR法痰培养后PCR法痰培养,其中直接PCR法与痰培养后PCR法的特异度、准确度均显著高于痰培养法(P0.05),直接PCR法的敏感度显著高于痰培养法(P0.05)。结论:通用PCR法在痰标本真菌检测中的临床应用价值较高,直接PCR具有操作简单、快速等优势。     

支气管扩张合并支气管哮喘患者支气管肺泡灌洗液病原菌培养及药敏状况研究

目的:对支气管扩张合并支气管哮喘患者支气管肺泡灌洗液病原菌培养及药敏状况展开分析,实现多药耐药医院感染的有效预防与控制。方法:随机选取2010年9月~2013年8月期间收治的50例支气管扩张症合并支气管哮喘患者,对50例患者支气管肺泡灌洗液标本进行病原学检测及药敏试验,并对临床感染资料及病原菌耐药性进行统计学分析。结果:50例支气管扩张症合并支气管哮喘患者支气管肺泡灌洗液培养阳性率为30例,60.0%,共分离出48株细菌。其中,革兰阳性球菌5株,占分离菌的10.4%;革兰阴性杆菌41株,占分离菌的85.4%;真菌2株,占分离菌的4.2%。41株革兰阴性杆菌对抗菌药物的耐药性分别为:复方新诺明73.1%,阿米卡星22.0%,环丙沙星14.6%,头孢曲松48.8%,头孢噻肟41.5%,头孢哌酮19.5%,头孢他啶20.7%,头孢他啶/舒巴坦12.1%,头孢吡肟22.0%,庆大霉素17.1%,阿莫西林/克拉维酸41.5%,哌拉西林/他唑巴坦19.5%。结论:铜绿假单胞菌是支气管扩张合并哮喘患者感染中的常见病原菌,医务人员要结合病原菌高耐药率、高分离阳性率的特征,合理运用抗菌药物控制传播。     

肺结核并发纤维化患者BALF和血清MMP及TIMP-1检测的临床意义

目的:探讨肺结核并发纤维化患者支气管肺泡灌洗液(BALF)及血清中基质金属蛋白9(MMP-9)及基质金属蛋白酶组织抑制剂l(TIMP-1)含量与肺纤维化及肺功能的关系.方法:酶联免疫(ELISA)法检测我院2009年3月至2009年9月68例肺结核并发纤维化患者(纤维化组)及30例无肺部疾病患者(对照组)的支气管肺泡灌洗液及血清中MMP-9及TIMP-1的含量,同时进行肺功能检查.结果:纤维化组患者的BALF及血清MMP-9的含量与对照组怠者相比无统计学意义,但纤维化组患者的BALF及血清TIMP-1的含量显著高于对照组(P＜0.05),且纤雏化组患者的BALF及血清MMP-9/TIMP-1比值低于对照组(P＜0.05).患者的动脉血氧分压、肺活量等肺功能指标与TIMP-1呈正相关,而与MMP-9/TIMP-1比值呈负相关(P＜0.05).结论:肺结核患者肺纤维化的发生可能与TIMP-1水平升高及MMP-9/TIMP-1比值降低相关,降低TIMP-9的水平可能是防止肺结核惠者并发肺纤维化的一种新途径.     

支气管肺泡灌洗在肺部真菌感染中的诊断价值

近年来,肺部真菌感染的发病率不断增加,尽管培养是真菌诊断的金标准,但其耗时较长,临床应用受限。支气管镜下肺泡灌洗技术方便、快捷、创伤小,通过对应用该技术所获得的支气管肺泡灌洗液行细胞学检查、常规染色、真菌抗原和分子学技术检测已是快速诊断某些真菌感染的重要手段之一。     

95例肺炎支原体快速液体培养阳性标本分析

目的:采用巢式PCR法(nPCR)及全自动微生物鉴定仪对肺炎支原体(MP)快速液体培养阳性标本进行分析,探讨MP快速培养假阳性情况及原因.方法:收集95例MP快速液体培养阳性标本,巢式PCR检测MP核酸,用全自动微生物鉴定仪检测导致培养假阳性的微生物.结果:95例MP快速液体培养阳性标本中,90例巢式PCR结果阴性,假阳性率94.7%;经全自动细菌鉴定仪鉴定,97.8%为真菌所致.结论:普通的敏感细菌在MP快速液体鉴定培养基中可以被有效抑制;真菌是引起的快速培养假阳性的主要原因.     

