GC法测定核桃油中的酚类抗氧化剂的不确定度分析

目的：建立气相色谱法测定山核桃油中酚类抗氧化剂的不确定度评定数学模型,分析试验中不确定度来源。方法：样品经过乙酸乙酯稀释,采用气相色谱法测定山核桃油中BHA、BHT、TBHQ的含量,计算合成不确定度和扩展不确定度。结果：山核桃油中BHA、BHT、TBHQ的扩展不确定度分别为0.097、0.093 8、0.096 6 mg/kg（k=2,P=95%）。结论：影响3种抗氧化剂气相色谱法测定的不确定度来源主要是标准曲线溶液配制、标准曲线拟合和样品定容步骤,此不确定度评定可以提高检测结果的准确性。     

ICP-MS法测定茶多酚片中铅和总砷的不确定度分析

目的：为提高电感耦合等离子质谱法（ICP-MS）测定茶多酚片中痕量重金属铅和总砷含量的准确性,通过建立数学模型,对不确定度来源进行分析。方法：样品经过微波消解前处理,采用ICP-MS法分别测定茶多酚片中铅和总砷的含量,根据JJF1059.1-2012《测量不确定度评定与表示》分析不确定度来源,计算合成不确定度和扩展不确定度。结果：经过分析计算,茶多酚片中铅和总砷的扩展不确定度分别为0.029、0.010mg/kg。结论：影响茶多酚片中铅和总砷ICP-MS法测定的不确定度主要来源为样品前处理和标准溶液。     

高效液相色谱法测定蔬菜中β-胡萝卜素的不确定度评定

建立高效液相色谱法测定蔬菜中β-胡萝卜素（β-carotene）的不确定度评定数学模型,计算β-胡萝卜素测量结果的不确定度。胡萝卜和菠菜中β-胡萝卜素的扩展不确定分别为0.684和0.444 mg/100g,k=2,P=95%。影响β-胡萝卜素HPLC法测定的不确定度来源主要是样品均匀性、前处理过程及HPLC仪器定量重复性,不确定度评定有利于完善测定结果的准确性。     

时间分辨荧光免疫层析法检测大米中黄曲霉毒素B_1的不确定度分析

对采用时间分辨荧光免疫层析法(TRFIA)测定大米中黄曲霉毒素B1(AFB1)含量的不确定度进行分析,找出影响不确定度的主要分量。根据CNAS GL06—2006《化学分析中不确定度的评估指南》中提供的方法,建立数学模型,分析测定过程中各不确定度分量的来源,并对其进行量化和评定。结果表明,相对标准合成不确定度为3.703%、相对标准总不确定度为7.406%,大米中黄曲霉毒素B_1含量为(5.235 2±0.387 7)μg/kg(k=2)。不确定度主要来源于标准曲线拟合、重复性检测和样品提取,分别占比20.82%、23.27%和19.35%。测定过程中,应首先制备准确且稳定的标准曲线,并增加平行样的测定次数,提高提取操作的准确度。本文所建立的不确定度评定方法可用于TRFIA法测定大米中黄曲霉毒素B_1含量结果的评定。     

气相色谱法测定橄榄中三唑酮残留量的不确定度评定

介绍了气相色谱法测定橄榄中三唑酮残留量的不确定度评定方法。结果表明,测量过程中三唑酮残留量的不确定度主要来源于校准过程、重复性测量和回收率;当橄榄三唑酮含量为0.072 21 mg·kg-1时,扩展不确定度U = 0.005 576 mg·kg-1(k = 2)。     

干烤法测定C群脑膜炎球菌多糖原液固体总量的不确定度评定

目的建立干烤法测定C群脑膜炎球菌多糖原液固体总量的不确定度分析方法。方法分析C群脑膜炎球菌多糖原液固体总量测定过程中引入的不确定度,并对各个不确定度的分量进行评估。结果由各分量不确定度计算合成不确定度,最终给出测定结果在95%置信区间的扩展不确定度。结论 C群脑膜炎球菌多糖原液固体总量测量不确定度主要由取样及干燥过程引入,在试验中须严格控制以减小不确定度。     

婴幼儿配方奶粉菌落总数检验中不确定度的评定

分析样品中菌落总数不确定度的来源,采用合并样品标准差的方法来评定菌落总数的不确定。研究表明：实验中的扩展不确定度为0．046％,采用此法适合于菌落总数检验结果的评定。且该法简便,适合于每一个样本的检验结果,随着检验结果的不断增加,可随时加入到合并样本中,重新计算合并样本标准差,更新不确定度的取值范围。     

