Fonsecaea monophora致皮肤着色芽生菌病1例

报告重庆地区1例由Fonsecaea monophora感染引起的皮肤着色芽生菌病。患者,男,81岁,因左上臂内侧皮肤被铁片划伤后出现溃疡伴疼痛1年余到我院就诊。对患者皮损组织行组织病理学检查和真菌培养,将培养出的菌落做形态学和分子生物学鉴定。真菌培养获得菌落形态,小培养乳酸酚棉兰染色得到镜下特征形态,菌落形态：可见暗棕色和黑色菌落生长;镜下形态：可见枝孢型和喙枝孢型产孢;皮损处组织病理学检查结果：可见慢性肉芽肿样改变。ITS(internal transcribed spacer)区域测序鉴定结果为Fonsecaea monophora。根据实验室培养结果和临床资料分析确定该例为Fonsecaea monophora感染引起的着色芽生菌病。口服伊曲康唑200 mg, 2次/日,联合药物涂抹和光动力学治疗有效。     

基于目标颜色基及梯度方向匹配的菌落分割计数算法

【目的】通过菌落测试片提取菌落并计数,在农业、食品业、医疗卫生等领域中是一项常用且重要的工作。目前,菌落自动计数算法大都是以菌落培养皿为主要工作对象,对菌落测试片适用性较差。另外,目前相关技术在常规的粘连物体分割中有着较好的效果,但在菌落分割计数中,由于菌落本身的形态特征,对粘连菌落分割计数的效果尚不够精准。【方法】为解决此类问题,本文提出一种基于目标颜色基及梯度方向匹配的菌落分割计数算法。首先利用图像中菌落的颜色特征作为基,将图像转换到基空间内,以增强菌落与背景之间的差异,其次利用菌落图像的梯度幅值特征对梯度方向进行滤波,然后通过梯度方向进行匹配,进而将粘连的菌落分割,最后利用非极大值抑制的方法筛选出菌落并计数。【结果】经试验,本研究算法的计数精度可达98.00%,能够满足实际需求。【结论】在针对菌落的目标分割计数中,本研究算法不仅计数精度高,而且具有较好的鲁棒性,在对不同厂家的菌落总数测试片菌落分割计数中均有优异效果;然而在对大面积目标的检测分割中算法的准确率会有所下降,因此,该算法更适合于菌落等小目标的检测分割。     

皮肤淋巴管型孢子丝菌病1例

报道1例皮肤淋巴管型孢子丝菌病。患者女,79岁,农民。左上肢皮肤红斑结节线状分布,疼痛瘙痒不适两月余。皮损病理及PAS染色提示真菌感染,对皮损和脓液进行真菌镜检,结果为阴性。真菌培养、小培养及对培养阳性菌落进行分子生物学鉴定提示申克孢子丝菌。诊断:皮肤淋巴管型孢子丝菌病。予口服伊曲康唑胶囊0.2g/次,2次/d,治疗1个月后明显改善。     

外科手消毒前免刷手与刷手两种方法对术中不同时点手带菌情况的影响

比较外科手消毒前免刷手与刷手两种方法对术中不同时间节点手部带菌情况的影响。选取在本院工作的手术室医务人员共96名,使用计算机产生随机数字表将研究对象随机分配为无刷手组和刷手组各48名,无刷手组研究对象在洗手时不刷手,刷手组研究对象正常刷手,比较免刷手和刷手洗手法在使用同种消毒液后及术中不同时间节点的手不消毒效果、手部皮肤菌落种类和医务人员对于手部皮肤的评价。经研究发现,无刷手组和刷手组研究对象术中不同时间节点手部存活菌落数比较无显著统计学差异(p0.05)。两组各时间节点手部皮肤均有细菌检出,主要以凝固酶阴性葡萄球菌、棒状杆菌为主,肠球菌次之,两组比较无显著统计学差异(p0.05)。无刷手组对于手部皮肤的评价要明显高于刷手组(p0.05),差异有统计学意义。外科手消毒时,免刷手能够达到与常规刷手法同样的消毒效果,消毒时效能维持3 h以上,减免刷手步骤,操作简单且使用方便,对手部皮肤刺激较小,可在临床广泛推广使用。     

