替加环素与5种抗生素对多重耐药鲍曼不动杆菌体外联合药敏实验的研究

分析亚胺培南、头孢哌酮-舒巴坦、头孢曲松、左氧氟沙星、庆大霉素5种临床常用鲍曼不动杆菌治疗的抗生素单用和分别与替加环素联用的体外敏感性实验的研究,以期发现较好的联合用药方案,为临床合理使用抗生素提供用药参考。采用微量肉汤稀释法测定5种抗生素对鲍曼不动杆菌的MIC值,再采用棋盘法测定5种抗生素分别与替加环素联用MIC值,并计算FIC指数。结果显示,替加环素与亚胺培南、头孢哌酮舒巴坦、左氧氟沙星、头孢曲松具有协同和相加作用,替加环素与庆大霉素具有拮抗作用。临床在选择抗生素治疗鲍曼不动杆菌所引起的重症感染时,可根据该药敏实验结果与亚胺培南或头孢哌酮舒巴坦或左氧氟沙星或头孢曲松与替加环素联合使用,但应避免与庆大霉素联合使用。     

米诺环素对泛耐药鲍曼不动杆菌的体外药敏分析

初步探讨米诺环素对泛耐药的鲍曼不动杆菌体外药敏。将各种标本分离获得的鲍曼不动杆菌,进行米诺环素药敏试验,并将检测结果进行统计和分析。2009年1月至2011年9月共检出鲍曼不动杆菌471株,其中米诺环素敏感的鲍曼不动杆菌2009年5株、2010年12株、2011年23株;亚胺培南、美洛培南敏感其他耐药的0株,亚胺培南、美洛培南、米诺环素敏感其他耐药的0株;米诺环素和头孢哌酮/舒巴坦同时敏感的236株,占总数的50.1%。米诺环素对泛耐药的鲍曼不动杆菌在体外有很好的抗菌活性,特别是联合头孢哌酮/舒巴坦治疗泛耐株鲍曼不动杆菌的感染是一个不错的选择。     

嗜麦芽窄食单胞菌对四环素类抗生素药敏试验评价

目的了解琼脂扩散法（K-B法）及肉汤稀释法检测嗜麦芽窄食单胞菌的耐药性,了解两种方法的差异及为临床分离的嗜麦芽窄食单胞菌提供药敏结果。方法对28株临床分离嗜麦芽窄食单胞菌进行K-B法及肉汤稀释法检测,了解扩散直径及每株菌的MIC值。结果多西环素、米诺环素对嗜麦芽窄食单胞菌的药敏结果较好;K-B法及肉汤稀释法所得结果相关性好。结论临床上可以选择多西环素、米诺环素治疗嗜麦芽窄食单胞菌感染;可以应用K-B法检测嗜麦芽窄食单胞菌对四环素类抗生素的药物敏感性。     

替加环素结合舒巴坦对多重耐药鲍曼不动杆菌病原微生物的治疗效果观察

目的探讨重症多重耐药鲍曼不动杆菌肺炎对替加环素结合舒巴坦的疗效反应。方法选取98例自2011年6月到2013年6月收治于沈阳军区总医院的严重鲍曼不动杆菌肺炎的患者,数字表法随机分为对照组与观察组,对照组在常规治疗基础上行替加环素治疗,观察组在对照组的基础上行舒巴坦治疗,观察两组治疗后的总有效率与不良反应情况。结果观察组患者的ET、AngⅡ和NO水平分别为(0.35±0.10)mg/L、(146.3±28.6)μg/L和(37.8±8.7)μmol/L,均明显低于对照组的(0.40±0.12)mg/L、(185.7±35.3)μg/L和(48.6±10.5)μmol/L,对比差异具有统计学意义(P0.05)。与对照组相比,观察组的总有效率明显提高(81.63%vs 40.82%,P0.05),而不良反应显著降低(P0.05)。结论替加环素结合舒巴坦治疗多重耐药鲍曼不动杆菌肺炎安全有效,值得临床广泛关注和应用。     

