一种半氧化苏木素染液的配制方法

一种半氧化苏木素染液的配制方法梁化印郭瑞峰（解放军第二五二医院病理科保定０７１０００）苏木素染液配制方法较多,传统方法有自然氧化和加氧化剂的人工氧化两种。其目的都是将无染色能力的苏木素氧化后,在媒染剂的作用下产生有较强染色能力的三氧化苏木红。但自然氧...     

龙胆紫希夫氏液显示DNA染色新方法

应用龙胆紫配制成Schiff(希夫氏)试剂,在微波辐射下进行Feulgen染色,结果使正常及良、恶性肿瘤组织细胞核内DNA着紫红色,并能应用真彩色图像仪进行DNA的定量分析.其方法操作简便,便于临床病理诊断应用.现介绍如下.标本的采集:活检手术切取的肿瘤组织100余例,经甲醛固定,石蜡包埋.切片,厚5μm.染液的配制:①8.3%盐酸水溶液(HCl8.3ml、蒸馏水 91.7ml);②龙胆紫(上海试剂站)希夫氏试剂的配制同PAS方法,以龙胆紫代替碱性品红;③亚硫酸氢盐溶液(10%偏重亚硫酸钠溶液5ml、1mol/L-HCl5ml、蒸馏水90ml).染色步骤;①切片脱蜡至水—蒸馏水;②8.3%盐酸水溶液水解切片1min(微波仪5档),蒸馏水洗;③     

介绍一种陈旧苏木精染液复苏的方法

苏木精是组织切片制作常用细胞核染料 ,以Harris苏木精染液最为常用。Harris苏木精染液在使用一段时间后 ,染色能力逐渐减弱 ,造成细胞核着色困难 ,染色时间延长 ,虽能着色 ,但依然着色浅淡 (图 1,2 )。为此 ,我们采用在陈旧Harris苏木精染液中加入苏木精酒精液 ,经煮沸冷却后加冰醋酸的方法 ,使Harris苏木精染液恢复染色能力 ,收到了较好的效果 ,现介绍如下。1　材料与方法1 1材料 (1) 5 %苏木精酒精液苏木精(E·Merck进口分装 ) 5 g溶于无水乙醇 10 0ml,放置 4～ 5周后使用。 (2 )陈旧Harris苏木精染液80 0ml。1 2方法在 80 0ml陈旧Ha…     

血清蛋白的醋酸纤维薄膜电泳实验透明液的改进

醋酸纤维薄膜电泳,是以醋酸纤维薄膜作为支持物的电泳方法。血清蛋白的醋酸纤维薄膜电泳实验是生物教育专业学习蛋白质化学的必做实验,其操作过程中,“透明”一步是该实验的最后环节。笔者在实践中通过反复改进,对透明液配制比例做了改动,收到良好的实验效果。透明甲液：90ml无水乙醇,10ml冰醋酸;透明乙液：80ml无水乙醇,20ml冰醋酸;透明丙液;85ml无水乙醇,15ml冰醋酸。实际操作过程中采用以下2种方法：方法一,先将漂洗干燥后的膜条放入甲液中作用3～5min,然后再将膜条浸入乙液中作用1～2min,透明效果理想;方法二,将漂洗干…     

用蜡浸膜保存干制标本

干制的生物标本的保存是比较困难的,特别是昆虫和植物蜡叶标本,易发霉变质、虫蛀、破碎,不利于长期的保存,影响教学使用。为了更好地保存干制的生物标本,我们试用一种“浸沾蜡膜”的方法,保存干制标本获得比较好的效果。1蜡膜派的制备1.1蜡膜液的配方（甲）二甲苯100ml切片石蜡（50～60°）4～sg（乙）汽油（80～100＃）100ml切片石蜡（50～60°）5～10g1．2蜡膜液的配制和应用（甲）方的配制：先将二甲苯注入烧杯中,再把石蜡切成碎片并投入烧杯内,待石蜡溶化成“蜡膜液”后即可使用。本方适用于各种昆虫标本和植物标本的浸膜。（乙…     

变色素2R水溶液显示神经髓鞘的新方法

本文应用变色素 2R(Chromotrope 2R)显示神经髓鞘的新方法,将神经髓鞘染成红色,形态清晰,颜色鲜艳,操作简便,易于掌握,是显示神经髓鞘较为优良的方法,为神经组织的病理诊断和研究提供了新的技术方法.标本来源:尸检脑组织、脊髓和周围神经组织,经10%甲醛固定,石蜡包埋,切片5μm.试剂的配制:①变色素2R染液:变色素2R(北京化工厂)0.5g,磷钨酸0.6g,冰醋酸1.0g,蒸馏水加至100ml.放置4℃冰箱长期保存,用前回温.②0.2%冰醋酸水溶液:冰醋酸0.2ml,蒸馏水加到100ml.染色步骤:     

