同形小种的发现和利用：I.5＋10亚基的龙麦15生物型的起源和利用

以前的ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析表明龙麦１５在Ｇｌｕ－Ｄ１位点的高分子量（ＨＭＷ）麦谷蛋白亚基为２＋１２。我们通过对龙麦１５进行大量的ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析,发现了Ｇｌｕ－Ｄ１位点的ＨＭＷ麦谷蛋白亚基为５＋１０的龙麦１５生物型。文章分析了５＋１０龙麦１５生物型的产生,利用及对当前优质麦育种工作的理论和实践意义。     

小麦高分子量麦谷蛋白亚基分离方法的研究

小麦高分子量麦谷蛋白亚基（ＨＭＷ－ＧＳ）与小麦面包烘烤质量和面粉的加工特性密切相关,ＳＤＳ－ＰＡＧＥ是其常用的分离方法之一。ＳＤＳ－ＰＡＧＥ方法一般分为２类：第一类采用１１％和５％浓度的胶,后者用于分离２亚基和２＾＊亚基,该种方法常使用碱性提取液,需要２次电泳过程,且在５％浓度的胶中ＨＭＷ－ＧＳ易于和麦醇蛋白混淆;另外一类ＳＤＳ－ＰＡＧＥ采用梯度胶,配合使用银染方法,制梯度胶则使用梯度仪及磁力搅拌     

SDS—PAGE电泳对小分子多肽的分析

对一些小分子多肽进行电泳分析时,在固定,染色,脱色过程中极易扩散丢失;即使用常规尿素－ＳＤＳ－ＰＡＧＥ系统测定寡肽分子量,银染色后小于８ＫＤａ的标准品也无着色带显示。     

菜心中SDS-PAGE向负极泳动的富含苯丙氨酸的蛋白的发现

在提取乙醇酸氧化酶同工酶的过程中, 发现了一种在SDS变性下向负极泳动的富含苯丙氨酸的碱性蛋白.在3次重复实验中, 均可以从SDS-PAGE后的负极缓冲液中获得这种蛋白, 其碱性与酸性氨基酸残基的比例分别高达1.46、1.28和0.89,而苯丙氨酸含量分别高达为60.00%、65.62%和62.30%.其余氨基酸残基的含量则和普通蛋白的相近似.由于该富含苯丙氨酸的碱性蛋白是水溶性的, 碱性氨基酸残基应主要分布在蛋白的表面,而苯丙氨酸则组成一个强疏水内核.     

利用同工酶和SDS-PAGE技术对一些兰属(Cymbidium)品种的分析(简报)

利用同工酶和ＳＤＳ－ＰＡＧＥ技术对兰属（Ｃｙｍｂｉｄｉｕｍ）５个种和２个变种的１１个品种进行了分类研究,酯酶和细胞色素氧化酶的同工酶共出现２４条带,其中２３条具有多态性;ＳＤＳ－ＰＡＧＥ有３０条带,其中２５条带为多态性。根据同工酶和ＳＤＳ－蛋白质标记进行聚类分析,生化水平与传统的形态学分类结果基本一致,但某些兰属品种的分类地位与传统的分类有一些差异。     

小麦中高分子量麦谷蛋白的高效分离回收

以普通小麦小偃6号为材料,研究从SDS-PAGE中快速回收和累积蛋白亚基的方法。采用制备电泳(17 cm×17 cm×1.5 mm)进行分离,KC l快速染色,将目的蛋白条带切下,置于透析袋中电洗脱回收蛋白亚基。结果表明,在蛋白提取过程中加入四乙烯吡啶与常规方法相比能够更好地分离高分子量麦谷蛋白14和15亚基,回收后的14亚基经电泳检测为单点纯。本方法为高效分离回收小麦中高分子量麦谷蛋白提供了新的技术思路。     

