血管内皮细胞生长因子研究进展

从不同侧面阐述了血管内皮细胞生长因子（VEGF）在新生血管形成中的作用.VEGF诱导新生血管形成,具有血管渗透性,是新生血管形成的主要调控者之一.VEGF mRNA不同剪接,形成5种VEGF变异体(isoform)即VEGF121-206.VEGF诱导新生血管的调控过程、拮抗VEGF成为大家竞相研究的领域.     

血管内皮细胞生长因子基因治疗闭塞性血管病研究进展

概述了近年来利用血管内皮细胞生长因子（ＶＥＧＦ）基因治疗闭塞性血管病的成果,初步探讨了ＶＥＧＦ基因的临床疗效及其应用的安全性。     

成纤维细胞生长因子在骨修复中的作用和应用

成纤维细胞生长因子 ( FGF)是一类与肝素有高亲和性的多聚肽 ,最初根据它能刺激成纤维细胞再生而命名。现已发现有 1 8个成员 ,即 FGF1- FGF18。目前研究得最多的是 FGF1和 FGF2 。根据它们等电点 ( PI)的不同 ,FGF1又称为酸性成纤维细胞生长因子 ( a FGF,PI为 5 .6) ,FGF2 又称为碱性成纤维细胞生长因子 ( b FGF,PI为 9.6) ,它们均通过自分泌和 /或旁分泌途径在组织修复中发挥重要作用。成纤维细胞生长因子受体 ( FGFR)属于免疫球蛋白超家族成员 ,目前已确定了 4种由独立基因编码的人 FGFR。它们是一种跨膜蛋白质 ,分为细…     

血清血管内皮细胞生长因子和碱性成纤维细胞生长因子水平变化对服药自杀青少年心理状况的影响

摘要 目的：研究服药自杀青少年血清血管内皮细胞生长因子（VEGF）和碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）变化,及其与患者心理状况的相关性。方法：纳入2018年1月到2020年12月四川大学华西医院收治的服药自杀青少年81例（研究组）,同时纳入81例健康志愿者作为对照（对照组）。检测两组研究对象血清VEGF和bFGF水平,并使用汉密顿抑郁量表（HAMD）、抑郁自评量表（SDS）和自杀意念自评量表（SlOSS）评估两组患者心理状态。结果：两组研究对象性别、年龄、身高以及体质指数（BMI）具有可比性（P>0.05）;研究组吸烟者比例（16/81）和有家族精神病史比例（13/81）均显著高于对照组（6/81和3/81）（P<0.05）。研究组服药自杀青少年血清VEGF（699.72±103.42）ng/mL和bFGF（348.31±65.13）ng/mL水平均高于与对照组健康志愿者[（620.31±85.32）ng/mL和（265.37±35.23）ng/mL]（P<0.05）,并且与是否吸烟或有无家族精神疾病史无关（P<0.05）。Pearson相关性分析结果显示：服药自杀青少年血清VEGF和BFGF均与HAMD和SDS评分无相关,与SIOSS评分均呈正相关（r=0.278和r=0.302,均P<0.05）。结论：服药自杀青少年血清VEGF和bFGF水平升高,与自杀意念自评量表得分有正相关。     

血管内皮细胞生长因子复性条件研究

利用大肠杆菌 BL2 1 (DE3)表达血管内皮细胞生长因子 (VEGF16 5)表达蛋白以包含体形式存在。为了获得有生物活性的蛋白质 ,我们对影响复性的参数 :氧化型、还原型谷胱甘肽比例 ,复性液的 p H值 ,复性时间 ,精氨酸浓度 ,血管内皮细胞生长因子起始浓度进行了较为系统的研究 ,初步获得了具有一定生物活性的 VEGF16 5二聚体蛋白。     

