黄绿蜜环菌菌丝体多糖分离纯化与含量测定

分离纯化黄绿蜜环菌菌丝体粗多糖,提高多糖含量,以进一步应用于工业化生产。采用DEAE-52纤维素层析柱分离纯化黄绿蜜环菌菌丝体多糖,依次用水、0.1 mol/L Na Cl、0.2 mol/L Na Cl、0.4 mol/L Na Cl、0.8 mol/L Na Cl进行洗脱;苯酚-硫酸法测定纯化后多糖含量,测定波长490nm,葡萄糖浓度与吸光度的回归方程为A=6.3137X+0.2156R2=0.9909。黄绿蜜环菌菌丝体水体粗多糖经DEAE-52纤维素层析柱分离纯化后,多糖含量达到99%以上。经过中试试验验证提取及分离纯化工艺适用于工业化生产。     

肾茶熊果酸含量测定的研究

本试验研究用薄层扫描法测定肾茶中熊果酸含量。样品经适当提取后点于硅胶GF254薄层板上,以环已烷-氯仿-乙酸乙酯-甲醇(25:15:5:2)为展开剂,置于紫外光灯(波长254nm)下定位;双波长反射锯齿扫描,λ_S=520nm,λ_R=650nm。结果表明,经方法学考察,点样量在0.5~2.5μg范围内呈现良好的线性关系,其回归方程为y=3658.34X-7857.07,r=0.9998;平均回收率为101.57%,RSD=2.83%。     

土茯苓中总黄酮的含量测定方法研究

目的：建立土茯苓总黄酮的含量测定方法。方法：采用70%乙醇超声提取工艺和可见分光光度法测定土茯苓中总黄酮的含量,以芦丁为对照品,在500 nm波长处测量。结果：芦丁在0.008～0.048 mg.mL-1范围内线性关系良好（r=1.000）,平均加样回收率（n=6）以芦丁计为98.34%,RSD为3.4%。结论：此方法操作简单,精密度、稳定性和重复性良好,可用于土茯苓总黄酮含量测定。     

棉花高质量DNA的提取及SRAP反应体系的优化

建立一种简便、快速、经济、有效的gDNA提取方法,并以得到高质量的gDNA为模板摸索棉花SRAP反应体系的最优条件。在提取棉花DNA之前对样品进行预除酚处理,采用CTAB法并加以改进,摸索了一种简便、快速、经济、有效的gDNA提取方法。结果表明预处理除酚法提取天然彩色棉的gDNA为白色,OD260 nm/OD280 nm平均值达到1.900,OD260 nm/OD230 nm平均值1.659,琼脂糖电泳检测表明所提取的DNA较完整,RNA含量少;通过对重要参数进行摸索和优化试验,建立一套稳定可靠、扩增效果好、可重复性强的适用于棉花的SRAP反应体系：25μL的反应体系中,模板DNA量30ng、2.5mmolm/L Mg2＋浓度、0.8μmol/L的上下游引物、200μmol/L的dNTPs以及Taq酶1U。     

胶束电动毛细管色谱法测定红丝线提取物中紫蓝素的含量

建立了胶束电动毛细管电泳色谱法(MECC)测定红丝线提取物中紫蓝素的含量的方法。毛细管柱内径75μm,长50.2cm;运行电压25kV,检测波长585nm,温度25℃;缓冲液为25mmol/L,β-CD10mmol/L,硼酸盐-20%乙腈(pH值8.0);进样方式:压力进样,进样时间5s。结果表明紫蓝素在10～100μmol/L浓度范围内具有良好的线性关系(r=0.9995),回收率为95.3%～103.2%。该方法快速、简便、并且较为准确,适用于测定红丝线提取物中紫蓝素的含量。     

Folin-ciocalteu比色法测桑叶中多酚含量

采用以没食子酸为标准,研究了Folin-ciocalteu比色法测定桑叶中多酚含量的适宜条件。结果表明,桑叶提取液在Folin-ciocalteu试剂2.0 mL、20%Na2CO3溶液5.0 mL、反应温度30℃、反应时间2 h的条件下,测定其760 nm处的吸光值,多酚浓度在10.0～100.0 mg/L范围内与吸光值呈良好的线性关系;稳定性、精密度、重现性和回收率实验的相对标准偏差为0.2969%～2.502%。该法是一种简便、快速、准确测定桑叶多酚含量的可靠方法。     

