不同基底对培养鸡胚视网膜神经纤维生长作用的计算机辅助定量研究~*

以天然的细胞外基质——鸡胚视网膜基膜作为培养基底,用层粘连蛋白、纤维粘连蛋白、多聚赖氨酸和鼠尾胶等物质包被的表面为人工培养基底,比较了孵育10天的鸡胚视网膜条在这些不同培养基底上神经纤维生长的图像。第一次尝试用计算机对多根神经纤维的生长图像进行辅助定量分析。选择的四个参数是每根神经纤维平均总长度(L)、平均偏转角度(Q)、平均弯曲度(R)和平均分支点数(B)。结果表明,纤维生长图像的各个参数值和培养基底密切相关。     

蛙视网膜杆细胞系统的阻遏—回升效应

适当频率的闪光作用于视网膜时,第2个闪光引起的视网膜电图(ERG)b-波比第1个闪光引起的小得多,随后各次闪光引起的反应又逐渐增大,直至持续稳定在一定水平,这一现象叫阻遏一回升效应(Suppression-recovery effect,以下简称 S—R 效应)。S—R效应在许多动物都观察到(见〔1〕)。Owen 和 sillman 认为~〔1〕,蛙的视网膜 S—R 效应是锥细胞系统的一种现象,而且在感受细胞水平就已发生。但我们对蛙视杯的 S—R 效应观察表明,引起 ERG 阈上1对数单位以内的弱闪光产生的 S—R 效应,是杆细胞活动     

鸡胚视网膜基膜的免疫电镜的研究

扫描电镜观察到鸡胚视网膜基膜(RBM)上的菊花样结构,经免疫胶体金透射电镜证实为Müller胶质细胞的末端足,层粘连蛋白(laminin)分布在末端足的辐射臂及其周围的基膜上。培养的视网膜细胞,其神经纤维在RBM伸长,收缩了的Müller细胞末端足呈球状颗粒分布在神经纤维及其生长锥的上面和侧面。推测分布在Müller细胞末端足的辐射臂及其周围基膜上的层粘连蛋白在体内可能与神经纤维生长的导向有关。     

视物时为何感觉不到盲点的存在?

答:视网膜上所有的由神经节细胞发出的视神经纤维都集中在眼后极偏向鼻侧处穿出视网膜,视网膜动脉和视网膜静脉也由此进出视网膜,这个区域叫做视乳头。由于这个区域没有感光细胞,入眼光线成象于此,不能引起视觉,因而生理学上称之为盲点。     

视网膜生物钟研究进展

昼夜节律生物钟是以24h为周期的自主维持的振荡器。在高等的多细胞生物中,生物钟可以分为母钟和子钟。研究表明哺乳动物的母钟位于下丘脑视交叉上核(suprachiasmatic nucleus,SCN),由此发出信息控制全身的节律活动;子钟位于组织细胞内,调控效应器的节律。在分子水平上,生物钟的振荡由自身调控反馈环路的转录和翻译组成,并接受外界环境因素的影响,通过下丘脑视叉上核(Suprachiasmatic Nucleus,SCN)中枢震荡器的同步整和而产生作用。视网膜是一种十分节律性的组织,许多生化的、细胞的和生理的过程都是以节律的方式来进行的,如视觉灵敏度、视网膜杆细胞外片层脱落和视网膜色素上皮细胞的吞噬作用、光受体中的视觉色素基因的快速表达等。生物钟存在于很多脊椎动物的视网膜中,被认为是一种外周生物钟。本文综述了视网膜生物钟,生物钟信号传输以及生物钟网络等的最新研究进展。     

视网膜神经网络的信息传递

可见光作用于脊椎动物视网膜时,感光细胞外段的视色素吸收光量子,经过一系列瞬时光化学反应,迅速将光能转换成电信息,并向视网膜内核层细胞(水平、双极和无足细胞)及视神经节细胞传递,后者以峰电位形式将信息传向中枢。最近十几年来,对视觉系统外周部分的信息转换和传递过程的研究十分活跃,尤其是Tomita用微电极记录视网膜细胞内反应技术的发展,以及Kaneko用荧光黄染色单个     