血管内皮细胞生长因子在非血管新生方面的重要功能

血管内皮细胞生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF或VEGF-A),又称为血管通透因子(vascular permeable factor,VPF)是一种具有多种功能的生物大分子,它是分泌性糖蛋白生长因子超家族中的一员.VEGF主要通过两个高亲和力的酪氨酸激酶受体来传递各种信号:VEGF受体1和2(VEGFR1,VEGFR2),从而引起细胞的多种生理反应.在胚胎时期,VEGF可以促进血管内皮细胞的增殖、迁移、管状形成和提高内皮细胞的存活率,对于血管新生和发育十分关键;而在成体时期,VEGF则主要参与正常血管结构的维持,并调节生理和病理性血管新生.近几年来的临床试验表明,使用多种阻断VEGF作用的抑制剂能有效促进肿瘤血管的退化和减小肿瘤的体积,但是同时在部分病人中也观察到了多方面的副作用.这些结果显示,VEGF也具有非血管新生方面的重要功能.因此,在研制基于拮抗VEGF作用的抗癌药物时,这些功能更不容忽视.研究表明,在成体的小肠、胰岛、甲状腺、肾脏和肝脏等器官组织中,VEGF都发挥着十分重要的作用,如果VEGF水平降低,这些器官组织的毛细血管网状结构将部分退化.VEGF还可以促进骨髓形成、组织修复与再生、促进卵巢囊泡成熟,并且参与血栓、炎症反应和缺氧缺血的病理过程.本文主要对VEGF在血管新生之外的功能及其分子机制进行了简要探讨.     

血管内皮细胞生长因子及临床应用策略

血管内皮细胞生长因子（VEGF）是一种特异作用于血管内皮细胞的多功能细胞因子,它能引起血管通透性增加,引起细胞外基质成分改变,诱导血管形成,在炎症,创伤愈合,心脏缺血,动脉粥亲硬化,糖尿病性视网膜病变及肿瘤形成等与血管生成和病变有关的诸多病理过程中起重要作用。     

碱性成纤维细胞生长因子对脑微血管内皮细胞血管新生基因谱和环加氧酶-2表达的影响

本文研究了碱性成纤维细胞生长因子（basic fibroblast growth factor, bFGF）对小鼠脑微血管内皮细胞（microvascular endothelial cell, MVEC）株bEnd．3中血管新生相关基因表达谱的改变,并重点从mRNA、蛋白质和细胞水平检测bFGF对血管新生旁观分子环加氧酶-2（cyclooxygenase-2,COX-2）表达的影响。用特异性小鼠血管新生基因芯片高通量检测bEnd．3细胞基因谱表达的改变,分析促血管新生基因及抑制血管新生的基因表达谱的变化;用RT—PCR、Western blot、免疫细胞化学等方法分别从mRNA、蛋白质和细胞水平检测COX-2表达变化及细胞内的定位。结果发现用10ng／ml的bFGF刺激bEnd．3细胞2h后多种促血管新生基因表达明显上调,如Adamtsl、MMP-9、Ang-1、PDGFB、G—CSF、FGFl6、IGF-1等分别上调3、8、120、5．2、4．5、1．7、2．7倍。与此同时,多种抑制血管新生的基因表达相应下调,如TSP-3、TIMP-2、TGFβ1等表达分别下调3．4、1．5和3．5倍。RT-PCR和Western blot的结果证实,bFGF可以上调COX-2mRNA的表达和蛋白质的合成。免疫组化的结果表明,COX-2主要分布在胞浆。以上结果提示：bFGF具有上调促血管新生基因表达,下调抑制血管新生基因表达的作用,两者协同作用,促进血管新生。同时bFGF还可以明显促进血管新生旁观分子COX-2mRNA的表达和蛋白质的合成。本文讨论了bFGF引起MVEC内COX-2表达上调的意义。     

血管内皮细胞生长因子与心血管缺血性疾病的治疗

血管内皮细胞生长因子是一种高特异性的促血管内皮细胞生长的因子。由于ＶＥＧＦ在循环中的半衰期短暂,它的基因治将是研究方向。     

Enhancement of bone formation by genetically-engineered bone marrow stromal cells expressing BMP-2, VEGF and angiopoietin-1

To explore the potential of combined delivery of osteogenic and angiogenic factors to bone marrow stromal cells (BMSCs) for repair of critical-size bone defects, we followed the formation of bone and vessels in tissue-engineered constructs in nude mice and rabbit bone defects upon introducing different combinations of BMP-2, vascular endothelial growth factor (VEGF) and angiopoietin-1 (Ang-1) to BMSCs with adenoviral vectors. Better osteogenesis and angiogenesis were found in co-delivery group of BMP-2, VEGF and angiopoietin-1 than any other combination of these factors in both animal models, indicating combined gene delivery of angiopoietin-1 and VEGF165 into a tissue-engineered construct produces an additive effect on BMP-2-induced osteogenesis.     

