超声波在植物切片整体染色中的应用

一、引言动、植物切片整体染色法,是从事切片工作者长期待解决,并为许多从事切片的技术人员尝试的一个方法。但在植物切片两色整染中,效果往往不能令人满意。这个方法因为操作简单,时间经济,可节省人力、物力、     

真空、高温、振荡在动、植物切片整体染色中的应用

引言动、植物切片整体染色法,是从事切片工作者长期亟待解决,并为许多从事这方面工作的技术人员尝试的一个方法。本方法因操作简单,时间经济,省人省力,尤其适于切片大批量生产。在动、植物切片整染方面有Golgi(1893)、Cajal(1903)等整块神经组织镀银法,Shotka(1947)苦味酸、无色碱性复红两色一步法,     

爱氏苏木精整体染色制片复染法的一些改进

爱氏苏木精整体染色制片复染法的一些改进采用爱氏苏木精（Ｅｈｒｌｉｃｈ）对植物花药、子房、根尖等材料进行整体染色制片,其最大优点在于材料先染色,后包埋,切片后只需脱蜡即可封片。这样,可在较短时间内获得效果较好、数量较多的切片。但这种制片方法在有些植物中...     

用子房整体透明法和微分干涉差显微镜研究水稻的胚胎发育

水稻的胚囊处于胚珠组织的包围之中,外面还有子房壁,以往观察子房都是用切片的方法.切片制作的过程相当繁杂,并且需要掌握熟练的染色技术。根据连续切片来建立立体概念也需要经验。为了寻找观察胚囊结构的简便方法,人们曾提出过胚珠水解压片法、整体解剖法、酶分离法等,但也需要精细的手工操作,并且不能保证每个子房或胚珠都可获得其中的胚囊。整体透明是个比较好的方法,Herr采用胚珠整体透明法在相差和干涉显微镜下观察一些植物的大孢子母细胞、大孢子和早期的胚囊;Young用此法鉴定buffelgrass的无融合生殖过程     

植物冰冻切片条件的优化及其与石蜡切片在组织化学应用中的比较

冰冻切片是植物组织学研究中一项重要的实验技术,冷冻温度和冷冻时间是决定切片质量的关键因素。通过比较15种冰冻切片条件,得出植物组织直接冰冻切片较适宜的冷箱温度、冷台温度和冷冻时间。同时,通过对5种植物的不同组织进行组织化学染色,比较了新鲜材料直接冰冻切片与常规石蜡切片在不同化学成分鉴定上的异同及各自的适用范围。结果表明,对于多糖、蛋白质和角质,两种切片方法的鉴定结果比较一致,但对于脂肪只能采用冰冻切片技术。研究结果对植物组织学实验和研究方法的改进具有一定的参考价值。     

植物胚胎学研究中石蜡切片的几种整体染色法

石蜡切片法应用于生物学的研究历史已久,至今仍为细胞学、组织学、胚胎学及组织化学等方面广泛应用的研究方法之一。我们在观察小麦和玉米的受精及胚胎发育过程中摸索出制作石蜡切片的三种整体染色方法,使常规石蜡切片法得到了简化并且效果良好。     

线粒体的两种染色方法比较

取材与制作：制做光镜下线粒体的显微标本,材料可来自动、植物的不同组织,但相同的材料用不同的方法染色其效果大不相同。笔者在制作该切片过程中,取材于小鼠空肠段和肾脏器官,用Ｒｅｇａｕｄ液固定,常规石腊包埋并切片３微米。将两种不同材料的切片分别用两种方法染...     