海南黎药海巴戟多糖含量测定及其测量不确定度评估

研究和探讨海南黎药海巴戟多糖含量,并对多糖含量测量过程中引入的不确定因素进行评估。采用苯酚-硫酸法测定海巴戟药材中多糖含量,并根据苯酚-硫酸法建立数学模型,找出影响不确定的因素,最终确定测量结果的合成不确定度和扩展不确定度。以D-葡萄糖作为对照品,浓度在0.002 5～0.012 5 g/L范围内线性关系良好(R~2=0.999 4),重现性试验RSD=1.84%,4 h内显色稳定,加样回收率为98.05%(n=9,RSD=2.32%);16批海巴戟药材多糖含量为5.53%～12.63%,其多糖含量测定方法的合成不确定度为0.029 4～0.093 8,扩展不确定度为0.059 0～0.187 6。影响测量不确定度的主要因素有称量、浓度配制和吸光度。本研究建立的海南黎药海巴戟多糖含量测定方法适应性广、灵敏度高,若将测量结果不确定度纳入标准制定有助于对海巴戟药材含量分析方法的建立和质量标准的制定,有利于对海巴戟药材资源的开发。     

公共场所空气中一氧化碳浓度测量的不确定度分析

目的:对公共场所中测定一氧化碳浓度的不确定来源进行分析,找出影响不确定度的因素,对不确定度进行评估,如实反映测量的和准确性。方法:根据《公共场所卫生标准检验方法第2部分:化学污染物》GB/T 18204.2-2014中的空气中一氧化碳不分光红外分析测量法,按照《测量不确定度评定与表示》JJF1059-2012建立公共场所一氧化碳浓度测量不确定度的数学模型,分析各个不确定度分量,并对合成相对不确定度方差进行计算。结论:该方法可用于公共场所一氧化碳测量结果的不确定度分析。     

基于HPLC指纹图谱和多成分定量评价不同品种百合鲜品质量

目的：建立3种不同品种百合鲜品HPLC指纹图谱，并同时测定其中5种成分。利用聚类（CLA）、主成分分析（PCA）等方法考察不同来源百合质量，为其质量控制评价提供参考。方法：HPLC梯度洗脱法建立了20批百合鲜品的指纹图谱，通过中药指纹图谱相似度评价软件进行相似度评价，采用聚类、主成分分析等进行分析。并同时测定5种成分的含量。结果：标定15个色谱共有峰，20批药材共有峰相似度为0.930～0.997；通过聚类分析分为2类；PCA筛出累积方差贡献率达86.70%的2个主成分；偏最小二乘法-判别分析（OPLS-DA）结果表明不同来源百合药材存在明显差异，对样品有显著影响的色谱峰分别为3号、6号（王百合苷C）和10号。三种分析方法所得结果基本一致。结论：所建立的HPLC指纹图谱和多指标成分定量方法可行，可为系统评价不同品种百合提供一些参考。     

紫细菌光合色素指纹图谱的建立与色素分析

【目的】探索快速高效的色素样品制备方法;为建立紫细菌全色素TLC和HPLC标准指纹图谱和数据库提供研究方法和思路;为色素代谢与调控等研究提供快速的色素分析方法。【方法】选择沼泽红假单胞菌(Rhodopesudomonas palustris CQV97)为材料,采用改良丙酮甲醇提取法、TLC重复展层法、图像灰度分析法、吸收光谱法、HPLC和MS法进行色素分析。【结果】甲醇或丙酮可选择性地提取样品的细菌叶绿素和类胡萝卜素,通过对丙酮甲醇法的改良,使色素提取总量提高了13.5%。建立了CQV97菌株全色素的TLC和HPLC指纹图谱,二者均含有11种色素组分。图像灰度分析法估算了TLC指纹图谱各色素组分的表观相对含量。以TLC图谱的各色素组分为外标物,明确了HPLC图谱中各色素组分的保留时间(Rt)与TLC图谱中各色素组分的迁移率(Rf)之间的对应关系。结合色素代谢途径、光谱分析和MS,定性分析了指纹图谱中11种色素组分。TLC或HPLC分析结果表明,理论样品与对照样品色素组分和含量一致,而实际样品与对照样品色素组分一致,但含量不同,重复测定3次,样品中色素相对含量的RSD均小于5%。【结论】改良的丙酮甲醇法可以快速高效地提取光合细菌的色素。采用TLC重复展层法和HPLC法建立的全色素指纹图谱色素组成一致,重复稳定性好,各具特色。TLC和HPLC两种指纹图谱分析方法均能进行光合色素的快速分析,适合于紫细菌色素合成途径中主要积累色素的组分和含量变化规律研究。     

