正常人转移因子的制备及某些性质

转移因子是致敏白细胞中的可透析物质,能将一个有免疫能力的人的某些细胞免疫力转移给无免疫力的人。所以供给转移因子可能是一种有效的免疫治疗措施。本文详细介绍综合利用血源制备正常人转移因子的方法,并分析其某些理化性质和生物学性质。收集分离血浆后的白细胞层,用三羟甲基氨基甲烷缓冲的或等渗的氯化铵溶液破坏其中污染的红细胞,白细胞经生理盐水洗涤后进行10次冻融,白细胞匀浆对流动去离子水透析,透析液冷冻干燥、除菌分装。每安瓿2毫升转移因子注射液相当4×10~8个白细胞的透析物,保存于-20℃备用。本制剂蛋白质定性检查阴性;每毫克干粉约含多肽148微克、核糖14微克;在250～251毫微米有吸收高峰;转移因子酸水解液硷基纸层析有三种硷基;硅胶薄板层析呈四个茚三酮显色点;葡聚糖G-25凝胶过滤呈可重复的特征性洗脱图谱,具有3个主要峰及若干个小峰,主要洗脱部分在V_t之后。动物实验表明此制剂无毒性、无过敏性和抗原性。本制剂已用于临床治疗带状疱疹、系统性红斑狼疮、慢性乙型肝炎、原发性肝癌、肺癌及白血病等一百六十余例,结果将另文发表。     

人体白细胞转移因子和“免疫”核糖核酸的联合抽提法——Ⅱ.“免疫”核糖核酸

本文继续介绍联合抽提法的第Ⅱ部分“免疫”核糖核酸(iRNA)的抽提。将白细胞匀浆沉淀残渣按Scherrer 和Darnell 的十二烷基磺酸钠加苯酚的热抽提法抽提。每克白细胞可得iRNAl～2毫克。A_(260)/A_(230)=2.05～2.26,A_(260)/A_(280)=2.03～2.20。RNA 含量为48.33±4.72%,DNA 含量为4.31±2.53%,蛋白质为2.76±0.32%,糖原含量为42.92±9.92%。聚丙烯酰胺凝胶电泳显示五条区带,相当于4S、8S、9S、15S 和20S。冻干的iRNA 制剂经动物实验证明无毒性、无热原和无过敏性,但对家兔具有抗原性。制剂经RNase、DNase 或pronase 处理后与抗血清仍有沉淀反应,但经唾液淀粉酶处理后沉淀线消失。所以认为抗原性系由制剂中所含糖原所引起。溶于肝素溶液的制剂注射于病人,能提高其迟发型皮肤变态反应及细胞免疫反应。     

人体白细胞转移因子和“免疫”核糖核酸的联合抽提法——Ⅱ.“免疫”核糖核酸

本文继续介绍联合抽提法的第Ⅱ部分“免疫”核糖核酸(iRNA)的抽提。将白细胞匀浆沉淀残渣按Scherrer和Darnell的十二烷基磺酸钠加苯酚的热抽提法抽提。每克白细胞可得iRNA1～2毫克。A_(260)/A_(230)=2.05～2.26,A_(260)/A_(280)=2.03～2.20。RNA含量为48.33±4.72%,DNA含量为4.31±2.53%,蛋白质为2.76±0.32%,糖原含量为42.92±9.92%。聚丙烯酰胺凝胶电泳显示五条区带,相当于4S、83、9S、15S和20S。冻干的iRNA制剂经动物实验证明无毒性、无热原和无过敏性,但对家兔具有抗原性。制剂经RNase、DNase或pronase处理后与抗血清仍有沉淀反应,但经唾液淀粉酶处理后沉淀线消失。所以认为抗原性系由制剂中所含糖原所引起。溶于肝素溶液的制剂注射于病人,能提高其迟发型皮肤变态反应及细胞免疫反应。     

福斯科林对大鼠排卵的作用及卵巢纤溶酶原激活因子活性影响

利用未成年大鼠研究了福斯科林对大鼠排卵作用及卵巢中纤溶酶原激活因于活性与排卵的关系。实验结果表明23日龄未成年大鼠,预先注射孕马血清,48小时后注射5,10,20,40及80微克五种不同剂量福斯科林,均不能引起动物排卵。当给以20微克及80微克福斯科林,同时增注前列腺素E_240微克,能引起动物排卵,平均排卵数为8.1±3.8个和9.8±6.5个。注射不同剂量福斯科林后,卵巢中纤溶酶原激活因子活性随注射剂量增加而增加,但并不呈线性关系。虽然注射福斯科林和前列腺素E_2能引起动物排卵,但卵巢中纤溶酶原激活因子活性与不排卵及超数排卵动物比较并无显著性差异。实验结果提示,福斯科林不直接引起大鼠排卵,只在与前列腺素E_2合并用药时才引起排卵。卵巢内纤溶酶原激活因子活性随注射福斯科林增加而增加,但不对卵泡破裂起直接作用。     

