碱裂解法提取细菌质粒DNA的改良

碱裂解法是目前最为广泛应用的细菌质粒DNA的提取方法。但该法提取DNA所需时间较长,通常需要2h以上。为了快速提取质粒DNA,对常规碱裂法中溶液Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、RNA酶A及无水乙醇的反应时间由原来的5min,5min,10min,30min,10min分别缩短至5s,1min,5s,10min,5min。这种改良方法极大地缩短了DNA的提取时间,可在30min内完成整个DNA的制备,且制备的DNA可直接应用于进一步的酶切,连接及PCR等各种分子生物学分析。     

杜仲叶中绿原酸提取工艺优化及分离制备

目的：优化绿原酸提取工艺，并进行单体制备。方法：在单因素试验基础上，以料液比、乙醇浓度和pH为影响因素，绿原酸提取收率为评价指标，依据中心组合法则，运用3因素3水平的响应曲面分析法优化提取工艺。以绿原酸提取液为原料，采用高压制备液相色谱法分离绿原酸。结果：最优提取工艺为料液比1∶10(g/mL)、乙醇浓度20%、pH 3.5、提取时间90 min、提取温度75℃，绿原酸的平均提取率为2.78%，模型预测值为2.94%。高压制备液相分离获得的绿原酸单体纯度大于98.75%，收率大于95.0%。结论：建立了一种简便高效的绿原酸提取分离工艺。     

创新组方肠内营养乳剂制备的工艺参数研究

目的：初步确定初乳制备工艺参数的范围,为下一步肠内全营养脂肪乳产品的工艺研究提供参考。方法：用D50和跨距的平均值为工艺参数评价指标,固定油相和乳化剂用量,用不同的剪切转速、剪切时间和剪切温度进行实验,初步制备脂肪乳初乳,用激光衍射的方式得到初乳的粒径和粒度分布。结果与结论：当剪切转速在2 500~3 500r/min,剪切时间在10~20min,剪切温度在25~30℃时,粒径较小,而且粒度分布集中。     

银杏外种皮生物活性物质联合提取工艺研究

分别以石油醚、80%乙醇、水为溶剂,依次对银杏外种皮中的银杏酸、黄酮以及多糖进行了联合提取研究。结果表明:常温条件下银杏外种皮经高速剪切破壁,石油醚提取银杏酸40 min,2次累计提取率可达98.5%,银杏酸含量可达54.6%,经硅胶柱纯化后纯度可达到97.5%;残渣用80%乙醇提取黄酮60 min,固液比1∶15,1次提取率可达94.6%,其中总黄酮含量为7.5%,经水沉、大孔树脂纯化,黄酮苷含量为24.4%;最后以水为溶剂,90℃下回流提取剩余残渣120 min,固液比为1∶10,多糖2次累计提取率可达72.7%,含量为24.3%,除去蛋白纯化后纯度可达64%。     

高剪切乳化技术辅助提取荷叶水不溶性膳食纤维工艺优化及其物性分析

为扩大荷叶在食品加工中的开发应用性,研究采用高剪切乳化技术辅助提取荷叶水不溶性膳食纤维(insoh-ble dietary fiber,IDF),优化提取工艺;测定其基本物性,并与常规粉碎、球磨式粉碎处理进行对比.结果 表明,在剪切转速8 000 rpm剪切时间4min,酸液浓度0.25 mol/L,酸解温度45℃条件...     

高压热水浸提法提取金针菇中游离氨基酸的优化研究

研究了采用高压热水浸提法从金针菇中提取游离氨基酸的最适条件。通过单因素试验和正交试验,探讨了料液比、高压热水浸提时间及高压热水浸提温度对金针菇中游离氨基酸提取率的影响。试验结果表明,此法提取金针菇中游离氨基酸的最适条件为：料液比为1∶35（g/mL）、高压热水浸提温度为108℃、高压热水浸提时间为50min。在此条件下,金针菇中游离氨基酸的提取率为3.37%。     

川芎及土壤中毒死蜱残留检测提取方法

为建立川芎植株和土壤中农药毒死蜱残留检测的最佳提取方法,利用气相色谱-质谱法测定毒死蜱残留量,并采用正交设计,考察提取溶剂、提取时间、提取次数和溶剂量对农药毒死蜱回收率的影响,优选提取方法。川芎地上部分和根茎中毒死蜱残留的最佳提取方法为：乙腈3倍量超声提取2次,每次15 min。土壤中毒死蜱残留的最佳提取方法为：乙酸乙酯10倍量震荡提取2次,每次30 min。经方法学验证,筛选建立的提取方法均达到农药残留分析要求,该方法可行。     