淡紫拟青霉所致皮肤及皮下感染:临床和实验研究

目的 报道国内首见淡紫拟青霉所致皮肤及皮下感染患者1例。方法 取患者皮损标本多次直接镜检,真菌培养,根据真菌培养的菌落特点和镜下形态、扫描电镜及DNA序列测定鉴定致病菌种,并对分离的致病菌进行体外药敏试验。结果 患者为6个月患儿,出生12d时面部出现粟粒大暗红丘疹,脓疱,并缓慢扩大。刮取脓疱直接镜检见无色细长分支菌丝。多次培养见灰紫色羊毛状菌落生长,光镜及电镜下可见无色细长分支、分隔菌丝、直立的分生孢子梗、顶端单轮生帚状支及大量柱状或分散柱状排列椭圆形、近球形小分生孢子。根据其菌落颜色及瓶梗形态等形态学特征鉴定为淡紫拟青霉,其rRNA基因DNA测序分析证实其表型分类。动物实验证实该菌的致病性,组织相中胶质性损害为其主要病理特征。体外药敏试验提示其对特比萘芬、酮康唑较敏感,对伊曲康唑、氟康唑敏感陛较差。结论 该病例被确定为淡紫拟青霉所致的皮肤及皮下感染,为国内首例。     

Eltor型霍乱弧菌L型的诱导及形态学观察

本文主要介绍Eltor型霍乱弧菌在液体和固相的青霉素诱导下形成L型的过程及其菌落和菌体的形态学改变。Eltor型霍乱弧菌在被诱导3—5次即可出现典型的L型菌落。本试验共诱导10次,获得稳定的L型菌株,菌落形态除油煎蛋样外,还可见到双重心样菌落、靶环样菌落、纤维型菌落。菌体的正常状态为徽弧状,经青霉素作用后,微弧状消失,膨大变直,继尔变成杆状和杆状长链。菌落中心多为相互盘绕、交织成网状的丝状体。     

菌落杂交

菌落杂交技术通过RNA-DNA或DNA-DNA杂交能在短时间内筛选出含某些特异DNA序列的细菌克隆。细菌菌落在铺于琼脂平皿中的硝酸纤维素滤膜上培养。影印上述菌落作参比菌落,并于2-4℃保存。裂解滤膜菌落细胞,不必除去细胞残屑,释出DNA作原位变性。放射RNA或DNA探针与滤膜上菌落DNA杂交。     

小菌落突变株：一种利于持续复发性感染的细菌致病形式

小菌落突变株是一种具有独特表型及致病特征且生长缓慢的细菌亚群。在表型上,小菌落突变株表现为生长率低、菌落形态不规则及生化特性异常,这使得临床微生物学家在鉴定时遇到了挑战。在临床上,小菌落突变株比相应的野生株更能持续存在于哺乳动物细胞中,且对抗生素更不敏感。当宿主细胞形成应急的保护性环境时,小菌落突变株会引发隐性或复发性感染。这篇综述涵盖了小菌落突变株相关表型、遗传及临床上的特征,重点描述目前研究最多的葡萄球菌。     

单种群菌落分形结构的形成及其机制研究

在变形杆菌、绿脓杆菌单种群菌落分形结构的形成过程中,细菌的运动、潜－生序变化及环境的营养水平是菌落形成扩散限制聚合模型（ＤＬＡ）分数维图样的关键。对菌落环境的分析结果显示单种群菌落中非平衡环境的形成是菌落分形结构产生的根本机制     

细菌平板菌落计数的改进方法

细菌平板菌落计数是微生物教学、科研及生产实践中最常用的活细菌总数测定方法。由于它是根据固体平板上一个菌落代表一个细菌的原理而设计的,因此深层菌落的存在、菌落的大小及疏密程度等因素均影响观察者观察计数。为便于观察.提高菌落的检出率,对常规平板菌落计数法做如下改进: 在倒平板之前,向装有150ml牛肉膏蛋白胨固体培养基的三角瓶内加入1/1000浓度的氧化还原染料     