酶的热化学研究——Ⅰ.精氨酸酶催化水解反应的热动力学

用微热量计系统测定了精氨酸水解反应的焓变,其值为:(?)_rH_m(298K)=18.35±0.15 KJmol~(-1)(?)_rH_m(303K)=19.20±0.15 KJmol~(-1)(?)_rH_m(310K)=19.58±0.10 KJmol~(-1)用热动力学方法解析了实验热谱图,求出精氨酸酶的米氏常数,其值为K_m(298k)=1.7mmol~(-3)K_m(303k)=1.2mmol~(-3)K_m(310k)=2.3mmol~(-3)     

灵长类淋巴细胞亚群的研究——Ⅰ.外周血和淋巴组织的SRBC、SMRBC和ZYC玫瑰花结形成细胞的测定

用经过氨乙基异硫脲(AET)或神经氨酸酶(VCN)处理过的绵羊红细胞(SRBC),酵母多糖—补体复合物(ZYC)和红面猴红细胞(SMRBC)作为标记,测定了健康恒河猴、熊猴、豚尾猴、红面猴和树鼩的外周血以及恒河猴淋巴样组织的淋巴细胞亚群,在这五种动物中,E_(AET)玫瑰花结形成细胞的百分比依次为78.1±6.4,77.7±4.2,76.0±6.4,82和24.9±7.2。ZYC形成细胞的百分比依次为11.4±4.2,9.0±3.8,12.8±2.2,15和15.7±7.4。恒河猴胸腺,脾脏和淋巴结的E_(AET)形成细胞的百分比分别为95.2±2.9,28.8±10.3,44.8±6.2。与人类不同,SMRBC不是恒河猴B淋巴细胞的标记。此外,还与其他作者的结果进行了比较。     

紫貂(Martes zibellina)妊娠期血清孕酮水平的变化

用放射免疫法测定受配雌紫貂妊娠期间(9月至翌年2月)的血清孕酮水平。结果表明:其中产仔雌貂在9月至翌年1 月的血清孕酮呈现相对稳定的较高水平(平均1.45±0.23毫微克/毫升),2月下旬急剧升高至本试验的最高值(平均3.72±1.67毫微克/毫升,P<0.01),空怀雌貂在妊娠前期内的血清孕酮水平均为0.70±0.14毫微克/毫升的低水平,与产仔组相比,差异显著或极显著。作者认为血清孕酮水平的变化与日照和胚泡活动密切相关。     

糖精对人体外周淋巴细胞姊妹染色单体交换率的影响

本工作以离体人类外周淋巴细胞姊妹染色单体交换(SCE)为测定指标,研究糖精(邻磺酰苯酰亚胺)的诱变活力。结果表明,对照组的SCE率为4.24±2.05/细胞。作为阳性对照的丝裂霉素C明显地提高SCE(8.26±3.02—28.52±7.81/细胞)。50微克/毫升的糖精诱发的SCE率为5.75±2.7/细胞,150微克/毫升的糖精诱发的SCE则为5.91±     

尿中儿茶酚胺的螢光测定

本文根据三羟吲哚法原理,按Pitkanen(1956)和Euler(1955)等萤光测定法加以改良,可借助一般仪器设备较迅速正确地测定尿中总儿茶酚胺的含量;改进了吸附与洗脱过程;对尿中某些干扰物质的去除作了初步探讨。去甲肾上腺素的平均回收率为86.5±S.E.3.47(％)。正常青年男女102名24小时尿中总儿茶酚胺的含量为: 男(67名):85.6±S.D.9.3微克(43.7—151.6微克) 女(36名):87.8±S.D.19.4微克(40.5—136.6微克)     