替加环素与多粘菌素B对泛耐药鲍曼不动杆菌体外研究

目的为治愈耐舒普深的泛耐药鲍曼不动杆菌（PDR-Ab）提供新药。方法替加环素采用二倍琼脂稀释法,多粘菌素B用E-test条法测分离目标菌株100株的最低抑菌浓度（M IC）,并用WHONET 5.4软件分析数据。结果多粘菌素B对耐舒普深的泛耐药鲍曼不动杆菌株的M IC值分布情况为：1.5 mg/L为2株,1.0 mg/L为9株,0.75 mg/L为9株,0.5 mg/L为38株,0.38 mg/L为34株,0.25 mg/L为8株,均为敏感;替加环素对耐舒普深的泛耐药鲍曼不动杆菌株的M IC值分布情况为：≥32 mg/L为0株、16 mg/L为2株、8 mg/L为3株、4 mg/L为4株、2 mg/L为6株、1 mg/L为9株、0.5 mg/L为30株、0.25 mg/L为33株、0.125 mg/L为9株、0.06 mg/L为2株、0.03 mg/L为2株,敏感率为95.0%,中敏率为3.0%,耐药率为2.0%。结论替加环素或多粘菌素B是目前对耐舒普深的泛耐药鲍曼不动杆菌最有效药物之一。     

替加环素不敏感鲍曼不动杆菌的分子流行病学及耐药机制

为探讨替加环素不敏感鲍曼不动杆菌Acinetobacter baumannii的耐药机制,为院内感染控制及临床合理用药提供理论依据,采用琼脂稀释法和微量肉汤稀释法检测全国多中心12个城市20家医院临床分离的94株非重复的替加环素不敏感鲍曼不动杆菌的最低抑菌浓度(Minimum inhibitory concentration,MIC),应用多位点序列分型(Multilocus sequence typing,MLST)技术进行分子流行病学研究,应用eBURST软件对MLST结果进行分析;用PCR和测序技术分析常见耐药基因(bla_(OXA-40-like)、bla_(OXA-58-like)、bla_(OXA-23-like)、bla_(OXA-51-like)、bla_(NDM-1)),与替加环素耐药相关的外排泵调控基因adeR和adeS的突变位点、trm的突变位点。经检测94株鲍曼不动杆菌除对多粘菌素B 100%敏感、对米诺环素敏感率25.5%外,其他抗菌药物的敏感率均低于3.5%,亚胺培南和美罗培南敏感率均只有1.1%。MLST分型得到12种ST分型,以ST195(45株,47.9%)、ST208(19株,20.2%)和ST457(10株,10.6%)为主,eBURST分析发现其中8个ST型均属于克隆复合体92(Clonal Complex 92,CC92);99%菌株bla_(OXA-23-like)型碳青霉烯酶基因阳性;均未扩增出bla_(NDM-1)基因;外排泵调控基因adeR和adeS的检出率分别是73.4%和91.5%,Asp26Asn和Ala97Glu分别为adeR和adeS的高频突变位点;在12株鲍曼不动杆菌中检测到了adeS基因的ISAba1,以北部地区为主;trm基因均在第240位核苷酸发生缺失突变。综上所述,替加环素不敏感鲍曼不动杆菌对除多粘菌素B外的大多数抗菌药物具有很高的耐药性,AdeABC外排泵上游的双组分调控系统adeR和adeS的缺失和突变,trm缺失突变是导致鲍曼不动杆菌对替加环素敏感性降低的主要原因。     

