制作果蝇唾腺染色体标本的改良方法

(一)临时唾腺染色体标本制作过程 1.挑取肥大的三龄幼虫于几滴生理盐水中,洗去体表的培养基。拉取唾腺后,细心剥去附着的脂肪组织。 2.挑取唾腺放置于1滴0.2％氯化钾水溶液中低渗处理15分钟。根据室温高低适当调整低渗时间。 3.除去低渗液,加1mol盐酸处理1-2分钟。吸去盐酸,并用生理盐水冲洗。     

对高中生物三个实验的改进意见

对高中生物的几个实验,已有不少有效的改进方法,为更好地获得实验效果,我也谈些在实验过程中得到的改进体会,以供参考。一、洋葱根尖细胞的有丝分裂装片观察1.剪取洋葱根尖约3—5毫米,用刀片细心地把它纵剖成数片,这样便于把根尖切片压成单层的细胞,以提高观察效果。2.用镊子把剖成薄片的根尖放于载玻片的中央,用10％的盐酸解离,解离后用吸水纸把盐酸吸去,再滴以清水漂洗,然后用吸水纸吸去,重复数次,时间约十分钟,再滴以1％龙胆紫溶液染色3分钟,用吸水纸吸去。这样,解离、漂洗、染色不用镊子夹取,可避免夹破,     

果蝇唾腺染色体制片方法的改进

1　果蝇的培养培养基为常规的玉米粉培养基 ,培养基要松软、含水量较高、发酵良好。放入 7～ 8对果蝇 ,在 18℃恒温培养。待幼虫出现后 ,将其移至 10～ 12℃恒温培养 ,稍低的温度有利于幼虫的充分生长发育 ,实验时选用肥大的三龄幼虫作为材料 (最好选雌性幼虫 )。2　唾腺的剥离将幼虫放在滴有一滴低渗液 ( 0 .0 75% KCl)的载片口 ,实验者两手各持一枚解剖针 (或大头针 ) ,在解剖镜下左手用解剖针压住幼虫尾端 1/ 3处 ,右手用解剖针自幼虫口沟慢慢地向前拉出 ,一对唾腺也随之被拉出。拉出的唾腺带有脂肪体 ,在低渗液下处理几分钟 ,用解剖针…     

从小白鼠血液制备染色体的快速方法

每只小白鼠注射(I.P)0.1毫升秋水仙素(0.6毫升/毫升),四小时后杀死。从心脏取血,用肝素抗凝。取10滴左右血液置于一刻度离心管中,管内预先装好3—5毫升0.7％柠檬酸钠,放在37℃下温浴,摇匀后加一滴稳定的玻璃酸酶(150N.F.单位/毫升)。在37℃下温浴20分钟。用温浴的最后五分钟配制3∶1甲醇-醋酸固定液。温浴完毕时加2滴固定剂并温和地摇匀。600转离心机离心5分钟弃去上清液(留1毫升左右)再加3毫升固定剂,加塞后放置冰箱30分钟。在600转离心机离心5分钟弃去上清液(留1毫升),再加预冷固定液3毫升,用吸管来回搅匀。离心弃去上清液。再加2毫升冷固定剂,并在冰箱中过夜。第二天离心后弃去上清液,用甲醇洗,吸去甲醇,取一     

肌纤维简易装片制作及横纹的观察

取蝗虫胸部小束肌肉于玻璃皿中,将10％HCl溶液滴加到肌束上解离30分钟,尔后用玻棒轻研到细绒状。用针挑少许于玻片上,先染色,后用解剖针分离,滴一滴10％亚甲蓝溶液染色1分钟,用吸水纸吸去余液,再用生理盐水冲洗几次除去浮色,然后将玻片置于解剖镜下(肉眼操作亦可),用尖细解剖     

胰酶液在果蝇唾腺染色体制片中的应用

用黑腹果蝇的三龄幼虫作制备唾腺染色体的材料,由于其唾腺小,周围粘有脂肪体,较难去除,很容易把唾腺弄碎;而脂肪体的存在,又影响压片时唾腺染色体的展开。我们发现,用胰酶液对唾腺预处理,易制得理想的压片。现将此法介绍如下: 1.剖取唾腺在载玻片上滴一滴0.7％氯     

用Feuglen染色法制做果蝇唾腺染色体

制作果蝇唾腺染色体通常以改良苯酚品红或醋酸洋红为染色剂 ,这些常规方法存在 1个共同的弊病 ;染色体被着色的同时 ,细胞质也着色较深 ,染色体与其背景形成的反差很小 ,不利于显微摄影。为此笔者改变传统方法用 Feuglen染色法对果蝇唾腺染色体进行染色制片 ,收到了良好的效果。1　方法和步骤1)将盛有 1mol盐酸的小烧杯置于 6 0℃的恒温水浴中 ,待用 ;2 )取较肥大的果蝇三龄幼虫 ,置于滴有 0 .85 %生理盐水中 ,在解剖镜下剖出唾腺 ;3)弃去杂物 ,剔除唾腺上的脂肪 ;　　 4 )将唾腺小心移至 1mol盐酸的恒温小烧杯中 ,2 0～ 30 s;5 )取出唾腺 …     