胚胎神经纤维的生长

当胚胎的神经元迁移到它的特定位置后,就会长出突起(树突和轴突),这些突起会沿着一条特殊的路线伸展,有时直行,有时转弯,最后伸到它的靶子处。它是怎样前进和找到靶子的呢? 神经解剖学家S.R.Cajal(1906)最早看到了胚胎神经纤维的生长,并看到在纤维的末端有一个棒状结构,Cajal把它命名为生长锥。R.G.Harrison(1910)用组织培养方法,观察到神经纤维的生长不是任意的,它总是沿着一条特殊的路线伸展,寻找和识别其最后的靶子。     

绿色荧光蛋白基因修饰的人视网膜色素上皮细胞异种移植的长期观察

探讨利用视网膜色素上皮 (retinalpigmentepithelium ,RPE)细胞移植介导目的基因转移至视网膜的可行性。人的RPE细胞在体外经携带绿色荧光蛋白 (greenfluorescentprotein ,GFP)基因的逆转录病毒感染及G4 1 8筛选后 ,手术显微镜直视下经睫状体平坦部注射到兔眼视网膜下间隙。术后通过活体荧光眼底照相 ,荧光显微镜、共聚焦显微镜及透射电镜等观察眼球铺片及切片 ,发现经 gfp基因修饰的人RPE细胞在兔眼视网膜下间隙可存活一年以上。移植的RPE gfp细胞不仅仅局限于移植部位 ,大多扩散到超过 2～ 3个象限的眼底 ,镶嵌于宿主RPE细胞之间或呈单层排列在宿主色素上皮与神经视网膜之间 ,并持续高水平表达GFP。移植后早期玻璃体内每周注射免疫抑制剂普乐可复 (FK5 0 6 )可明显改善移植细胞的存活状态     

诱导人胚胎干细胞分化形成具有三维结构的视网膜样组织的方法研究

目的探讨在成分简单的培养条件下将人胚胎干细胞(h ESCs)通过3D培养的方式诱导分化为人神经视网膜各种细胞的方法。方法将不同系的h ESCs用消化酶消化后,以团块形式悬浮培养在含有1﹪Matrigel的培养液中。对于SHh ES8系的h ESCs在第1天加入BMP4信号通路抑制剂,然后每2天换液以逐渐降低其浓度。在分化的不同时间,通过检测全能性基因和视网膜标志基因的表达水平以确定h ESCs团块的分化状态。对于H9系的h ESCs,抑制Wnt信号通路以促进h ESCs分化过程中神经视网膜前体细胞重要转录因子CHX10的表达。数据经Graph Pad Prism 6.0c student's t-test分析处理。结果 (1)H9系h ESC经过15 d的分化,各眼区转录因子的表达水平都有大幅上调(与D0相比,D4时SIX3水平上升到720.1±238.6,P=0.039;SIX6上升到260.0±132.5,P=0.122;PAX6上升到2661±1353,P=0.121;LHX2上升到480.4±27.56,P0.000;RAX上升到144.9±35.61,P=0.016),免疫荧光检测也显示此时分化的细胞已经具备早期视网膜细胞的特征;(2)在H9系h ESCs分化第7天添加IWR1e抑制Wnt信号通路,可以有效地提高CHX10的表达,使含CHX10阳性细胞的团块的比例从0﹪上升到86.6﹪(P=0.000),表明Wnt信号通路在视网膜细胞形成中起重要的调节作用;(3)SHh ES8系的h ESCs通过悬浮培养,在第24天时可以检测到有CHX10阳性的视泡样结构,继续培养至83 d,可以检测表达不同的神经视网膜细胞标志基因的细胞,包括CRX阳性的感光细胞或前体细胞、AP2α阳性的无长突细胞和ISLET1阳性的神经节细胞。结论不同系的h ESCs对同样的诱导分化显示出不同的反应;抑制Wnt信号通路可以促使CHX10表达,实现早期视网膜细胞的分化成熟;利用无血清悬浮培养的方式,可以使h ESCs分化为各种视网膜细胞和具有一定三维结构的视网膜样组织。     