HPLC法测定赣南脐橙中维生素B1、维生素B2含量

目的：建立2种不同的HPLC法测定赣南脐橙中维生素B1及维生素B2含量,通过比较,得出适合赣南脐橙维生素B1及维生素B2含量测定的最佳方法。方法：色谱条件：色谱柱：C18反相色谱柱（粒径5μm,150 mm×4.6 mm）;流动相：0.05mol/L乙酸钠溶液-甲醇=65∶35（pH值4.6）;流速1.0 mL/min;柱温30 ℃;检测波长：维生素B1激发波长375nm、发射波长435nm;维生素B2激发波长462nm、发射波长522nm。结果：维生素B1和维生素B2线形范围是0.01～1.00μg/mL,最低检出限为0.001μg/mL;果皮、果肉维生素B1平均回收率分别为95.3%、92.98%;果皮、果肉维生素B2平均回收率分别为89.1% 、84.6% 。结论：此方法简单、准确,可用于测定赣南脐橙中的维生素B1及维生素B2含量。     

深色果蔬维生素C检测方法的优化与比较

目的：优化2,6-二氯靛酚钠滴定法和高效液相色谱法检测维生素C含量操作规范性及适用性。方法：对检测条件的设置、试剂及样液的保存时间、提取剂及浓度的选择、提取过程、脱色剂用量及2种检测方法的精密度、重复性和加标回收率等关键影响因素进行比较。结果：高效液相色谱法检测设置C18（5μm,4.6×250mm）色谱柱,0.1%草酸为流动相,流速1mL/min,柱温30℃,检测波长254nm,所得图谱保留时间适宜,峰形良好,维生素C标准液浓度在0.025～0.3mg/mL范围内线性关系良好,回归方程为：y=46 116x+173.26,R2为0.999 2;维生素C标准液在4～6℃保存下48h内可用、2,6-二氯靛酚钠溶液在4～6℃保存下应在12d内使用,待测液制备完成后应立即测定,若无法立即测定,可于4～6℃冰箱中保存1.5h;2%草酸为提取剂效果最佳,样品加提取液匀浆后迅速定容、过滤和检测,不可久置;使用2,6-二氯靛酚钠滴定法时需添加0.4g/30mL的活性炭进行脱色;精密度、重复性及加标回收率均符合测定要求。结论：2种检测方法都适用于深色果蔬维生素C含量检测,各有特点,可根据测定要求及实际条件选择适宜的方法。     

土茯苓中总黄酮的含量测定方法研究

目的:建立土茯苓总黄酮的含量测定方法。方法:采用70%乙醇超声提取工艺和可见分光光度法测定土茯苓中总黄酮的含量,以芦丁为对照品,在500 nm波长处测量。结果:芦丁在0.008～0.048 mg.mL-1范围内线性关系良好(r=1.000),平均加样回收率(n=6)以芦丁计为98.34%,RSD为3.4%。结论:此方法操作简单,精密度、稳定性和重复性良好,可用于土茯苓总黄酮含量测定。     

HPLC-UV测定大鼠血浆中氧化槐定碱含量及其药代动力学研究

建立测定大鼠血浆中氧化槐定碱的体内分析方法,并考察其药代动力学参数。血浆样品以甲醇溶液沉淀,采用ZORBAX XDB-C18(150 mm×4.6 mm,4.0μm)色谱柱分离,流动相为乙腈-磷酸缓冲溶液(0.01 mol/L KH2PO4,H3PO4调p H 3.30)=4∶96(V/V),检测波长210 nm。血浆中氧化槐定碱在2.50~500.00μg/m L内线性较好(r=0.9971),提取回收率为77.3%~89.9%,日内、日间精密度RSD均小于10%。大鼠静脉注射50mg/kg和100 mg/kg氧化槐定碱后,其消除半衰期t1/2分别为(37.24±9.27)和(34.25±8.82)min,AUC分别为(1998.76±178.35)和(5130.62±1450.86)mg/L/min,Cmax分别为(89.53±10.47)和(247.35±112.02)mg/L。本文建立的方法简便、经济,可用于氧化槐定碱体内药代动力学分析。     

HPLC法测定芦笋茎秆中芦丁、槲皮素及白藜芦醇含量

为了建立高效液相色谱法对芦笋茎秆中芦丁、槲皮素和白藜芦醇含量的测定方法。采用不同方法提取芦笋茎秆中的芦丁、槲皮素和白藜芦醇,得出甲醇法提取芦丁、甲醇-HCl法提取槲皮素以及乙醇法提取白藜芦醇得率最高;确定了高效液相色谱法对3种物质的最佳色谱条件为流动相:芦丁为0.2 mol/L乙酸钠-甲醇(Me-OH∶H2O=35∶65)溶液(用磷酸调p H 2.80)、槲皮素为无水甲醇-0.4%磷酸溶液(55∶45,V/V),等梯度洗脱,白藜芦醇为水和甲醇,二元线性梯度洗脱;检测波长分别为:254 nm、360 nm和306 nm;流速:0.8 m L/min、1.0 m L/min、0.8 m L/min。通过该方法测得芦丁、槲皮素及白藜芦醇的平均回收率分别为:98%、97%、98%。     