利用冰冻切片机快速制作木质茎显微切片技术

植物的木质茎,因次生维管组织含量多,细胞壁木质化程度高,质地较硬,徒手切片和石蜡切片均难以获得满意的切片效果。冰冻切片机可对一定硬度的组织进行切片,是制件植物木质茎的制片的有效工具之一。【方法】利用冰冻切片机可在不经化学固定,对一些质地均匀,含水量较高的木质茎直接切片;而对木质坚硬、含水量较少的茎,经过FAA等固定剂固定后,OCT包埋,(-30)～(-25)℃切片,用0.1%甲苯胺蓝染色液染色。【结果】木质茎的冰冻切片结构完整,图像清晰、色彩丰富。【结论】冰冻切片机可用于木质茎的显微切片制作,再结合甲苯胺蓝染色,具有简便、高效、易操作的优点。     

植物胚胎学研究中石蜡切片的几种整体染色法

石蜡切片法应用于生物学的研究历史已 久,至今仍为细胞学、组织学、胚胎学及组织化 学等方面广泛应用的研究方法之一。我们在观 察小麦和玉米的受精及胚胎发育过程中摸索出 制作石蜡切片的三种整体染色方法,使常规石 蜡切片法得到了简化并且效果良好。     

植物树脂半薄切片染色方法的改进

以双子叶植物棉花的幼根、幼茎、叶、胚珠和单子叶植物玉米茎为实验材料,制作树脂半薄切片,对样品染色方法等进行了改进,将蕃红-固绿染色、苏木精-伊红染色、氯化铁-苏木精染色方法系统应用于植物树脂半薄切片制备中,获得了结构完整、染色清晰的棉花各器官和玉米茎半薄切片,建立了一套适合于植物树脂半薄切片制作的染色方法。     

双面刀片压切法制作临时装片

长期以来,中学植物实验中,用显微镜观察植物叶子结构时,总是采用徒手切片法制作临时装片。去年,我们采用了比较成功的双面刀片压切法,代替徒手切片法,用显微镜观察植物结构各部分时,如蚕豆叶片横切、黄豆芽下胚轴横切等,极为清晰,效果良好。     

利用光盘制作植物临时切片的制取装置

针对普通徒手切片法存在的安全性低、操作难度高等不足,利用光盘等简单材料制作植物临时切片的制取装置,大大提高了实验的安全性,操作简单,切片效果良好,适合在中学生物学教学中推广。     

观察植物胚胎发育的简便方法

观察植物胚胎发育过程通常采用切片法、胚珠水解压片法、整体解剖法、酶分离法和整体透明等几种方法,其中切片法制作过程复杂;用胚珠水解压片法时,胚珠的其它细胞会覆盖在胚囊上难以观察;整体解剖法的操作要求精细难度较大;酶分离法不能保证所需要的胚珠或子房通过酶解得到其中的胚囊;相比之下整体透明是比较好的方法,但在相差和一般干涉显微镜下只能观察早期的胚囊,如用染色处理,由于子房和胚珠大小不均一,染色时间难以掌握,而且胚囊以外的组织也会着色,影响胚囊内部结构的清晰度,在此我们介绍一种用整体透明直接在微分干涉差显微镜下观察     

禾本科植物超薄切片应注意的问题

在透射电镜的生物样品制备方法中,超薄切片技术是最基本、最常用的制备技术,一般来说,植物样品的超薄切片比动物样品难度要大,而在植物材料中,禾本科植物材料的制样又特别困难,因为禾本科植物(如水稻、小麦、玉米、高梁、甘蔗等)质地坚硬,细胞壁角质化,并且充满硅质,它们对固定液的渗透具有不可忽视的障碍作用,按常规的生物样品制备方法常常失败或效果不佳。样品制备的好坏,很大程度上依赖于操作者的经验和操作技术,作者近几年来对禾本科植物叶片做了一些超薄切片工作,体会到要获得较理想的超薄切片,必须十分认真地对待制样过程中的每一操作步骤,任何环     

