T4噬菌体表面展示技术的研究进展

噬菌体表面展示技术(phage display)是由Smith于1985年首先建立起来的一种新的生物技术[1],它能将表达的外源多肽或蛋白以融合蛋白的形式展示在噬菌体的表面,保持相对独立的空间构象和原有的生物活性[2].常用的噬菌体表面展示系统主要有丝状噬菌体、λ噬菌体及T4噬菌体展示系统等.虽然它们都具有噬菌体展示系统的优点,但对于丝状噬菌体来说,它不能展示那些难以分泌的肽和蛋白质,而且它的N端可融合外源多肽的容量有限,较大蛋白的融合会造成空间障碍,影响噬菌体的装配,使其失去感染力.而对于λ噬菌体,大分子蛋白的融合会抑制噬菌体的组装,使其生长受到影响,因此这两种噬菌体更适用于构建短肽库和cDNA表达文库[3],而不适于构建重组疫苗和表达分子量大具有完整结构域的蛋白质[4,5].     

以胖为美

—项最新研究显示,雄陉驼背鲸总是寻求体型肥大的雌性作为自己的伴侣。 尽管鲸类保护已有几十年的历史,但是没有人亲眼目睹驼背鲸交配。科学家所知道的就是,在交配季节（冬季和春季）,会有20只以上的雄性驼背鲸拥挤着靠近一只雌性驼背鲸。美国夏威夷大学海洋哺乳生物学家藕曲里学家亚当·派克说：“雄性之间的这种竞争是相当残酷的。他们会吹出泡泡警告对方,然后用身体撞击、用嘴撕咬对方,偶尔这些“情敌”也会血染海洋。有一些雌性要比其他雌性吸引更多的雄性追求者。     

使雌性排斥雄性移植器官的基因

使雌性排斥雄性移植器官的基因在器官移植中,雄性可以接受雌性供体的器官,而雌性却排斥雄性供体的器官,因为雄性体内存在Ｈ－Ｙ抗原,而雌性体内没有这种抗原。科学家用高度近亲繁殖实验小鼠施行皮肤移植时首次发现了Ｈ－Ｙ抗原。《Ｎａｔｕｒｅ》今年８月２４日报导,...     

大肠杆菌VT噬菌体受体(vpr)基因突变株的鉴定

近年来大肠杆菌O157引起的人和动物的发病率呈上升趋势^[1-3],O157的强致病性与很多因子有关,如：粘附因子、肠溶血素(Enterohaemolysin,Ehx)、Vero毒素(Vero toxin,VTs)等。VT可致人和动物的腹泻、出血性肠炎、溶血性尿毒综合证、血栓、血球减少性紫癜等疾病^[4],是O157主要的致病因子。大量的研究表明VT是由λ家族具有vT基因的噬菌体(vT—phage)编码的^[5],且在噬菌体感染宿主菌的裂解状态时由晚期调节基因调控毒素的产生。可见大肠杆菌O157所产的vT与vT噬菌体的感染有关。大肠杆菌表面是否存在噬菌体的受体为众多科学工作者所关注,1999年Saunders等在大肠杆菌染色体中克隆出一段与VT2噬菌体敏感性有关的基因^[6],将其定名为vpr(verotoxin phage receptor)。为了进一步确定vpr基因的功能,本试验利用同源重组的方法,将已经构建的含vpr基因片段的重组自杀性质粒pYYvpr,转化到含全长vpr基因的大肠杆菌MC1061,经PCR和southern blot鉴定,获得一株染色体同源基因突变株,并对其进行生物学特性研究,初步证实该基因与噬菌体的裂解性感染有关。     

东亚飞蝗与亚洲飞蝗的主成分及判别式分析

本文对采用自我国西北,西南地区散居型飞蝗标本之１１个数量性状进行了主成分和判别式分析。个体水平上的主成分分析说明：飞蝗个体在空间上存在着连续变异。鉴于使用传统的形态测量方法有时难以在个体水平上明确划分亚洲飞蝗和东亚飞蝗,我们这个两个亚种的雌性和雄性分别建立了线性判别函数：Ｖ（雌性）＝－３５．３７℃＋２．７２Ｍｘ－１．７１Ｖ＋４．３１Ｅ／Ｆ;Ｖ（雄性）＝－１７．２２＋９．１１Ｈ－５．６４Ｐ－１．０５     