食品中农药残留的高通量微生物检测方法研究

目的甲胺磷的微生物高通量定量分析法,并在待检蔬菜样品进行初步的探索。方法以短双歧杆菌LJM-006作为测试菌,选择浓度为0、0.25、0.5、1.0、2.0和4.0 mg/L的甲胺磷标准品溶液20μL加入所述检测管内,37℃厌氧培养8～10 h,分别测定反应管和阴性对照反应管的A500值,B值为样品反应管的A500值,B0值为阴性对照反应管的A500值;以B/B0为纵坐标Y,甲胺磷浓度的对数值为横坐标X,绘制标准曲线,建立甲胺磷含量与B/B0的线性回归方程;以此方法进行模拟食品样品中所含甲胺磷检测,进行准确度、精密度分析。结果双歧杆菌菌株LJM-006对甲胺磷敏感性高,与其他有机磷农药的交叉反应率均小于2%;在0.01～100 mg/L浓度范围内B/B0与甲胺磷浓度对数值的线性关系良好,甲胺磷检测的标准曲线为Y=-24.68X＋66.72,R2为0.9902,IC50=0.25 mg/L,检测下限达到0.1 mg/L,回收率为78.5%～105.7%,批内变异系数≤12%,批间变异系数≤8.2%。结论该方法具有操作简便,具备一定灵敏度和特异性等优点,可作为一种食品中甲胺磷残留筛检方法。     

化妆品中的甲硝唑、氧氟沙星与环丙沙星HPLC检测法

目的:建立反相高效液相色谱同时测定化妆品中的甲硝唑、氧氟沙星与环丙沙星方法.方法:以十八炕基硅烷键合硅胶为填充剂,以0.01mol/L四丁基溴化铵溶液(三乙胺调pH至3.0)-甲醇(88:12)为流动相,柱温30℃,流速1.0ml/min.315nm、293nm、277 nm分别作为甲硝唑、氧氟沙星、环丙沙星含量测定的检测波长.样品先用乙腈-水(0.1%甲酸)(体积比5:95)溶液提取,经正己烷脱脂后测定.结果:甲硝唑在2.02～50.59μg/ml,氧氟沙星在2.03～50.69μ g/ml,环丙沙星在2.02～50.45μg/ml范围内与峰面积线性关系良好,r分别为0.9999,0.9998和0.9999.10,25,40μ/g/ml三个浓度水平甲硝唑、氧氟沙星和环丙沙星的平均回收率为85.88%～97.20%,RSD为1.11%～6.10%;检测限均为1ng.结论:本法快速、准确、可用于化妆品中擅自添加的甲硝唑、氧氟沙星与环丙沙星的筛查及含量测定.     

HPLC法同时测定酱腌菜中常用防腐剂和甜味剂的研究

目的：建立一种高效液相色谱法同时测定酱腌菜中苯甲酸、山梨酸、脱氢乙酸、糖精钠和安赛蜜的分析方法。方法：样品经超声提取,沉淀蛋白,高速离心后,过0.22 μm微孔滤膜,上机测定。流动相为甲醇和20 mmol/L乙酸铵溶液,等度洗脱,经ZORBAX SB-C18色谱柱分离,于230 nm波长下紫外检测器检测。结果：5种添加剂在15 min内能很好的分离,浓度在1.00~150 mg/L范围内线性很好（R2>99.99%）;平均加标回收率为83.0%~99.9%,精密度为0.06%~5.47%;方法的检出限（S/N=3）和定量限（S/N=10）分别为0.221~1.15 mg/kg、0.736~3.82 mg/kg;方法间比对数据结果呈现高度一致性。结论：该方法简单易操作,准确可靠,能够满足酱腌菜中常用防腐剂和甜味剂的检验需要。     