制作植物细胞有丝分裂装片的小经验

在洋葱根尖有丝分裂切片时,从固定液中取出洋葱根尖,在10％盐酸溶液中解离10分钟,经清水漂洗后放在载玻片上。用镊子(或刀片)截取根尖乳白色部分(取乳白色的三分之二),剔除其余部分。用吸水纸吸去根尖周围的水。用镊子将截取的根尖充分捣烂(根尖在     

用组培芽鉴定组培材料染色体数目的方法

通过与根尖比较研究组培芽制片方法的结果表明:用组培芽制片在预处理方法上,以低温(0℃)结合0.002 mol*L-1 8-羟基喹啉处理4～4.5 h的效果较好;解离时,以2.5%混合酶液(纤维素酶与果胶酶各占2.5%)于25℃下解离4～4.5 h效果较好.利用所确立的组培芽制片程序,鉴定出新创制的Cucumis属种间杂种双单倍体和马铃薯无性变异系的染色体分别为2n=19和2n=96.证明以组培芽为材料进行染色体制片是一种快捷而有效的鉴定组培材料染色体数目的方法.     

内耳整块染色石蜡包埋制片法

内耳制片常用的是火棉胶——石蜡双重包埋H-E片染法。此法制片步骤较多,不易掌握。我采用Bouin氏固定液固定,H-E整块染色、石蜡包埋法制片,操作简便,易于成功,内耳的基本结构(前庭膜、盖膜、毛细胞都完好无损,如取材适当,可在同一切片同时显示壶腹嵴。染色液的配制: 1.苏木精染液的配制: 苏木精 25毫克硫酸铝钾 1.25克碘酸钠5毫克蒸馏水 75毫升由于以上药品称量很小,故需称的较准确。配出来的液体若呈现混浊,则是因为以上药品(主要是碘酸钠)称得不准造成的,这种混浊染色液不能用。 2.复制伊红染色液的配制: 将伊红(Y或B均可)0.5克溶于3毫升蒸馏水中,溶解后将冰醋酸—滴—滴加于其中,边滴边搅动,     

显示环氧树脂厚切片中多糖,蛋白质和脂类的细胞化学方法

用花生(Arachis hypogaea L.)种子的子叶组织作为模式材料,Epon 812包埋的组织进行厚切片后,按下列三步染色。第一步,PAS 反应:(1)在0.5%高碘酸(0.3%硝酸配制)中10分钟;(2)自来水洗1—2分钟,蒸馏水经过;(3)锡夫试剂中30分钟;(4)偏亚硫酸氢钠溶液三次洗涤,每次2分钟;(5)自来水洗5分钟,蒸馏水经过。第二步,苏丹黑 B 液染色:(1)70%酒精中1—2分钟;(2)新鲜配制的0.3%苏丹黑 B 液(70%酒精配制)中染色,40—60℃,30分钟至1小时;(3)70%酒精中分色1分钟;(4)自来水冼,蒸馏水经过。第三步,考马斯蓝染色:(1)7%醋酸中1—2分钟;(2)1%考马斯蓝(7%醋酸配制)中染色,60℃,20分钟;(3)0.1%醋酸液中分色1分钟;(4)自来水冼5分钟,蒸馏水经过;(5)自然干燥或在40℃电热温箱中烘干。干燥后的切片用甘油胶封固。经这三步染色的切片,细胞内的多糖、脂类和蛋白体同时被显示:淀粉粒及纤维素的细胞壁为樱红色,油滴为黑色,蛋白体为蓝色。制片能长期保存。     

用蔗糖溶液进行微生物制片

从事微生物学研究和教学工作,其形态观察是十分重要的。最近我们发现应用蔗糖溶液进行微生物制片效果很好。现报道如下: (一)在一般微生物菌体制片中的应用 1.方法基本与常规的微生物制片方法相似,但不同的是: (1)在涂片前应先在清洁的载玻片上滴加少许蔗糖液(0.5M)进行擦拭。     

蝗虫性细胞减数分裂制片方法的改良

最近,我室采用分离、滴片方法观察蝗虫性细胞减数分裂,取得良好效果。现介绍如下。 1.取材在麦熟和稻熟季节采集蝗虫。取其精巢固定于卡诺液中0.5—1小时。去固定液,用95％酒精洗3次,移于70％酒精中,置于低温下可长期保存。 2.制片方法 (1)用眼科镊把精巢取出,装入瓶中,加入碎玻璃反复振荡,使组织捣碎。 (2)用吸管吸取捣碎液放入离心管内,以1000转/分的速度离心3—5分钟。去上清液,     

