佛波酯PMA促进碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)释放及机理研究

碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)是一个强促有丝分裂因子和促新血管生成因子,在实体瘤的发生及转移过程中起重要作用。由于bFGF缺乏信号肽序列,人们至今无法阐明bFGF释放的详细机制。我们选用PMA处理人鼻咽癌细胞CNE-2,发现胞内bFGF表达量提高,48 h后,bFGF胞外释放量有明显增加,提示PKC可能直接参与对bFGF释放的调控作用。同时我们的结果也表明:CNE-2细胞中PMA激活的PKC-α可在体外条件下磷酸化细胞内源的bFGF(18KDa)。结果提示了CNE-2细胞内PKC-α转位激活可能磷酸化胞内bFGF底物,导致bFGF释放的增加。     

惊厥和抗癫痫药对中枢神经系统内环核苷酸的影响

3＇,5＇-环-磷酸腺苷(cAMP)是细胞内的一种“第二信使”,许多激素、神经递质等“第一信使”的作用均通过它实现。3＇,5＇-环-磷酸鸟苷(cGMP)也是一种“第二信使”;但对其生理功能的研究比cAMP少。近年来认为,以上两种环核苷酸(CN)在某些神经病中(包括癫痫)可能起着重要作用。许多实验材料证明,动物脑内的CN与惊厥,癫痫和抗癫痫药物的作用有密切关系。一、惊厥和癫痫对脑内环核苷酸的影响     

线粒体呼吸链膜蛋白复合物Ⅱ的三维结构解析

线粒体作为细胞器,是细胞内的动力工厂,是细胞发生有氧呼吸作用的主要场所,它的功能是通过氧化磷酸化进行能量转换,为细胞活动提供能量。其中,氧化过程由线粒体内膜上的4个呼吸链膜蛋白复合物(简称复合物Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ)来完成。近20年来,解析这4个膜蛋白复合物的结构一直是生物学研究的热点。     

刺激内脏大神经引起的小强荧光(SIF)细胞的组织化学和超微结构变化

对豚鼠一侧内脏大神经进行电刺激后,显微分光光度术测量发现:(1)刺激侧腹腔神经节小强荧光(SIF)细胞的儿茶酚胺(CA)荧光强度较对照侧下降了35.6%±4.6%((?)±SE)。(2)在单胺氧化酶(MAO)反应后,刺激侧 SIF 细胞的平均光密度(O·D·值)较对照侧显著升高;在镁离子激活的腺苷三磷酸酶(Mg~(2 )-ATPase)反应后,刺激侧的 O·D·值较对照侧显著下降。对超微结构进行的立体学分析显示,刺激侧 SIF 细胞内颗粒小泡的体积密度(V_v)较对照侧下降29.6%。这些结果表明:(1)豚鼠腹腔神经节 SIF 细胞受交感节前神经纤维支配。(2)刺激这些神经纤维可促使 SIF 细胞释放 CA。(3)释放的 CA 主要来自颗粒小泡的贮存。(4)CA 的这一释放过程伴有细胞内 MAO 活性的升高及 Mg~(2 )-ATPase 活性的下降。这些细胞能对电刺激发生反应的事实提示:交感神经节中的成团分布型 SIF 细胞可以在应激状态下,通过释放 CA 参与对机体的内分泌调节过程。     

缺氧性肺血管收缩的细胞机制

缺氧直接作用于肺血管平滑肌细胞而使肺血管收缩。缺氧使细胞膜Ca~(2 )通透性增加,K~ 电导降低、膜电位下降,产生Ca~(2 )依赖性动作电位,导致肺血管张力增加和肺血管收缩。缺氧还能使平滑肌细胞内能量代谢发生改变,抑制氧化磷酸化和三羧酸循环作用,降低磷酸势能,引起肺血管收缩。缺氧减少细胞内氧自由基的产生而使细胞内氧化还原状态发生改变,GSH/GSSG和NADPH/NADP~ 比值增高,导致肺血管阻力增高。     

止泻药对大鼠小肠环核苷酸依赖性蛋白激酶活性的作用

<正> 众所周知,由环核苷酸依赖性蛋白激酶激活的胰蛋白磷酸化过程在细菌内毒素引起的腹泻中为一具有重要过程作用。本文在大鼠小肠内研究了两种止泻药Iopesamide及Somatostatin(生长激素释放抑制因子)能否抑制蛋白激酶的活性。     

