大熊猫粪便类固醇激素研究进展

概述了大熊猫粪便样本采集和保存方法,系统总结了大熊猫粪便类固醇激素提取、测定方法和应用研究,对大熊猫粪便类固醇激素的应用进行了展望。     

圈养林麝粪便类固醇激素保存时效性研究

用非损伤性采样方法对圈养林麝在三个条件:1)未处理,2)90%甲醇,3)0.9%抗生素,15个时间梯度下(20℃)的粪便中类固醇激素及其代谢物的保存时间及方法进行了比较,结果表明:林麝粪便在室温下(20℃),孕酮及其代谢物48 h有明显的上升趋势;雌二醇、睾酮和皮质醇及其代谢物在18 h均出现显著变化;对比抗生素保存,用甲醇保存是一种较好的保存林麝粪便类固醇激素的方法;然而不同激素用甲醇保存的时间不同,孕酮不宜超过1个月,皮质醇不宜超过半个月,睾酮则不宜超过10天,而雌二醇可以保存2个月之久.     

粪便类固醇激素检测准确性的影响因素

近年来,采用非损伤性取样方法监测野生动物的生理状况越来越受到重视。本文对检测过程中影响动物粪便类固醇激素检测准确性的因素进行了分析总结,包括样品的新鲜程度、样品量和保存方法;激素代谢的日节律和季节性变化;动物的年龄、性别和繁殖状态等,以期为粪便类固醇激素检测技术在野生动物中的准确应用提供借鉴。     

大熊猫尿液类固醇激素研究现状及展望

概述了大熊猫尿液样本采集和保存方法,系统总结了大熊猫尿液类固醇激素的提取方法、测定方法以及大熊猫尿液类固醇激素在应激反应监测、发情期监测及最佳配种时间选择、雌性卵巢功能和妊娠监测、雄性繁殖力评估等方面的应用研究,结合前人的研究工作,对大熊猫尿液类固醇激素的应用前景进行展望.     

圈养林麝粪样类固醇激素提取方法比较及优化

野生动物粪便作为非损伤性样本具有易于采集、保存及运输的优点,被广泛用于生理代谢产物提取并探查野生动物的生理状态,而粪样类固醇激素是最常用的指标.迄今不同研究者对粪样类固醇激素的提取方法并不统一,而对于各提取步骤的系统比较并进而优化提取方法的研究较少,可能导致测定结果的不确定性.本研究以圈养林麝(Moschus berezovskii)粪便为实验样本,设置粪便取样量、磨碎方式、单次和复提、烘干和免烘干四个步骤的比较,分别采用酶联免疫法和放射免疫方法检测粪样孕酮值和皮质醇值.结果表明,0.1 g、0.3 g和0.5 g三组取样量的孕酮值和皮质醇值均不存在显著差异,但0.1 g组的激素测定值稳定性差;粪便粉碎机磨碎样本和研磨杵研磨样本的孕酮值存在显著差异,但两者皮质醇值无显著差异;溶剂提取的单次样本和复提样本的孕酮值和皮质醇值均存在显著差异;提取液烘干样本与免烘干样本的孕酮和皮质醇不存在显著差异.因此,圈养林麝粪样类固醇激素提取方法优化为,采用粉碎机磨碎的粪样且取样量超过0.1g干粪,提取时进行复提,在验证待测液中的乙醇浓度不会影响激素测定的前提条件下对上清液免烘干,可达到准确、快捷及简便的效果.     

性类固醇激素及其受体在文昌鱼性腺和神经系统中的分布

首次用雌二醇,睾酮及孕酮受体的多克隆抗体在文昌鱼性腺,脑泡和神经管中进行免疫细胞化学定位研究,结果表明,不同发育时期的卵原细胞和卵母细胞中都存在雌激素,雄激素和孕激素受体,在小生长期,3种受体通常定位在卵原细胞和早期初级卵母细胞的胞质或核膜,在大生长期和成熟期,则定位在胞质和核质,在雄性,3种类固醇激素受体分布在不同发育时期的精原细胞,精母细胞和精子细胞（雌激素受体例外）中,受体阳性物定位在胞质和核,另外,用免疫细胞化学方法和性类固醇激素抗体对文昌鱼不同发育时期的性腺和神经系统进行研究,结果揭示,免疫阳性物存在于不同发育时期的卵巢和精巢中,在卵巢发育是上期,卵原细胞和卵母细胞的胸质和核仁膜对紫二醇,睾酮和孕酮抗体显示强或中等强度免疫阳性反应,在大生长期和成熟期,卵母细胞胞质和核仁膜对睾酮和孕酮抗体的免疫阳性反应明显减弱,而对雌二醇则显著增强,在雄性,随着精原细胞和精母细胞对孕酮抗体发生强的免疫阳性反应,在成熟期则对雌二醇抗体发生免疫阴性反应,精子始终为免疫阴性,本文研究首次发现,文昌鱼脑泡和神经管中存在哺乳动物神经旮体激素样免疫阳性神经细胞及其纤维,免疫阳性物分布在神经细胞胸质,核显阴性反应,这些结果为证明文昌鱼性类固醇激素参与调节性腺发育成熟和生殖内分泌调控轴的功能成熟提供重要的形态学新证据。     