四种检测沙眼衣原体方法的诊断符合率分析

目的评价直接免疫荧光染色(DFA)、聚合酶链式反应(PCR)、酶联免疫吸附试验(ELISA)和金标免疫层析试验(GICA)4种方法检测沙眼衣原体(Chlamydia trachomatis,CT)的实验诊断符合率。方法同时采用DFA、PCR、ELISA和GICA4种方法检测临床泌尿生殖道样本CT感染标志物。2种及2种以上方法结果阳性判为真阳性,仅有1种方法结果阳性或全部方法结果阴性则判为真阴性。分别计算4种法的灵敏度、特异性、阳性预测值和阴性预测值、ROC曲线下面积以及各方法之间的Kappa值。结果 223份临床泌尿生殖道标本中阳性32例,阴性191例。DFA、PCR、ELISA、GICA 4种方法的敏感度依次为93.7%、96.8%、90.6%和28.1%,特异性为98.9%、98.9%、98.4%和100%,阳性预测值为93.7%、93.9%、90.6%和100%,阴性预测值为98.9%、99.4%、98.4%和89.2%;ROC曲线下面积为0.964、0.964、0.945和0.641。前3种方法之间Kappa值0.82~0.95,与GI-CA法之间Kappa值均小于0.5。结论 DFA法、ELISA法、PCR法作为临床CT感染的实验室检测是较理想的方法;GICA法因灵敏度低且ROC曲线下面积仅0.641,作为实验诊断方法不太理想。     

肺部感染性病变支气管肺泡灌洗液细菌L型检出的临床意义

肺部感染性病变的细菌学检查近年来愈来愈受到临床工作者的关注,尤其目前泛用抗生素现象较为普遍,易导致细菌成为L型[1]。本文对肺部感染性病变的支气管肺泡灌洗液(BALE)标本进行了需氧性细菌和L型细菌两种方法的培养,同时与患者的痰细菌培养作对照,以对BALF的细菌培养的临床意义进行探讨。1　材料与方法1.1　临床资料　59例肺部感染性疾病患者,其中肺炎9例,慢性支气管炎21例,支扩8例,肺脓肿4例,肺大疱并感染1例,肺部感染7例,发热待查9例。其中男性36例,女性23例,平均年龄42.9岁±15.6岁,全部病例手术前均进行了胸片及血常规检查,部分…     

肺炎支原体液体培养法检测的实验评价

目的比较液体培养法和固体培养法平行检测肺炎支原体结果的一致性;评价液体培养法检测肺炎支原体的可靠性。方法采用液体培养基和固体琼脂培养基平行检测1 648份临床标本的肺炎支原体,比较同一份标本在2种培养基上的检测结果。结果液体培养法阳性296例,阳性率为18%;固体培养法阳性244例,阳性率为14.8%;液体培养法阳性而固体培养法阴性57例;固体培养阳性而液体培养法为阴性5例。2种方法的阳性检出率比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论肺炎支原体快速液体培养法与固体培养有较好的一致性,具有方便、简单、准确且可以用于早期检测等优点,适合临床大批量标本筛查。需结合患者临床症状等排除真菌和耐药菌造成的假阳性。     