蝴蝶"抑春素"诱引寄生蜂

寄生蜂可以通过感受寄主昆虫的种内化学通讯信号来定位寄主。德国自由大学和荷兰瓦赫宁根大学的昆虫学家发现,在交配过程中菜粉蝶Pieris brassicae雄性会给雌性涂抹一种“抑春素”(anti-aphrodisiac)的气味物质——苄基氰化物(benzyl cyanide),以降低雌性菜粉蝶对其它雄性菜粉蝶的吸引能力。但是,寄生此种菜粉蝶卵的一种赤眼蜂Trichogramma brassicae可以探测到这种气味,     

潮汕蝾螈的求偶行为

潮汕蝾螈(Cynops orphicus)是我国特有的濒危有尾两栖类,繁殖季节始于5月中旬。对其求偶行为观察发现,该螈求偶模式表现出与东方蝾螈(C.orientalis)相似的特点,但雄性扇尾和潜行时间(25~37 s)较东方蝾螈(10~20 s)更长;雄性在一次求偶中多次排精,雌性亦可多次纳精,精子囊形态与东方蝾螈类同;雌性纳精后,雄性反转咬住其腹部,被咬雌性呈现植物态。纳精过后,雌性出现暂时的冷漠或恐惧,不再接受雄性求偶。该螈成功纳精在累次求偶行为中占比不高(2.7%),但较东方蝾螈(1.1%)成功率高。雄性之间存在求偶过程中的竞争和干扰行为。     

抗生素可替代品——噬菌体和益生菌会议

1会议简介 近年来,随着抗生素的滥用,细菌对抗生素的耐药性不断增强.据报道,目前有些国家肺炎链球菌耐药发生率达到25％;美国75％的细菌感染会对一种或多种抗生素产生耐药性;日本葡萄球菌分离株半数以上都具有多重耐药性[1].我国的情况更为严重,其中临床分离的大肠杆菌对喹诺酮类抗生素耐药率已超过60％,居世界首位,因此寻找代替抗生素治疗细菌性疾病的策略成为解决该问题的有效途径之一.其中,噬菌体替代抗生素的研究已成为近几年的热点[2],对噬菌体生物学的深入研究推动了应用噬菌体进行细菌性疾病诊断和治疗的发展.     

