柴胡及体细胞杂种愈伤组织酯酶同工酶技术的优化

为解决柴胡及其体细胞杂种愈伤组织中次生代谢物多,同工酶粗提液粘稠、杂质多且呈混浊态,同工酶电泳谱带不清晰及易拖尾的问题,通过增加离心次数、调整酶粗提液上样体积等方法,得到了理想的酯酶同工酶电泳谱带。该法广泛适用于其它植物的同工酶聚丙烯酰胺凝胶电泳分析。     

圆盘电泳分析几种植物同工酶的重演性与清晰度

近几年来,国内外不少研究者以同工酶为“生化指标”来探讨高等植物中的许多理论和生产实践问题并取得了可喜的进展。许多工作表明,把同工酶作为一项“生化指标”是正确的和合适的。关于同工酶的分析方法虽已有论述,但目前还存在一定的技术问题,如凝胶上同工酶谱型的重演性问题,即同一样品,在同一实验方法下,不同人操作结果是否相同;每次分析间隔一定时期(如间隔一周)和数次分     

罗汉果雌雄株同工酶性别鉴定研究

采用电泳技术结合同工酶染色,分析了罗汉果雌雄株叶片的过氧化物酶同工酶、酯酶同工酶、超氧化物歧化酶同工酶、多酚氧化酶同工酶和过氧化氢酶同工酶。结果表明:罗汉果雌雄叶片在同工酶谱上,存在着与性别性状相关的酶带;雌雄间的差异酶带在每一种同工酶中均有一条以上,可作为罗汉果雌雄株间的性别鉴定。此外,还比较了高产、低产、不结果雌株之间同工酶的酶带和活性差别。     

鱼类同工酶图谱分析中值得注意的若干情况

鱼类同工酶图谱分析中值得注意的若干情况张子平，王艺磊，张海萌（国家海洋局第三海洋研究所厦门３６１００５）（厦门水产学院）关键词鱼类，同工酶，图谱分析随着鱼类同工酶研究水平的提高，以及采用这一方法所研究的问题之不断深入拓展，象过去那样仅简单地根据电泳图...     

5种樱桃属植物的POD、CAT和SOD同工酶分析

采用聚丙烯酰胺垂直平板凝胶电泳技术对5种樱桃属植物的过氧化物酶(POD)同工酶、过氧化氢酶(CAT)同工酶和超氧化物歧化酶(SOD)同工酶的酶谱特征进行分析,结果表明:5种樱桃属植物共电泳出12条POD同工酶酶带、4条CAT同工酶酶带和8条SOD同工酶酶带;其中,POD同工酶酶谱具有5条共同谱带,CAT同工酶4条,SOD同工酶5条。冬季休眠期的樱桃属植物,POD与SOD同工酶谱带的多样性比较丰富,不同植物之间的谱带差异较大;而CAT同工酶谱带差异不明显。     

上饶早梨离体保存库再生苗遗传稳定性的同工酶分析

为了检测上饶早梨离体保存库中不同再生苗的遗传稳定性,采用聚丙烯酰胺凝胶电泳技术对其20个样本进行多酚氧化酶(PPO)同工酶、超氧化物歧化酶(SOD)同工酶、淀粉酶同工酶、过氧化物酶(POD)同工酶、酯酶(EST)同工酶、过氧化氢酶(CAT)同工酶和蛋白酶同工酶分析。结果表明,20个样品的POD同工酶、EST同工酶和蛋白酶同工酶均只有一条带;20个样品的CAT同工酶均出现两条带;PPO同工酶在20个样品中出现6条带;SOD同工酶在20个样品中出现5条带;淀粉酶同工酶在20个样品中出现4条带。利用popgene软件计算出POD同工酶、EST同工酶、蛋白酶同工酶、CAT同工酶、PPO同工酶、SOD同工酶和淀粉酶同工酶的多态性百分率分别为0%、0%、0%、0%、83.33%、60%和100%。使用NTsys 2.1软件计算PPO同工酶、SOD同工酶和淀粉酶同工酶酶带的遗传相似系数,并用非加权组平均法(UPGMA)进行聚类分析。结果表明,3个同工酶的聚类结果一致,20个样本分为两大组,一组包括"花厅六月雪"和"花厅黄皮消"两个主栽品种,另一组只包括"田墩六月雪"一个主栽品种。3个主栽品种内的样本所有同工酶酶带结果一致且遗传相似系数均为1.000 0,说明3个主栽品种内样本的遗传稳定性高,无遗传变异。本试验结果表明,上饶早梨离体保存库的建立具有较强的可靠性和可行性。     