Dot-ELISA法检测血液及唾液HIV抗体的应用评价

评价人类免疫缺陷病毒1+2型抗体检测试剂盒(Dot-ELISA法)检测血清和唾液样本的临床性能。采用对照试验研究,选取背景清晰的研究对象200例,采集同一研究对象的血清和唾液样本,应用万泰生物药业公司生产的人类免疫缺陷病毒1+2型抗体检测试剂盒作为考核试剂,法国生物梅里埃公司生产的人类免疫缺陷病毒抗体诊断试剂盒(ELISA法)作为参考试剂,考核试剂检测结果与参考试剂及研究对象背景进行比较分析。考核试剂检测血清HIV抗体与参考试剂相比较,阳性符合率100%,阴性符合率100%,总符合率100%,Kappa值1.00,一致性为最强;考核试剂检测唾液HIV抗体与参考试剂检测结果相比较,阳性符合率98.78%,阴性符合率100%,总符合率99.50%,Kappa值0.99,一致性为最强。Dot-ELISA法人类免疫缺陷病毒1+2型抗体检测试剂盒对血清及唾液样本检测性能优越,适合HIV抗体快速筛查。     

支气管肺泡灌洗液G试验可有效诊断早产儿肺部侵袭性真菌感染

本研究试图通过测量血清与支气管肺泡灌洗液中1,3-β-D葡聚糖浓度,分析应用支气管肺泡灌洗液G试验作为早期诊断早产儿肺部侵袭性真菌感染的可行性。选取2014年2月至2016年9月经确诊为侵袭性真菌感染的早产患儿42例作为观察组,将同期生产于我院的健康早产儿61例作为对照组。在清晨时间采集观察组与对照组早产儿的静脉血与分支气管肺泡灌洗液,将静脉血离心取上层血清待用,比较血清与支气管肺泡灌洗液的G试验的表达情况、阳性率及灵敏性。观察组早产儿经测量后,支气管肺泡灌洗液以及血浆中的1,3-β-D葡聚糖水平与健康早产儿比较有差异,说明通过G实验检测1,3-β-D葡聚糖有诊断早产儿侵袭性真菌感染的价值;观察组早产儿的支气管肺泡灌洗液G试验阳性率为83.33%,血浆G试阳性率为64.29%,x~2值为3.941,p值为0.047;支气管肺泡灌洗液G试验灵敏度为89.47%,血浆G试验灵敏度为65.79%,二者x~2值为6.138,p值为0.013。本研究的结果认为支气管肺泡灌洗液G试验可以有效、敏感的测定早产儿体内1,3-β-D葡聚糖的表达情况,应用于早产儿早期诊断肺部侵袭性真菌感染具有临床价值。     

HIV-1抗体蛋白印迹确认与核酸检测复核对比研究

应用病毒核酸载量法NASBA和HIV-1 RNA的巢式逆转录PCR(nested RT-PCR)法与HIV抗体蛋白印迹(WB)方法,对经过初筛的44例HIV-1抗体阳性标本进行了对照检测研究。发现了2例(gp160、p24)和1例(gp160g、p120p、66、p24)的特殊阳性样本,经NASBA法和该RT-PCR法核酸检测为阴性;WB确认的4例gp160阳性带、1例p24、p17阳性带和13例p24阳性带,经NASBA法和该RT-PCR法核酸检测也为阴性;而WB确认的其余全部带型的抗体阳性标本经过NASBA法和该RT-PCR法检测均为阳性。该研究表明对只有gp160p、24和gp160、gp120p、66、p24的特殊阳性标本和以p24为主的抗体不确定标本需要用RT-PCR或NASBA方法进行核酸检测,以进一步确认。     