《微生物学杂志》征稿简则

《微生物学杂志》属中国微生物学会主办的系列学术期刊之一,为我国生物学核心期刊,先后被美国《化学文摘(CA)》、《中国生物学文摘》、《中国核心期刊(遴选)数据库》、《万方数据-数字化期刊群上网期刊》、《中国学术期刊综合评价数据库》、《中国期刊全文数据库》等国内外重要检索刊物摘引和收录。主要刊载工业微生物学、农业微生物学、医学微生物学、兽医微生物学、食用菌学、生物工程学及各相关领域的学术论文。主要栏目有“研究报告”、“研究简报”、“进展与评述”、“实验与技术”、“开发与应用”、“专题译述”、“论文摘要”、“技术讲座”、“测试方法”、“成果与产品信息”及“会议简讯”等。1文稿要求内容精练、论点明确、数据可靠、行文流畅,“研究报告”、“综述”一般在3 500字(2版)最多不超过3版(包括图、表)。英文摘要和英文翘目必须是中文的译文(中文150～300字,外文不超过250个实词)、关键词(3～5个)、中图分类号(查阅“中国图书馆分类法”第三、四版)、作者单位及汉语拼音的作者姓名;“实验与技术”、“研究简报”要附英文题目及汉语拼音的作者姓名、单位名称：“论文摘要”等文章一般在1 000字以内。2来稿请提供激光打印稿一式两份(A4纸小4号通栏打印,作者自留副本),并附作者工作单位证明介绍信。稿件须注明联系人详细通讯地址(邮政编码、电话、传真、电子信箱等)、第一作者个人信息(性别、职称、所获学位、现研究方向等),以便处理稿件时能及时与作者联系。3文中所用计量单位及符号均按近期公布的“中华人民共和国法定计量单位”书写,非许用单位,务请换算成许用单位。来稿务必做到清稿定稿。稿件中的外文字母、符号必须分清大、小写,正、斜体,上下角的字母、数码、符号,位置高低应区别明显。容易混淆的字母、符号等在首次出现时,请用铅笔注明。4文中插图随文排(先见文,后见图)。曲线图一律要求电脑绘制;照片必须黑白分明,影像清楚,如是显微镜或电镜照片应注明倍数。文中画一方框,表明其插图位置,并将图题、图注写在方框下,图及照片大小一般不超过45 mm×65 mm;同一稿件图及照片尺寸尽可能相同,不用圆形照片;图片实际宽度(指印出后的横向长度,包括坐标轴的刻度值名称等在内)一般不超过70 mm;特殊情况不超过125 mm。图中文字、数字和符号应与正文一致,图题、表题(包括图表内项目)要注明英文。5论文第1页注脚处,请注明科研项目来源,并附课题号及受资助情况(各种科技发展基金、科技发展计划、重点实验室资助等。务必注明项目编号)及第一作者姓名、性别、职称、学位、研究方向等情况。本刊对国家自然科学基金资助项目及具有前沿课题取得突破性进展的优秀论文将优先发表,并开展优秀论文评选活动。本刊发表的论文,凡涉及获省(部)级以上成果奖者,请及时与本刊联系,提供获奖复印件或单位证明。6参考文献仅限于公开发表的且是主要和最新的(最好近3年的),其排列顺序不分文种按论文中引用文献次序列出。研究报告限10篇以内,进展与综述限15篇以内。文献必须注明文献类型：专著[M],论文集[C],报纸文章[N],期刊文章[J],学位论文[D],报告[R],标准[S],专利[P]。著录如下：     

隐蔽的比赛

如此高的几率 ,可能说明偷听塑造了动物交流的演化。一些动物行为表现似乎是为了适应避人耳目。许多鸣鸟在最长的、最匹配的唱歌比赛中也是最安静的 ,都想赢得比赛的两只相斗的雄鸟可能不想让别的鸟知道谁胜谁败。观战对比赛动物的社会作用比“偷听”更难研究。这个工作尚处于早期阶段。研究者们发现 ,当雌性鱼在旁边观战时 ,雄性鱼会有不同的表现 ,它们的攻击性会有所收敛 ,更多地展示出一些文雅的举止 ,比如摇尾等。失败的雄性鱼宁愿喜好那些没有看见它们受辱的雌性 ,它们有很强烈的愿望 ,选择那些没有看见它们失败的雌性。据说“偷听”有…     

噬菌体抗体库技术

噬菌体抗体库技术用ＰＣＲ扩增出抗体的全套可变区基因,通过噬菌体表面表达技术,把Ｆａｂ段或单链抗体表达在噬菌体表面,经过“吸附－洗脱－扩增”过程筛选并富集特异性抗体。     

红脂大小蠹基于近交避免行为的雄性配偶选择研究

为研究红脂大小蠹Dendroctonus valens雄性在配偶选择时是否存在近交避免行为,以及这种选择行为是否是基于化学信息,设计了3个实验,分别验证雄性对近缘和远缘雌性基于化学信息的配偶选择,近缘或远缘雌性存在下雄性的交配动机,以及基于化学信息的亲属识别机制及对雄性交配的影响。结果显示,在亲缘关系不同的2雌性选择实验中,雄性更愿意与远缘雌性交配;雄性在近缘雌性粪屑存在下,交配成功率显著降低。研究表明雄性红脂大小蠹对不同亲缘关系的雌性有显著不同的交配期望。雄性对亲缘关系近的同家庭雌性有明显的近交避免行为,由此避免近交衰退。本研究同时显示雄性红脂大小蠹亲属识别的机制是基于雌性个体的化学信息。     