介绍一种快速混合的苏木精染液

苏木精(Hematoxylin)系从豆科植物苏木(Caesa lpinia sappan)中用乙醚浸制提炼而成,是一种常用的优良核染料。在苏木精的结构式中(见图1、2),因无双键的醌式结构,无发色团,所以它本身不是染料而必须经氧化成为氧化苏木精时才能染色。这个过程称为“成熟”。使苏木精“成熟”的方法有二:一是在苏木精溶液中加入氧化剂如氧化汞,高锰酸钾,碘酸钠,重铬酸钾等,使苏木精脱氢成为醌,才呈发色团,这个过程较快;二是配制成苏木精原液并暴露于空气中3-6周,使其氧化,这个过程较慢。另外,由于苏木精对组织的亲合力很小,即使成熟后变为氧化苏     

一种简易革兰氏染色法

我们用简易G染色法,对细菌进行染色,实践证明该方法稳定性好。简单快速,特介绍如下:一、试剂:(一)甲液:结晶紫0.25g,蒸留水加至100ml(二)乙液:碱性品红0.3g,碘化钾0.5g,碘0.2g,用95％酒精加至100ml溶解(可以水浴溶解)。二、方法:     

内耳整块染色石蜡包埋制片法

内耳制片常用的是火棉胶——石蜡双重包埋H-E片染法。此法制片步骤较多,不易掌握。我采用Bouin氏固定液固定,H-E整块染色、石蜡包埋法制片,操作简便,易于成功,内耳的基本结构(前庭膜、盖膜、毛细胞都完好无损,如取材适当,可在同一切片同时显示壶腹嵴。染色液的配制: 1.苏木精染液的配制: 苏木精 25毫克硫酸铝钾 1.25克碘酸钠5毫克蒸馏水 75毫升由于以上药品称量很小,故需称的较准确。配出来的液体若呈现混浊,则是因为以上药品(主要是碘酸钠)称得不准造成的,这种混浊染色液不能用。 2.复制伊红染色液的配制: 将伊红(Y或B均可)0.5克溶于3毫升蒸馏水中,溶解后将冰醋酸—滴—滴加于其中,边滴边搅动,     

加速苏木精染色液“成熟”的两种方法

海登汉氏(Heidenhain’s)苏木精染色法是一种经典的细胞核和染色体的染色法,广泛地用于动、植物制片和细胞学的压片中,而且对很多难于被其他染料着色的材料,用此法仍能取得比较良好的效果。但该法中的苏木精染色液配后不能马上使用,需放在空气中经一到二个月“成熟”后才能使用。“成熟”即苏木精氧化成苏木素(氧化苏木精)的过程:     

正交设计优选五味子果实中总木脂素提取工艺

目的:比较不同方法对北五味子总木脂素提取的影响,优选最佳提取工艺方法。研究五味子木脂素抗微波辐射损伤作用。方法:以干燥北五味子果实为原料,分别采用传统加热回流法、超声提取法、微波提取法、微波—超声提取法提取北五味子总木脂素,对这四种提取方法分别进行正交试验分析,以确定最佳提取工艺。结果:通过结果比较分析,以微波提取工艺结果最佳,在微波提取功率为200W,乙醇体积分数为80%,提取时间为40min,料液比为1:12的提取条件下,北五味子总木脂素的产量达到了16.44mg/g,使得木脂素的提取产量较传统加热回流法、超声提取法、微波—超声提取法得到了显著的提高。     

血涂片制作的几点体会

制作方法：血涂片Wright’s染色法。①采血、制血膜、水平放置血膜片晾干。②血膜片固定于甲醇2-3min,取出晾干。③用蜡笔在血膜片两端划一染色区,避免染色时染液外溢。④往血膜片滴加瑞氏染液（瑞氏染料0．1g＋甲醇60ml）,数十秒钟后,再加一倍于染液的蒸馏水,染色5-8min。     

小肠腺三色染色法

我们采用三色染色的方法对小肠肠腺细胞进行染色,杯状细胞、潘氏细胞、胞质和肠腺基膜呈现三种不同的颜色。细胞形态清晰,对比鲜艳,收到了理想效果。材料和方法1·材料人小肠为手术切除新鲜标本。10%甲醛固定24-48h,常规脱水,石蜡包埋。2·方法石蜡切片厚4-6μm,切片脱蜡,蒸馏水洗2m in,复合染液染3-5m in,70%乙醇分色,蒸馏水洗1m in,阿利新蓝染5m in,蒸馏水轻洗;0·2%光绿复染胞质、肠腺基膜20s;70%盐酸乙醇分色;梯度乙醇脱水;二甲苯透明;中性树胶封固。3·染液配制(1)复合染液:1%伊红(1g伊红,70%乙醇100m l)40m l,2%偶氮桃红(2g偶氮桃红甲…     

微波法从黄连中提取黄连素的工艺研究

为了研究微波法从黄连中提取黄连素的效果,分别考察不同微波功率、原料浸泡时间、料液比(g/mL,下同)、提取次数、微波辐射时间对黄连素提取率的影响。结果微波法从黄连中提取黄连素的最佳工艺条件为:提取功率500W,原料浸泡时间24 h,料液比1∶120,提取次数2次,微波辐射时间3 min,提取率达5.61%,提取效果较好。与硫酸法、石灰法、乙醇浸取法相比,不仅提高了提取速度,并且更加环保。     