268份人类免疫缺陷病毒抗体待确定样本的检测结果分析

为了提高实验室人类免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus,HIV)抗体检测能力及对免疫蛋白印迹(Western blot,WB)实验结果的判断能力,对送检至北京市东城区艾滋病确证实验室的268份HIV抗体待确定样本进行确证实验及结果分析。按照试剂说明书和实验室标准作业程序(Standard Operation Procedure,SOP)操作对送检的全部样本进行WB确证实验;了解HIV筛查实验结果与确证实验结果的相关性,并分析不同送检机构、送检人群样本的检测结果差异以及不同试剂、不同检测方法的结果差异。结果显示在筛查出抗体待确定的268份样本中,确证阳性170份,阳性率63.43%;确证阴性51份,阴性率19.03%;不确定结果47份,占筛查有反应的17.54%。确证阳性病例来自监管场所、自愿咨询检测门诊(Voluntary Counseling and Test,VCT)和医疗机构,不同送检单位及不同人群的阳性样本率有显著统计学意义(P<0.01)。WB确证阳性样本带型以全条带和次全条带为主,且所有确证阳性标本均来自双试剂阳性样本。不同检测方法阳性样本率的差异有显著统计学意义(P<0.01),其中化学发光法的样本阳性率占46.27%,酶联免疫吸附实验(ELISA)占88.29%,胶体硒法占43.48%。本研究结果提示,对潜在HIV感染者,应扩大检测面,加强医疗机构检测,并提供一种以上方法的多次检测,以减少漏检的风险。     

肺癌患者放化疗后肺部感染病原菌及其耐药性分析

目的 分析引发肺癌患者放化疗后肺部感染的病原菌种类及其对常见抗菌药物的耐药性。方法 选取2018年1月至2021年12月厦门大学附属中山医院收治的128例肺癌放化疗后发生肺部感染的患者,收集患者呼吸道痰液和支气管肺泡灌洗液标本,分离、培养菌株标本,采用VITEK-60全自动细菌鉴定分析仪进行菌株鉴定,采用K-B纸片法和ATB Fungus-3试纸条法进行体外药敏试验。结果 128例肺癌患者放化疗后,从其痰液和支气管肺泡灌洗液标本中共分离出158株细菌,其中革兰阴性菌101株（63.9%）、革兰阳性菌39株（24.7%）、真菌18株（11.4%）。革兰阴性菌以肺炎克雷伯菌（51株,32.3%）和铜绿假单胞菌（23株,占14.6%）为主,革兰阳性菌以金黄色葡萄球菌（18株,11.4%）和肺炎链球菌（16株,10.1%）为主,真菌以白假丝酵母菌为主（11株,占7.0%）。铜绿假单胞菌对哌拉西林耐药率为87.0%,肺炎克雷伯菌对环丙沙星完全耐药（100.0%）,对亚胺培南敏感（耐药率为0.0%）。未发现耐万古霉素的金黄色葡萄球菌和肺炎链球菌。结论 肺癌患者放化疗后引发肺部感染的病原菌种类增多且...     

炎症因子在大叶性肺炎患儿支气管肺泡灌洗液及血清中的表达及临床意义

目的:探讨炎症因子在大叶性肺炎患儿支气管肺泡灌洗液及血清中的表达水平及其临床意义。方法:收集2014年6月至2016年6月我院儿科收治的79例大叶性肺炎患儿为病例组,按照临床肺部感染评分(CPIS)分为重度组(n=46)和轻度组(n=33),于同期随机选取30例健康儿童为对照组,采用双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)检测各组支气管肺泡灌洗液及血清炎症因子如白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-8(IL-8)、白细胞介素-17(IL-17)、肿瘤坏死因子(TNF-α)以及高迁移率族蛋白B1(HMGB1)表达水平。结果:重度组、轻度组血清IL-6、IL-8、IL-17、TNF-α及HMGB1水平高于对照组,重度组血清IL-6、IL-8、IL-17、TNF-α及HMGB1水平高于轻度组,差异有统计学意义(P0.05)。病例组患儿支气管肺泡灌洗液IL-6、IL-8、IL-17、TNF-α及HMGB1水平高于血清,差异有统计学意义(P0.05)。重度组、轻度组支气管肺泡灌洗液IL-6、IL-8、IL-17、TNF-α及HMGB1水平高于血清,差异有统计学意义(P0.05),重度组支气管肺泡灌洗液、血清IL-6、IL-8、IL-17、TNF-α及HMGB1水平分别高于轻度组,差异有统计学意义(P0.05)。经Spearman积矩相关分析,支气管肺泡灌洗液与血清中IL-6、IL-8、IL-17、TNF-α及HMGB1水平分别呈正相关关系(r=0.711、0.695、0.752、0.793、0.728,P0.05)。结论:炎症因子在大叶性肺炎患儿支气管肺泡灌洗液及血清中呈高表达,并与大叶性肺炎病情严重程度密切相关,联合检测有助于早期评估病情。     