制作活体草属虫临时装片的技巧

现介绍一种制作活体草履虫临时装片的技巧。１）用胶头吸管（长８０ｍｍ）吸取密度适当的草属虫液,将其１／４滴滴到载片中央,盖上盖片。２）取一张棱形的滤纸（对角线１．５ｃｍ长左右）用它的一个角尖触在盖片的一边,吸去多余的水分,稍候,再改用其另一个角尖继续吸,这样重复吸２～３次,即可将此装片用于实验观察,且效果十分理想。本方法优点：制片快。片中草履虫不易丢失;观察清楚,生动;制片成功率１００％;制片方法简便易行。制作活体草属虫临时装片的技巧@黄丽清$北京市日坛中学!100020     

对弹性组织的选择性染色 (俄西印——新复红法)

1)切片脱蜡,入100%酒精.2)以俄西印——新复红(orcinol-new fuchsin)液于37℃染15分钟。染液配法为:新复红(new fuchsin)(C.I.,No.678)2克俄西印(orcinol)4克蒸馏水 200毫升上液煮佛5分钟,加37.2%三氯化铁溶液(ferricchloride)25毫升,再煮5分钟,待凉,过滤,其沉淀收集于滤约上,并须洗净晾干,将沉淀溶于95%酒精100     

肺血管注射石蜡切片

通过卡红明胶液进行血管注射,而不经过其他染色方法,直接石蜡切片,可清楚地显示毛细血管在泡壁上的分布及其毗邻关系。卡红明胶液的配制 1.取卡红6克加入50毫升蒸馏水中,逐渐滴加氨水,直至完全溶解,过滤备用。 2.取精制明胶20克与200毫升蒸馏水混合,过夜,置水浴锅中滆水加热溶解。随即取卡红液入明胶液中,搅拌混合,逐步滴加醋酸,至     

果蝇幼虫唾液腺脂肪体的剔除

在制作唾液腺染色体装片时,须把脂肪体剔除.我采用1NHCl处理唾液腺后再剔除脂肪体,收到良好效果.现介绍如下:拉出唾液腺后,先剔除幼虫残体,然后吸去生理盐水,在腺体上滴一滴1NHCl,浸2-3分钟,唾液腺和脂肪体由半透明渐变为白色,特别是脂肪体变得完全不透明,轮廓清晰,肉眼即可辩     

流行性出血热病毒(EHFV)在传代人淋巴细胞上的致病变作用增殖的研究

流行性出血热病毒陈株、L_99和SR_11株按种传代淋巴细胞克隆株Ly-A_6后第5～7日观察到CPE,开始时受感染细胞浆内颗粒增多,细胞圆缩、聚积成堆,随后细胞膜模糊不清,2～3天脱落,同时制片IFA检测到胞浆内特异性荧光颗粒,以上结果能被EHF免疫血清所中和。接种病毒后的细胞单层用l％甲基纤维素加维持液覆盖,第6日吸去覆盖液,加5％甲醛-1％结晶紫固定染色可见到明显的PFU。EHFV致病变细胞株的染得将为病原学研究提供了优越的基质细胞。     

两种青霉临时制片技术的比较

青霉是常见的污染菌 ,多生于橘子等上 ,我们使用它作为材料制作临时装片 ,在普通显微镜下就可清晰看到其菌丝体 ,是学生观察青霉的理想用材。笔者在实验中未按照一般的操作去做 ,无意中竟发现了一种极为简易且效果十分理想的操作方法。现将此简易制片技术和一般制片技术作一比较。1　简易制片技术1.1　菌株　橘子上生长出的淡绿色菌丝体。1.2　制片　 1)将十分清洁的载玻片平放在桌上 ,滴2～ 3滴 5% KOH溶液于载玻片中央 ;2 )斜着用镊子从橘子上夹取一小块生有菌丝体的橘皮 ,然后将材料放于载玻片上的溶液中 ,轻轻地来回搅动 3～ 5次 ,这…     

以龙胆紫染硫酸酯多醣类的组织化学意义

甲、方法:1)固定于任何固定液皆可,但以酒精为最合适。石蜡切片,厚3微来。切片脱蜡,降酒精,至蒸馏水。2)以龙胆紫(gentian violet)水溶液1∶250,000或1∶1,280,000染色24小时(即0.25毫升0.1%龙胆紫贮存液加入100毫升蒸馏水内;或以0.1毫升0.1%龙胆紫液加入128毫升蒸馏水内)。3)滤纸吸干切片,然后在亚尼林二甲苯(anilinc-xylene)1∶1或1∶2液内脱色及脱水约5分钟(或稍长),直至紫色不再从切片上脱下为止。以二甲苯洗2—3次,用树胶封片。若染透明质酸(hyaluronic anid)可以甘油封片。