山瑞鳖Trionyx steidachneri染色体组型

本文以骨髓为材料,用秋水仙—低渗—空气干燥制片法,制备染色体标本,对山瑞鳖的染色体组型进行研究。其2n=66 NF=60,其中近中着丝粒染色体4对,近端着丝粒染色体4对和端部着丝粒14对。并有11对点状染色体。山瑞鳖与鳖的染色体数目是十分相近的。     

山瑞鳖驯化养殖、保护及其开发利用Ⅰ.山瑞鳖的繁殖习性

山瑞鳖Palea steindachneri (Siebenrock 1906),隶属爬行纲、龟鳖目、鳖科,在我国仅分布于广东、广西、海南、贵州和云南等省的海拔大约在1300m以下的山区溪河、池塘局部水域.国外见于越南北部、老挝和缅甸与我国毗邻的地区.在我国,山瑞鳖濒临绝灭境地被列为国家二级保护动物.为了保护和开发利用这一宝贵资源,笔者自1988年开始,对山瑞鳖进行实验性的驯化养殖研究,现将初步结果报告如下.     

山瑞鳖驯化养殖、保护及其开发利用的初步研究Ⅱ.山瑞鳖的生长、饲养管理及保护利用

(续上期 )4　山瑞鳖的稚幼鳖的生长4 1　刚孵出的山瑞稚鳖的大小　测量了不同窝次刚孵出 3 5只稚鳖 (在鳖类从卵内刚孵出的鳖通称稚鳖 ,至于稚鳖期与幼鳖的界限则无定论。本文对山瑞鳖按体重划分为 :5 0 ｇ以下为稚鳖期 ,5 0～ 40 0ｇ为幼鳖期 ,40 0～ 40 0 0 ｇ为商品鳖 ,40 0 0 ｇ以上视为成年鳖 ) ,平均体重 7 4(6 0～ 9 1 ) ｇ ,背甲长宽 3 7 6× 3 0 9(3 0× 2 3～ 47× 3 4)ｍｍ ,腹盘长 2 5 0 (2 4～ 2 7)ｍｍ。4 2　山瑞幼鳖的生长　前述刚孵出的 3 5只稚鳖经过7个月的加温 (2 5℃ )饲养结果 ,除中途死亡 1 1只外 ,剩下 2 4只幼鳖…     

基于线粒体Cytb基因全序列探讨两爪鳖和山瑞鳖的系统进化关系

采用PCR方法对两爪鳖(Carettochelys insculpta)和山瑞鳖(Pdea steindachneri)mtDNA的细胞色素b基因(Cytb)进行了扩增和测序,并结合GenBank中已公布的其它15种龟鳖类和两种鳄类的同源序列,进行了序列变异比较和系统发生分析.以凯门鳄和扬子鳄为外群,采用邻接(neighbor ioining,NJ)法、最大简约(maximum likelihood,ML)法和最大似然(maximum parsimony,MP)法重建分子系统树.结果均支持将龟鳖目分为3支:侧颈龟科(Pelomedusidae)(非洲侧颈龟Pelomedusa subrufa),两爪鳖科(Carettochelyidae)(两爪鳖Carettochelys insculpta)和一支由其它15种现生龟鳘类组成的进化支.在这里两爪鳘科被认为可能代表一新的亚目;而山瑞鳖聚于鳖科(Trionychidae)中,与中华鳌(Pelodiscus sinensis)最先聚成一支,再依次与马来鳖(Dogania subplana)、非洲鳖(Trionyx triunguis)、印度箱鳖(Lissemys punctata)聚成一组.     

中华真地鳖生物学特性初步研究

中华真地鳖Eupolyphagesinensis系夜出性昆虫 ,其活动主要发生在夜间 ,1 9～ 2 4时活动最盛 ,且蜕皮高峰主要集中在后半夜。该文描述了初龄若虫的形态特征 ,对若虫的发育历期、蜕皮时间及卵鞘的孵化进行了研究 ,并比较了中华真地鳖若虫的消化道 ,提出了地鳖虫食品开发的流程 ;同时简要论述了地鳖虫基础研究及药用和食用开发过程中存在的问题     