外源激素对雌性黄鳝血清类固醇激素的影响

本文研究了几种外源激素对不同季节的雌性黄鳝血清性类固醇激素的影响。结果表明:鲤鱼垂体匀浆和人绒毛膜促性腺激素均显著蹭加血清类固醇水平,多巴胺拮抗剂domperidone降低血清类固醇水平,鲑鱼促性腺激素释放激素类似物增加血清类固醇水平。这些结果提示:雌鳝促性腺激素分泌亦受促性腺激素释放激素刺激,但多巴胺是否也起促性腺激素释放抑制因子的作用尚不清楚。垂体-性腺轴对外源激素的反应有明显的季节性差异,繁殖季节性腺成熟系数高的鱼反应性最强,繁殖前性腺未成熟期较繁殖后恢复发育期反应快.     

神农架川金丝猴粪便和尿液中类固醇激素的检测

灵长类动物类固醇激素的研究已经在很多物种间展开(Cariso et al.,1999;Lutz et al.,2000;He et al.,2001;Yan and Jiang,2006;Brandon et al.,2008;Lu et al.,2010;Kim et al.,2012)。特别是对于没有明显发情特征的灵长类动物,类固醇激素的变化可以为它们的繁殖状态提供更多可靠的评估(Fujita et al.,2001)。自然状态下野生动     

甲壳动物的类固醇激素及其对卵巢发育的作用

如何促进虾蟹的卵巢发育是经济甲壳动物养殖中的重要问题.对于这一问题的解决尚在探索之中.如果使用外源激素能达到这一目的,无疑是方便的.为此,对甲壳动物中的类固醇激素及其作用进行了较多的研究.     

性腺甾体激素对雌,雄大鼠下丘脑血管升压素mRNA水平的影响

实验用１０－１１周龄经阉割的雌、雄Ｓｐｒａｇｕｅ－Ｄａｗｌｅｙ大鼠进行。以３末端异羟基洋地黄毒甙标记的２６个碱基长的寡核苷酸作为检测探针,用核酸斑点杂交技术检测大鼠下丘脑血管升压素ｍＲＮＡ水平。在假手术对照组,雄性大鼠下丘脑ＡＶＰｍＲＮＡ水平经雌性大鼠高４５％（Ｐ〈０．０５）,血浆渗透压高于雌性大鼠（Ｐ〈０．０５）。摘除卵巢的大鼠下丘脑ＡＶＰｍＲＮＡ深恶痛绝经假手术组雌性大鼠高３０％（Ｐ〈０．０５     

气相色谱-质谱法分离鉴定胡桃(Juglans regia)花粉中的甾类激素

用有机溶剂提取胡桃花粉中的甾类化合物,以70％甲醇除掉脂类杂质,然后将提取出来的甾类化合物衍生化,经气相色谱分离,质谱仪鉴定,搞清胡桃花粉中含有雌二醇、谷甾醇等甾类激素;植物雄配子体中存在有动物雌性激素。     

九如天宝液含雌性激素样物质的作用研究

以柞蚕雌蛾提取液为主要成分的九如天宝液,经药效学和临床验证表明：腹腔注射和灌胃高、中、低三个剂量均可使丙殴事九素所致的大鼠前列腺增生的体积明显缩小,重量减轻（P值均＜001）,高利量腹腔注射与阳性对照药物雌H醇的效果接近;治疗前列腺肥大的总有效率达92．1％,妇女更年期综合症的总有效率达88.0％     

野生鲇鱼生长激素分泌的季节变化及其神经内分泌调控

采用离体垂体碎片灌流孵育系统 ,将处于性腺退化期野生鲇鱼垂体切成约 1mm3 的碎片 ,用M 199冲洗之后放入灌流柱的两层Cytodex -Ⅲ微载体之间 (温度为 19± 1℃ )。每 5分钟收集一管灌流液 ,- 2 5℃贮存待测GH。采用鲤鱼GH放射免疫测定方法 (cGHRIA)测定鲇鱼垂体碎片灌流液以及血清和垂体中的GH含量。结果表明 :促黄体素释放激素类似物 [desGly10 (D Ala6)LHRHethylamide ,LHRH A]不能显著刺激离体垂体碎片基础GH分泌 ,注射LHRH A后不能显著提高血清基础GH水平 ;注射DA能显著提高鲇鱼血清基础GH水平 ,APO能以剂量依赖方式显著刺激垂体碎片基础GH分泌。雌、雄鲇鱼血清GH水平在 6月达到峰值 ,垂体GH水平在 3月和 7月份各出现一个峰值 ,各个季节雌鱼垂体和血清GH水平均显著高于雄鱼。鲇鱼血清和垂体GH水平与生殖周期有密切联系。     