TD-PAGE中若干技术的改进

本文介绍了TD-PAGE 实验操作中一些技术的改进,为得到较好的电泳效果提供了简单可行的方法。     

TD—PAGE中若干技术的改进

本文介绍了ＴＤＰＡＧＥ实验操作中一些技术的改进,为得到较好的电泳效果提供了简单可行的方法。     

G3基因工程菌发酵中pH值对包涵体型及目的蛋白表达的影响

在不同ｐＨ值条件下摇瓶及罐发酵Ｇ３双体分子重组菌。探讨ｐＨ值对Ｇ３双体分子包涵体形成及目的蛋白表达水平的影响，确定Ｇ３双体分子重组菌发酵最佳ｐＨ值为生长期ｐＨ７．０－＃．２，生产期ｐ６．７－６．８。     

用SDS溶解的蛋白质的Dot—ELISA和免疫双扩散技术

有些难溶性蛋白质用非离子型去垢剂不能溶解,溶解这类蛋白质有时要用2％(w/v)十二烷基磺酸钠(SDS)和4％;(v/v)巯基乙醇。但SDS和巯基乙醇又能影响免疫反     

高分子量麦谷蛋白１４和１５亚基的纯化、Ｎ—末端序列及部分生化特性研究

用ＳＤＳ－ＰＡＧＥ制备电泳技术结合一种新的凝胶中蛋白质显色方法,对普通小麦（Triticum aestivum)小偃六号的高分子量麦谷蛋白１４和１５亚基进行了有效的分离纯化,将其转印于ＰＶＤＦ膜上测定了Ｎ－端的氨基酸顺序,通过比较了发现它们与已知序列的其他的高分子是麦谷蛋白亚基高度同源。用两种双向电泳技术确定了它们的等电点（ＰＩ）属于碱性范围。     

高冰草中一种新型高分子量麦谷蛋白亚基编码序列的研究

高冰草(Agropyron elongatun)是普通小麦(Triticum aestivum)的近缘禾草,SDS-PAGE显示其所编码的麦谷蛋白亚基的类型较普通小麦更加丰富,是普通小麦品质改良的重要亲本之一。利用基因组PCR的方法从高冰草中克隆到一个新的高分子量麦谷蛋白亚基(HMW-GS)基因(AgeloG2)全编码序列,同源性分析表明：与普通小麦的1Dy12基因比较在少数位点发生了碱基替换和一处6碱基序列的缺失,同源性为99％;与普通小麦的1Dy10基因比较,该基因亦只有少数碱基的替换和两处18碱基序列的增加及一处6碱基序列的缺失,同源性为98％。从推导的编码序列分析,AgeloG2编码y型HMW—GS。综上分析,AgeloG2是一个新的高分子量麦谷蛋白y-型亚基基因。聚类分析结果显示,无论在基因序列还是推导的氨基酸序列上,小麦1Dy亚基与AgeloG2的同源性都高于与粗山羊来源的y型亚基的同源性。     

利用菌体酯酶同工酶和可溶性蛋白SDS—PAGE鉴定链霉菌融合子

利用酯酶同工酶技术鉴定链霉菌融合子证实,融合子SP-7和SR-T19的酯酶同工酶谱表现为介于双亲的中间型,并互不相同。此外,融合子SR-7还出现1条双亲所没有的决要酶带。表明融合子在融合过程中发生了真正的遗传重组,而不是亲本遗传物质的简单加合。菌体可溶性蛋白SDS－PAGE显示,融合子SR-7和SR-T19与双亲具有总体上的相似性,且可分辨的谱带数目和强度都超过了双亲,同时相互之间又有明显的不同,支持了这2个融合子均是双亲重组的后代。     

乌拉尔图小麦(Triticum urartu)1Ay高分子量麦谷蛋白亚基基因编码区的克隆与鉴定

应用简并性引物和基因组PCR反应从乌拉尔图小麦(Triticum urartu)不同种质材料中获得并测定了表达型和沉默型1Ay高分子量麦谷蛋白亚基基因全长编码区的基因组DNA序列.表达型1Ay基因编码区的序列与前人已发表的y型高分子量麦谷蛋白亚基基因编码区的序列高度同源,由其推导的1Ay亚基的一级结构与已知的高分子量麦谷蛋白亚基相似.在细菌细胞中,表达型1Ay基因编码区的克隆序列可经诱导而产生1Ay蛋白,该蛋白与种子中1Ay亚基在电泳迁移率和抗原性上类似,表明所克隆的序列真实地代表了表达型1Ay基因的全长编码区.但是,本研究所克隆的沉默型1Av基因的编码区序列因含有3个提前终止子而不能翻译成完整的1Ay蛋白.讨论了表达型1Ay基因在小麦籽粒加工品质改良中的潜在利用价值以及lAy基因沉默的机制.     