Construction of recombinant adenovirus vector containing hBMP2 and hVEGF165 genes and its expression in rabbit Bone marrow mesenchymal stem cells

To construct an adenovirus vector co-expressing human bone morphogenetic protein (hBMP2) and human vascular endothelial growth factor (hVEGF165) as well as green fluorescence protein (GFP) as a marker, with which the intracellular expression of the inserted genes could be identified in Bone marrow mesenchymal stem cells (BM-MSCs). BMP2 and VEGF165 genes were PCR amplified from a cDNA library and inserted to the polyclonal site of adenovirus shuttle plasmid pAd-MCMV-GFP. The virus solution (Ad-BMP2-VEGF165) was generated by co-transfecting HEK293 cells with the constructed recombinant shuttle plasmid pAd-MCMV-BMP2-VEGF165 and adenovirus helper plasmid pBHGloxΔ (delta) E1, 3Cre. The virus solution was further purified and virus titer was determined accordingly. The expression of the target genes was subsequently detected and quantified in rabbit BM-MSCs by using real time PCR, ELISA and Western blotting. The recombinant adenovirus vector containing BMP2 and VEGF165 (Ad-BMP2-VEGF165) was successfully constructed, which was confirmed by Sanger sequencing, colony PCR, as well as visually detection of GFP, and the titer of the adenovirus was 1 × 10¹⁰ PFU/mL, and the proteins level of BMP2 and VEGF165 secreted in the supernatant are significantly higher than the control. Recombinant adenovirus vector containing hBMP2 and hVEGF165 genes was successfully constructed. The transfection rate of BM-MSCs by the adenovirus was high (95% at 100 MOI) and the BMP2 and VEGF165 genes was highly expressed in the cells. The present study provides a method to efficiently express the target genes in BM-MSCs and an vector for further research of bone defect repair using dual genes of BMP2 and VEGF165.     

骨形态发生蛋白诱导骨髓间充质干细胞成骨分化的研究进展

目前从骨髓中成功分离、鉴定BMSCs的方法较为成熟。新发现一些物质能诱导BMSCs向成骨细胞分化因子,其中对BMP研究较多。其机制可能是通过结合Ⅰ、Ⅱ型BMP受体后激活Smad信号通路诱导成骨。其诱导方法主要包括直接应用天然BMP或者将BMP及其协同基因转入BMSCs,通过靶细胞的持续表达BMP促进新骨形成。本文将近10年BMP诱导BMSCs向成骨分化的研究现状及发展趋势做一综述。     

视网膜微血管内皮细胞在糖尿病视网膜病变中的研究现状

糖尿病视网膜疾病是导致成年人失明的主要因素,是糖尿病的一种令人恐惧的并发症,高血糖被认为是促进其发展的主要原因。高血糖不断地破坏视网膜的微血管系统最终导致视网膜的许多代谢,结构和功能的紊乱。视网膜微血管内皮细胞在微脉管系统中形成树枝状供应视网膜神经,这些内皮细胞的解剖和生理符合重要视觉保护的营养需求[1]。一方面,内皮组织务必确保氧的供应和代谢活跃的视网膜营养供应;另一方面,内皮细胞有助于血-视网膜屏障将循环产生的毒素分子,白细胞促炎性物质排出体外来保护视网膜,这种特性也可能会引起疾病,比如:视网膜血管的渗漏和新生血管,炎性物质转移,因此,视网膜内皮细胞在视网膜缺血性病变,血管炎中起到重要作用,包括糖尿病视网膜病变和视网膜炎症或感染尤其是后葡萄膜炎。使用基因表达和蛋白质组学分析等研究方法,有助于了解这些疾病的发病机制。为了进一步开展对糖尿病视网膜疾病的研究,有必要就目前有关糖尿病视网膜病变患者微血管内皮细胞的研究进展予以综述,旨在为糖尿病视网膜病变的深入研究提供参考依据。     