脊髓损伤机制研究的生物信息学分析

用生物信息学方法筛选参与脊髓损伤(spinal cord injury, SCI)发展过程的关键分子和通路,可为脊髓损伤发展机制的研究提供指导。从GEO数据库下载基因芯片数据,并将数据集中的样本分为脊髓损伤组(SCI组)和正常组(normal组)。应用R语言处理来自不同数据集样本间的批次效应,同时对基因芯片的表达数据进行标准化处理,并通过PCA分析监测标准化处理后数据的质量。应用R语言中的limma包分析标准化后的基因表达矩阵,以得到差异基因。将差异基因导入DAVID数据库进行GO (gene ontology)分析,并通过KEGG数据库进行通路分析。然后应用STRING数据库构建PPI网络,并通过Cytoscape中的cytoHubba插件分析得到10个hub基因。最后应用箱式图监测hub基因在不同样本中的表达,并用GeneCards数据库查询hub基因的功能。此外,为了补充差异基因筛选的不足,通过R语言对基因表达矩阵进行了GSEA (gene set enrichment analysis)分析。结果显示:TYROBP、ITGB2、PTPRC和FCER1G等基因在脊髓损伤发展过程中发挥重要的作用;细胞外基质的炎症反应、葡糖醛酸基转移酶活性的变化和星形胶质细胞的迁移等与脊髓损伤的发展机制关系密切; TNF信号通路、NF-κB信号通路和p53信号通路在脊髓损伤的发展机制中发挥重要的作用。这些关键的分子和通路在脊髓损伤中的作用值得我们进行更深入的探讨。     

红腹锦鸡和丽纹龙蜥视网膜的组织学观察

为了进一步探讨动物视网膜结构与机能的关系,利用光镜和扫描电镜比较观察了红腹锦鸡(Chrysolophus pictus)、丽纹龙蜥(Jspalura splendida)视网膜的结构。结果表明,红腹锦鸡、丽纹龙蜥的视网膜均由四层细胞构成,在光镜下均可分为十层结构。红腹锦鸡视网膜平均厚225·2μm,视细胞与节细胞数比约为2:1;丽纹龙蜥视网膜平均厚156.2μm,视细胞与节细胞数比为1:1。红腹锦鸡、丽纹龙蜥视网膜视细胞的平均密度分别为(124828±24404)个/mm2和(33165±7034)个/mm2。显示了红腹锦鸡和丽纹龙蜥均具有昼行性动物视网膜的结构特征。     

两种生境下的8种藓类植物茎结构的比较解剖学研究

对极端生境(旱生与水生)下的8种藓类植物,旱生条件下生长的虎尾藓(H edw ig ia cilia ta(H edw.)P.B eauv.)、欧黑藓东亚变种(And reaea rup estrisH edw.var.f auriei(B esch)T akak i)、长蒴紫萼藓(G rimm ia m acrothe-ca M itt.)、日本蓑藓(M acrom itrium jap on icum D oz.et M o lk)和簇生砂藓(R acom itrium aqua ticum(Schrad.)B rid.),水生条件下生长的大叶凤尾藓(F issid ens g rand if rons B rid.)、鳞叶水藓(F ontina lis squam osa H edw.)和短尖美喙藓(E urhynch ium angustirete(B roth.)T.K op.)进行了茎的横切及离析后细胞形态学的比较研究.结果表明:(1)生长在干旱条件下的5种藓类植物的茎无中轴分化,细胞壁厚;离析后可见细胞端尾和纹孔场数目多,端尾数目增多扩大了细胞间的接触表面积,纹孔场数目最多为2.60/细胞,显示出其机械组织发达,这些是对旱生生长环境的适应.(2)生长在水生条件下的3种藓类植物茎的中轴有或无,细胞壁薄;离析后可见细胞端尾和纹孔场数目少,纹孔场数目最少为0.37/细胞,茎表皮细胞壁薄且茎内有大量薄壁细胞,表明其机械组织不发达,这些特征与水生生长环境相适应.本文还对8种藓类植物茎的结构特征在分类中的应用进行了探讨,认为茎表皮、内外皮部宽度及细胞分化的比例、中轴的有或无等在属间种内的性状是稳定的,具分类学意义.     