昆虫激素对雄性和雌性果蝇的不同影响

尽管两性之间存在极大的行为差异,但令人吃惊的是,对任何物种,研究人员几乎都没有发现能够将雄性与雌性脑区分开来的解剖特征。现在,用果蝇所做的研究工作揭示了雄性和雌性之间对昆虫激素cVA的反应存在的差异。雄性释放该激素,而雄性和雌性都能探测到该激素,而且它们都是通过其     

雌性进化并非只为“找对象”

谁都不会把绿头鸭的“公”、“母”搞混。公鸭翠绿色的脑袋与母鸭暗褐色的身体形成鲜明的对比。雄性进化出亮丽的颜色,是为了吸引雌性的眼球——至少生物学教科书是这样告诉我们的。然而,一项新的研究表明,在一些物种中,曾经色彩艳丽的雌性为保护自己而穿上了土黄色的“袍子”。     

一株新型裂解K63荚膜型肺炎克雷伯菌的噬菌体分离鉴定和生物学特性研究及全基因组分析

[背景]噬菌体具有特定的杀菌能力,对生态和细菌的进化具有重要影响。近年来由于多重耐药细菌的全球出现,噬菌体疗法逐渐引起了人们的关注。[目的]对一株新型裂解K63荚膜型肺炎克雷伯菌的噬菌体vB_KpnP_IME308进行生物学特性研究、测序和比较基因组学的分析。[方法]以一株从临床分离到的肺炎克雷伯菌为宿主菌分离噬菌体,应用双层平板法进行噬菌体最佳感染复数(optimal multiplicity of infection)、一步生长曲线(one-step growth curve)、温度以及pH敏感性实验测定,纯化噬菌体并通过透射电镜观察噬菌体形态;应用标准的苯酚-氯仿提取方案提取噬菌体全基因组,使用Illumina MiSeq测序平台进行噬菌体全基因组测序,测序后对噬菌体全基因组序列进行组装、注释、进化和比较基因组学分析。[结果]分离到一株新型的肺炎克雷伯菌噬菌体,命名为vB_KpnP_IME308;其最佳感染复数为0.001,一步生长曲线结果显示,其感染宿主菌的潜伏期约为20 min,裂解期约为80 min,平均裂解量330PFU/cell;噬菌体vB_KpnP_IME308在4-50℃和pH 5.0-10.0范围内稳定;电镜观察该噬菌体属于短尾噬菌体科(Podoviridae)。基因组测序结果表明,噬菌体基因组全长为43 091bp,(G+C)mol%含量为53.9%,(A+T)mol%含量为46.1%。BLASTn比对结果表明,该噬菌体与目前已知噬菌体基因组仅84%区域有相似性。噬菌体进化树结果表明该噬菌体属于Autographivirinae亚科的Drulisvirus属的成员。[结论]从医院污水中分离鉴定了一株新型的肺炎克雷伯菌噬菌体,表征并分析了噬菌体全基因组序列,这些结果均表明该噬菌体具有开发为抗肺炎克雷伯菌制剂的潜力,为噬菌体治疗多重耐药细菌感染奠定了基础。     

利用定量PCR测定嗜盐古菌噬菌体SNJ1的滴度

[目的]利用定量PCR建立检测嗜盐古生菌噬菌体SNJ1滴度的新方法,为研究高盐环境中噬菌体的动态变化提供新的途径。[方法]采用定量PCR技术检测嗜盐古菌噬菌体的gene 23上的DNA片段,通过DNA片段丰度推断噬菌体的滴度。[结果]定量PCR方法绘制的噬菌体SNJ1的标准曲线与噬菌体的滴度间有非常高的相关性(R2=0.9956),且定量PCR扩增体系效率高(99.87%),样品间的变异系数小(0.257%~3.270%),扩增特异性强(融解曲线仅有1个峰)。[结论]利用定量PCR在检测嗜盐古生菌噬菌体SNJ1滴度时表现了较高的特异性与精确性,该方法为检测高盐环境中噬菌体变化提供了一种快速、简便的手段。     