运用数字PCR检测乳腺癌组织FFPE样品中人表皮生长因子受体2拷贝数的变化

目的:建立数字PCR(dd PCR)法检测乳腺癌福尔马林固定石蜡包埋(FFPE)切片样品中人表皮生长因子受体2(HER2)的拷贝数变化(CNV),并与免疫组化(IHC)、荧光原位杂交(FISH)结果比较,以寻求更客观、准确、通量的肿瘤标志物检测方法。方法:以细胞系293T、HOEC、SKOV3基因组DNA(g DNA)为模板,对靶基因HER2及校正基因CEP-17建立双通道dd PCR检测法,并对21例IHC检测HER2阳性(++/+++)的乳腺癌FFPE样品进行CNV(HER2/CEP-17)检测,与IHC、FISH结果比较。结果:单、双通道法对HER2 CNV检测结果一致;细胞及临床样品检测结果表明,dd PCR检测HER2 CNV的阴性、阳性Cut-off值分别为1.2、2.1,中间值为1.2~2.1。14例FISH阴性标本中,dd PCR的一致性为93%(13/14);3例IHC"+++"的样品中,FISH检测均为阳性,2例dd PCR检测为阳性,1例(17#)检测临界阳性。2例IHC"++"的样品,FISH检测阳性,但dd PCR检测为阴性。结论:dd PCR能检测样本HER2 CNV,且与FISH结果判读部分一致,具有临床应用前景,但仍需大量样品来进行验证及建立结果判断标准。     

免疫渗滤法检测血液及尿液HIV抗体的应用评价

评价免疫渗滤法人类免疫缺陷病毒1+2型抗体诊断试剂盒检测人血浆和尿液样本的临床性能。采用对照试验研究,选取背景清晰的研究对象200例,采集同一研究对象的血浆和尿液样本,应用万泰生物药业公司生产的人类免疫缺陷病毒1+2型抗体诊断试剂盒作为考核试剂,法国生物梅里埃公司生产的人类免疫缺陷病毒抗体诊断试剂盒(ELISA法)作为参考试剂进行检测,考核试剂检测结果与参考试剂及研究对象背景进行比较分析。考核试剂检测血浆HIV抗体与参考试剂相比较,阳性符合率100.00%,阴性符合率100.00%,总符合率100.00%,Kappa值1.00,一致性强度为最强;考核试剂检测尿液HIV抗体与参考试剂检测结果相比较,阳性符合率68.29%,阴性符合率100.00%,总符合率87.00%,Kappa值0.72,一致性强度为高度。免疫渗滤法人类免疫缺陷病毒1+2型抗体诊断试剂盒对血浆、尿液样本检测性能优越,适合临床快速诊断。     