同工酶差异位点分析在蔬菜杂交种纯度检测中的应用

用１０种同工酶和蛋白质和分析体系,分析了７种重要蔬菜的７１个杂交种与其亲本之间的差异位点以及这些差异位点用于杂交种纯度检测的可能性和存在的问题。试验表明,作物的不同种类,杂交种与亲本之间的亲缘关系以及作物种类的遗传多态性,都会影响同工酶差异位点产生的多寡,从而影响到这一技术是否能用于此种作物的纯度检测,分析了不同同工酶在不同蔬菜中的多态性以及在蔬菜种子纯度检测中的表现。     

社鼠组织器官同工酶的研究

用聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦电泳方法,分析了社鼠的肝、肾、心肌、骨骼肌、肺、脾和脑等多种组织器官的ＬＤＨ、ＡＤＨ、ＥＳＴ、和ＳＯＤ４种同工酶,对各组织器官的酶带数目和分布,以及酶活性进行了比较研究。结果表明,社鼠的ＬＤＨ同工酶、ＡＤＨ同工酶和ＥＳＴ同工酶具有比较明显的组织特异性,而ＳＯＤ同工酶的组织特异性较低。肺和脾除ＥＳＴ同工酶活性较高外,脑除ＬＤＨ同工酶活性较高外,其它３种同工酶的活性均较低;而肝和肾中４种同工酶的活性普遍很高。心肌和骨骼肌因氧张力不同而使ＬＤＨ同工酶酶谱存在明显差异,但其它３种同工酶酶谱却非常相似。同工酶的组织特异性与各组织器官所执行的生理功能是相一致的     

岳鲤及其双亲(荷包红鲤♀、湘江野鲤♂)LDH同工酶的研究

用聚丙烯酰胺凝胶电泳,结合CS910双波长扫描分析了岳鲤及其双亲(荷包红鲤♀、湘江野鲤♂)6种组织的乳酸脱氢酶同工酶(Lactate Dehydrogenase,LDH)。结果表明:岳鲤及其双亲的LDH同工酶均存在组织特异性;亲本之间LDH同工酶的差异主要表现在肝脏;亲本各组织的大多数LDH同工酶在F_1代得到表现;亲本及F_1代的LDH同工酶可能由基因位点AA′BB′共同控制。本文还讨论了LDH同工酶分析和杂交结果预测的关系。     

家鸽不同组织同工酶的初步研究

利用聚丙烯酰胺凝胶电泳方法对家鸽不同组织的酯酶同工酶、乳酸脱氢酶同工酶的酶谱进行了观察和试验分析。计算了家鸽8种组织酯酶同工酶各自酶带的Rf值。显示出家鸽8种组织的酯酶同工酶酶带和7种组织的乳酸脱氢酶同工酶酶谱分布特征具有明显的组织特异性。初步分析了基因位点与酶谱带型之间的相互关系,对于鸟类的生化分析和遗传研究有参考作用。     

同工酶分析技术及其在植物研究中的应用

同工酶几乎存在于所有生物的所有组织中,是生物化学和分子生态学的重要研究内容。本文阐明了同工酶分析技术的特点,及其在植物系统学、植物生理生态学研究中的应用,并着重阐述了同工酶分析技术在云杉研究中的应用。     

甘薯(6×)×海滨野牵牛(4×)种间杂种过氧化物酶同工酶分析

植物杂种的遗传分析,除应用形态学、细胞学等方法外,尚可利用同工酶分析技术。在这方面,国内李继耕等对玉米杂种;易琼华等对杂交稻;吴郁文等对小麦、黑麦和小黑麦;李玉湘对油菜与白菜的种间杂种等都进行了同工酶分析,展示了同工酶分析杂     

云南高背鲫鱼不同组织同工酶分析

采用聚丙烯酰胺凝胶电泳技术,分析了滇池中云南高背鲫鱼(Carassius auratus)的脑、眼睛、肝脏、心脏、肌肉5种组织中的酯酶(EST)、超氧化物歧化酶(SOD)和乳酸脱氢酶(LDH)3种同工酶的表达模式,并对各种酶的同工酶酶谱表型进行了分析。结果表明,云南高背鲫鱼的同工酶系统具有明显的组织特异性,且同工酶的种类与活性变化与其功能相适应。     

细胞色素P450与肿瘤

本文综棕了细胞色素Ｐ４５０同工酶与致癌物代谢、与抗癌药的相互作用以及化的关系,并对调控Ｐ４５０同工酶以防治肿瘤的策略进行了论述。由于Ｐ４５０同工酶具有多态性、工物特异性及可诱导性的特点,在调控Ｐ４５０同工酶以防治肿瘤的问题上,针对不同人群、不同疾病状况及不同用药方案可能需采取抑制或诱导的不同策略。     

瓜尔豆不同品种抗霜冻性与酯酶同工酶的关系分析

对瓜尔豆10个品种酯酶（EST）同工酶分析及抗霜冻性测试表明,酯酶同工酶带数及酶活性在品种间有明显差异．抗霜冻性强的品种同工酶带数多、活性高,其中品种G1抗霜冻性最强,且具有1条特异EST同工酶带。     