"占群"还是"挑战"?不同时间限制条件下麋鹿个体的交配计策

在麋鹿的发情交配季节 ,雄性麋鹿可区分为 3种类型 :“群主”、“挑战者”和“单身汉”。“群主”是一头圈占并控制雌鹿活动的优势雄性。“挑战者”不占有雌性繁殖群 ,但在发情场附近地点展示炫耀。当雌性繁殖群的雌鹿外出采食靠近“挑战者”的展示炫耀地点时 ,“挑战者”会积极地寻求机会与之交配。“单身汉”在繁殖季节不表现发情行为。他们像非繁殖季节一样采食 ,采食后蹲在水塘中休息。我们对何种因素决定麋鹿个体的发情交配计策感兴趣。 1996至 1998年夏天 ,我们在北京麋鹿苑观察麋鹿发情交配行为以分析导致这些行为差异的原因。结果发现 ,“群主”、“挑战者”和“单身汉”用于维持生命的时间预算与用于发情的时间预算成反比 ,并且 ,“群主”、“挑战者”和“单身汉”用于维持生命的时间预算与用于发情的时间预算差异显著。“群主”的绝大部分时间用于发情占群 ,而用于采食、饮水的时间很少 ,所以 ,“群主”在发情期间基本上处于禁食状态 ,靠消耗体内脂肪维持生命。“单身汉”则相反 ,绝大部分时间用于采食、休息和反刍 ,基本上没有发情行为。“挑战者”在发情行为与维持生命行为之间的时间则居于“群主”与“单身汉”之间。交配次数是偏态分布的 ,与雄性发情时间呈正比。“群主”的交配概率最高     

探究黄缘蜾蠃后代性别的分配

蜾蠃亚科Eumeninae昆虫提供了重要的生态系统服务如传粉和生物防治。黄缘蜾蠃Anterhynchium flavomarginatum筑巢在芦苇中,是一种重要的独栖性捕食昆虫。2015-2016年,本实验通过在江西省德兴市新岗山镇的BEF-China样地收集筑巢巢管,室内处理巢管并记录数据,旨在研究该蜂后代性别的分配。研究发现该蜂是实验地营巢独栖性蜂类的优势物种;在后代仅有雌性或雄性的巢管中,性别偏向雄性,雌雄比为0.27∶1,雄性数量远高于雌性,推测原因一是虽然放置的巢管直径是随机的,但是其中直径小于12 cm的巢管数量更多,二是巢箱附近黄缘蜾蠃可利用的资源较少;雄性的巢内平均个体数量高于雌性原因是雌性个体较大且所需的食物更多,占用了巢内更多的空间;在后代雌雄共有的巢管中,雌雄比接近为1∶1,略偏向雌性;随着巢管直径的增大,雌性比例有上升的趋势,但是巢管长度对雌性的影响不大;构建巢室时,后代性别的分配总是按照雌性在内,雄性在外的方式排列,这可能揭示了黄缘蜾蠃可以决定后代的性别分配。     

斯洛维尼亚池塘中大蟾蜍的交配模式

为了解大蟾蜍( Bufo bufo)的配对成功是否与身体大小有关,在蟾蜍产卵之前,我们在斯洛文尼亚捕捉和测量了2 224只成体样本。在这些捕获的个体中, 1 772只为雄性, 452只为雌性,其中355对处于抱对状态。雌性的体长(从吻端到泄殖腔的距离)一般比雄性稍长。无论雄性还是雌性,抱对者的体长均大于未抱对者。抱对的雄性和雌性的体长具有显著的正相关。我们所发现的大小匹配的交配模式,与从其它普通蟾蜍种群得到的结果一致[动物学报51 (3) : 513 -515 , 2005]。     

天山盘羊集群行为的研究

除了孤盘羊外,盘羊集群可分为４类,即雌性群,雄性群、混合群和家庭群。雌性群和雄性群是盘羊的基本群。其余为季节性群。根据３－１１月野外１８２群,２０４０只盘羊统计。盘羊全年群平均１１．２（２－５６）只,雌性群１２．８（２－５６）只,雄性群６．６（２－１６）只和混合群１８．１（６－４３）只。同时对盘羊群体的季节性变动进行了研究。盘羊集群与其自身的生物学特性、环境的水热分布和人类的竞争有关,因此不同地区