三种鳖线粒体DNA细胞色素b基因序列的比较分析

对中华鳖、砂鳖和山瑞鳖线粒体DNA细胞色素b基因进行了引物设计、PCR扩增、序列测定和PCR-PFLP(Polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism)分析。研究结果表明中华鳖、砂鳖与山瑞鳖线粒体DNACytb基因的序列全长相同,均为1140bp,其A、C、G、T含量相似,分别为378个(33.2%)、322个(28.2%)1、22个(10.7%)、318个(27.9%)、373个(32.7%)、324个(28.4%)、124个(10.9%)、319个(28.0%)、380个(33.3%)3、30个(28.9%)、127个(11.1%)、303个(26.7%)。同源性及序列差异率分析表明:中华鳖与砂鳖b基因序列的同源性为92.3%,中华鳖、山瑞鳖的为85.0%,砂鳖、山瑞鳖的为84.1%;中华鳖与砂鳖b基因核苷酸序列间的差异率为7.7%,中华鳖、山瑞鳖间的序列差异率为15.0%,砂鳖、山瑞鳖间的序列差异率为15.9%,而中华鳖、砂鳖、山瑞鳖各自个体间的序列差异率分别为2.37%、0.88%和0.18%,种间差异显著。用内切酶酶切分析其扩增产物,结果表明:用内切酶NdeⅠ可准确鉴别砂鳖,而用内切酶BamHⅠ则可准确鉴别山瑞鳖。内切酶NdeⅠ和BamHⅠ的联用分析,可使这三种鳖在分子水平都得到明确的鉴定。从三种鳖线粒体DNACytb基因核苷酸序列的显著差异和酶切位点的变化,可以进一步证明砂鳖是不同于中华鳖的鳖属一新种。     

中国鳖科Pelodiscus属一新种研究

本邀请季１个产自桂东北及邻近地区的鳖类新种－小鳖。该鳖种生活在水质清洁,砂砾石底质的江段,６０年代以前出产额丰,现已难觅踪影。对野生小鳖资源的保护已迫在眉睫。     

中华鳖人工孵化的研究

试验采用四种孵化方式：自然孵化、人工孵化箱孵化、恒温水溶箱孵化、调温调湿箱孵化。从孵化方式、温度、鳖卵的大小及放置方位等不同因素对其孵化的影响进行了研究。结果表明：温度在孵化过程中，对孵化期的长短起着重要的作用鳖卵孵化最适宜温度为３０－３１℃左右；卵正放的孵化率＞和的孵化率＞倒放的孵化率；卵子的卵径和卵重直接影响着孵出稚鳖的大小。     

黄喉拟水龟的繁殖生物学研究

1998年4-11月对黄喉拟水龟的繁殖生物学进行了研究,在广东,黄喉拟水龟的产卵高峰期在5-6月,窝卵量1-7枚,平均2.5枚;卵重平均13.95g;长径平均4.34cm;短径平均2.23cm。卵重与卵长径呈正相关关系,在25-32℃、沙床含水量5-10%孵化条件下,孵化时间平衡73.8d,孵化率84.2%。初生稚龟均重9.75g。背甲长平均3.77cm;背甲宽平均2.91cm。稚龟体重与背甲长、宽呈极显著的正相关关系,稚龟经8-11月3个月生长,平均日增重0.149g。稚龟体重、背甲长、宽与日龄呈极显著的正相关关系。稚龟体重与背甲长宽也呈极显著的正相关关系。     

中华真地鳖寄生螨的初步研究

在地鳖虫的饲养中发现 ,中华真地鳖EupolyphagasinensisWalker被螨类寄生较严重 ,可造成巨大的损失。经鉴定该寄生螨为伯氏嗜木螨Caloglyphusberlesei,并对其进行了形态描述。通过饲养观察 ,总结了该寄生螨的发育历期、寄生部位、寄主带螨率和单头带螨量 ,并调查了该寄生螨在饲养土中的分布规律。根据该寄生螨的生物学特性 ,该文提出了几种防除该螨的措施和方法。     

鳖性腺发育的研究

湖南地区鳖的性成熟年龄是四年。成熟雌鳖每年产卵3—5次(窝),一般每次产卵8—12个,最多可达20—26个,是典型的多次产卵类型。由8—10微米直径的卵原细胞,长足到17—20毫米的成熟卵子,其间可以分为卵原细胞期、初级卵泡期、生长卵泡期和成熟卵泡期。在生长卵泡期可以看到由卵表伸向放射膜内的微绒毛(microvilli),这种结构与卵黄形成所需的物质转运有关。曲细精管中精子的正常形成和存活,不受季节变化的影响。进入雌鳖输卵管中的精子经过冬季到来年的生殖季节仍保持受精能力。     

中华真地鳖若虫分龄的研究

通过系统测定刚蜕皮中华真地鳖EupolyphagasinensisWalker若虫腹宽、体长及体重值,得出若虫腹宽、体长及体重值变化有一定的规律,腹宽、体长及体重可以作为若虫分龄的标准。     

福建引种天蚕生物学特性的研究

天蚕是一种资源昆虫,该虫自浙江引种,在福建一年发生一代,以卵越冬。翌年4月上旬孵化,幼虫5龄,幼虫期34—40天,5月中旬化蛹,蛹期21—32天,成虫671中旬羽化,成虫寿命4—7天。     