食品中单核细胞增生李斯特氏菌的测量不确定度评定

依据GB 4789.30—2016《食品安全国家标准食品微生物学检验单核细胞增生李斯特氏菌检验》第二法平板计数法和JJF 1059.1—2012《测量不确定度评定与表示》,对单增李斯特氏菌平板计数法测量不确定度的来源进行分析,以建立食品中单核细胞增生李斯特氏菌平板计数法的测量不确定度评定方法。结果发现:通过建立数学模型T=AB/Cd,分析不确定度来自样品制备、样品稀释及重复测量的过程,样品的存储采集、样品的均质、培养基配制的时间、培养基灭菌温度、培养箱温度及培养时间对总不确定度的贡献较小。单核细胞增生李斯特氏菌平板计数法的检测结果为(2.9±1.2)×10~6CFU/g,对同一样品测定10次的扩展不确定度为1.2×10~6。     

rhIGF-1等电点的测定

目的：通过测定rhIGF-1等电点为例,建立一种快速测定蛋白质等电点的方法。方法：采用等电聚焦电泳（isoelectric focusing,IEF）和高效液相色谱（HPLC）连用的方法,主要以7．5％的凝胶浓度、3％的交联度及6％的两性电解质浓度配置凝胶,电泳后的凝胶经凝胶成像系统和HPLE分析确定目的条带及其pI值。结果：rhIGF-1的等电点为pI=8．20,pH梯度曲线线形回归方程为Y=0．0664X＋3．8217,相关系数r达0．9956,说明等电聚焦电泳测定结果准确。     

赤霉酸含量紫外吸收测定法的改进

目的：用紫外法专一性地测定赤霉酸含量。方法：加入１ｍｏｌ／Ｌ氢氧化钠溶液终止赤霉酸在酸性条件下的降解,测定降解产生的赤霉烯酸的紫外吸收值进而确定赤霉酸的含量。结果：吸光度与ＧＡ３含量在一定浓度范围内有良好的线性关系,γ＝０．９９７８,ＲＳＤ＝０．４５％,与原有的Ｈｏｌｂｒｏｏｋ方法相比,测定结果无显著性差异（Ｐ＞０．０５）。该方法快速、易行且重复性良好     

光照强度对成熟红颜草莓果实着色和花青素生物合成的影响及可能的分子机制

为了研究光照对红颜草莓（Fragaria×ananassa Duch.‘Benihoppe’）果实着色、花青素含量及花青素合成相关基因表达的影响,本文采用高效液相色谱法（HPLC）和实时荧光定量PCR技术测定了不同遮阴处理下（透光率100%、75%、25%）草莓果实花青素含量及色素相关基因的表达情况。结果显示,与100%透光率下的草莓果实相比,在75%和25%透光率下合成的花青素含量分别下降了41.58%和92.54%;和花青素合成相关基因的表达也都有不同程度的下降,其中二氢黄酮醇4-还原酶基因（FaDFR）、类黄酮-3'羟化酶基因（FaF3'H）和类黄酮3-O-糖基转移酶基因（FaUFGT）的表达与花青素含量相关性达到显著水平;此外,在遮光条件下转录因子FaMYB10、FaMYB1表达也明显下调。可见,光照是影响草莓果实着色的关键环境因素,遮光抑制色素相关功能基因和转录因子的表达,阻碍了果实中花青素的合成,最终导致果实着色差异。     

基于多指标结合化学计量学的多基源藏药烈香杜鹃质量评价分析

目的：采用多指标结合化学计量学综合评价烈香杜鹃的质量,为其质量评价提供科学依据。方法：采用2020年版《中国药典》四部通则规定的方法对藏药烈香杜鹃的显微、水分、总灰分等分别进行了鉴别和测定,采用高效液相色谱法（HPLC）测定了金丝桃苷和槲皮苷的含量,并进行聚类分析（HCA）和主成分分析（PCA）。采用中药色谱指纹图谱相似度评价系统（2012）进行了相似度评价。结果：不同基源烈香杜鹃的显微鉴别结果存在细微差别,水分、总灰分、酸不溶性灰分、浸出物含量也显示出一定的差异。指纹图谱的相似度分析显示样品相似度系数为0.705～0.990。金丝桃苷和槲皮苷的含量平均值分别为0.408 2%、0.175 5%、0.583 7%,RSD值分别为62.97%、46.67%和47.89%。化学模式分析结果显示样品间存在一定差异。结论：不同基源的烈香杜鹃质量有一定的差异性,基于多指标结合化学计量法的方法能有效评价藏药烈香杜鹃的质量,为烈香杜鹃的质量评价提供参考。     