纤支镜检查对菌阴性肺结核的诊断价值

目的探讨纤支镜检查技术对菌阴性肺结核的诊断价值。方法通过回顾性分析153例痰涂片、痰培养和PCR分析均为结核杆菌阴性疑诊为肺结核最终确诊为肺结核的患者病例资料。观察肺结核病灶在纤支镜下的表现,并于镜下行组织活检、刷检、组织盲检,支气管肺泡灌洗液涂片及PCR检查和痰结核分枝杆菌涂片检查。结果回顾性分析发现肺结核纤支镜下改变主要为粘膜充血肿胀(23.5%)、粘膜溃疡糜烂(19.6%)、粘膜表面灰白色苔状物或豆腐渣样物质覆盖(15.7%)和支气管瘢痕或狭窄(13.1%)。纤支镜下组织活检、刷检、组织盲检,支气管肺泡灌洗液涂片及PCR检查和痰结核分枝杆菌涂片检查,诊断为肺结核的患者占最终明确诊断为肺结核的百分比分别为41.2%(63/153),47.1%(72/153),11.1%(17/153),56.9%(87/153),55.6%(85/153)和32.0%(49/153)。结论菌阴性肺结核镜下改变多样无特征性,纤支镜检查技术对菌阴性肺结核的明确诊断具有重要价值,多种纤支镜技术联合能够明显提高菌阴性肺结核的诊断率。     

血清和支气管肺泡灌洗液GM试验对非粒细胞缺乏患者不同类型肺曲霉病的诊断价值分析CSCD

目的探讨血清和支气管肺泡灌洗液(BALF)GM试验在不同类型肺曲霉病中的诊断价值,并确定BALF GM试验对常见肺曲霉病的最优cut-off值。方法收集2017年1月至2021年3月在重庆医科大学附属第一医院诊断为肺曲霉病且同时送检过血清和BALF GM试验的非粒细胞缺乏患者资料146例,其中侵袭性肺曲霉病(invasive pulmonary aspergillosis,IPA)97例,慢性肺曲霉病(chronic pulmonary aspergillosis,CPA)39例,变应性支气管肺曲霉病(allergic bronchopulmonary aspergillosis,ABPA)10例;并随机选取132例同时期患有其他类型肺部疾病者作为对照组。统计分析血清和BALF GM试验对不同类型肺曲霉病的诊断性能。结果在非粒细胞缺乏患者中,BALF GM试验对IPA和CPA诊断的最优cut-off值分别为1.0和0.91,敏感性分别为74.2%和74.4%,特异性分别为83.3%和81.1%,但对ABPA的诊断作用有限(AUC=0.648);在cut-off值为0.5时,血清GM试验对IPA和CPA的诊断敏感性分别为41.2%和10.3%,对ABPA的诊断价值较差(AUC<0.5)。结论在非粒细胞缺乏患者中,BALF GM试验对IPA和CPA的诊断均有良好辅助诊断作用,但对ABPA的诊断作用有限;血清GM试验对IPA和CPA的诊断敏感性较低,对ABPA的诊断价值更差。     

建立一种反向斑点杂交法检测肺炎支原体23S rRNAV区A2063G基因突变的方法

目的建立检测肺炎支原体（Mycoplasma pneumoniae,MP）23S rRNA V区2063基因型的反向斑点杂交方法,并与PCR产物直接测序法的结果进行比较分析。方法19例自临床咽拭子标本分离培养的MP,用自行设计的反向斑点杂交法检测23S rRNA V区2063基因型,同时对相应序列测序分析。抽提标准菌株FH和127份经PCR测定MP阳性的临床标本基因组DNA,用MP阴性的基因组DNA抽提物5份作阴性对照,用反向斑点杂交法检测23S rRNA V区2063基因型。结果19例分离培养的MP,经反向斑点杂交法检测15株有23S rRNA V区基因A2063G位点突变;4株为2063A,与测序结果一致（Kappa一致性检验,P〉0.05）。经反向斑点杂交法检测,127份MP阳性的基因组DNA抽提物中有122份标本为A2063G位点突变,标准菌株FH和2份DNA抽提物的2063位点碱基为A,还有3份抽提物标本的2063位点碱基既有A又有G,5份阴性对照均无显色。结论反向斑点杂交方法能快速、准确检测临床MP 23S rRNA V区2063基因型。