贯彻《实验动物管理条例》,推动我省实验动物工作

经国务院批准、国家科委颁布的《实验动物管理条例》(下简称《条例》),是我国第一部关于实验动物的法规。《条例》的发布与实施,是国家加强对实验动物的宏观管理、提高实验动物科学水平及实验动物质量的重要措施。为保证《条例》的实施,国务院有关部门还将在技术监督方面制定统一的检测标准,逐步推行实验动物合格认证制度。实验动物是生命科学研究的基础。在生命科学研究中许多研究均要借助动物实验以探索生物的进化、揭示遗传的奥秘、研究疾病的病因、阐明衰老的机理;在监测公害和环境污染,生产和检定药品、生物制品、食品、化妆品,以及国…     

HPV转基因动物研究进展

人乳头状瘤病毒(Human papillomavirus,HPV)可以引起人宫颈癌、肛门生殖器癌、尖锐湿疣等多种良、恶性肿瘤,严重威胁人类健康。然而,由于HPV严格的嗜人类上皮组织的特性,自然状态下不感染任何实验动物,给研究HPV的感染过程、致病机理,以及开发治疗HPV感染的药物等带来了困难,因此,研究HPV的动物模型显得尤为重要。     

长链非编码RNA Dleu2 对宫颈癌细胞增殖、迁移及侵袭的影响

目的:研究长链非编码RNA(long non-coding RNA,lnc RNA)Dleu2对宫颈癌细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响。方法:利用高通量Lnc RNA芯片技术检测10例宫颈癌组织及对应的癌旁组织,筛选得到一批表达水平具有显著差异的Lnc RNA,进一步针对可能具有生物学功能的Lnc RNA-Dleu2,利用q-PCR验证其在癌组织样本中的相对低表达。再通过在细胞内过表达Lnc RNA-Dleu2研究其对宫颈癌Hela和Caski细胞系增殖、迁移和侵袭的影响。结果:q-PCR结果验证了Lnc RNA芯片筛选的结果,即相较于癌旁组织和正常宫颈上皮细胞系,Lnc RNA-Dleu2在宫颈癌组织和细胞中均低表达。CCK8和克隆形成实验结果显示,过表达Lnc RNA-Dleu2能显著抑制Hela和Caski细胞增殖能力(P0.01);细胞划痕实验结果显示,过表达Lnc RNA-Dleu2能显著抑制Hela和Caski细胞增殖和迁移能力;Matrigel细胞侵袭实验结果显示,过表达Lnc RNA-Dleu2能显著抑制Hela和Caski细胞的侵袭能力(P0.01)。结论:Lnc RNA-Dleu2在宫颈癌中相对低表达,提高Dleu2表达水平能够抑制宫颈癌细胞系Hela和Caski的增殖、迁移和侵袭能力。     

中国实验动物学会代表团访问日本

2009年5月13—21日,中国实验动物学会组织国内实验动物专家及相关人员22人参加了在日本崎玉县大宫召开的“日本实验动物科学技术2009”学术年会,并参观考察了日本东京大学医科学研究所实验动物研究中心、日本国立感染症研究所实验动物管理中心等2家实验动物科研、教学单位。     

应用SYBR实时荧光定量Real—TimePCR法检测人宫颈癌MCPH1 mRNA表达

目的 应用SYBR实时荧光定量RT-PCR法检测MCPH1/BRIT1 mRNA的表达.方法 提取人宫颈癌总RNA,经逆转录PCR获得靶基因（MCPH1）及管家基因（GAPDH）的CDNA,采用SYBR Green 荧光实时定量法检测,以GAPDH基因作为内参,计算各组MCPH1 mRNA的相对表达量.结果 在31例宫颈癌标本中,MCPH1基因mRNA的表达,19例癌比正常低,1 例癌比正常高,其余标本无统计学意义;6例癌比癌旁低,1例癌比癌旁高,其余无统计学意义.结论 利用SYBR实时荧光定量RT-PCR检测出人宫颈癌中MCPH1基因mRNA的表达下调,为进一步研究MCPH1在宫颈癌中的作用及功能奠定了基础.     