252例前列腺炎患者前列腺液细菌培养及药敏试验结果

目的了解本地区细菌性前列腺炎患者感染的病原菌种类及耐药情况,为临床治疗提供依据。方法对252例细菌性前列腺炎患者的前列腺液作细菌培养,用美国德灵公司MicroScan Auto SCAN4型细菌鉴定仪及药敏分析仪对分离的细菌进行鉴定及药敏试验。结果252例标本中,阳性154例,阳性率61．1％,以金黄色葡萄球菌为主,其次为大肠埃希菌和表皮葡萄球菌。药敏试验结果显示,常规使用的抗生素如青霉素G、氨苄西林、复方新诺明、环丙沙星等耐药率较高,在61．3％-83．9％,而对万古霉素、亚胺培南、阿米卡星、妥布霉素、利福平、左旋氧氟沙星等敏感性较高。结论细菌性前列腺炎患者的治疗,应以细菌培养及药敏试验结果为依据,指导临床合理选用抗菌药物。     

4103例泌尿生殖道支原体感染及药敏分析

目的通过分析泌尿生殖道支原体感染及药敏情况,为临床提供用药指导。方法采用支原体检测试剂盒进行支原体属培养和药敏试验。结果4103例患者标本中,检出支原体属1336株,总阳性率为32．56％;其中单一解脲脲原体（Uu）感染1227例,阳性率为91．84％;单纯人型支原体（Mh）感染15例,阳性率为1．12％;Uu＋Mh混合合感染94例,阳性率为7．04％。解脲脲原体对阿奇霉素、红霉素、交沙霉素、罗红霉素、米诺环素、强力霉素敏感性高;单纯人型支原体对交沙霉素、米诺环素、强力霉素敏感。结论泌尿生殖道支原体感染以Uu为主。支原体大多具有多重耐药性,临床治疗需根据药敏结果选药物。     

肺炎克雷伯菌ESBLs及AmpC酶的基因分布检测与耐药特性的相关性研究

目的研究肺炎克雷伯菌ESBLs及AmpC酶的基因分布与耐药特性的相关性。方法收集2008年1月至2013年12月临床分离的100株肺炎克雷伯菌,采用K-B法进行体外药敏试验,采用ESBLs确证试验和AmpC三维试验确定产酶表型,采用聚合酶链式反应进行ESBLs酶及AmpC酶基因的检测。结果60株检测出ESBLs酶,其中60株内检出ESBLs基因阳性56株,主要为SHV型基因;检出AmpC酶的检测6株,主要为DHA型基因。其中两种基因同时阳性者1株。除哌拉西林/他唑巴坦,单产AmpC酶、ESBLs及两种基因同时阳性菌（SSBLs）对其他17种常用抗生素的耐药率均高于不产酶菌株。结论医院肺炎克雷伯菌的主要耐药机制为ESBLs酶及AmpC酶基因。ESBLs耐药基因检出率高,ESBLs阳性株耐药率明显高于ESBLs基因阴性株。     

肺炎克雷伯菌Hfq蛋白特性及对耐药的影响

Hfq(host factor for RNA phage QB replicase)蛋白是一个全局性调节因子,广泛参与细菌生长、趋化、毒力、耐药及应对外界选择压力等方面的调节,但在肺炎克雷伯菌(Klebsiella pneumoniae,KP)中的功能尚不清楚。本研究从临床病例中分离到59株KP,将其hfq基因与11例常见临床感染菌株hfq基因〔从美国国立生物技术信息中心(National Center for Biotechnology Information, NCBI)数据库下载〕进行了比较。所有hfq基因经EMBOSS Transeq翻译成氨基酸序列,用MAFFT软件进行多序列比对,并通过NCBI数据库中的保守结构域预测Hfq蛋白结构域。分别采用ESPript3.0、Phyre2分析Hfq蛋白的二、三级结构。59株KP中仅3株hfq基因的5个密码子位点存在差异,而其蛋白质氨基酸序列完全一致。KP与大肠埃希菌、阴沟肠杆菌、痢疾志贺菌之间,Hfq蛋白的氨基酸序列相似度较高,主要区别在C末端上;与金黄色葡萄球菌、产单核细胞李斯特菌相比,KP Hfq蛋白在N末端和C末端上差别较大;所有菌株C末端均呈酸性。三级结构预测提示68(66.67%)个氨基酸与模板序列一致, 较为保守的功能结构为54-VYKHAI-59序列。采用CRISPR/Cas9同源重组技术敲除KP的hfq基因,并对其进行药物敏感性测试,结果显示,基因敲除菌株对抗生素的耐药性较野生株有显著下降(P<0.05),差异有统计学意义,提示KP的Hfq蛋白氨基酸序列非常保守,可能参与了KP的耐药调节。     

