重组hPRL-1的表达纯化及其理化和酶学性质研究

目的:表达纯化hPRL-1重组蛋白,分析其理化性质及酶学特性。方法:热激法将重组pET15b质粒转化入E.coli BL21中,IPTG诱导表达出His-tagged hPRL-1蛋白。使用Ni-NTA亲和层析法结合Mono Q离子交换层析法纯化。用SDS-PAGE法和Western Blot法进行表达情况的定性定量分析,并使用HPLC法鉴定蛋白纯度,计算出蛋白分子量,圆盘等电聚焦电泳分析重组蛋白等电点。比较分析以pNPP、4-MUP和DiFMUP为底物时的酶促反应动力学。同时以pNPP为底物测定酶的最适pH值;以4-MUP为底物测定酶的最适温度,分析探讨缓冲液离子强度与蛋白酪氨酸酶通用抑制剂钒酸钠对酶活力的影响。结果:以亲和层析和离子交换层析结合,可以纯化得到纯度约为95%的蛋白。测得蛋白分子量为24.54kD,等电点为9.11。以pNPP、4-MUP和DiFMUP为底物时Km分别为3720μmol/L,130μmol/L和50μmol/L。酶的最适pH值为7.6,最适温度为34℃。结论:纯化所得蛋白为目的蛋白hPRL-1;两步纯化相结合可以得到纯度较高的蛋白;三种底物特异性依次为DiFMUP>4-MUP>pNPP。     

陆地表层系统动力机制研究Ⅰ.陆地表层系统和动力学方程

对陆地表层动力学的研究对象、研究内容及其基本理论方法作了阐述;以多学科综合的观点定义了陆地表层系统,包括时空尺度范围的约定、状态变量的选择、物质循环以及外界因子等的讨论;依据物质和能量守恒原理建立了陆地表层系统的非线性控制议程组,表述了各圈层之间物质循环和能量循环过程、反馈关系及其动力学联系;讨论了探制方程组的整体动作功能以及人类活动对陆地表层系统的影响。     

心脏和脑循环功能相互影响的动力学模型

心脏和脑血管疾病是医学研究的热点。本文整合心脏、体循环和脑循环,构建了循环系统的整体动力学模型,力图揭示心脏和脑循环功能的相互影响。结论表明,从血液动力学角度,不但心脏特性变化会对脑循环产生影响,脑血管异常也会对心血管功能（如血压）发生作用。     

红细胞变形的动力学行为

用激光衍射仪测量了兔红细胞在PBS和PVP两种介质里的应力松弛过程.结果表明,红细胞在低粘介质(PBS)中的动力学行为和它在高粘介质(PVP)中的动力学响应有显著差异,除了等容变形和非等容变形以外,还有一个从定向到随机取向的变化过程.故在低粘介质中测得的红细胞应力松弛过程中变形指数(DI)随时间(t)的变化是由红细胞变形(DI)d和红细胞取向(DI)or两部分构成的.红细胞变形的特征时间(约10毫秒)比取向过程的特征时间(约50秒)小2～3个量级.这就使得我们有可能从测得的DI—t曲线中把(DI)d和(DI)or区分开来,从而获得关于红细胞动力学特性的更多的信息.这一点,在临床实践是很有意义的.     

柠檬酸发酵过程的动力学

发酵动力学是微生物培养过程研究中的一个重要部分,它让人们从理论和定量的角度了解和分析微生物的培养过程,是过程设计和控制的基础．柠檬酸发酵过程的动力学．Chemiel^[1]、Kristiansen^〔2〕、Khan^〔3〕、Rohr^〔4〕、Vaija^〔5〕等曾作过研究。本文在考察前人工作的基础上．结合实验研究．进行如下探索。     

人眼房水动力学系统的建模与仿真方法研究

为从宏观上应用工程方法进一步研究房水运行机理,提出了人眼前节房水流动系统的动力学仿真模型。依据目前眼科界较为公认的房水运行和眼压反馈机制建立系统构架,基于对眼科解剖学与生理学相关理论的分析、流体力学基本原理和临床参数进行系统辨识与参数确定。运用数字仿真的方法分剐在正常生理平稳状况和激发试验状况下对模型进行了仿真运行,获得了和临床结论较为一致的结果。能较好地模拟房水运行机制,在与临床可测量参数一致的同时能获得一些不易测量的参数,为研究房水动力学提供依据。     

KF-3000脑循环分析仪

KF-3000脑循环分析仪是上海匡复医疗设备发展有限公司和复旦大学联合研究基础上开发的新一代的脑循环动力学检测与分析仪器。它通过无创检测颈动脉的血流速度、血液压力、血管管径和人体血压,以及颅内大脑两侧前、中、后动脉及椎动脉的血流速度．运用脑循环动力学模型和专用计算软件来计算分析反映脑循环功能状况的脑血管动力学参数。     

豚鼠呼吸动力学各指标的智能化测试系统

呼吸动力学各指标的测定,是反映肺功能状态常用而重要的指标。传统的手工操作实验法重现性较差,操作复杂且慢,精确度亦差。1969年Dennis等采用模拟电子计算机测定肺顺应性、肺阻力,但此乃是专用的模拟机,也有其局限性。我们在前段工作基础上,应用微机实现了实时自动测试。本文着重介绍这个智能化测试系统。     

易感地带的日本血吸虫病传播动力学模型及其定性分析

在血吸虫病流行病学上,把容易感染血吸虫病的地方称为易感地带.易感地带的特点:一是人、多种牲畜作为终宿主参与了血吸虫病的传播,终宿主的种群数 m 大于2;二是各终宿主的平均虫体负荷较大.     

枯草杆菌蛋白酶E的分子动力学模拟和随机动力学模拟

在同源蛋白质序列比较的基础上;利用毕汝昌小组计算机图象系统得到的粗结构,作了能量极小化,分子动力学模拟,随机动力学模拟,得到了枯草杆菌蛋白酶的空间结构.并将该结构与已知同源蛋白质的空间结构进行了比较.     

酶反应速率方程的普适形式

酶反应速率方程的普适形式是应用于相互关联的大规模代谢途径动力学建模的重要方法.把酶反应速率方程写成Michaelis-Menten-King-Altman方程形式可以使得动力学参数(或函数)容易与数据库中的实验数据相接轨,并可以处理任意数量的底物和产物,有利于大规模的计算.普适形式可以同时描述正、负反应方向,并能精确地用于准稳态条件.展示了在三类生物体系中广泛存在的酶反应机制中普适方程的严格推导过程,并讨论了普适方程的特点,针对不可逆反应酶反应产生的产物抑制效应可以自然消除,总结了在普适速率方程中体现调节剂的作用和协同作用.     

嗅觉系统神经网络模型的模拟与动力学特性分析

在哺乳动物嗅觉系统的拓扑结构及生理实验的基础上建立了一套非线性动力学神经网络模型．此模型在模拟嗅觉神经系统方面有着突出的优点,同时在信号处理以及模式识别中表现出了奇异的混沌特性．着重描述了K系列模型的非线性动力学特性,并通过数值模拟进行分析．     

固定化酵母反应动力学的研究

本文采用微分反应器初速度法对以海藻酸钙为载体的固定化酵母的耗糖动力学进行了研究。测得了固定化酵母的表观动力学常数,并进一步求得了固定化酵母的本征动力学常数。实验结果表明,固定化酵母的表观动力学常数显著受内外扩散的影响,其本征动力学常数与 游离酵母的动力学常数比较,也有较大的不同。此外,对内扩散对反应动力学的影响进行了理论分析和实验验证。