中华真地鳖若虫肠道细菌的研究

中华真地鳖是一种传统中药资源昆虫,从人工饲养种群的正常取食及蜕皮若虫肠道环境中分离、纯化,好氧和厌氧培养获得11个细菌菌株,对其形态、染色反应、培养性状和生理生化反应进行了系统研究。鉴定结果表明,上述11个细菌菌株依次分别属于:不动杆菌属(Acinetobacter)、柠檬酸杆菌属(Citobacter)、沙门菌属(Sal-monella)、芽胞乳酸杆菌属(Sporolacillus)、节杆菌属(Arthrobacter)、肠杆菌属(Enterobacter)、地杆菌属(Terrabacter)、放线杆菌属(Actinobacillus)、克雷伯菌属(Klebsiella)、沙雷菌属(Serratia)、预研菌属(Yokenella)。中华真地鳖正常取食和蜕皮若虫肠道环境细菌种类不同。分离未获得真菌和放线菌。     

中国大鲵及鳖不同组织LDH同工酶的比较研究

采用聚丙烯酰胺薄层垂直板状凝胶电泳、特异性的组织化学染色及光密度薄层扫描研究的心、肝、肾、眼球、小肠、胸肌、脾脏、卵巢、胰腺、胃肌、血浆等12种组织的乳酸脱氢酶(LDH)同工酶的酶谱。并与爬行类动物鳖不同组织的LDH同工酶作了比较。结果表明中国大鲵的胸肌、肝脏、肾脏具有LDH~(100)、LDH~(60)、LDH~(50)3种同工酶;胃肌有LDH~(100)、LDH~(70)、LDH~(60)同工酶,其它组织只有LDH~(100)、LDH~(60)2种。故按组织特异性区分,大鲵组织的LDH同工酶具有3种谱型,它们的含量及相对活力也有很大的差异。鳖的LDH同工酶迁移率比大鲵的低,是一组阴极性同工酶,其等电点比大鲵的高,但其LDH同工酶与中国大鲵的有很大的差异,且两种动物都具有LDH~(50)。     

中华真地鳖中肠主要消化酶的活性研究

以中华真地鳖EupolyphagasinensisWalker为研究材料,测定人工饲养和野生地鳖虫在不同生长阶段消化酶的活性以及温度及pH对人工饲养地鳖虫中肠消化酶活性的影响。结果表明,在地鳖虫生长发育过程中,蛋白酶和脂肪酶活性随发育而逐渐增强,淀粉酶活性却随发育而逐渐减弱。在低龄若虫、高龄若虫和成虫阶段,人工饲养地鳖虫蛋白酶活力比野生地鳖虫低,人工饲养地鳖虫淀粉酶和脂肪酶活力比野生地鳖虫高;在30～60℃的范围内,人工饲养地鳖虫蛋白酶、淀粉酶的适宜温度范围为40～50℃,脂肪酶的适宜温度范围为35～45℃;蛋白酶、淀粉酶和脂肪酶的适宜pH范围分别为6.5～7.5,5.6～6.4和7.5～8.5。     

外源维生素C及冬眠对中华鳖稚鳖生长、维生素C合成和肝脏维生素C含量的影响

本文研究了饲料中维生素C(Vc)对中华鳖稚鳖冬眠前后Vc合成能力及肝脏中Vc含量的影响。将体重为29.41g±5.44g的稚鳖180只,按其饲料中Vc含量(0、500、2500mgVc/kg饲料)分为Vc0、Vc500和Vc2500共3组,每组6个平行,每平行10只鳖。实验开始前称重得各组初始平均体重。25℃±1℃下用实验饲料饲喂4周后,缓慢降温至7℃,人工诱导其进入冬眠,此时为冬眠期开始,每组取6只鳖,称重后快速处死,取其肝脏和肾脏。其余鳖全部称重。冬眠8周末取样,处理同上。用高效液相色谱(HPLC)法测定肝脏Vc含量和肝脏、肾脏古洛糖酸内酯氧化酶(GLO)活力。结果发现中华鳖自身能够合成Vc,且合成部位在肾脏。饲喂4周不同Vc水平的饲料后,各组间特定生长率差异不显著。冬眠8周后,各组体重均有所降低,组间冬眠期间特定生长率无显著性差异。冬眠开始时,稚鳖肝脏Vc蓄积量有随外源Vc浓度升高而递增的趋势,但差异未达到显著性水平;经历冬眠后各组稚鳖肝脏Vc含量降低,Vc500组下降不显著,而Vc0与Vc2500组显著下降;肾脏GLO活力在不同Vc梯度组间及冬眠前后均无显著差异。以上结果表明:中华鳖冬眠过程中要消耗较多的肝脏Vc,外源Vc和冬眠对肾脏Vc合成能力影响不显著。     

中华真地鳖六地理种群若虫生长发育研究

本文对中华真地鳖Eupolyphaga sinensis六个地理种群进行了研究,发现中华真地鳖体长与体宽呈显著一元线性回归关系,不同地理种群斜率（体形）存在差异。六个地理种群各龄若虫发育历期并不随龄期增长而延长。天津种群雌性若虫期发育历期显著大于其它种群,其它种群间除江苏种群外均无显著差异。雄性若虫期发育历期除天津种群外均无显著差异。同一地理种群,雌性若虫期发育历期大于雄性若虫期发育历期。以上结果表明,中华真地鳖不同地理种群间在形态和生物学上均有一定的差异。