丙型肝炎病毒感染实验动物模型的研究进展

丙型肝炎病毒（HCV）感染是导致人类慢性病毒性肝炎、肝硬化和肝癌的最主要病因之一。由于缺乏合适的HCV感染实验动物模型,使得针对HCV感染更为有效的疗法及疫苗的研发滞后。黑猩猩是HCV感染研究的最佳实验动物,但由于其来源有限、价格昂贵及临床症状等诸多问题,其应用受限,因此发展新的实验动物模型用于HCV感染相关的基础和应用研究迫在眉睫。近年来,以啮齿类等动物为替代模型取得了不少进展,应用转基因等实验技术使替代动物感染了HCV,并成功应用于多个学科领域的研究。本文分析了HCV自然感染的实验动物、自然感染和非自然感染的替代实验动物在致病机制研究、药物评价和疫苗研发应用中的优缺点及未来研究趋势。     

无创恶性肿瘤的荧光光谱诊断

在临床实验过程中观察到的癌患者卟啉代谢异常,通过动物实验研究了荷瘤小鼠的卟啉代谢规律.以卟啉为肿瘤的分子标志物,通过血清荧光测量建立起临床肿瘤诊断方法,研究了药物对诊断符合率的影响.通过血清荧光分析开展了临床癌诊断,其诊断符合率达90%.采用光纤技术和光学多道技术,研究了人皮肤及浅表组织的光学性质,建立起无创恶性肿癌的荧光光谱诊断的实验系统.     

人精浆,厌氧菌培养液在HSV—2诱导宫颈癌中的作用

本实验应用HSV-Z诱导小鼠宫颈癌的动物模型,发现人精浆或厌氧菌培养液只引起宫颈上皮轻度增生,二者混合(SB)不仅可致宫颈癌(11.5％),而且使HSV-2诱癌率从23.1％提高到50％,同时发现SB具有抑制机体细胞免疫功能的作用,抑制ConA刺激的淋巴细胞转化及NK细胞的活性。上述结果提示SB具有促癌作用,因而也讨论了SB促癌的可能机制。     

某些环境促癌因素的实验研究——Ⅰ乌桕与了哥王对HSV_2诱癌的促进作用

为了研究可疑促癌剂乌桕及了哥王提取物的作用,我们采用我室HSV_2诱发小白鼠宫颈癌的动物模型,进行体内促癌实验。这篇论文报道了实验结果。小白鼠分成6组,每组癌发率如下:HSV_2+0.9%;NaCl:13.0％;HSV_2+乌桕:40.0％;HSV_2+了哥王:36.4％;HSV_2+巴豆油:55.0％;乌桕+0.9％NaCl:7.7％;了哥王+0.9％NaCl:0。经过x~2检验指出差别在统计学上具显著性。因此我们提出:乌桕和了哥王提取物对小鼠宫颈癌有促进作用。与巴豆油提取物比较,其中巴豆油作用较强,乌桕作用次之,了哥王作用较弱。     

抗肿瘤重组麻疹病毒疫苗研制现状

肿瘤是人类死亡的首位病因,研制疫苗防治肿瘤是当前研究的热点领域之一。麻疹病毒的减毒株是一种新型疫苗载体,它可以表达多种肿瘤蛋白,这些肿瘤包括多形性胶质母细胞瘤、多发性骨髓瘤、前列腺癌、肾细胞癌、肝胚细胞瘤、卵巢癌、宫颈癌和乳腺癌等。     

CLDN6对宫颈癌细胞凋亡、凋亡相关蛋白及Akt信号通路活性的影响

目的研究紧密连接蛋白6(claudin 6,CLDN6)对宫颈癌细胞凋亡的影响。方法收集46例宫颈癌患者宫颈癌组织及对应的癌旁组织,应用免疫组织化学、Western blot和RT-PCR检测宫颈组织中CLDN6的表达水平;应用Annexin V/PI双染法流式细胞术检测过表达CLDN6对人宫颈癌细胞系Si Ha细胞凋亡的影响;Western blot检测过表达CLDN6对Si Ha细胞Bcl-xl、Bax、Bcl-2、Akt和p-Akt等蛋白水平的影响。结果宫颈癌组织中CLDN6 m RNA水平及蛋白水平均明显低于癌旁组织;过表达CLDN6使Si Ha细胞凋亡率和促凋亡蛋白Bax水平明显增加,抑凋亡蛋白Bcl-2和Bcl-xl水平和Akt磷酸化水平明显降低。结论 CLDN6可能通过抑制Akt信号通路活性促进宫颈癌细胞凋亡,宫颈癌的发生可能与CLDN6表达减少有关。     

