森永乳业、绿十字公司6月申请制造来自尿的M-CSF的认可

森永乳业、绿十字公司上月明确向厚生省提出两公司共同开发的来自尿的巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF,商品名为“P-100”)的制造承认申请。CSF作为干扰素的优胜后补者,正在进行临床开发。达到开发医药的最终阶段的制造承认。这在世界上还是第一次。估计今后商品化的粒状白细胞CSF、粒状巨噬细胞CSF、重组     

与癌症有关的一些进展

Genetics Institute(GI)公司(马萨诸塞州的剑桥)报道了用M-CSF(巨噬细胞集落刺激因子)产品进行广泛的动物研究的结果。研究小组发现,M-CSF可提高动物体内抗癌的白细胞的水平,并且在实验室研究     

从反面利用G-CSF的癌增殖作用

日本中外制药公司和麒麟啤洒-三共公司最近进行粒状白细胞集落刺激因子(G-CSF)的临床试验,探讨它作为增强抗癌剂效果的增强因子的作用。这是从反面利用分化增殖因子的癌增殖作用。以前,因为担心癌增殖作用,所以在日本分化生长因子等迟迟不能进入临床试验。这次试验也许能成为生物技术医药开发的典型实例。 G-CSF和粒状白细胞巨噬细胞集落刺激因子、白细胞介素1～8、上皮细胞生长因子等体内的分化生长因子不仅有诱引正常细胞分化、增殖的作用,而且还有使某种癌细胞自     

M-CSF上调cyclinD1/D3和CDK2/6的表达促进HeLa细胞增殖

非分泌型巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)的表达在肿瘤的发生发展过程中发挥重要作用,为探讨胞质M-CSF对细胞增殖的影响,采用基因重组技术构建胞内稳定表达M-CSF的HeLa细胞系,以空载体(pCMV/myc/cyto)转染HeLa细胞和未转染HeLa细胞作为对照,MTT法及反义寡核苷酸抑制实验分析M-CSF对细胞增殖的影响,并计算细胞倍增时间,RT-PCR观察胞内M-CSF对G1期细胞周期相关蛋白的影响．结果显示,与对照组比较,转染M-CSF的HeLa细胞倍增时间明显缩短、增殖能力显著增强,M-CSF的特异性反义寡核苷酸能抑制转染M-CSF的HeLa细胞的增殖,且抑制率随着反义寡核苷酸浓度的增高而增强,转染M-CSF 的HeLa细胞的cyclinD1/D3和CDK2/6 mRNA表达显著升高(P < 0.05)．提示：M-CSF可上调cyclinD1/D3和CDK2/6的mRNA表达,促进HeLa细胞的增殖．     

过表达外源M-CSF促进MCF7细胞增殖

为探讨过表达外源巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)对细胞增殖的影响,将重组载体 pCMV/cyto/myc-M-CSF转染MCF7细胞、G418筛选,RT-PCR、Western 印迹和免疫荧光鉴定M-CSF的mRNA表达、蛋白表达及定位,通过计算细胞倍增时间、MTT法及反义寡核苷酸抑制实验分析M-CSF对细胞增殖的影响. 结果表明,转染M-CSF的MCF7细胞过表达M-CSF-mRNA及蛋白,并且定位表达于细胞质;与转染空载体及未转染M-CSF组细胞比较,转染M-CSF的MCF7细胞倍增时间明显缩短、增殖能力显著增强,M-CSF的特异性反义寡核苷酸能抑制转染M-CSF的MCF7细胞的增殖,且抑制率随着反义寡核苷酸浓度的增高而增强;以上结果提示,胞质过表达M-CSF可促进MCF7细胞的增殖.     

重组M-CSF能预防动脉硬化

东京大学第三内科讲师山田信博等在给模型动物投用M-CST的历时三个月实验中证明重组巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)能防止动脉硬化.已知M-CSF能降低血中胆固醇.原来担心在动脉硬化处会蓄积活化巨噬细胞吞食的胆固醇,使病情恶化.但这次实验否定了上述情况,因此有可能作为动脉硬化的治疗药开发M-CSF.在东大第三内科前教授高久史麿的讲义中编写了详细内容. M-CSF刺激巨噬细胞,吞食血中胆固醇,同时作为HDL(高比重脂蛋白)也排出胆固     

有关巨噬细胞集落刺激因子的基本专利

美国专利与商标局批准了Cetus公司的两项基本专利,包括巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)和PEG M-CSF。1989年3月,Cetus公司开始在晚期癌症患者上对M-CSF进行临床试验。 M-CSF的美国专利号为4847201。该专利包括:编码各种具生物活性的鼠M-CSF和人M-CSF的基因;DNA序列、表达系统以及生产这些M-CSF的过程。Cetus公司在1985年8月首次宣布了M-CSF的克隆和表达,并且相信在全世界该公司的科学家首     