1796例泌尿生殖道支原体培养及药敏结果分析

目的分析新乡地区1796例泌尿生殖道标本的支原体培养及抗生素药物敏感试验,指导临床合理使用抗生素。方法支原体培养鉴定、药敏试剂盒购自贝瑞特公司。同时检测解脲支原体和人型支原体,并进行10种抗生素的药敏试验。数据统计采用χ^2检验。结果支原体培养1596例标本中,541例解脲脲原体（Uu）阳性,阳性率为33.9%;39例人型支原体（Mh）阳性,阳性率为2.4%;解脲脲原体、人型支原体均阳性76例,阳性率为4.8%。200例正常对照组27例阳性,阳性率为13.5%。药敏结果显示,强力霉素、克拉霉素和美满霉素的抗菌活性较强。结论支原体感染以Uu为主,Uu＋Mh次之,正常人泌尿生殖道支原体阳性率为13.5%。只有某些血清型感染且在达到一定浓度以上同时宿主处于多种病原体感染或免疫机制紊乱时,Uu才能致病。避免滥用抗生素引起生殖道菌群失调。临床上治疗Uu感染、Mh感染或Uu＋Mh混合感染时,建议选用强力霉素、克拉霉素和美满霉素。     

112株志贺菌菌群分布和药敏特点分析

目的研究本地区2001年至2005年志贺菌菌群分布及其药敏特点,以指导临床合理抗菌治疗。方法经大便培养筛选志贺菌,用生化和血清学方法鉴定菌群和血清型,采用K-B法检测病原菌耐药性。结果在112例细菌性痢疾患者中,男女比例相似,年龄分布以婴幼儿最高,临床表现不典型者较多,菌群分布以福氏志贺菌最多,F2b为优势血清型,对抗菌药物敏感性差异有显著性。结论近5年来本地区细菌性痢疾患者发病特点有年龄差异,菌群仍以福氏志贺菌为主,血清型以F2b为主,第3代头孢菌素是治疗细菌性痢疾最佳的抗菌药物。     

2008-2012年484株肺炎克雷伯菌耐药性分析及耐药机制的初步研究

目的回顾性分析近五年来医院住院及门诊病原菌感染患者中肺炎克雷伯菌的分离趋势,探讨其对常规抗菌药物的耐药性变迁和相关耐药机制。方法采用法国梅里埃公司的Vitek-2 Compact全自动微生物分析仪进行细菌鉴定及药敏试验,部分菌株采用微量生化管鉴定,部分药敏试验采用琼脂扩散法（KB）,药敏结果判读按照美国临床和实验室标准化协会（CLSI）制定的标准判读,纸片法表型确证试验检测超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）,改良Hodge试验检测碳青霉烯酶表型,EDTA双纸片法检测金属酶表型。结果五年间484株肺炎克雷伯菌部分药物耐药率正逐年上升,其常见药物平均耐药率如下：阿米卡星（3.0%）,复方新诺明（31.1%）,头孢三嗪（14.5%）,环丙沙星（18.7%）,氯霉素（21.6%）,特治星（6.3%）,头孢他啶（22.0%）,头孢噻肟（23.6%）,舒普深（4.2%）,呋喃妥英（26.9%）,美罗培南（2.1%）,ESBLs阳性99株（20.4%）,改良Hodge试验检测碳青霉烯酶表型阳性5株,EDTA双纸片法检测金属酶表型阳性2株。结论部分药物耐药率逐年上升的有复方新诺明、环丙沙星、头孢他啶、头孢噻肟;耐药率较低的有美罗培南、阿米卡星、舒普深、特治星、头孢三嗪。应加强细菌耐药性监测,以及耐碳青霉烯酶筛查试验,为临床提供用药参考。     