15甲基前列腺素 F_(2α)和13去氢ω—乙基前列腺素 F_(2α)对妊娠大鼠血中孕酮的影响

15-甲-PGF_(2α)和13-去氢-ω 乙-PGF_(2α)在相同剂量时均能使妊娠7天的大鼠血浆孕酮浓度下降。15-甲-PGF_(α2)组于用药后4、8和24小时血浆孕酮浓度下降,分别为用药前的56.6%、43.7%和13.3%。在给药后72小时所有动物子宫中胚胎已被吸收。13-去氢ω-乙-PGF_(2α)组于用药后4、8和24小时血浆孕酮浓度分别为用药前的63.5%、34.4%和51.9%,给药后72小时大多数动物子宫中仍有胚胎,但胚胎比对照组显著为小,且多游离于子宫中。在给15-甲-PGF_(2α)前30分钟和第二次给15-甲-PGF_(2α)的同时,肌注 HOG 20国际单位,能完全对抗15-甲-PGF_(2α)的降低妊娠大鼠血浆孕酮浓度和抗早孕作用,给药后24小时内血浆孕酮浓度与对照组相似,全部动物维持妊娠,胚胎大小和数目也与对照组相似。恒速静注15-甲-PGF_(2α)(20微克)于麻醉妊娠大鼠,30分钟后已使子宫卵巢静脉血中孕酮含量由用药前1.271±0.154微克/10分钟下降到0.279±0.083微克/10分钟,给药后60分钟仍维持于低水平。如预先静注 HOG 20国际单位,可使子宫卵巢静脉血中孕酮含量由用药前1.123±0.162微克/10分钟升高到1.496±0.018微克/10分钟,在 HCG作用的基础上再静脉恒速注入15-甲-PGF_(2α),虽可使子宫卵巢静脉血中孕酮含量下降到1.179±0.042微克/10分钟,但不能降低到     

注射用转移因子不同生产方法比较

比较从猪脾中提取活性转移因子的不同生产方法,以建立适合产业化的制造工艺。将猪脾匀浆后,分别冻融0、3、5次,再以超滤法或Lawence法提取转移因子。与lawrence法相比,经5次冻融并超滤制备的产品收率高,符合国家标准。匀浆冻融次数对转移因子的收率和质量有一定的影响,超滤法适合于转移因子的大规模生产。     

母牛分枝杆菌制剂对T淋巴细胞增殖反应影响的研究

以氚标记胸腺嘧啶核苷(~3H-TdR)掺入法检测每分钟脉冲数(CPM),比较母牛分枝杆菌活菌悬液、辐射杀死菌悬液及高温杀死菌悬液对健康人外周血T淋巴细胞增殖反应的影响.以此作为评价治疗以细胞介导免疫为主的结核病免疫功能障碍免疫制剂效力的一个重要参数.在加入单一刺激因子实验中,对照组CPM为448±131;加入BCG、母牛分枝杆菌活菌悬液、辐射杀灭菌悬液以及高温杀死菌悬液的CPM分别为1037±194,2299±140,1819±528,994±186.这4种制剂的刺激指数均在2.0以上,尤其是母牛分枝杆菌活菌悬液、辐射杀死菌悬液分别为5.13,4.06.结果表明,母牛分枝杆菌3种制剂与BCG基本相似,在体外对T淋巴细胞增殖反应有明显的促进作用,其中以活菌悬液和辐射杀死菌悬液更为显著.另一试验中,以重组白细胞介素-2(rIL-2)作对照,BCG、母牛分枝杆菌悬液、辐射杀死菌悬液及高温杀死菌悬液分别加入rIL-2,目的在于观察菌体抗原加淋巴因子对T淋巴细胞增殖反应有无协同刺激作用.对照组的CPM为3721±1336,BCG加rIL-2组CPM为6904±1218;母牛分枝杆菌3种制剂的CPM分别为9544±172…     

正己醇降解菌的分离、筛选及分类鉴定

为获得可降解正己醇的真菌菌种,分别以苹果园土壤、苹果渣、苹果酒醪和醋醅为分离源,采用富集培养和紫外线定向诱变,得到了两株能在pH3.8-4.0的条件下降解正己醇的真菌菌株TF和TM。菌株TM和TF在马铃薯葡萄糖培养液中对4.0mg/mL正己醇的降解率分别为45.60±5.43%和23.82±9.27%,与对照在α=0.01水平上差异显著。结合形态学特征及26S rDNA D1/D2区(菌株TM)和ITS区(菌株TF)序列分析,对两株菌进行了分类鉴定。结果表明:菌株TM属于地霉属Geotrichum,菌株TF为白地霉Geotrichum candidum(有性型Galactomyces geotrichum)。     