Immunolocalization of vascular endothelial growth factor on intramuscular ectopic osteoinduction by bone morphogenetic protein-2

When recombinant human bone morphogenetic protein-2 (rhBMP-2) is implanted in soft tissues, bony tissue is induced during the course of endochondral ossification. The relationship between endochondral ossification and vascularization is important in bone formation, and vascular endothelial growth factor (VEGF) is considered to play an important role in this process. In this study, the immunohistological localization of VEGF was investigated in rhBMP-2-induced ectopic endochondral ossification in the calf muscle of rats. In addition, the characteristics of anti-VEGF antibody-reactive cells were histologically investigated using electron microscopy to examine the cause of endochondral ossification induced by recombinant human bone morphogenetic protein-2. The role of VEGF in rhBMP-2-induced osteoinduction and vascular induction was studied by observing the relationship between the localizations of anti-VEGF antibody-reactive cells and vascularization. During the process of rhBMP-2-induced ectopic endochondral ossification, fibroblast-like cells, which were located at the margin of the implant and reactive to BMP-2 at 5 days, were positive for VEGF immunostaining. Hypertrophic chondrocytes appeared 9 days and osteoblasts appeared 14 to 21 days after implantation, and all these cells were reactive with anti-VEGF antibody. Bony trabeculae subsequently appeared in the muscle, and new blood vessels were formed alongside the trabeculae. When VEGF was added to rhBMP, more new blood vessels and bone were formed in the induced bone. These findings suggested that rhBMP-2 induced the differentiation of undifferentiated mesenchymal cells to chondrocytes and osteoblasts, and these differentiated cells expressed VEGF, creating an advantageous environment for vascularization in bony tissue.     

肾癌患者血清VEGF的水平及其与临床病理分期的关系

目的:探讨肾癌患者血清血管内皮生长因子(VEGF)的水平及其与临床病理分期的关系。方法:选择2013年1月至2015年1月在我院行手术治疗的肾癌患者56例为观察组,选择同期在我院进行健康体检的正常成人50例作为对照,所有患者的诊断均经病理切片证实,对所有研究对象,采集其清晨空腹静脉血,用酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清中的VEGF和VEGF受体-1(VEGFR-1)。结果:观察组血清中VEGF和VEGFR-1的浓度分别为(132.75±68.31)ng/mL和(33.76±15.39)ng/mL,均显著高于对照组,差异有统计学差异(均P0.05);不同分期患者血清中VEGF和VEGFR-1浓度差异有统计学意义(均P0.05),病理分期增加,VEGF与VEGFR-1的浓度增加,VEGF与VEGFR-1呈正相关(r=0.625,P0.05)。结论:血清VEGF水平可用于诊断RCC,且对于预判RCC的病例分期具有重要价值。     

Maspin在卵巢癌中作用机制的体外研究

目的:检测卵巢癌细胞中Maspin对细胞增殖能力、VEGF和乙酰肝素酶Heparanase(HPA)表达的影响。方法:构建Maspin真核表达质粒,体外转染卵巢癌SKOV3细胞,磺基罗丹明B法((sulforhodamine B,SRB)检测转染后细胞增殖能力变化,细胞免疫化学及半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测VEGF和HPA的表达。结果:成功构建Maspin真核表达质粒并转染于卵巢癌细胞SKOV3后,证实转染目的基因的SKOV3-Maspin细胞中Maspin表达明显增强;转染Maspin cDNA的SKOV3细胞的体外增殖能力明显弱于转染空载体组和未转染组,而后两者之间差异无显著性;转染Maspin cDNA的SKOV3细胞中VEGF的表达明显弱于转染空载体组和未转染组,而后两者之间差异无显著性;但是HPA的表达无明显改变。结论:Maspin可能通过下调VEGF的表达抑制卵巢癌血管生成。HPA表达与卵巢癌的恶性生物学行为密切相关,但与Maspin无明显相关性。     

