Anisomycin诱导小鼠艾氏腹水癌细胞凋亡

目的：探讨Anisomycin诱导EAC细胞凋亡的机制。方法：利用MTT法观察Anisomycin对EAC细胞增殖的影响;应用An．nexinV—FITC和PI双染色检测Anisomycin作用下EAC细胞凋亡的变化;琼脂糖凝胶电泳检测Anisomycin作用下EAC细胞的DNA断裂片断;采用RT—PCR检测Anisomycin作用下Caspase-3mRNA的转录水平;WesternBlot分析Anisomycin处理的EAC细胞内Caspase-3蛋白的表达。结果：Anisomycin对EAC细胞增殖的抑制率随浓度的升高而增高,EAC细胞的凋亡水平也上升,随着Anisomycin浓度升高EAC细胞DNA断裂的寡核苷酸片段亦越趋明显,Caspase-3的mRNA和蛋白水平也上调,并明显高于阿霉素组。结论：结果表明,Anisomycin能够抑制EAC细胞的增殖,在体外可能通过激活Caspase-3凋亡信号而诱导EAC细胞的凋亡。     

Anisomycin诱导小鼠艾氏腹水癌细胞凋亡

目的:探讨Anisomycin诱导EAC细胞凋亡的机制。方法:利用MTT法观察Anisomycin对EAC细胞增殖的影响;应用AnnexinV-FITC和PI双染色检测Anisomycin作用下EAC细胞凋亡的变化;琼脂糖凝胶电泳检测Anisomycin作用下EAC细胞的DNA断裂片断;采用RT-PCR检测Anisomycin作用下Caspase-3 mRNA的转录水平;Western Blot分析Anisomycin处理的EAC细胞内Caspase-3蛋白的表达。结果:Anisomycin对EAC细胞增殖的抑制率随浓度的升高而增高,EAC细胞的凋亡水平也上升,随着Anisomycin浓度升高EAC细胞DNA断裂的寡核苷酸片段亦越趋明显,Caspase-3的mRNA和蛋白水平也上调,并明显高于阿霉素组结论:结果表明,Anisomycin能够抑制EAC细胞的增殖,在体外可能通过激活Caspase-3凋亡信号而诱导EAC细胞的凋亡。     

用荧光探剂DPH研究腹水癌细胞膜脂流动性

研究细胞膜流动性是了解膜结构与功能关系的重要环节。可以用差示扫描量热法(DSC)、X射线衍射、电子自旋共振(ESR)、核磁共振(NMR)及荧光偏振等方法从不同角度对膜流动性进行研究。其中荧光偏振方法比较简便,理论解释比较容易,所得参数——荧光偏     

醋纤膜原位免疫固定电泳技术及其应用

本文介绍一种快速鉴定M蛋白的新方法——醋纤膜原位免疫固定电泳(IFE)。对一例罕见的三M蛋白血症及一例良性的双M蛋白血症患者血清进行IFE,获得了清晰的免疫固定电泳谱。结果表明,IFE具有操作简单,省时,抗血清用量小及易于判断结果等优点。宜于普遍开展。     

顺铂与小鼠艾氏腹水肝癌细胞膜的相互作用

本文研究了顺铂对小鼠艾氏腹水肝癌细胞膜蛋白内源性荧光的淬灭作用和测定了其在膜上的结合量。结果表明顺铂能与癌细胞膜结合。按存在两类结合部位,得到表观结合常数和结合部位数为: K_1=1.35×10~5L/mol n_1=6.80×10~(-4)mol/g(protein) K_2=2.50×10~3L/mol n_2=1.92×10~(-3)mol/g(protein)     

质子跨膜转运能够引起艾氏腹水癌细胞质膜表面质子化

荧光探针Ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｉｎ－ＰＥ在８ｍｍｏｌ／Ｌ Ｃａ＾２＋促进下,能够标记于艾氏腹水癌细胞质膜表面。在不影响膜结构的条件下,利用微量ＴｒｉｔｏｎＸ－１００消除膜表面与介质之间的质子浓度差,通过酸滴定实验,能够得到膜表面ＰＨ与ＦＰＥ荧光强度之间的相关曲线。根据此曲线测定了艾氏腹水癌细胞质膜表面ＰＨ：当介质ＰＨ为７．２时,其膜表面ＰＨ为６．７,其质子浓度大约为介质中的３倍,质子跨膜转运抑制剂ＣＣ     