防治血吸虫病药物的研究 ⅩⅩⅩⅡ.锑与磺溴酞钠等经肝排泄的相互抑制

大鼠静脉注射 PAT 15毫克/公斤,一小时内胆汁排锑量为给药量的29±13%,平均锑浓度为399±122微克/毫升,如在给 PAT 前先静脉注射 BSP 50毫克/公斤,则锑排泄率降为2±2%(P<0.001)。抑制程度与 BSP 的剂量及给药时间有关。大鼠静脉注射 BSP 15毫克/公斤,先收集胆汁一小时,再注射 PAT 30毫克/公斤及第二次 BSP15毫克/公斤,又收集胆汁一小时,结果实验组及对照组的 BSP 排泄率:第一次各为给药量的81±11%及75±7%,第二次各为47±14%及95±12%。给 PAT 后BSP 排泄率较对照组及自身对照期显著降低(P 值均<0.01)。上速竞争抑制现象在其他类型锑剂及酸性染料间也能获得证明。静脉注射(月弟)波芬,Sb-58或锑铵,剂量分别为40、20及17毫克/公斤,一小时内胆汁排锑率各为16.5±12.6%,6.45±4.4%及8.4±3.0%。若在给锑剂前先给 BSP 50毫克/公斤,则锑排泄率分别降至1.4±0.5%,1.9±1.2%及1.3±0.2%。大鼠结扎肾动静脉后注射 PAT 15毫克/公斤,一小时内胆汁排锑率为32±6%,若在给 PAT 前分别先注射50毫克/公斤溴甲酚绿或酚红,或100毫克/公斤萤光黄,则锑排泄率分别降至8±6%,17±12%及4±1%。家兔注射 PAT 或(月弟)波芬后,胆汁中锑在纸电泳时系向阳极泳动,且泳动速率变慢,证明锑剂代谢产物仍是阴离子,但已非原来的 PAT 或(月弟)波芬。对上述结果作了讨论,初步认为 PAT 经代谢后形成新的锑络合物,以阴离子形式,经肝—胆汁的酸性物质转运机构,通过特殊转运进入胆汁。     

简单、快速、灵敏的微型凝胶电泳装置

为了满足核酸、蛋白质极微量样品分析的需要,本室根据Ogrita等介绍的方法自制了比原设计更简单的微型双垂直板凝胶电泳装置。该装置由三块有机玻璃、四块窗玻璃和一个培养皿构成。胶室容量6.5毫升,点样量1微克(或更少)至10微克,每块胶板可点12个样品,电泳时间约2小时,两个垂直板的电泳条件完全相同。一、制作及组装取三块有机玻璃,长×宽×厚分别为:A_1=110×25×5毫米,A_2=90×25×5     

半胱胺盐酸盐减缓山羊手术后细胞免疫抑制效应的实验研究

16只摄食干草+精料日粮的成年阉公山羊随机分为试验(n=8)和对照组(n=8)分别接受瘤胃、十二指肠两次瘘管安装手术.试验组自手术前至试验结束给予口服半胱胺(15 mg·kg·goat-1·d-1)处理.两组分别于手术前1天、第一次(瘤胃瘘管)手术后第8天,第二次(十二指肠瘘管)手术后第4天和第13天经颈静脉采血,测定血清白细胞介素-2(IL-2)、考的松(Cortisol)浓度和淋巴细胞转化率(SI).手术前,试验和对照组之间IL-2(0.82±0.1 vs1.03±0.22 μg/L)、Cortisol浓度(20.48±4.52 vs20.80±9.93μg/L)、淋巴细胞转化率(90.72±7.25 vs 129.22±18.59)没有显著差异(p＞0.05).手术后对照组血清IL-2浓度(p＜0.05)和外周淋巴细胞转化率(p＜0.05)严重下降,Cortisol浓度上升(p=0.08);试验组各指标变化不大.两组相比,试验组IL-2浓度高于对照80-90%(p＜0.05),淋巴细胞SI高3倍左右(p＜0.05);Cortisol浓度则呈减少趋势(p=0.11).结果表明半胱胺制剂阻止手术后山羊外周白细胞介素-2和淋巴细胞的降低,减轻手术应激对细胞免疫的抑制.     