鱼眼晶体酯酶同工酶电泳分析

关于鱼类同工酶,国内外已有研究。近年来对鱼眼同工酶的研究更引起人们的重视。藤尾,芳久以LDH同工酶为指标研究鱼类遗传基因进化时,指出鰤鱼及秋刀鱼的眼睛具有特异的E_4同工酶。朱兰菲等测定了20种鲤科鱼的心脏、脑、肌肉及晶状体LDH同工酶,证明晶状体的酶带清晰、稳定,能代表各种鱼的LDH表型。 酯酶是一种广谱底物的水解酶.其催化反应是,以萘乙酸酯为底物的同工酶属于羧基酯酶类,一般为单链或二聚体蛋白质。由于酯酶同工酶是直接的基因产物,故可作为遗传、生化指标。有关鱼晶状体酯酶同工酶的研究,目前国内尚少报道,本试验所进行的鱼晶状体聚丙烯酰胺凝胶电泳分析,旨在探讨不同科属鱼类晶状体酯酶同工酶有无差异,为鱼类分类生物化学指标提供参考。     

长沙地区两种常见蚯蚓及太平Ⅱ号蚓的EST、LDH同工酶研究

本文报道了长沙地区两种常见蚯蚓——日本杜拉蚓、舒脉环毛蚓以及人工养殖的太平Ⅱ号蚓为实验材料,应用聚丙烯酰胺凝胶圆盘电泳方法,分析ＥＳＴ、ＬＤＨ两种同工酶。实验结果表明ＥＳＴ同工酶酶谱复杂,ＬＤＨ同工酶具多态现象。ＥＳＴ同工酶能正确反映出种属间的差异。因此ＥＳＴ同工酶酶谱可成为寡毛类分类学上分子水平的一项生化指标     

杨树的同工酶变异及早期选择的研究

用单相聚丙烯酰胺凝胶不连续缓冲系统水平平板电泳法,分离了杨树1年生扦插苗的酯酶和过氧化物酶同工酶。根据两种同工酶表型,从11个欧美杨无性系区分出9个无性系和1个遗传群。将过氧化物酶同工酶表型与8-11年生采条母树单株平均材积比较,发现1年生扦插苗的过氧化物酶同工酶带数特别是迁移率快的A区同工酶的带数与成龄树材积成一定正相关,从而可用过氧化物酶同工酶的带数作为亲本相近的杨树速生性的预测指标,使难以选择的数量遗传问题变成易于选择的质量遗传问题。在实践中,利用同工酶技术进行杨树的早期选择可能是一种多快好省的途径。     

番茄属(Lycopersicon)四个种的过氧化物酶同工酶分析

本文报告了应用连续浓度梯度聚丙烯酰胺凝胶电泳对番茄属Lyco-persicon的四个种:秘鲁番茄L.peruviaunm Mill.,多毛番茄L.hirsutum Humb.et Bonp,醋栗番茄L.pimpinellifolium(Jusl)Mill和普通番茄L.esculentum Mill.的86份材料,15个不同生育时期,不同器官以及同一器官的不同部位的过氧化物酶同工酶的分析结果。结果表明:L.Peruvianum的各个生育期和不同器官的过氧化物酶同工酶谱带叠加共有28条带,L.hirsutum有29条带,L.pimpinellifolium有28条带,L.esculentum有27条带。种间过氧化物酶同工酶谱型差异明显,种内不同生育期叠加总酶谱基本一致。在根、茎和叶中,这四个种的过氧化物酶同工酶酶谱和活性具有相似的生育期变化规律和器官分布规律.在果实发育过程中,种间过氧化物酶同工酶酶谱、活性及变化律规都不相同。本文还就同工酶谱型相似值的意义,野生资源及同工酶分析技术在番茄育种中的应用等问题进行了讨论。     

中华姬鼠与大林姬鼠的同工酶差异

中华姬鼠（Ａｐｏｄｅｍｕｓｄｒａｃｏ）和大林姬鼠（Ａｐｏｄｅｍｕｓｐｅｎｉｎｓｕｌａｅ）是形态学上十分相似的两种鼠类。为了对两种姬鼠的分类提供生物化学方面的依据,采用聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦电泳方法比较和分析了两种姬鼠的ＬＤＨ同工酶、ＥＳＴ同工酶和ＳＯＤ同工酶的差异。结果表明,两种姬鼠的ＬＤＨ同工酶酶谱基本相似,而ＥＳＴ同工酶和ＳＯＤ同工酶酶谱则存在明显的种间差异。根据ＥＳＴ同工酶Ａ２带的有无和ＳＯＤ同工酶主带等电点的差别,能将两种姬鼠很容易区分开来。