肌醇1,4,5-三磷酸受体与阿尔茨海默病

细胞内质网上的肌醇1,4,5-三磷酸受体(inositol 1,4,5-trisphosphate receptors, IP3Rs)是调节Ca~(2+)释放的重要离子通道。Ca~(2+)稳态是维持机体细胞生理功能的重要基础,Ca~(2+)信号参与酶激活、囊泡释放和细胞凋亡等多种细胞过程。研究表明,Ca~(2+)信号异常与阿尔茨海默病(Alzheimer's disease, AD)密切相关,神经元中钙信号异常可以导致细胞稳态失衡、突触功能丧失,甚至细胞死亡。现对IP3Rs的生物特性及其介导的Ca~(2+)释放在阿尔茨海默病发生发展过程中的作用进行综述。     

褪黑素与维生素 E 对抗花萼海绵诱癌素毒性作用的差异

最近的研究发现,褪黑素对花萼海绵诱癌素 (calyculin A , CA) 引起的骨架蛋白神经细丝异常过度磷酸化有保护作用 . 为进一步探讨褪黑素对骨架蛋白τ异常过度磷酸化的保护作用及其机制,分别用 CA, CA+ 褪黑素或 CA+ 维生素 E 处理鼠野生型成神经瘤细胞 (N2awt) ,采用 MTT 法测定细胞存活率,用免疫印迹法测定τ蛋白磷酸化水平,用 ³²P- 特异底物标记技术检测 GSK-3 和 PP-2A 活性,并进一步测定了细胞内脂质过氧化产物丙二醛含量,细胞内过氧化氢酶、超氧化物歧化酶和谷胱甘肽过氧化物酶活性 . 结果显示：褪黑素不仅对 CA 引起的抗氧化酶活性降低和脂质过氧化的保护作用强于经典抗氧化剂维生素 E ,而且对τ蛋白磷酸化的保护作用也强于经典抗氧化剂维生素 E ;褪黑素可同时激活 PP-2A 又抑制 GSK-3 ,而维生素 E 同时抑制两种酶的活性 . 研究提示：褪黑素既通过抗氧化作用,也通过调节细胞内磷酸化平衡对抗 CA 对神经细胞的毒性作用 .     

超速驱动阻抑

当心脏中某一起搏点被高于其自身发放频率的刺激驱动时,当驱动一停止,随即出现该起搏点起搏活动的暂停和起搏活动恢复后的负性变时性效应,这一现象称为超速驱动阻抑。窦房结超速驱动阻抑发生的机制有迷走神经末梢释放乙酰胆硷、[Ca~(2 )]_i和/或[Na~ ]_i的增高及产电性钠-钾泵的主动转运增强等因素参与;而心室内自主起搏点的超速阻抑则主要由于[K~ ]。增高和产电性钠-钾泵的激活增强。在生理状况下,窦房结对辅助起搏点施加的超速驱动阻抑是其主导心脏节律的机制之一。     

超速驱动阻抑

当心脏中某一起搏点被高于其自身发放频率的刺激驱动时,当驱动一停止,随即出现该起搏点起搏活动的暂停和起搏活动恢复后的负性变时性效应,这一现象称为超速驱动阻抑。窦房结超速驱动阻抑发生的机制有迷走神经末梢释放乙酰胆硷、[ca~(2+)]_i和/或[Na~+]_i的增高及产电性钠-钾泵的主动转运增强等因素参与;而心室内自主起搏点的超速阻抑则主要由于[K~+]_0增高和产电性钠-钾泵的激活增强。在生理状况下,窦房结对辅助起搏点施加的超速驱动阻抑是其主导心脏节律的机制之一。     

HSV1即刻早期基因产物ICP22对P53-mdm-2反式转录激活功能的抑制作用

Ⅰ型单纯疱疹病毒(HSV1)即刻早期基因产物ICP22在病毒感染细胞的过程中能够和细胞内的多种调控分子发生相互作用, 从而影响细胞内正常的分子生物学过程. 在转染细胞内表达的ICP22分子能够促进细胞进入S期, 这一作用可能是通过ICP22对mdm-2启动子的结合作用, 从而影响了P53对其的反式转录激活作用, 导致MDM-2结合P53并经泛素途径降解的效应降低, 间接地使细胞内P53水平增加而使细胞进入S期的过程加速.     