冰冻徒手切片

在用显微镜观察植物器官的解剖结构时 ,徒手切片的方法是制作玻片标本常用的最简便的方法。在对幼小植物根、海带带片、蘑菇菌褶、木耳子实体、苔藓植物、又薄又嫩的叶片等难于直接拿在手中的标本进行徒手切片时 ,通常利用萝卜、马铃薯块茎或泡沫塑料等作夹持物 ,将要切的材料夹在其中 ,进行切片。由于这些材料幼嫩软弱 ,有的容易夹坏 ,较难切薄。通过实验发现利用冰冻方法进行徒手切片效果很好。方法是 :将较厚的叶片、木耳子实体、蘑菇、海带带片、较粗的幼根等切成可以手拿方便的条块 ;将较细小的材料如苔藓植物捆成束 ;将较薄的几个叶片…     

植物叶片解剖结构的量化及其在C4植物高粱中的应用北大核心CSCD

测量切片内所有细胞或细胞器的总周长,并乘以切片厚度和校正因子是一种量化植物叶片解剖结构的常用方法。前人在使用该方法时因忽视了细胞大小、切片厚度等影响估算精确度的因素,从而导致计数样本偏少并产生较大误差。通过分析该方法误差产生的原因及其与精确度的关系,明确了该方法在实际应用中不同精确度所要求对应的切片数量。在此基础上,将该方法用于C4植物高粱(Sorghum bicolor)叶片结构的量化,提出叶肉细胞与维管束鞘细胞接触面积(CABM)等参数,发展并完善了植物叶片解剖结构的量化方法。     

植物叶片解剖结构的量化及其在C4植物高粱中的应用

测量切片内所有细胞或细胞器的总周长,并乘以切片厚度和校正因子是一种量化植物叶片解剖结构的常用方法。前人在使用该方法时因忽视了细胞大小、切片厚度等影响估算精确度的因素,从而导致计数样本偏少并产生较大误差。通过分析该方法误差产生的原因及其与精确度的关系,明确了该方法在实际应用中不同精确度所要求对应的切片数量。在此基础上,将该方法用于C4植物高粱(Sorghum bicolor)叶片结构的量化,提出叶肉细胞与维管束鞘细胞接触面积(CABM)等参数,发展并完善了植物叶片解剖结构的量化方法。     

盐生肉质草本植物海马齿叶片石蜡切片简易方法

海马齿是海边盐生肉质草本植物,由于叶片的肉质化,传统石蜡切片制作路线不能制作出结构完整,效果较好的切片.本实验以传统的石蜡切片方法为基础,在固定方法选择,脱水时间控制,包埋温度,染色等方面做了适合海马齿叶片特点的改良,固定方法采用戊二醛固定液固定24 h,并洗脱;脱水每级梯度时间为1 h,包埋温度在100℃,染色方法采用固绿染色法.结果表明:采用这种改良的方法可以制作出染色清晰,组织结构完整的海马齿叶片切片.这对其它肉质化植物的石蜡切片制作有着借鉴作用.     

一种用于DAPI染色的方法--Steedman's wax包埋切片法

以植物的胚珠和子房为实验材料,介绍一种用Steedman's wax 包埋对组织切片中的细胞核进行DAPI染色的方法.Steedman's wax 作为一种低熔点多酯蜡,具有与石蜡相似的性质,切片方法同常规石蜡切片,适合于切成厚度大于5 μm的连续切片.Steedman's wax包埋的切片能成功地进行DAPI染色.与用压片法和Technovit 7100或GMA包埋切片法进行的DAPI染色相比,用Steedman's wax 包埋切片法进行的DAPI染色具有廉价、操作简便、可进行连续切片、图象清晰等优点,特别在植物细胞程序化死亡(PCD)的研究中及细胞核DNA含量测定方面,有着较大的应用价值和潜能.     

高度木质化材料的冰冻切片技术

高度木质化植物材料的切片难度很大,应用常规切片方法不容易取得高质量的图版。本文介绍的冰冻切片方法,不需要进行长时间的软化处理、以及繁琐的脱水、包埋等过程,切片还进行不同的染色或组织化学测定,是一种快速、简捷和有效的制片方法。 其关键步骤是选好甘油浓度, 冰冻温度和展片步骤。