快速显示血细胞及骨髓细胞DNA、RNA的方法

实验对传统的甲绿 派若宁法做了一定的改进 ,使染色时间缩短 ,步骤简化 ,效果良好。并对骨髓和脾造血细胞内ＤＮＡ、ＲＮＡ的定性和定量显示进行了一定的探讨。1.材料和方法1 1　材料 :派若宁Ｙ染液的配制 6%派若宁Ｙ(ＡＭＲＥＳＣＯ分装 ) 1ｍｌ,0 2Ｍ醋酸缓冲液(ｐＨ5 0 ) 8ｍｌ,蒸馏水 8ｍｌ ,优质甘油 1ｍｌ。此过程在磁力搅拌器上进行。 2 %甲绿用 0 1ＭＰＢＳｐＨ7 2溶液配制 ,经三氯甲烷洗脱去影响染色效果的甲紫成分 ,制得较纯的甲绿溶液。1 2　染色方法 :取小鼠股骨 (用ＲＰＭＩ 1640培养液将骨髓冲出 )和脾细胞 ,制成细胞悬液…     

微波提取山楂中黄酮类化合物的工艺优化

以总黄酮得率为指标,采用微波法辅助提取山楂叶中的总黄酮,选取浸提时间、乙醇体积分数、微波辐射时间、液固比等参数进行单因素试验,选择影响较大的因素,利用Design-Expert 8.0.5b进行响应面分析,得到优化的提取工艺条件:乙醇体积分数56%,液固比51 m L/g,微波辐射时间3.7 min,在此条件下,山楂叶中总黄酮得率为8.923%。     

介绍一种改良的油红O脂肪染色法

在日常病理诊断和科研工作中,显示组织内的脂肪常采用油红O进行染色。应用过程中发现,配制该染液所用的丙酮和异丙醇容易挥发,致使染液产生沉淀,染色时易在组织切片上留下红色的结晶,给染色结果的准确判断带来很大影响。为此,我们对染液配方进行了改进,收到较好效果。材料和方法1·标本人或动物的肝组织等,甲醛—钙液固定,冰冻切片,厚10μm。2·改良的油红O染色液油红O 0.5g,50%乙醇100m l。将油红O溶于乙醇内,且不断搅拌至完全溶解即可。配制好的染液置磨口瓶内保存备用。3·染色步骤①切片干燥后入50%乙醇稍洗;②油红O乙醇染液作用8m in…     

分化的骨骼肌细胞的不同固定和化学染色方法比较

该文比较了几种不同固定和化学染色方法对分化的骨骼肌细胞的效果及优缺点,并探讨了用化学染色法进行骨骼肌细胞形态学分析的可行性。骨骼肌前体细胞系C2C12经肌分化诱导3天后分别使用4%多聚甲醛(paraformaldehyde,PFA)、甲醇(methanol)、卡诺氏(Carnoy)固定液固定5 min、10 min和15 min,以确定最适固定方法;然后分别用改良苯酚品红(modified phenol fuchsin)、吉姆萨(Giemsa)、苏木精–伊红(hematoxylin-eosin,HE)三种不同的染液进行染色。结果表明,4% PFA固定5 min或10 min较其他方法更好地保持了肌管的形态;对于分化的骨骼肌细胞包括形成肌管的细胞和未形成肌管的细胞,HE染色优于其他几种染色方法,但以上几种方法均不如免疫荧光染色方法。     

一种新的猪蛔虫横切片的制作方法

蛔虫是线形动物门的代表动物 ,是学习和观察线虫动物最好的实验材料。我们在借鉴前人经验的基础上 ,经多次实验与反复比较 ,探索出了用正丁醇脱水透明 ,整染制片的新方法。现将具体操作步骤介绍如下 :1　取材　到肉联厂采集新鲜猪蛔虫 ,鉴别雌雄后 ,分别入生理盐水。2　固定　将标本取中段剪成 4～ 5cm入 1 0 %福尔马林液固定 4 0 h。自来水冲洗 2 4 h后 ,用锋利刀片将已剪成 4～5cm的标本进一步切成 4～ 5mm,入蒸馏水 1～ 2 h。3　染色　采用 Mayers苏木精液 (苏木精 2 5mg,钾明矾1 .2 5g,碘酸钠 5mg,蒸馏水 75ml) ,染 3 6～ 4 8h,染液在…     

从千层塔中微波协助提取石杉碱甲和石杉碱乙

首先从 8种溶剂中筛选出硫酸作为微波协助提取的浸提溶剂 ,然后用正交试验确立了千层塔生物碱的最佳提取条件。以石杉碱甲和石杉碱乙回收率为指标 ,考察了溶剂倍数、溶剂浓度、微波处理时间等因素。结果表明 ,在室温下微波协助提取的最优条件为 :酸浓度 0.8% (v/v) ,液固比例 2 5∶1 ,微波处理时间 90s。 3次重复实验所得石杉碱甲和石杉碱乙回收率分别是 93.7%和 93.9% ,相对标准偏差分别为 1.79%和 1.5 6% (n =3)。与传统的回流提取工艺相比 ,过程时间从 2h缩短为 90s,回收率提高了 1 0 %以上。