惊厥和抗癫痫药对中枢神经系统内环核苷酸的影响

3′,5′-环-磷酸腺苷(cAMP)是细胞内的一种“第二信使”,许多激素、神经递质等“第一信使”的作用均通过它实现。3′,5′-环-磷酸鸟苷(cGMP)也是一种“第二信使”;但对其生理功能的研究比cAMP少。近年来认为,以上两种环核苷酸(CN)在某些神经病中(包括癫痫)可能起着重要作用。许多实验材料证明,动物脑内的CN与惊厥,癫痫和抗癲痫药物的作用有密切关系。一、惊厥和癫痫对脑内环核苷酸的影响许多实验材料证明,多种方法引起的动物惊厥和人类癫痫活动可明显影响脑内CN的水平。Sattin首先报道超强电休克惊厥(MES)可使小鼠前脑cAMP含量明显升高,以后许多报告也证明,以多种方法引起动物惊厥时,均可使其脑内CN含量升高。如Lust证     

正常和活力低下的人精子膜脂类过氧化反应或环核苷酸与运动性的关系(英文)

本文分别采用过膜游动法、硫代巴比妥酸比色法和放射免疫分析法测定了正常人和精子活力低下的不育症患者精子膜的脂类过氧化反应(LP)、环一磷酸腺苷(cAMP)和环一磷酸鸟苷(cGMP)水平,研究了膜LP、细胞内cAMP和cGMP与运动性之间的关系。结果表明,无论正常还是活力低下的精子,膜LP和运动性之间均存在明显负相关(r=-0.76,P<0.001和r=-0.68,P<0.001);精子内两种环核苷酸与运动性之间则均存在明显正相关(cAMP:r=0.64,P<0.01和r=0.59,P<0.01;cGMP:r=0.60,P<0.01和r=0.55;P<0.05)。其中膜LP与运动性之间的相关性最高。这些结果提示,膜LP是造成精子运动性降低的主要原因之一;精子内两种环核苷酸也可能影响其运动性。     

用生物学方法重建心脏起搏点的研究进展

正常人的心脏节律源于右心房的天然起搏点（pacemaker）——窦房结。窦房结的功能异常或者房室传导阻滞会导致心率异常（如心律缓慢）。治疗严重的心动过缓需要植入在技术上已经相当成熟的电子起搏器,但这种治疗存在一些缺陷和不足。近年来,在动物实验模型中应用基因或细胞来重建心脏的生物起搏点已经取得了进展。超极化活化环核苷酸门控（hyperpolarization-activated cyclic-nucleotide-modulated,HCN）通道（起搏通道）通过超极化活化的阳离子电流（hyperpolarization-activated cation current,It）调制心脏的自律性。利用病毒载体或转染HCN基因的细胞将HCN基因导入动物心脏内可重建生物起搏点。也有导入其它基因或植入自律细胞来探索心脏起搏点的重建。本文总结了重建心脏生物起搏点的一些研究进展。一旦稳定性和寿命等关键问题得到相应解决,遗传工程改造的生物起搏点可用于治疗严重的心动过缓。     

蛋白质O-GlcNAc糖基化修饰对tau蛋白磷酸化修饰的影响

蛋白质的O位N-乙酰葡萄糖胺(O-GlcNAc)糖基化修饰是一种新近发现的广泛存在于细胞核蛋白与细胞浆蛋白的蛋白质翻译后修饰.其性质与经典的膜蛋白和分泌蛋白的糖基化修饰不同,而与蛋白质磷酸化修饰更相似.O-GlcNAc糖基化和磷酸化均修饰tau蛋白的丝氨酸和苏氨酸残基,通过改变O-GlcNAc糖基化供体底物浓度以及其关键酶活性等方法,改变分化后成神经细胞样的PC12细胞中的蛋白质O-GlcNAc糖基化修饰水平,然后用特异性识别不同位点磷酸化的tau蛋白抗体,进行蛋白质印迹分析来检测tau蛋白磷酸化水平的变化.结果发现细胞内蛋白质O-GlcNAc糖基化对tau蛋白磷酸化的影响,在不同的磷酸化位点其影响不同.增加蛋白质O-GlcNAc糖基化修饰导致tau蛋白大多数磷酸位点的磷酸化水平降低,反之亦然.这些结果说明,tau磷酸化在大多数位点受到O-GlcNAc糖基化修饰的负性调节.这一研究为阐明调节tau蛋白磷酸化水平的机理和阿尔茨海默病脑中tau异常过度磷酸化的分子机制提供了新的线索.     