PEG化重组尿酸氧化酶蛋白含量测定方法研究

目的:以未修饰的原型蛋白为对照品,建立准确测定2种聚乙二醇化重组尿酸氧化酶(PEG-rUOX)含量的方法。方法:以原型蛋白rUOX为对照品,利用凝胶色谱法测定PEG-rUOX中的蛋白含量,通过详细的专属性、精密度、准确性等方法学考察,建立该方法。色谱条件:采用TSK Gel 5000PWxl(300 mm×7.8 mm)凝胶色谱柱,以含0.15mol/L氯化钠的0.05 mol/L的Tris-HCl溶液(pH9.0)为流动相,流速0.5 mL/min,柱温为室温,检测波长280 nm。结果:在280 nm下,2种rUOX在200~1000μg/mL浓度范围内线性关系良好(r2分别为1和0.9999),其高、中、低平均回收率均较高,为98.33%~99.96%。结论:本方法专属性、精密度和准确性良好,可作为PEG-rUOX的含量测定方法。     

可见分光光度法测定人尿中痕量1-萘酚

目的:建立一种可见分光光度法单独测尿中痕量1-萘酚的新方法。方法:在碱性介质中,1-萘酚（1-NAP）与氯霉素作用生成蓝色物质导致体系的吸光度增加,2-NAP不干扰测定。结果:该蓝色产物的最大吸收波长λmax=472.0nm,其吸光度与1-NAP摩尔浓度在7.64×10^-7mol/L～6.31×10^-4mol/L范围内线性关系良好,线性回归方程为△A=0.3146C+0.0239,相关系数r=0.9973,检出限为2.29×10^-7mol/L,相对标准偏差RSD为3.25%～6.42%,加标回收率为95.3%～105.7%。结论:本方法灵敏、简单、快速、易于推广,用于人尿中1-NAP含量的单独测定结果满意。     

高效液相色谱法测定茶叶中的氟含量

建立了一种高效液相色谱法快速、准确测定茶叶中氟。样品经浸泡提取后,以邻苯二甲酸为背景吸收,以Agilent ZORBAX-ODS柱（4.6mm×250mm,5μm）,流动相为乙腈-0.1mol/L邻苯二甲酸溶液（15∶85,V∶V）,柱温35℃,检测波长294nm,流速1.0mL/min的条件进行实验。结果表明：氟在0.5～10.0μg/mL范围内线性关系良好,平均回收率为101.0%。建立的方法准确、可靠,可以用于茶叶中氟的含量检测。     

RP-HPLC测定红丝线中香豆素的含量

采用反相高效液相色谱法,测定红丝线中香豆素的含量。色谱柱为ZORBAXXDB-C18(4.6mm×150mm,5μm);流动相:V(甲醇)∶V(0.01mol/L磷酸二氢钠溶液(pH5.4))=45∶55;流速:1mL/min;检测波长278nm。香豆素的线性范围为2.5~30mg/L(r=0.9998),回收率97.5%~101%。该法简便、准确,重复性好,适用于测定红丝线中香豆素的含量。     

人工发酵古尼虫草中甘露醇的测定

利用比色法简便、准确和快速地测定发酵生产的古尼虫草菌丝中甘露醇含量。结果表明 ,甘露醇的最大特征吸收峰在 41 2nm处 ,质量浓度在 1 0～ 5 0mg/L范围内线性较好 ,其回归方程 ρ=-0 842 +97 3 2 9A,r=0 9992 ;平均回收率 1 0 0 2 4% ,RSD =0 5 4% (n=5 )。样品中甘露醇采用水提取法 ,提取时间 2h。甘露醇显色后 2 0min内测定对结果影响不大 ,在测定时要注意排除果糖对测定结果的影响。用此法测得发酵古尼虫草菌丝体中甘露醇的含量为 7.4% ,RSD =0 .2 4% (n =6)。     

HPLC-ELSD法测定不同炮制方法雪莲果中低聚果糖的含量北大核心CSCD

本文建立了雪莲果低聚果糖的HPLC-ELSD测定方法,分析不同炮制方法雪莲果中低聚果糖的含量。用不同方法处理新鲜雪莲果,然后超声提取雪莲果粉末中低聚果糖,采用HPLC-ELSD测定,色谱柱：华谱XAmide（4.6×250 mm,5μm）,流动相：乙腈∶水=75∶25,流速：1 m L/min,柱温：30℃,检测器：ELSD,漂移管温度70℃。方法学考察结果表明,蔗果三糖、蔗果四糖、蔗果五糖在0.406～2.030 mg/m L、0.420～2.100 mg/m L、0.456～2.280 mg/m L范围内呈良好线性关系,平均回收率分别为101.4%、99.7%、98.6%,RSD分别为1.53%、1.29%、2.81%。该方法稳定、可靠、精密度高、重复性好,不同处理方法所得雪莲果粉末中3种低聚果糖的含量差别较大,其中用清水漂洗0.5 h,然后冷冻干燥所得雪莲果粉末中的低聚果糖含量最高。