用ANS研究脱落酸提高植物线粒体膜的流动性

用荧光标记法,以ＡＮＳ作荧光探剂研究了脱落酸（ＡＢＡ）对植被线粒体脱流动性的影响。（＋）ＡＢＡ浓度效应实验结果和不同ＰＨ及不同温度条件下的实验结果均表明（＋）ＡＢＡ能降低植物线粒体膜的荧光强度,即（＋）ＡＢＡ能提高线粒体原流动性,且此种效应具有浓度饱和性,并导致线粒体异柠檬酸脱氢酶（ＩＣＨ）活性升高。ＡＢＡ的类似物,ＲＣＡ．７Ａ和ＲＣＡ．７ｂ,也具有提高ＩＣＤＨ活性的效应,抗ＡＢＡ结合蛋白的抗体（     

用脂肪酸自旋标记研究库存血红细胞膜的流动性

用两种脂肪酸自旋标记物5—DOXYL和16-DOXYL研究了ACD-B库存血保存期间红细胞膜的流动性及其温度相关性.结果发现:血液保存期间红细胞膜浅层流动性降低,深层流动性增高;红细胞膜浅层相变温度点明显降低,红细胞膜深层则出现两个相变温度点T_1和T_2在血液保存期间T_1和T_2逐渐接近并最后融合成一个相变温度点.     

艾氏腹水癌细胞表面抗原的实验性研究

肿瘤细胞抗原性的研究是一个具有重要理论及实践意义的课题。为了探索能否应用抗体作为药物或放射性物质的运载工具,使之在肿瘤部位选择性地集中,需要搞清肿瘤表面抗原不仅存在而且必须具有相当的数量和稳定性。为此,选用了艾氏腹水癌细胞作为动物模型,在研究其表面抗原有关特征的基础上初步探讨了这种可能性。     

小鼠艾氏腹水癌细胞内3'''',5''''-环腺苷酸(cAMP)的免疫荧光细胞化学定位和外源性cAMP对癌细胞内cAMP的影响

本工作用显示cAMP的免疫荧光细胞化学方法观察了小鼠艾氏腹水癌细胞内cAMP的分布,并发现经外源性cAMP及氨茶碱处理后,有使小鼠艾氏腹水癌细胞内cAMP荧光增强的效应。cAMP主要分布在胞质内。实验组动物从接种癌细胞的次日起,每日从腹腔注射2毫克的cAMP和1毫克的氨茶碱,发现在接种后第9天,大多数癌细胞胞质内的cAMP荧光增强,以核周区胞质内的荧光最显著。进一步证实了我室以前用生化测定癌细胞内cAMP含量的结果。本文并对显示cAMP的免疫荧光细胞化学方法进行了讨论,用cAMP荧光染色反应的特异性鉴定证明了方法的可靠性。     

艾氏腹水癌细胞膜质子跨膜外转运与脂质体融合:Ca2+及脂质体膜脂成份的作用

研究了Ca^2 及脂质体膜脂成分对艾氏腹水癌细胞质膜质子跨膜转运驱动的脂质体融合中的作用。结果 表明Ca^2 促进质子跨膜转运驱动的质子跨膜转运驱动艾氏腹水癌细胞与脂质体间的融合,膜融合程度与膜表面电荷密度的相关曲线显示,在下述条件膜融合与膜表面电荷密度呈正相关：（1）介质Ca^2 浓度小于6mmol/L,脂质体磷脂组成为PE：PC：CL＝6：2：2;（2）介质Ca^2 浓度为6mmol/L,脂质体鳞脂组成为PE：PC：CL＝6：2：2;（3）无Ca^2 介质,脂质体磷脂组成为PE：CL＝8：2;（4）介质Ca^2 浓度10mmol/L,脂质体磷脂组成为PE：CL＝8：2。脂质体PE／PC含量对膜融合的影响表明,当PE含量减少PC含量增加时,膜融合程度不断下降,提示影响膜融合的另一因素可能是生物膜结构形成“柄”融合中介体的能力。     