血管钠肽抑制异丙肾上腺素增强的大鼠心肌细胞钙瞬变

采用光谱荧光法研究血管钠肽(vasonatrin peptide,VNP)对心肌细胞内钙瞬变的作用及其机制,观察钠尿肽鸟苷酸环化酶(guanylate cyclase,GC)受体的特异性阻断剂(HS-142-1)、8-溴-环磷酸鸟苷(8-Br-cGMP)和镁蓝(methylene blue,MB)对心肌细胞内钙瞬变的影响。结果显示,异丙肾上腺素(isoproterenol,Iso)(10~(-10)～10~(-6)mol/L)可剂量依赖性地引起心肌细胞内钙瞬变增强,相对于对照组分别增强(13±8)%(P>0.05)、(26±13)%(P<0.05)、(66±10)%(P<0.01)、(150±10)%(P<0.01)和(300±25)%(P<0.01)。此效应可被β肾上腺素受体阻断剂普萘洛尔(10~(-6)mol/L)所阻断。VNP(10~(-10)～10~(-6)mol/L)可剂量依赖性地抑制Iso(10~(-8)mol/L)引起的心肌细胞内钙瞬变幅值的升高,相对于Iso(10~(-8)mol/L)分别减弱(99±3)%(P>0.05)、(96±2)%(P<0.05)、(84±6)%(P<0.01)、(66±3)%(P<0.01)和(62±3)%(P<0.01)。8-Br-cGMP(10~(-7)～10~(-3)mol/L)也可剂量依赖性地抑制Iso(10~(-8)mol/L)引起心肌细胞内钙瞬变的增强。HS-142-1(2×10~(-5)mol/L)使VNP的作用几乎完全消失。MB是GC的抑制剂,10~(-5)mol/L MB不但使VNP的作用完全消失,而且增强Iso对心肌细胞内钙瞬变的效应。VNP和HS-142-1本身对心肌细胞内钙瞬变无显著影响。而MB使心     

超滤法和盐析法粗提基因工程干扰素其比活的比较

我们的工作是应用ＹＦ２ＰＳＫ３１Ｒ型超滤器超滤粗提基因工程干扰素,并与盐析法对比。超滤法简便快速条件温和,超滤后干扰素平均收率为９３．９５％±２．４８％,盐析法则为７５．９３％±３．９％,前者比后者提高１８．０２％,差异显著。比活前为：４．４５５Ｅ６±７．５８Ｅ５ＩＵ／ｍｇ蛋白,后者为：１．６１１７Ｅ６±２．０７９Ｅ５ＩＵ／ｍｇ蛋白,差异也是显著的     

HOE642对减轻缺氧／复氧致未成熟兔心肌细胞内钙超载的作用

目的观察Na+/H+交换抑制剂HOE642（Cariporide）对缺氧／再复氧前后未成熟兔心肌细胞内游离钙离子浓度(［Ca2+］i）的影响,探讨HOE642对未成熟心肌保护机制。方法6枚新西兰幼兔心脏,用酶解法分离成单个未成熟兔心肌细胞悬液,每份细胞悬液均随机分为基础组、对照组和实验组,基础组未经缺氧直接测量细胞内Ca2+及心肌酶含量（CK、LDH）,而后两组均经受缺氧60min,再复氧30min后测量,其中实验组于缺氧时加入HOE642（1μmol／L）。用Flou-3／AM标记,激光扫描共聚焦显微镜测定单个未成熟免心肌细胞内游离钙浓度。另测定三组心肌细胞悬液中心肌酶含量（CK、LDH）。结果缺氧／再复氧后对照组未成熟兔心肌细胞内［Ca2+］i（2814±236/1375±102）及心肌酶漏出量明显高于缺氧前基础值(P＜0.01);再复氧后HOE642处理组心肌细胞内［Ca2+］i较缺氧前基础值增加不显著（1446±128/1375±102,P>0.05);而较未用药对照组明显减少（1446±128／2814±236,P<0.01）。而HOE642处理组细胞悬液心肌酶漏出量较基础值有所增加,但其相差不显著,而较对照组有心肌酶漏出量明显减少,两者相差非常显著（P＜0．01）。说明HOE642对缺氧／再复氧后未成熟兔心肌细胞内游离钙超载具有明显的抑制作用。结论HOE642对未成熟心肌的保护机制可能是抑制心肌细胞内游离钙超载引起的心肌缺血／再灌注损伤。     

多异瓢虫的发育与温度的关系

测定多异瓢虫Hippodamia variegata(Goeze)在13,17,21,25,29和33℃下各虫态的发育历期。结果表明,在不同温度梯度下,多异瓢虫全世代历期依次为:(62.23±3.42)d,(48.31±2.96)d,(25.01±2.53)d,(20.78±1.83)d,(13.68±0.67)d和(10.92±0.58)d。利用最小二乘法确定出多异瓢虫各虫态的发育起点温度和有效积温,其全世代的分别为10.85℃和249.79日.度;由微分法求出Logistic曲线方程中的最大发育速率K,进而由最小二乘法求出a、r,从而确定出多异瓢虫各虫态的发育速率与温度的Logistic曲线关系,其全世代的为:V=0.101156/[1+exp(3.905041-0.183509T)];由Lagrangc中值定理求出各虫态的发育最适温度、适宜温区,其全世代的分别为:Tmid(最适温度)=21.28℃、Tmin(适宜温区下限)=11.55℃、Tmax(适宜温区上限)=31.01℃。