细胞素与艾滋病的体外实验结果引起疑问

近期研究体内四种造血生长因子及γ-干扰素对受HIV-1侵染的人体单核吞噬细胞的影响,它们给临床应用蛋白质治疗艾滋病带来一些问题。特别是洛杉矶加利福尼亚大学(UCLA)医学院的研究者发现当往HIV-侵染的培养细胞中加入粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)、巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)或白细胞介素-3(IL-3)时,     

协和发酵公司开始G-CSF衍生物的临床试验

协和发酵公司表示从6月开始进行粒细胞群落刺激因子(G-CSF)的衍生物(KW2228)的临床试验。现在是第一阶段。临床试验班长是东京大学第3内科教授高久史麿。 G-CSF是担任非特异性的活体防御反应的粒细胞(白血球的一种)的增殖分化因子。在粒细胞中特异地增殖噬菌、杀菌作用发挥好的中性白细胞。因此,可望作为因癌的化学疗法和放射疗法等引起的粒细胞减少等副作用的治疗药。如开发G-CSF顺利的话,也许能完全治愈     

B淋巴细胞刺激因子

B淋巴细胞刺激因子是新发现的属肿瘤坏死因子族的细胞因子。它是由单核细胞和巨噬细胞持续合成、分泌的,具有特异的激活B淋巴细胞,诱导B淋巴细胞增殖、分化为浆母细胞、分泌抗体,以及促进成熟B淋巴细胞在体内的存活等功能。在缺少B淋巴细胞刺激因子的情况下,可导致成熟B淋巴细胞缺乏。而异常过高表达B淋巴细胞刺激因子引起自身免疫性疾病,系统性红斑狼疮样症状。     

胞质M-CSF诱导HeLa细胞侵袭和迁移

为探讨巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)对人宫颈癌细胞(He La细胞)侵袭和迁移的影响及机制,采用胞质定位空载体p CMV/cyto/myc与重组载体p CMV/cyto/myc-M-CSF稳定转染He La细胞株,建立稳定高表达胞质M-CSF的细胞系(He La-M细胞).经Transwell实验观察胞质M-CSF对He La细胞侵袭和迁移能力的影响,逆转录-聚合酶链式反应及蛋白质印迹检测细胞Rho三磷酸鸟苷酶(Rho GTPases)及基质金属酶的表达,明胶酶谱法检测基质金属蛋白酶2的活性.结果显示,与转染空载体的He La细胞(He La-C细胞)和对照组He La细胞比较,胞质M-CSF的高表达可明显增强He La细胞在体外的侵袭和迁移能力,其机制与Rho GTPases的活化,以及MMP2表达上调及其活性增高密切相关.     

Cetus克隆菌落刺激因素-1

编码菌落刺激因素-1(CSF-1)的人体基因已由Cetus公司(埃默里维尔,加利福尼亚)首次克隆并得到表达。CSF-1与巨噬细胞上的特定受体相结合。它刺激骨髓中未分化的前体细胞生长和发育,如巨噬细胞和单核细胞。此外 ,CSF-1诱导血液中成熟单核细胞的增殖和血管外成熟巨噬细胞的增殖。它也促使干扰素、肿瘤坏死因素和粒细     

影响人骨髓CFU-C产率某些因素的分析

在CFU-C(粒系或单核-巨噬细胞集落生成单位)体外琼脂培养中,只有在CSF(细胞集落生成刺激因子)的作用下粒系祖细胞才能增殖、分化,生长成为细胞集落。CSF来源广泛,其刺激活力文献报告不一。此外,CFU-C产率波动较大,影响因素甚多。本文在相同的实验条件下,比较了不同来源的CSF刺激活力,并对影响CFU-C产率的某些因素进行了分析。     

白细胞介素18的生物学作用

白细胞介素 18(IL - 18)是新近发现的细胞因子 ,具有诱导 IFN-γ的产生 ,促进 T细胞的增殖 ,促进 Th1细胞的发育和增殖 ,增强 NK细胞及 Th1细胞的细胞毒性 ,增强粒细胞 -巨噬细胞集落刺激因子 (GM- CSF)的产生 ,抗肿瘤效应 ,抑制 Ig E的生成以及破骨细胞的形成等多种生物学活性和作用     

