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克隆差异表达基因的新策略 总被引:4,自引:0,他引:4
基因表达的变化有两种,即新出现的基因表达与表达量差异的基因表达.表达量差异的基因克隆技术主要有mRNA差异展示,此技术是目前筛选差异表达基因最有效的方法之一,但主要存在假阳性率高的不足,针对此缺点,近几年提出了新的策略与方法,如差异消减展示、基于PCR和减法杂交基础上的差异表达基因克隆技术,这些技术具有显著优势. 相似文献
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经华中农业大学周国岭先生对国内外64篇有关基因克隆技术的论文概括和分析,当前基因克隆技术主要有5个类别,即体位克隆或状态克隆、转位或转DNA标记法、同系位候选基因法、快捷顺序标记法、差接式快捷基因克隆法等。 相似文献
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抑制性扣除杂交技术(SSH)及其在基因克隆上的研究进展 总被引:15,自引:0,他引:15
抑制性扣除杂交技术是一种基因克隆的新方法,它对研究细胞生殖、发育、分化、癌变、衰老及程序化死亡等生命过程有关基因的差异表达以及相关基因的分子克隆提供了有力的工具,本文简要介绍抑制性扣除杂交技术的主要原理,基本过程、优越性、主要缺陷及目前最新的研究进展 相似文献
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近年来,由于分子生物学和遗传学向发育生物学和生理学渗透,生长发育的遗传控制成为研究的热点,到目前为止,人们主要借助蛋白质的分离纯化分离了一些发育基因,但绝大部分发育基因的产物是未知的,其分离工作相当困难,近年来发展起来的基因克隆技术使未知产物的发育基因克隆取得了突破性的进展,本文对这些技术进行了简单的介绍和评述。 相似文献
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近年来,由于分子生物学和遗传学向发育生物学和生理学渗透,生长发育的遗传控制成为研究的热点。到目前为止,人们主要借助蛋白质的分离纯化分离了一些发育基因,但绝大部分发育基因的产物是未知的,其分离工作相当困难。近年来发展起来的基因克隆技术使未知产物的发育基因克隆取得了突破性的进展,本文对这些技术进行了简单的介绍和评述。 相似文献
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本文对幽门螺杆菌遗传物质基础的结构和特点进行了讨论,分析了其遗传物质交换的机制,并介绍了基因克隆技术在该菌中的研究成果。HP不仅染色体DNA的大小结构表现出差异性,而且其限制修饰酶也有明显多样性,自然转化是其遗传物质交换的主要方式。该菌多个与致病有关的基因已成功克隆,基因克隆技术是研究该菌有力工具。 相似文献
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林木基因克隆研究进展 总被引:1,自引:0,他引:1
林木种质资源丰富, 种质间遗传差异大, 控制林木重要性状的基因克隆及转化对培育优良林木新品种具有很强的实用价值, 但许多具有潜在应用价值的林木基因未得到充分发掘和有效分离。近年来, 随着各种不同林木cDNA文库的建立, 大规模随机EST测序技术的运用以及克隆技术的不断完善, 特别是毛果杨(Populus trichocarpa)基因组测序计划的完成, 大量与林木重要性状相关的基因被分离和鉴定。这些重要基因的获得为利用转基因技术培育高产、优质、抗逆、抗病虫害的林木新品种奠定了一定的基础。该文综述了20多年来国内外林木基因克隆的研究进展, 对基因克隆及其应用过程中亟待解决的问题进行了讨论, 并对其发展趋势进行展望。 相似文献
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林木种质资源丰富,种质间遗传差异大,控制林木重要性状的基因克隆及转化对培育优良林木新品种具有很强的实用价值,但许多具有潜在应用价值的林木基因未得到充分发掘和有效分离。近年来,随着各种不同林木cDNA文库的建立,大规模随机EST测序技术的运用以及克隆技术的不断完善,特别是毛果杨(Populustrichocarpa)基因组测序计划的完成,大量与林木重要性状相关的基因被分离和鉴定。这些重要基因的获得为利用转基因技术培育高产、优质、抗逆、抗病虫害的林木新品种奠定了一定的基础。该文综述了20多年来国内外林木基因克隆的研究进展,对基因克隆及其应用过程中亟待解决的问题进行了讨论,并对其发展趋势进行展望。 相似文献
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在分子水平上研究神经递质受体和生物膜离子通道的结构和功能,是近年来多学科协同研究的一个较新的领域。本文介绍了近年来神经递质受体和离子通道基因克隆工作主要采用的途径和方法。神经递质受体和离子通道的移植是其基因克隆工作中的一个重要环节。 相似文献
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基因克隆作为一种常规技术被广泛应用于DNA及蛋白质的研究。在传统的基因克隆中,一般利用限制性内切酶对DNA片段进行消化,然后使用DNA连接酶完成连接,因此这种方法受到插入片段和载体酶切位点的限制。一些ligase-free克隆技术虽然克服了酶切位点的限制,但费时费力,成本较高。为了弥补其他ligase-free技术的不足,文中介绍了一种新的利用核酸外切酶Ⅲ进行ligase-free克隆的方法,反应时间仅需要30 min,提高了克隆效率并有效降低经济成本,有利于大规模基因克隆的应用。 相似文献
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基因鉴定集成法:全基因组基因表达研究的新策略 总被引:2,自引:0,他引:2
人类基因组包含的核苷酸数目庞大,基因鉴定(识别)的技术策略是基因克隆研究至为重要的基础。在全基因组基因表达分析策略方面,已相继建立了mRNA差异显示、代表性差异分析、抑制性消减杂交、基因表达系列分析和cDNA微阵列等技术。基因鉴定集成法是新近在综合上述技术的优缺点的基础上建立的全基因组分析新策略,具有充分利用生物基因信息数据库进行基因鉴定(识别),并能提高稀有拷贝基因鉴定效率的优点。本文简要介绍其 相似文献