巨噬细胞吞噬过程中膜磷脂流动性和受体流动性的关系

本文用ＦＲＡＰ（ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅｒｅｃｏｖｅｒｙａｆｔｅｒｐｈｏｔｏｂｌｅａｃｈｉｎｇ）技术,测量了静息状态和刀豆素Ａ刺激不同时间后巨噬细胞膜磷脂、ＣｏｎＡ受体扩散系数和荧光恢复率的变化。结果显示ＣｏｎＡ刺激后膜磷脂和ＣｏｎＡ受体的扩散系数和荧光恢复率均较静息状态的巨噬细胞明显降低,磷脂流动性的变化与ＣｏｎＡ受体流动性的变化呈正相关。提示受体介导内吞导致的膜磷脂流动性的降低,可能是由于配体与细胞膜上受体结合形成配体－受体复合体,增加了受体的负荷,使受体的流动性降低,进而使膜磷脂的流动性降低。巨噬细胞内吞过程中膜磷脂和ＣｏｎＡ受体流动性的降低,可能还与ＣｏｎＡ刺激后巨噬细胞胞浆ｐＨ值有关。     

荧光显微镜观察大蒜油对腹水癌细胞的影响

用吖啶橙染色,荧光显微镜观察大蒜油对—S180,昆明小鼠,U14 C57BL/6J小鼠和L1210DBA小鼠的癌细胞作用的影响,结果表明大蒜油有直接破坏癌细胞的DNA,RNA和分裂中期染色体的作用。给药后2—6小时作用最强,12小时后癌细胞数逐渐恢复,因此给药间隔不应超过12小时。我们研究证实大蒜油有明显的抗癌作用,为临床应用提供有力的依据。     

膜融合剂对脂质体及血影膜膜流动性的影响

本文用荧光探针ANS,DPH与A研究了几种膜融合剂对脂质体与血影膜流动性的影响.蔗糖使PS脂质体的脂双层流动性降低,探针越是在极性区流动性越小,说明蔗糖主要作用于脂双层的极性区;蔗糖也使血影膜流动性降低,此作用是可逆的.油酸甘油脂(GMO)使PS脂质体的流动性增加,且越是在疏水区内部,流动性增加得越大,说明GMO主要是作用于脂双层的非极性区:GMO也使血影膜流动性增加,此作用是不可逆的.二甲亚砜(DMSO)对血影膜的作用,两种不同荧光探针不一样,对DPH的作用出现双相让,低浓度与高浓度的作用结果分别与蔗糖和GMO的作用一致.     

云芝多糖对腹水肝癌小鼠生存期和腹水中癌细胞动态的影响

近十多年来,相继报道云芝菌丝多糖(PsK)或云芝菌丝滤液多糖(Coriolan)对小鼠S-180等实体瘤的生长有强烈抑制作用,并且     

ConA结合引起的Ehrlich腹水癌细胞成帽能力、入胞作用、表面形态及细胞膜流动性的变化

利用透射电镜下正电荷铁蛋白标记技术,扫描电镜法和荧光偏振技术,发现ConA结合于Ehrlich腹水癌细胞表面可导致细胞成帽能力下降,入胞作用受抑,表面形态简化以及膜流动性下降等变化.讨论了这些变化之间的可能联系.     

白血病淋巴细胞膜脂区流动性的变化

本工作使用1,6-dipbenyl 1,3,5-hexatriene(DPH)作为萤光探剂,应用萤光偏振技术研究了人和小鼠的淋巴细胞。结果表明:白血病淋巴细胞膜脂区的流动性比正常淋巴细胞大;同时发现新生的非癌变的淋巴细胞膜脂区也具有较大的流动性。最后分析了胆固醇成分对膜流动性的影响,淋巴细胞膜脂区胆固醇相对含量的减少,可使膜脂区的流动性增大。