子宫内膜异位症动物模型研究进展

为更好的把动物模型应用于子宫内膜异位症的病因、发病机制及治疗等方面的研究,本文将对子宫内膜异位症实验动物的选择、传统动物模型、新型特殊动物模型的构建方法及优缺点进行综述,以期为子宫内膜异位症疾病动物模型的研究提供参考。     

大骨节病病因研究

本文在前人研究的基础上结合厌氧细菌学的新进展对益都（青州市）及永寿患区进行大骨节病（ＫＢＤ）的病因研究提出“产生硫酸软骨素（ＣＨＳ）酶厌氧菌是引致ＫＢＤ的原始病因新假说,并通过实验室试验及病因阻断防治措施结果调查证实。实验结果：（１）从山东益都,陕西永寿两省患区水源中分离出３种产生ＣＨＳ酶厌氧菌。（２）以该菌拌粮饲胎乳鼠３０天后关节软骨出现类似人类ＫＢＤ早期病变,饲养期愈长病变愈重。（３）调查结果：采取阻断病因措施“改水”后,山东益都,吉林敦化,蛟河两省患区均无新病例发生。说明“假说”是确有实效的。     

原位核酸杂交检测宫颈癌中金黄色葡萄球菌L型DNA

应用病原微生物培养、改良革兰氏染色、免疫组化染色及原位核酸杂交等方法,对５０例宫颈癌和３３例慢性宫颈炎进行了研究。结果发现宫颈癌病原微生物培养细菌及其Ｌ型阳性感染率为５８％（２９／５０例）,以金黄色葡萄球菌（金葡菌）及其Ｌ型多见（１３／２９例）;宫颈癌和慢性宫颈炎组织切片革兰氏染色,细菌Ｌ型检出率分别为６６％和４５．５％;免疫组化染色（ＡＢＣ法）金葡菌Ｌ型抗原阳性率各为６８％和４８．５％。Ｌ型主要分布于癌间质、癌巢及宫颈上皮下结缔组织内。１２例宫颈癌金葡菌Ｌ型ＤＮＡ探针原位杂交显示,１０／１２例癌细胞核内有金葡菌Ｌ型ＤＮＡ杂交阳性信号,表明金葡菌Ｌ型ＤＮＡ已进入宫颈癌细胞内,可能会在基因水平上影响宫颈上皮恶变,提示宫颈癌发生与金葡菌Ｌ型感染关系密切,值得进一步研究。     

应用实时荧光定量RT-PCR检测宫颈癌及其外周血中VEGF表达的研究

目的:研究血管内皮生长因子在宫颈癌患者癌和癌旁组织及外周血循环细胞中的表达情况,分析其在肿瘤生长与转移中的作用。方法:采用基于TaqMan探针技术的实时荧光定量RT-PCR法检测了50例宫颈癌患者癌及癌旁组织和40例正常宫颈组织标本中VEGF mRNA的表达情况及其对应的外周血中的VEGF mRNA表达,分析其与临床病理参数之间的关系。结果:宫颈癌组织及癌旁组织中VEGF mRNA的表达水平无明显差异,但均与正常宫颈组织的表达水平差异有显著性;宫颈癌组织中VEGF mRNA的表达与肿瘤的组织学类型无明显的相关性;而与肿瘤的临床病理分期、病理分化程度、淋巴结转移、肿瘤直径、深肌层浸润间均呈显著的正相关。宫颈癌患者外周血中VEGF的表达明显高于对照组水平,与淋巴结是否转移密切相关,但与其他临床病理参数无关。结论:实时荧光定量RT-PCR可以敏感且特异性的检测出宫颈癌组织及外周血中VEGF mRNA的表达,且方法准确可靠,操作方便,在肿瘤的微转移的诊断监测方面有一定的应用价值。VEGF有可能成为治疗恶性肿瘤的一个潜在的分子靶点。     

陕西省南郑县猕猴资源调查

陕西省南郑县猕猴资源调查郑生武,左华,徐怀浩陕西省动物研究所西安７１００３２南郑县林业局猕猴（Ｍａｃａｃａｍｕｌａｔｔａ）广布于我国南方诸省,陕西南部的南郑、西乡、镇巴３县亦有其踪迹。南郑县资助陕西省动物研究所于１９９０年９月至１９９１年１月对该县境...     