矿质元素对北虫草继代培养不同菌落子实体产量及菌丝生长速度的影响

主要研究矿质元素对北虫草继代培养中形成的不同类型菌落子实体产量及菌丝生长速度的影响, 旨在探讨矿质元素与子实体产量以及菌丝生长速度的关系。采用正交试验, 将北虫草优良菌株L20在不同矿质元素培养基上进行12次继代培养。结果表明菌株L20在不同培养基中继代培养后形成7种菌落类型, 有子实体形成能力的菌落为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅴ型, 其中Ⅰ型菌落产量最高、Ⅲ型中等、Ⅱ型最低, Ⅴ型形成的子实体均为畸形; Ⅳ、Ⅵ、Ⅶ型无子实体形成能力。菌丝生长速度依次为Ⅴ型 > Ⅳ型 > Ⅶ型 > Ⅵ型 > Ⅲ型 > Ⅱ型 >Ⅰ型, 高产型菌落生长速度最慢, 而低产型菌落菌丝徒长, 表明菌落生长速度与子实体产量成负相关。优型菌落——Ⅰ型菌落子实体高产及高产保持代数最多的矿质元素配方为K3Mg2Ca4Mn3Zn2, 其中Mn和K促进子实体高产, K、Mg、Ca有利于高产保持多代。抑制Ⅰ型菌落菌丝徒长的最佳配方为K3Mg2Ca2Mn3Zn2, 其中Mn对其抑制作用最为显著。     

真菌菌落示教标本的制备

在医学微生物教学中,真菌占的比重不大,但实验准备工作却较繁琐。经实践,本人认为用以示教的真菌菌落如皮肤丝状菌,深部真菌,食物中毒性真菌的有关代表株,若经相应的培养基(沙氏或察氏培养基)培养出所需时期的菌落后,用棉球沾取甲醛溶液放置培养管内经37℃     

噬菌体脱毒机理的研究Ⅰ

用噬菌体处理河流弧菌Ⅱ的时间不同,细菌菌落的透明度和超微结构也不一样。在吸附后７ｈ开始菌落出现透明度的变化,首先是不透明（乳黄色）的菌落占绝对优势,但已出现半透明和透明菌落,培养到４８ｈ时,几乎全部变为透明菌落。透明菌落不再能与其噬菌体吸附而产生噬斑,也不会再感染鲍而产生脓疱病。透射电镜观察发现,透明菌落的菌细胞形状和结构大都发生变化。细胞壁薄,细胞质浓缩集中在细胞的一侧或一端。不透明菌落细胞形状正常,细胞壁完整,细胞质外延使细胞横切面呈指环状。电镜观察不同时间取样发现,１号样品细胞结构无明显变化。２号样品多数细胞产生外膜泡。３号样品许多细胞结构与１号相似,但在一些细胞的附近出现成簇的外膜泡和噬菌体。４号样品细胞结构变化较大,细菌的核区被破坏,在细胞的周围发现许多噬菌体。５号样中发现许多菌细胞被破坏,也在一些细胞内发现噬菌体。６号样中透明菌落和不透明菌落细胞结构变化明显。７号样几乎所有菌落都变为透明状,许多细胞破裂等。     

不同培养基对冬虫夏草菌丝生长的影响

不同培养基对3个来源不同的冬虫夏草菌菌丝生长影响的研究结果表明,在不同培养基上,各菌株之间在菌丝萌发时间、40d菌落直径和菌落形态上表现出一定的差异。同时筛选到的最优培养基比已报道培养基的菌落生长速度快2～3倍,且菌丝为白色、粗壮,菌丝质量较优。     

TTC在螺旋平板法测定冷冻水产品中菌落总数的应用研究

研究以2,3,5-三苯基氯化四氮唑(TTC)作为指示剂在螺旋平板法测定冷冻水产品中菌落总数的适宜用量。通过对大肠埃希氏菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌三株标准菌株制备的菌悬液在含梯度含量TTC的平板计数琼脂(PCA)中分别进行菌落计数、生长和显色观察实验,初步筛选出适宜的TTC含量范围。以冷冻水产品样品在该用量范围内的菌落计数和显色观察实验,验证在实际应用中的适宜性。验证实验结果显示:在TTC含量为1.5mg/100ml的组与未添加TTC的对照组菌落计数结果经统计学检验无显著性差异,且菌落显色情况良好,有利于计数的准确性。     