快速提取类球红细菌中辅酶Q10的方法研究

目的：建立一种从类球红细菌中快速分离纯化辅酶Q10的方法。方法：对影响超声提取辅酶Q10的各因素,包括提取试剂、超声频率、循环次数及工作时间的最佳条件进行正交试验,比较超声破碎法与碱醇皂化法提取辅酶Q10的差异。结果：在超声提取中,提取试剂和循环次数对辅酶Q10提取效果具有显著性影响;在超声频率0.5s、丙酮提取3min、循环3次的条件下提取的辅酶Q10的含量比碱醇皂化法提高了近6倍。结论：超声破碎法是一种简单、迅速、高效的提取辅酶Q10方法。     

提取防风多糖的工艺优化

采用超声波强化和微波辅助提取2种方法提取防风多糖,并与传统热水浸提法在多糖的提取率上进行比较。防风多糖超声提取的最佳工艺条件为超声功率1 000 W、提取时间25 min、液固体积质量比为25,防风多糖微波提取的最佳工艺条件为微波功率560 W、液固体积质量比为30、提取时间10 min,在最佳提取工艺下,2种方法的提取率分别为6.103%和7.639%。与传统热水浸提法相比,超声法和微波法提取防风多糖具有迅速、节能、高效、提取率高等诸多优点。     

扁蓄总黄酮提取方法的比较研究

目的:筛选扁蓄总黄酮的最佳提取方法和提取工艺.方法:以扁蓄总黄酮的提取率为指标,分别采用乙醇回流法、超声波法和微波法提取扁蓄总黄酮,通过正交试验对提取工艺中的温度、固液比、提取功率及时间等技术参数进行考察,使用分光光度法测定扁蓄总黄酮含量.结果:回流提取扁蓄总黄酮提取率为1.09%,超声波提取扁蓄总黄酮的最佳条件为温度80℃,固液比1:10,功率700 W,提取2次,每次20 min,提取率为1.67%,微波法提取扁蓄总黄酮的最佳条件为温度100℃,功率700 W,固液比1:20,提取2次,每次10min,提取率为1.98%.结论:微波提取法提取扁蓄总黄酮具有高效、省时、节能等优点,在中药提取中有良好的应用前景.     

酶法辅助超声波法提取类球红细菌辅酶Q10条件优化

采用单因素和正交实验优化了酶法辅助超声波法提取类球红细菌辅酶Q10的提取条件。结果表明,较优的辅酶Q10提取条件:超声波总时间14 min,超声波振幅30%,超声波工作/间歇时间1 min/1 min,料液比115,溶菌酶添加量300μL,酶解pH 7.2,酶解温度37℃,酶解时间90 min。优化后辅酶Q10的提取率比优化前提高了91.9%。     

酸溶辅助超声波法提取类球红细菌类胡萝卜素条件优化

通过单因素和正交试验,对类球红细菌3757产类胡萝卜素的提取条件进行了研究。先采用超声波法、酸溶法、研磨法、冻融法、酸溶辅助超声波法和冻融辅助超声波法优化了从类球红细菌3757菌株中提取类胡萝卜素的方法,然后开展了酸溶辅助超声波法的单因素和正交实验,最后进行了重复性实验。结果表明,酸溶辅助超声波法是较优的提取方法,丙酮是较好的提取溶剂。最佳提取条件为料液比110、超声波处理总时间20 min、酸浓度3 mol/L、酸溶时间25 min、超声波振幅40%、超声工作/间隔时间2 min/1 min、酸溶温度27℃,实验重现较好。优化后类胡萝卜素的提取率较优化前提高了74.8%,为其产业化创造了条件。     

药用植物草珊瑚RAPD扩增条件优化

采用CTAB-DNA提取方法,从草珊瑚植物的嫩叶中提取总DNA。以此DNA为模板,优化了草珊瑚RAPD-PCR的反应条件。结果表明,PCR扩增体系最适宜的条件为:反应体积25μL,内含2.5mmol/L Mg2+、1.0UDNA聚合酶、0.4μmol/L引物、60ng模板DNA和0.16mmol/L dNTP。扩增程序为:94℃预变性2min;94℃变性30s,37℃复性30s,72℃延伸80s,40个循环;72℃延伸10min;4℃保存10min。     