外源性环核苷酸衍生物ax-cAMP-丁酯对肿瘤细胞表面的影响

3′,5′-环-腺苷酸(cAMP)作为一种第二信使广泛存在于各种细胞内,对细胞的多种功能起着重要的调节作用。在多数情况下,外源性环核苷酸可以抑制肿瘤细胞的生长,但其作用机制仍然不清。对某些肿瘤细胞,cAMP可使细胞形态发生变化,但这些研究大多限于观察cAMP作用较长时间的肿瘤细胞。我们曾报告,环核苷酸衍生物ax-cAMP-丁酯对几种腹水型肿瘤细胞(包括Ehrlich腹水癌细胞)的DNA和RNA合成具有明显抑制作用。本文将介绍的是用电镜下的定量形态     

吲哚丁酸通过蛋白磷酸化激活湖北海棠根系Ca2+-ATP酶

以湖北海棠(Malus hupehensis Rhed.)实生苗为试材,通过在砂培液中加入吲哚丁酸(IBA)和蛋白激酶抑制剂3,3’,4’,5,7-五羟黄酮(quercetin)研究了IBA对根系膜蛋白磷酸化和Ca2 -ATPase活性的影响.试验表明根系膜蛋白磷酸化反应主要发生在丝氨酸残基上100 μmol/L的IBA使蛋白激酶和Ca2 -ATPase活性在2～3h内升高数十倍,之后很快下降,蛋白激酶活性变化明显早于Ca2 -ATPase;蛋白激酶抑制剂quercetin不仅抑制根系膜蛋白的磷酸化,也显著削弱IBA对Ca2 -ATPase的激活作用.结果显示,在对IBA响应中Caa2 -ATPase是信号转导途径中的成员,IBA可能通过蛋白磷酸化激活根系Ca2 -ATPase而起作用.     

蛋白酪氨酸磷酸酶-PEST在生理调节及相关疾病中的作用

蛋白质分子中酪氨酸残基可逆性的磷酸化是细胞内信号分子传导的基本方式。两类作用相反的酶参与磷酸化的调节:蛋白酪氨酸激酶(protein tyrosinekinase,PTK)和蛋白酪氨酸磷酸酶(protein tyrosine phosphatase,PTP)。含脯氨酸-谷氨酸-丝氨酸-苏氨酸(P-E-S-T)结构域的蛋白酪氨酸磷酸酶(PTP-PEST)属于非受体型酪氨酸磷酸酶类,其本身能与多种蛋白质相互作用,并在细胞迁移、免疫细胞活化和胚胎发育等生理过程中发挥重要作用。本文对PTP-PEST的结构特点、生理功效、介导的信号传导途径和近年来PTP-PEST在疾病中的作用作一综述。     

抑癌基因PTEN及其在肿瘤中的突变失活

正常细胞和肿瘤细胞的蛋白质磷酸化及去磷酸化研究一直引人注目。研究表明,细胞内蛋白质酪氨酸磷酸化水平受蛋白质酪氨酸激酶和蛋白质酪氨酸磷酸酶动态调控。多种癌基因的表达产物具有蛋白质酪氨酸激酶活性并参与肿瘤形成进程,提示蛋白质磷酸酪氨酸磷酸酶可能抑制肿瘤形...     

蛋白激酶R样内质网激酶信号通路在内质网应激中作用的研究进展

蛋白激酶R样内质网激酶(protein kinase R-like ER kinase,PERK)是一种位于内质网膜上的I型跨膜蛋白,属于eIF2α上游激酶家族.当发生内质网应激时,PERK被激活,通过磷酸化真核细胞起始因子2α(eukaryotic initiation factor 2α,eIF2α)抑制蛋白质合成,并活化转录活化因子4介导的细胞凋亡途径,参与细胞的整合应激反应.PERK本身的活性可以被特异性的磷酸酶去磷酸化抑制,所调控的信号途径在心力衰竭、缺血-再灌注损伤及代谢异常等病理过程中发挥重要作用.