一个小麦低分子量谷蛋白基因的分离

以新疆小麦日喀则基因组DNA为模板,采用Glu-D3位点特异引物进行PCR扩增。PCR产物插入pUCm-T载体,转化感受态大肠杆菌E．coli DH5a,获得阳性克隆。经测序发现该插入片段长度1287bp,包括了部分启动子序列和完整的编码序列。编码序列推导的蛋白质含有8个半胱氨酸残基,属于6类LMW-GS中的TypeI类,为以后这类基因的功能研究提供了基因材料。     

用一种改进的电泳方法测定抗冻蛋白的分子量

针对抗冻蛋白分子量较小的特点,该文采用了一种改进的Ｔｒｉｃｉｎｅ－ＳＤＳ－ＰＡＧＥ法测定其分子量。采用三层胶系统并在电极缓冲液中以Ｔｒｉｃｉｎｅ代替Ｇｌｙｃｉｎｅ。     

小麦花药培养后代和杂交后代中高分子量麦谷蛋白亚基变异分析

通过对Alondra、Orofen等5个小麦品种进行花药培养,同时以新春9号、京771、CB037等9个高分子量麦谷蛋白亚基组成不同的小麦品种相互间配制24个正、反交组合,分析小麦加倍单倍体无性系和品种间杂交后代中高分子量麦谷蛋白亚基变异,探讨利用花药培养和杂交手段改良HMW-GS组成的可能性。SDS-PAGE电泳分析发现,小麦加倍单倍体无性系中HMW-GS发生了频繁变异,Alondra加倍单倍体中变异率最高(61.8%),Verry加倍单倍体次之(16.7%),均出现了原始材料中所不具备的亚基类型;HMW-GS在部分F1杂种中呈现不完全共显性、亚基表达沉默和正、反交亚基表达不一致现象,宁春4号/CB037、京771/宁春4号2个组合中出现了双亲所不含有的亚基;通过连续自交和对新出现亚基的跟踪选择,获得了表达新亚基的高代株系。研究结果对于改良小麦加工品质,加深了解小麦HMW-GS编码基因的遗传特性、结构特性等具有一定理论意义和实践价值。     

SDS—PAGE垂直板电泳技术鉴定脆弱类杆菌及相关菌株的探讨

本文报告了采用SDS—PAGE垂直板电泳技术对脆弱类杆菌及相关菌株超声波粉碎的可溶性蛋白抗原进行了电泳谱分析。结果证明这些菌株有三种共同的蛋白抗原组分,但不同菌种间蛋白成分存在着差异。     

SDS电泳技术的实验考虑及最新进展

水平薄层SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳是测定分子量的好方法。本文简述了方法的原理,技术的实验考虑和最新进展。提供了制胶的方法。指出了配制SDS电泳样品的关键。同时介绍了新的银染色方法和不使用缓冲液和滤纸桥,而使用缓冲液凝胶条作电极的最新进展。     

小麦高分子量麦谷蛋白亚基等电点的特性分析

运用IEF×SDS-PAGE和NEPEGE×PAGE 2种双向电泳技术对5个普通小麦品种和1个硬粒小麦品种的高分子量麦谷蛋白亚基等电点的特性进行了研究。结果表明,等位亚基之间的等电点比较相近,而非等位亚基之间的等电点存在不同程度的差异,其中普通小麦G lu-B 1位点的亚基等电点最高,属于碱性类型。用NEPHGE×SDS-PAGE电泳能够对G lu-B 1亚基的等电点特性进行比较分析。通过对麦谷蛋白亚基等电点特性及变异规律进行分析,可以为精确判断亚基类型和鉴定遗传新种质等研究工作提供有价值的信息。