虫草素对慢性肾脏病大鼠血管内皮损伤的保护作用及其机制

摘要 目的：探讨虫草素对慢性肾脏病(chronic kidney disease,CKD)大鼠血管内皮损伤的保护作用及其机制。方法：慢性肾脏病大鼠(n=48)随机平分为四组-模型组、虫草素高剂量组、虫草素中剂量组、虫草素低剂量组,虫草素高剂量组、虫草素中剂量组、虫草素低剂量组,分别给予虫草素160 mg/kg、80 mg/kg、40 mg/kg,模型组灌胃给予等量生理盐水,每天1次,连续给药治疗2周。结果：虫草素高剂量组、虫草素中剂量组、虫草素低剂量组治疗1周、治疗2周的24 h尿量、血清尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)与肌酐(serum creatinine,Scr)水平都低于模型组(P<0.05),体重都高于模型组(P<0.05),不同剂量组别之间对比差异也有统计学意义(P<0.05)。虫草素高剂量组、虫草素中剂量组、虫草素低剂量组治疗2周的结缔组织生长因子(Connective tissue growth factor,CTGF)、血管内皮生长因子(Vascular endothelial growth factor,VEGF)蛋白相对表达水平高于模型组(P<0.05),肾小球硬化指数、肾小管损伤评分都低于模型组(P<0.05),不同剂量组别之间对比差异也有统计学意义(P<0.05)。结论：虫草素在慢性肾脏病大鼠的应用能发挥血管内皮损伤保护作用,促进改善大鼠的肾功能,提高大鼠的体重,且具有剂量依赖性。     

VEGF-C和VEGFR-3在胃癌组织中的表达及临床意义

目的：探讨胃癌患者血管内皮生长因子C（vascular endothelial growth factor-C,VEGF-C及血管内皮生长因子受体-3（vascular endothelial growth factor receptor-3,VEGFR-3）在胃癌组织中的表达,从而确定胃癌预后的分子标志物。方法：搜集整理临床资料,采用Real-time PCR及ELISA法检测43例胃癌组织VEGF-C和VEGFR-3的表达。结果：43例胃癌组织中均有不同程度的VEGF-C和VEGFR-3的表达,Real-time PCR结果显示胃癌组织淋巴结转移组和非转移组VEGF-C和VEGFR-3的表达分别为0.07±0.01和0.12±0.01,0.03±0.01和0.06±0.02,与正常对照组相比,差异有显著性（p〈0.05）。ELISA检测显示,与正常胃组织中VEGF-C和VEGFR-3的蛋白表达相比,胃癌无淋巴结转移组及胃癌并发淋巴结转移组中VEGF-C和VEGFR-3均明显增加。结论：VEGF-C和VEGFR-3的表达与胃癌淋巴结转移密切相关,提示胃癌标本VEGF-C和VEGFR-3的检测可作为胃癌预后的分子标志物。     

VEGF-C 和VEGFR-3 在胃癌组织中的表达及临床意义

目的:探讨胃癌患者血管内皮生长因子C(vascular endothelial growth factor-C,VEGF-C及血管内皮生长因子受体-3(vascular endothelial growth factor receptor-3,VEGFR-3)在胃癌组织中的表达,从而确定胃癌预后的分子标志物。方法:搜集整理临床资料,采用Real-time PCR及ELISA法检测43例胃癌组织VEGF-C和VEGFR-3的表达。结果:43例胃癌组织中均有不同程度的VEGF-C和VEGFR-3的表达,Real-time PCR结果显示胃癌组织淋巴结转移组和非转移组VEGF-C和VEGFR-3的表达分别为0.07±0.01和0.12±0.01,0.03±0.01和0.06±0.02,与正常对照组相比,差异有显著性(p<0.05)。ELISA检测显示,与正常胃组织中VEGF-C和VEGFR-3的蛋白表达相比,胃癌无淋巴结转移组及胃癌并发淋巴结转移组中VEGF-C和VEGFR-3均明显增加。结论:VEGF-C和VEGFR-3的表达与胃癌淋巴结转移密切相关,提示胃癌标本VEGF-C和VEGFR-3的检测可作为胃癌预后的分子标志物。