M-CSF与L929细胞培养上清诱导分化骨髓巨噬细胞的差异分析

[目的]通过比较常用的M-CSF与L929细胞培养上清两种诱导方式获得骨髓巨噬细胞(BMDM)的形态及基本生物学功能,为选择制备BMDM的方法提供实验依据。[方法]用两种方式诱导小鼠骨髓获取BMDM,然后分别利用Zeiss荧光显微镜和流式细胞仪比较BMDM的细胞形态及纯度;通过吞噬实验、杀菌实验以及液相芯片技术(liquid chip)比较两组BMDM的生物学功能;同时将上述结果与体内分化成熟的腹腔巨噬细胞相比较。[结果]两组诱导分化成熟的BMDM均呈现不规则形或梭形;BMDM的纯度分别为M-CSF组98.6%,L929上清组99.6%;腹腔细胞贴壁后巨噬细胞的纯度是98.8%;吞噬实验、杀菌实验两组之间及其与腹腔巨噬细胞相比无显著差异;炎症因子释放水平检测中3组细胞存在IL-6或TNF-α某些时间点释放水平差异。[结论]M-CS与L929上清诱导方式所获得BMDM的形态相似,纯度相近(98.6%比99.6%),吞噬细菌能力无显著统计学差异(21.31±5.83比26.10±6.11,t=-0.745,P0.05),杀菌能力无显著差异(杀菌30min:36.41%±4.21%比39.53%±6.75%;60min:44.35%±6.75%比45.27%±1.96%,两者均P0.05),但是炎症因子释放的某些时间点有差异(TNF-α的释放在LPS刺激后24 h M-CSF组高于L929组:549.92±412比271.47±432,t=-0.34,P0.05),应根据实验目的选择获取BMDM的诱导方式。     

克隆新的巨核细胞增殖因子

中外制药公司和京都府立医科大学合作纯化并克隆目前未报道过的新型巨核细胞(血小板的前驱细胞)增殖因子获得成功。现在正在探讨用基因操作大量生产,使动物个体增加血小板。增殖红细胞的促红细胞生成素、增殖白细胞的粒细胞刺激因子都作为大型医药。 该公司等从人胰癌的HPC-Y5株用小鼠骨髓细胞集落刺激形成法纯化巨核细胞增殖因子(MPF)获得成功。分子量为32000,在N配糖体键上结合一个糖链。目前报告了具巨核细胞增殖活性的白细胞介素6(IL6)和离体的巨核细胞增殖活性几乎相同。     

注射紫杉醇的小鼠骨髓细胞体外分化巨噬细胞增强

目的研究小鼠腹腔注射紫杉醇对体外骨髓细胞诱导分化巨噬细胞的影响。方法小鼠连续5d腹腔注射紫杉醇,无菌制备骨髓细胞,用含巨噬细胞集落刺激因子（M-CSF）的RPMI1640培养液培养骨髓细胞,通过流式细胞仪对其诱导分化的巨噬细胞表面分子、吞噬功能进行分析。结果紫杉醇明显降低小鼠骨髓细胞数量,但骨髓细胞体外诱导分化成巨噬细胞的数量明显增加;F4/80^＋巨噬细胞中CD80、CD14表面分子表达升高,而I-A^d表达降低;紫杉醇处理组诱导分化的巨噬细胞吞噬鸡红细胞的能力提高。结论结果提示紫杉醇可能具有调节巨噬细胞表面分子的表达和吞噬功能。     

两种有希望的新抗癌药

巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)和编号为3F8的新单克隆抗体可能都是有效的抗癌剂。这是来自Genetics Institute公司(在马萨诸塞州坎布里奇)和Memorial Sloan-Kettering癌症中心(在纽约州纽约)的研究人员最近在加利福尼亚旧金山召开的美国临床肿瘤学会会议上介绍的。3F8单克隆抗体是癌症中心的Nai-Kong Cheung研制的。初步研究表明,它和许多种癌细胞亲和力强,包括黑素瘤和成神经细胞瘤,有可能用于直接治疗。     

甲氨蝶呤诱导巨噬细胞M1极化促进骨肉瘤细胞凋亡的实验研究

目的:探讨甲氨蝶呤诱导巨噬细胞分化情况和分化后巨噬细胞对骨肉瘤细胞凋亡的影响。方法:采用甲氨蝶呤刺激小鼠单核巨噬细胞RAW264.7细胞24小时后,使用流式、免疫荧光等技术检测M1型巨噬细胞标志物CD86、诱导型一氧化氮合酶(Inducible nitric oxide synthase,i NOS)的表达量,并以脂多糖(Lipopolysaccharide, LPS)诱导巨噬细胞极化为阳性对照,未处理细胞为阴性对照,评估甲氨蝶呤的诱导效果。将经甲氨蝶呤刺激的巨噬细胞与骨肉瘤细胞K7共培养,使用流式技术检测骨肉瘤细胞K7凋亡程度。结果:一定剂量的甲氨蝶呤作用于小鼠单核巨噬细胞后,可以显著上调M1型巨噬细胞的标志物CD86、i NOS,上调程度与LPS组相当。与脂多糖诱导巨噬细胞极化类似,甲氨喋呤可以激活NF-κB。经甲氨蝶呤刺激后的巨噬细胞可以促进骨肉瘤细胞的凋亡。结论:甲氨蝶呤诱导向M1型分化的巨噬细胞可以促进骨肉瘤细胞的凋亡。     

IL-6/JAK2/STAT3信号通路在肿瘤中的作用

白细胞介素是由多种细胞产生并作用于多种细胞的一类细胞因子.白细胞介素家族成员包括白细胞介素-1(interleukin-1,IL-1)、白细胞介素-2(interleukin-2,IL-2)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、多集落刺激因子、合成抑制因子等,影响细胞的增殖、生存、分化、迁移、侵袭、...