紫草素通过下调HPV E6/E7蛋白表达抑制宫颈癌Caski细胞增殖

宫颈癌是发展中国家癌症死亡的主要癌症之一,也是最常见的女性生殖系统肿瘤,它与病毒相关且其主要是由人乳头瘤病毒(human papillomavirus, HPV)感染引起的癌症。紫草素在控制细胞凋亡、坏死性凋亡和免疫原性细胞死亡中的重要作用而被证明具有抗肿瘤活性,且与肿瘤细胞生长和转移密切相关,但是缺乏相应的机理和机制研究。因此本实验就通过用不同浓度紫草素处理宫颈癌细胞来研究紫草素的作用机理。结果表明,紫草素能够通过下调HPV E6/E7蛋白的表达,从而提高抑癌因子P53的活性,以促进宫颈癌细胞凋亡的发生。且与前人的研究相同的是,HPV E6/E7蛋白低表达不利于宫颈癌细胞的增殖和迁移。因此,这些结果充分证实了紫草素能有效地抑制宫颈癌细胞增殖和迁移,以及促进癌细胞凋亡的作用。本实验的研究结果探索了紫草素抑制肿瘤的机制,并为宫颈癌治疗的新方法提供了新的思路以及为后续机制的研究提供了参考和理论依据。     

GRPR在宫颈疾病中的表达及临床意义

目的:研究胃泌素释放肽受体(GRPR)在正常宫颈组织、宫颈上皮内瘤样病变(CIN)、宫颈癌中的表达,探讨GRPR在促癌发生和癌生长等方面的生物学功能。方法:采用免疫组化SP法检测GRPR在28例宫颈癌、51例宫颈上皮内瘤变和15例正常宫颈组织中的表达情况,其中以正常宫颈组织作为对照。结果:在正常宫颈和宫颈癌组织中,GRPR阳性表达率分别为20%和92.9%。GRPR在CINⅠ、CINⅡ、CINⅢ中阳性表达呈上升趋势,差别无统计学意义。宫颈癌组的不同临床分期、有无淋巴结转移组间比较,GRPR的阳性表达率均有显著性差异,并随病情严重程度的增加,阳性率增高,其表达强度呈显著正相关。结论:GRPR的过度表达与宫颈癌的发生、发展有关,是宫颈癌发生的早期事件,其检测可作为评估宫颈癌恶性程度、判断预后及指导治疗的重要参考指标。     

GRPR在宫颈疾病中的表达及临床意义

目的：研究胃泌素释放肽受体（GRPR）在正常宫颈组织、宫颈上皮内瘤样病变（CIN）、宫颈癌中的表达,探讨GRPR在促癌发生和癌生长等方面的生物学功能。方法：采用免疫组化SP法检测GRPR在28例宫颈癌、51例宫颈上皮内瘤变和15例正常宫颈组织中的表达情况,其中以正常宫颈组织作为对照。结果：在正常宫颈和宫颈癌组织中,GRPR阳性表达率分别为20%和92.9%。GRPR在CINⅠ、CINⅡ、CINⅢ中阳性表达呈上升趋势,差别无统计学意义。宫颈癌组的不同临床分期、有无淋巴结转移组间比较,GRPR的阳性表达率均有显著性差异,并随病情严重程度的增加,阳性率增高,其表达强度呈显著正相关。结论：GRPR的过度表达与宫颈癌的发生、发展有关,是宫颈癌发生的早期事件,其检测可作为评估宫颈癌恶性程度、判断预后及指导治疗的重要参考指标。     

piwi基因在宫颈癌组织中的表达

目的本研究旨在探讨piwill、piwil3和piwil4在宫颈癌组织与宫颈正常组织中的差异性表达,为进一步确定其在肿瘤发生发展中的作用奠定基础。方法根据已知的3条基因序列设计合成3对特异性引物,利用RTPCR检测9对宫颈癌组织及癌旁正常组织的piwill、piwil3和piwil4 mRNA水平,并以β-actin基因为标准进行对比。结果宫颈癌组织piwill、piwil3和piwil4的表达水平明显高于正常组织。结论piwill、piwil3和piwil4在宫颈癌中的表达提示其可能参与了宫颈癌的发生发展过程。