铁锈色小孢子菌引起Majocchi肉芽肿1例临床分析及分子鉴定

目的报道1例铁锈色小孢子菌感染引起的结节性肉芽肿及病理改变,探讨诊断和治疗。方法反复取感染部位分泌物进行细菌和真菌培养,对皮损进行病理检查,将培养菌落进行rDNAITS测序鉴定。结果分泌物PDA培养基中可见灰色菌落,表面呈绒毛状,37℃生长良好,镜下可见分隔菌丝未见分生孢子。分子生物学ITS测序结果显示：病原菌与铁锈色小孢子菌相似率为100%。确诊后用伊曲康唑治疗取得良好效果。结论在新疆特别是南疆地区头癣是很常见的皮肤病。对皮肤出现结节性损害且长期抗炎治疗不愈的患者,要考虑真菌感染的可能,及时诊断并早期进行抗真菌治疗。     

名词解释

菌落在固体培养基上,一个单细胞(孢子)经过一定时间培养后,在一局限的地方繁殖成为肉眼可见的细胞群体,称为菌落。因之,可用菌落数来代表活菌(孢子)的数目。不同成分的培养基上,菌落呈现的特征不同;不同的菌在相同成分的培养基上,菌落呈现的特征也各不相同;又由于各种菌在固定的培养基上菌     

利用弗氏链霉菌的修饰系统克服吸水链霉菌的限制性障碍——发展吸水链霉菌转化系统的尝试

用来自变铅青链霉菌TK24的质粒plJT02(tsr、mel~+)转化吸水链毒菌应城变种10-22的原生质体,未能得到转化子。但改用来自弗氏链霉菌ATCC 10745的plJ702转化10—22原生质体却得到了转化子。转化频率约10 ~3—10~4转化子/微克DNA。在这些转化子中,只有约1/1000是黑色菌落(mel~+),绝大部分为白色菌落(mel~-)。分别挑出黑色、白色2种菌落,只有从前者能提出电泳可见的plJ702质粒带。2种菌落的质粒提取物,均能转化TK24原生质体并正常表达黑色素。在非选择性条件下,从10-22(pIJ702)黑色菌落的群体中,获得了少数白色菌落,经证明它们是10-22的宿主突变体。这些突变体的plJ702转化子出现均一的黑色菌落。     

子宫颈感染孢子丝菌1例

目的探讨双相真菌申克孢子丝菌(复合体)子宫颈感染的临床特点,为进一步提高实验室及临床诊断水平提供资料。方法分析1例申克孢子丝菌(复合体)子宫颈感染临床表现与实验室诊断过程,检索近年来国内外主要文献进行复习。结果患者阴道分泌物镜检见成团的革兰染色阳性、圆形、卵圆形孢子,较球菌大,较酵母样真菌孢子小。37℃血平皿培养,形成边缘不齐、表面有褶皱、干燥、有韧性不易挑取的白色菌落;革兰氏染色镜下见染色阳性酵母样芽生孢子。25℃SDA培养,形成中心有白色褶皱,周围绒毛样的丝状真菌菌落形态,直接涂片镜检见大量有隔菌丝、孢子。上述特征符合申克孢子丝菌。国内外文献检索,申克孢子丝菌感染多为皮肤局限性、肺炎、骨关节等病例,偶有累及局部淋巴结的病例,仅少数艾滋病等免疫力极度低下患者为全身播散性感染。结论申克孢子丝菌所致子宫颈感染罕见,掌握其在人体内与不同条件下培养菌落的特征有助于及时诊断。     

食品微生物检验中菌落总数测定的注意事项

1菌落总数及测定菌落是指细菌在固体培养基上生长繁殖而形成的能被肉眼识别的生长物,它是由数以万计相同的细菌集合而成。当样品被稀释到一定程度,与培养基混合,在一定培养条件下,每个能够生长繁殖的细菌细胞都可以在平板上形成一个可见的菌落。菌落总数就是指食品检样经过处理