喜树果中喜树碱和10-羟基喜树碱的匀浆提取工艺

以喜树果为原料,对匀浆法提取喜树碱和10-羟基喜树碱的工艺进行了研究,确定了最佳的工艺条件：提取溶剂为体积分数55％的乙醇,匀浆时间为8min,料液比为1：15（g／mL）。在此工艺条件下,喜树碱和10-羟基喜树碱的提取率分别为0．801‰和0．546‰。将该法与超声提取、回流提取、常温冷浸提取、水浴振荡提取进行了比较,结果表明,匀浆提取具有得率高、省时间等方面的优势,是一种高效提取喜树碱和10．羟基喜树碱的方法。     

一种提取小鼠肠道中活体微生物的方法

目的 建立一种有效的肠道微生物提取方法,用于基于培养方法研究肠道微生物.方法 研究NaCl溶液体积、内容物振荡时间、离心转速和高速离心次数对肠道微生物提取数量、质量及其活性的影响.结果 在盛有适量玻璃珠的三角瓶中,将肠道内容物与0.85％的NaCl溶液按质量体积比(g∶mL)不大于1∶10进行混合,120 r/min漩涡振荡30 min,500 r/min离心5 min去除沉淀,将上清液分装于EP管中12 000 r/mim高速离心1次,弃去上清,在EP管中加入0.85％ NaCl溶液进行漩涡振荡使菌体充分分散,即可得到提取完全、质量高的小鼠肠道微生物.结论 该方法能够提取足够多的肠道微生物,并且保持其活性.     

乌药超声提取工艺的研究

目的:用超声波法提取乌药有效成分,优化提取工艺条件.方法:以醚内醇为考察对象,通过研究超声波条件下影响浸提的几个因素,包括提取次数、超声后浸泡时间、超声时间、超声功率等,并通过单因素试验优化了工艺条件.结果:确定了超声前浸泡时间45 min、超声功率600 w、超声时间13.2 min、液固比10∶1、超声后浸泡时间1...     

牡丹种壳中丹皮酚和芍药苷的微波提取及含量测定

以牡丹种壳为原料,采用微波辅助提取方法,以芍药苷和丹皮酚得率为指标,利用单因素实验对于影响牡丹种壳中芍药苷和丹皮酚得率的因素进行优化。得到的最佳提取工艺参数为:乙醇提取分数70%,液料比10∶1、微波功率230 W、微波时间10 min,浸泡时间1 h,提取次数1次,牡丹种壳芍药苷和丹皮酚的得率分别为2.88和0.52 mg·g-1。同时,对于选取的微波辅助提取方法的稳定性,回收率和重现性进行验证,结果显示微波辅助提取方法是一个稳定的、可靠的提取方法。     

葛根中葛根素和大豆苷提取方法的比较研究

目的:比较不同方法提取葛根中葛根素和大豆苷的效果。方法:分别用乙醇回流提取法、微波辅助提取法、超声波提取法及热水浸提法提取葛根中葛根素和大豆苷,用高效液相色谱法测定含量,计算提取量,并对最佳方法进行优化。结果:乙醇回流提取法、微波和超声法提取量较高,热水浸提法最低。超声提取法的最佳工艺为:以70%乙醇为溶剂,1:10料液比,提取时间45min。结论:该提取方法操作简便,提取效率高,提取时间短,节约溶剂,为工业化生产提供理论依据。     

响应面法优选牡丹果荚中丹皮酚和芍药苷提取工艺的研究

以牡丹果荚为原料,采用响应面分析法对影响微波辅助提取牡丹果荚中芍药苷和丹皮酚的主要因素(料液比、微波功率、微波时间)进行优化。结果表明:微波辅助提取牡丹果荚中的芍药苷及丹皮酚的最佳提取工艺条件为:液料比10∶1、微波功率253 W、微波时间10 min,牡丹果荚芍药苷和丹皮酚的得率分别为2.92、0.91 mg·g-1。与传统提取法相比,微波辅助提取方法不仅提取时间短,原料使用量少,而且提取率高,是一个高效的提取方法。     

碱水法提取草珊瑚中酚酸类成分的工艺研究

目的:研究碱水超声波法提取草珊瑚中酚酸类成分的工艺。方法:采用羟肟酸-高氯酸铁显色法测定草珊瑚中酚酸类成分的含量;通过单因素与正交试验研究碱水p H值、提取时间、提取温度、料液比等因素对草珊瑚中酚酸类成分提取效果的影响,优选提取工艺。结果:提取工艺为碱水p H=10、提取温度60℃、提取时间30 min、料液比1∶10。结论:碱水超声波法提取草珊瑚中酚酸类成分,提取率较高,工艺稳定,省时节能、安全可靠、操作简单。