重症监护病房肺炎克雷伯菌ESBLs检测及耐药性分析

目的了解江山市人民医院重症监护病房肺炎克雷伯菌产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）的情况及其耐药性分析。方法收集2006年1月至2011年12月该院重症监护病房临床分离的肺炎克雷伯菌418株,采用VITEK-32全自动细菌鉴定仪;药物敏感试验采用K-B纸片扩散法,用双纸片协同试验进行ESBLs检测。采用聚合酶链式反应（PCR）扩增检测细菌产ESBLs的基因分型。结果 418株肺炎克雷伯菌主要来源于痰液标本和中段尿标本等,其中产ESBLs的肺炎克雷伯菌有111株。重症监护病房肺炎克雷伯菌年龄分布以71～80岁年龄组最高,而产ESBLs菌株则以51～60岁年龄组为最高,可达43.1%。产ESBLs菌株对一～三代头孢菌素、氯霉素、大多数氟喹诺酮类抗菌药物耐药率一直很高;对碳青霉烯类抗菌药物总体上有较高的敏感性,但耐药菌也在有所出现。PCR扩增检测ESBLs基因型,该院中CTX-M、SHV、TEM等均占较高比例,提示上述三种耐药基因型在本地区均有分布。结论医院重症监护病房临床分离的肺炎克雷伯菌产ESBLs的比例较高,尤其是泛耐药菌株的不断出现,给临床治疗带来了巨大难题,应引起高度重视,以预防重症监护病房感染的发生和暴发流行。     

复发性外阴阴道念珠菌病的致病菌种鉴定及药敏分析

目的：探究复发性外阴阴道念珠菌病致病菌的菌种分布及耐药情况,指导临床治疗。方法：收集210例念珠菌性外阴阴道炎患者阴道分泌物标本,其中复发性外阴阴道念珠菌病（RVVC）组76例,外阴阴道念珠菌病（VVC）组134例。运用科玛嘉显色培养基法进行菌种鉴定和药物敏感试验。结果：在210例病例中,RVVC组中白色念珠菌54株（71.05%）,光滑念珠菌15株（19.74%）,热带念珠菌4株（5.26%）,克柔念珠菌2株（2.63%）,近平滑念珠菌1株（1.32%）。非白色念珠菌中以光滑念珠菌为主,在RVVC组中的比例明显高于VVC组,有显著性差异（P〈0.05）。药敏试验显示,RVVC的念珠菌株中仅8株对7种药物全部敏感,23株敏感药物〈5种,其中1株仅对制霉菌素敏感;对药物的敏感率为制霉菌素（97.37%）〉克霉唑（60.52%）〉酮康唑（51.32%）〉伊曲康唑（36.84%）〉咪康唑（35.53%）〉氟康唑（23.68%）〉特比奈芬（10.53%）。结论：白色念珠菌仍是RVVC的主要致病菌,非白色念珠菌比例在RVVC组中显著高于VVC组,其中以光滑念珠菌为主。念珠菌对制霉菌素敏感率最高,对唑类药物耐药性有增加趋势。     

120例婴幼儿外耳道炎分泌物细菌培养及药敏分析

目的通过对婴幼儿外耳道分泌物做细菌培养和药物敏感试验,指导临床用药。方法取120例患耳外耳道脓性分泌物,菌株经ATB express自动微生物分析仪进行鉴定和药敏试验。结果 120例菌株中,33例真菌感染,18例细菌和真菌合并感染,69例细菌感染。真菌耐药率不高,葡萄球菌对青霉素和红霉素耐药率接近100%。结论外耳道真菌感染率增高,细菌对抗生素耐药性增强,临床医生应参照药敏试验合理谨慎应用抗生素。