大鼠甲状腺促性腺激素释放激素受体的免疫组织化学及原位杂交研究

目的 探讨大鼠甲状腺中是否存在促性腺激素释放激素受体（GnRH-R)及其细胞定位,方法 收集15例雄性SD大鼠甲状腺,分别制成石蜡切片和冰冻切片,采用免疫组织化学ABC法和原位杂交技术。确定GnRH-R在其中的表达与定位。结果 大鼠甲状腺中,GnRH-R呈较强的免疫反应阳性,阳性物质分布在胞持,胞核呈阴性,原位杂交也检测到较强的GnRH-RmRNA阳性杂交信号,亦分布在胞质,胞核未见表达,结论 大鼠甲状腺可能自身合成GnRH-R。由此推断GnRH可能参与大鼠甲总而言之 腺功能的调节。     

GnRH受体与TRAIL在前列腺肿瘤中表达的研究

目的研究促性腺激素释放激素受体(GnRH-R)和凋亡相关蛋白(TRAIL)在前列腺肿瘤中的表达及临床意义.方法采用SABC免疫组化法及原位定量法,对前列腺肿瘤和前列腺增生患者中GnRH-R和TRAIL的表达进行检测及半定量分析.结果在前列腺癌组织高分化的11例,中分化的4例以及低分化的5例中,各种不同分化的癌组织均显示不同程度的GnRH-R和TRAIL阳性免疫反应,原位定量显示GnRH-R与TRAIL的表达均分别随着组织分化程度增高而增高(P<0.05),并且TRAIL较GnRH-R阳性免疫反应强.结论 GnRH-R和TRAIL表达量可能与前列腺恶性肿瘤的发生与发展有关.     

正常月经周期妇女卵泡液中激素水平的变化

本文测定了24例正常月经妇女在不同时相、不同大小卵泡的卵泡液中雌二醇(E_2)、孕酮(P_0)、雄烯二酮(A)、睾酮(T)、卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)和催乳素(PRL)的含量,并分析其与外周血中相应激素浓度的关系。测定结果显示:小卵泡的卵泡液中E_2、Po,FSH,LH水平低于大卵泡中水平,而A和T水平则相反。排卵前大卵泡中E_2(9815nmol/L),P_0(3316nmol/L),FSH(1.34IU/L)和LH(3.9lIU/L)达最高值。A(280nmol/L)和T(137nmol/L)却较小卵泡中水平低(相应为692nmol/L和176nmol/L)。PRL水平在大小卵泡中无显著性差异。卵泡液中甾体激素水平高于外周血7—20.000倍,FSH、LH水平为外周血的10—80％,PRL水平为60％—3倍。     

甲状腺素对雄性去势大鼠垂体分泌LH的反应性及其在血浆中浓度的影响

本文观察了雄性去势大鼠注射T_4后对血浆和垂体组织LH含量的影响及垂体对不同剂量的LHRHa的反应性。结果表明血浆LH含量与去势对照组相比,7.5μg组的第3、6、9天明显低(P<0.05),2.5和5.0μg组各天则无差异(P>0.05)。各组对100ng/100克体重LHRHa的反应比对500ng的要大,T_4 7.5μg组对LHRHa最大反应出现的时间比2.5和5.0μg组的推迟60min。垂体重量和LH含量各组无差异(P>0.05)。结果提示:7.5μg T_4对雄性去势大鼠的LH分泌和对垂体的LHRHa反应均显示抑制作用。     

侧脑室注射促甲状腺激素释放激素对大鼠睡眠—觉醒的影响

采用多导睡眠描记术研究了例脑室注射促甲状腺激素释放激素(TRH)对正常大鼠和去甲状腺大鼠睡眠-觉醒的影响。在正常大鼠,TRH引起觉醒增加,浅慢波睡眠(SWS_1)、深慢波睡眠(SWS_2)和总睡眠时间(TST)均减少,异相睡眠(PS)消失,SWS_1、SWS_2和PS的潜伏期均显著延长,给药后立即产生效应并在1h内达高峰。去甲状腺对大鼠的睡眠-觉醒无明显影响,注射TRH后引起的效应与正常大鼠相似。结果提示TRH有促进大鼠觉醒的作用,对各睡眠时相均有抑制作用,其作用部位可能在下丘脑以外的中枢结构。