累积番茄红素的大肠杆菌工程菌及其培养条件的研究

噬夏孢欧文氏菌番茄红素合成相关基因crtE, crtB, crtI同时克隆进表达载体pET-15b构建pET-15bcrtIEB,将该重组质粒转化E.coliBL21(DE3)构建工程菌,IPTG诱导工程菌累积红色色素,经HPLC和吸收光谱分析,工程菌中合成的色素为番茄红素。研究了碳源、金属离子、培养温度、诱导剂浓度、诱导时间等参数对工程菌生长及色素累积的影响,确定了合适的培养条件：培养基为改良LB培养基（蛋白胨10g/L、酵母提取物5g/L、麦芽糖5g/L、MgCl2 0.1g/L,NaCl 10g/L）;起始培养温度为37℃;培养至OD600为0.6左右时加入IPTG,终浓度为0.5mmol/L,诱导温度降至30℃;诱导时间为14h。发酵完成后工程菌的生物量（干重）为3.45g/L,番茄红素的最高含量可达5.8mg/gDW。     

HPLC法测定葛花中鸢尾苷的含量

目的：测定8个产地葛花中鸢尾苷的含量,建立葛花中鸢尾苷含量测定的HPLC方法。方法：采用GRACEC18（250mm×4.6mm,5μm）色谱柱,流动相为乙腈-水梯度洗脱,流速为0.8mL/min,紫外检测波长为265nm;柱温为室温。结果：鸢尾苷的峰面积（Y）与浓度（X）在11.8～236.4μg/mL范围内具有良好线性关系,Y=34920X-1156.5,r=0.9995（n=7）;平均加样回收率为103.66%,RSD〈2%（n=9）;测得8批不同产地的葛花药材中鸢尾苷含量在37.00～113.1mg/g。结论：建立了高效液相色谱法测定葛花中鸢尾苷含量的方法,该法准确、可靠,可用于葛花中主要成分鸢尾苷的含量测定;不同产地葛花中均检测到鸢尾苷,但其含量有一定区别。     

三色(Bougainvillea peruviana‘Thimma’)在转录水平的甜菜色素和类黄酮积累比较

Bougainvillea peruviana‘Thimma’属于三角梅属,该属植物积累甜菜色素而不是像绝大多数高等植物一样积累花青素。该材料特征同株出现3种颜色：白色、洋红色和白/洋红相间。本研究首次使用3种花色特征的花序（红色Yp、混合色的Ym、白色Yw）作为研究材料进行高通量测序。并通过real-time PCR方法对探测到的花色代谢基因进行验证。共获得平均长度为616 bp的73 325条基因。3种材料的差异显示基因（DEGs）中有327个被注释到甜菜色素合成基因,308个被注释到类黄酮合成基因,466个被注释到花青素合成基因。我们选出8个基因：4个甜菜色素合成基因（PPO,CYP76AD1,cDOPA-5-GT,DODA）和4个花青素合成基因（FLS,DFR,LDOX,3-GT）进行验证。其中,4个甜菜色素合成基因在3种花色材料中的表达较好的正相关于甜菜色素含量。花青素合成途径末端的3个基因（DFR,LDOX,3-GT）在B.peruviana中首次被验证。real-time PCR的验证结果很好的吻合转录组测序的结果。同时,B.peruviana也提供了一个很好的三角梅属植物的生理、生化和分子生物学研究的工具,有效的摒除其他生物学干扰。     

不同叶色猴樟花青素含量与光合特性比较

目的：比较不同叶色猴樟花青素含量与光合特性差异,初步分析猴樟春季叶色形成的机理。方法：以3种不同叶色的猴樟种苗为材料,测定其功能叶片花青素含量、光合色素含量、叶绿素荧光参数、光合作用参数及花青素合成相关基因表达量。结果：紫叶猴樟和红叶猴樟的叶绿素a、叶绿素b、叶绿素（a+b）和类胡萝卜素含量均与绿叶猴樟无明显差异,花青素含量分别是绿叶猴樟的134.24倍和49.80倍;红叶猴樟和紫叶猴樟的净光合速率（Pn）、气孔导度（Gs）、蒸腾速率（Tr）均高于绿叶猴樟,胞间CO2浓度（Ci）和水分利用效率（WUE）均低于绿叶猴樟;红叶猴樟和紫叶猴樟的初始荧光（Fo）、暗适应下最大荧光（Fm）、非光化学淬灭系数（NPQ）、光适应下PSII的最大量子产额（Fo’/Fm’）均高于绿叶猴樟,光化学淬灭系数（qP）和光适应下PSII的实际光化学效率（ΦPSⅡ）均低于绿叶猴樟,暗适应下PSⅡ最大光化学效率（Fv/Fm）差异不显著;紫叶猴樟的CbDFR、CbANS和CbUFGT基因表达量显著高于绿叶猴樟,红叶猴樟的CbDFR、CbANS和CbUFGT基因表达量高于绿叶猴樟,其中仅有CbUFGT基因表达量差异显著...