脑红蛋白在家兔视网膜中的分布

目的探讨脑红蛋白(NGB)在家兔视网膜的分布特征。方法选择健康成年家兔5只,利用免疫组织化学染色SP法,观察NGB在家兔视网膜中的分布情况。结果 NGB在家兔视网膜的视神经纤维层、节细胞层、内网状层、外网状层、光感受器内节段和色素上皮层中有强阳性表达,在视网膜的内核层有弱阳性表达,在视网膜的外核层和光感受器外节段中未见有阳性表达,内界膜、外界膜和视神经中亦发现有NGB阳性表达。家兔视网膜NGB阳性表达的细胞类型主要有节细胞、双极细胞和光感受器细胞,其中节细胞的阳性表达定位于细胞质,胞核中未见表达。结论除外核层和光感受器外节段外,NGB在家兔视网膜其它各层中均有表达,提示NGB在维持视网膜氧代谢平衡中发挥着重要作用。     

ROS介导JNK信号通路的研究进展

c-JunN端激酶(JNK)通路是细胞感受外界环境变化的重要途径,与细胞增殖、分化、凋亡等生命过程息息相关.活性氧(ROS)具有很高的生物学活性,可作为第二信使参与到JNK信号通之中.ROS可通过ASK1、Src激酶、GSTπ、MLK3、RIP-TRAF2复合体、MKPs等信号蛋白活化JNK,也可以充当IKK/NF-κ B、ERK等信号通路与JNK信号通路交叉时话的桥梁.另外JNK有时可出现在ROS上游,可通过促进ROS产生或聚集而发挥生物学作用.本文将对近年来ROS介导JNK信号通路网络调控的研究进展作一综述.     

前列腺素E2及其受体在链脲佐菌素诱导的糖尿病大鼠视网膜病变中的作用及机制研究

摘要 目的：探究前列腺素E2(prostaglandin E2,PGE2)及其受体前列腺素E2受体（E-prostanoid2 receptor,EP2R）在链脲佐菌素诱导的糖尿病大鼠视网膜病变中的作用及机制。方法：将SD大鼠随机分为6组：对照组使用标准饲料喂养;其他组大鼠使用高脂高糖饲料喂养+腹膜内注射链脲佐菌素(30 mg/kg)建立糖尿病大鼠模型;PGE2组、Butaprost组、AH6809组大鼠分别给予玻璃体腔内注射5 mmol/L的PGE2、EP2R激动剂Butaprost或EP2R抑制剂AH6809,注射剂量为6 μL。DMSO组注射等剂量DMSO盐溶液。每周注射1次,共注射4周。通过苏木精伊红(HE)染色评价视网膜病变;免疫组化或蛋白质印迹分析视网膜组织中EP2R、胰岛素受体底物1 (IRS-1)、磷酸肌醇3激酶(PI3K)、p-PI3K、蛋白激酶B (Akt)、p-Akt、细胞间粘附分子-1 (ICAM-1)、内皮一氧化氮合酶(eNOS)、核因子κB p65 (NF-κB p65)和血管内皮生长因子(VEGF)的表达。此外,分别应用PGE2、Butaprost或AH6809处理高糖培养基(4.5 g/L葡萄糖)培养的视网膜微血管内皮细胞系(HRMEC),并检测各组细胞活力、细胞凋亡率和血管生成情况。结果：与正常视网膜组织相比,糖尿病大鼠视网膜组织中EP2R呈显著高表达(P<0.05)。与对照组和模型组相比,PGE2和Butaprost组的EP2R、IRS-1、p-PI3K、p-Akt、ICAM-1、eNOS、NF-κBp65和VEGF的表达水平显著升高,而AH6809组的上述蛋白的表达水平显著降低(P<0.05)。体外研究中,与对照组和模型组HRMEC相比,PGE2和Butaprost处理的HRMEC的活力和血管生成数量显著升高,而细胞凋亡率显著降低,AH6809处理则抑制了上述细胞改变(P<0.05)。结论：PGE2/EP2R可能通过促进IRS-1/PI3K/Akt信号通路介导的炎症反应、细胞凋亡和血管生成促进糖尿病视网膜病变的发生和发展。     

鸟类顶盖的解剖组织结构

鸟类具有两条独立的视系统投射到端脑 :1)顶盖传出 (tectofugal)系统 ,即视网膜 -顶盖 -丘脑圆核 -外纹状体 ,与哺乳动物的视网膜 -上丘 -丘脑 -纹区皮层系统同源 ;2 )丘脑传出 (thalam ofugal)系统 ,即视网膜 -丘脑背外侧核 -上纹状体 ,与哺乳动物的视网模 -膝状体 -纹状皮层系统同源。鸟类顶盖与哺乳动物上丘为同源器官 ,是鸟类视觉系统中的一个接替站 ,也是鸟类视觉中枢中最大和最明显的核团 ,在此处进行视觉信息的初步处理。破坏顶盖能够削弱鸽对视觉图象和强度的分辨能力 ,而破坏其他视核团 ,如背部丘脑或纹状体 ,却不影响这种能力。可…     

花背蟾蜍视网膜感光细胞分化的研究

经电镜及间接荧光抗体对花背蟾蜍视网膜感光细胞分化的研究,结果表明:视网膜感光细胞在视网膜中央首先分化,同一切片中位于中央的细胞分化程度最高,离它越远、分化越低。以中央细胞为准,胚胎发育到21期,感光细胞开始分化,22期外节出现,外节盘膜是直接以外凸折叠形成的。同时在视网膜杆锥层出现视蛋白特异性荧光,说明光敏蛋白的合成,感光细胞轴突与双极细胞建立突触联系。至此(22期末),感光细胞行使功能的结构基本形成。到25期,外节盘数达300多层,突触结构发育成熟。     

早期糖尿病大鼠晶状体和视网膜水通道蛋白4表达的研究

目的观察早期糖尿病大鼠晶状体、视网膜水通道蛋白4(aquaporin 4,AQP-4)表达的变化,探讨糖尿病大鼠眼组织水代谢改变的机制。方法 SD大鼠分为正常对照组和糖尿病组。制作糖尿病大鼠模型,于第4、8周取材,用免疫组化法和计算机图像分析系统半定量分析各组大鼠晶状体、视网膜AQP-4表达的变化。结果正常及糖尿病大鼠AQP-4在晶状体上皮均无表达。AQP-4在视网膜上有表达,正常大鼠主要表达于视网膜视杆视锥层、节细胞层和神经纤维层,糖尿病大鼠从内界膜延伸至视细胞层整个视网膜厚度均可见AQP-4阳性表达,特别是在神经节细胞层毛细血管内皮和神经纤维层阳性表达更明显。糖尿病大鼠视网膜组织AQP-4阳性表达标随周龄的延长而增强。结论糖尿病大鼠视网膜AQP-4的表达较正常组增强,提示水通道蛋白的表达增加是糖尿病早期发生视网膜水肿的机制之一。     

眼底光化学反应研究取得进展

眼底光化学反应研究取得进展人眼是大自然最敏感的光探测器,科学家们一直在探索眼睛将光线转变为图象的秘密。光子透过眼球晶状体投射到视网膜的视细胞上,使视细胞发生一系列化学反应,从而形成能量信号传入大脑。但直到最近,科学家对此光化学过程的最早期活动了解甚少...     

蜘蛛的视觉

很多蜘蛛有8只眼睛,在头部前端排成2列或者3列。根据排列位置,蜘蛛的眼睛可分为前中眼、前侧眼、后中眼和后侧眼。所有蜘蛛的眼睛都是单眼,表面是角膜,在角膜下皮层的内面是由特化的视觉细胞构成的视网膜。每一个视觉细胞有一个有核的细胞体,一端有视杆。根据核和视杆位置的不同,蜘蛛的单眼可以分为后视杆眼(前中眼)和前视杆眼(前、后侧眼和后中眼)。角膜后面是反光组织和色素细胞。