低氧诱导因子在肾透明细胞癌中作用的研究进展

VHL基因具有调节转录、稳定细胞生长相关基因和调节细胞周期的功能,其突变、缺失、重排和超甲基化与肾细胞癌(RCC)的发生密切相关。VHL基因产物VHL肿瘤抑制蛋白(p VHL)是泛素连接酶的成分,具有调节低氧诱导因子(HIF)稳定性的作用。HIF家族主要包含三种HIFα因子(HIF1α、HIF2α、HIF3α)和两种HIFβ因子(HIF1β、HIF2β)。HIF1α位于14q染色体上,在肾透明细胞癌中该染色体经常缺失,且这种14q的缺失常伴有预后不良。HIF2α的表达异常促进了p VHL缺陷型肾透明细胞癌中的发生。目前,抑制HIF2α及其下游的血管内皮生长因子(VEGF)的药物都处于临床试验的不同阶段,已有四种VEGF抑制剂获准用于肾透明细胞癌的治疗。选择抑制HIF或具有HIF靶基因抑制选择性的药物进行研究,可能为肾透明细胞癌的治疗提供新的方法。本文就HIF在VHL蛋白缺陷型肾透明细胞癌中作用的研究进展进行了综述。     

缺氧诱导因子与肺癌关系研究进展

缺氧诱导因子(Hypoxia-inducible factors,HIFs)是在缺氧条件下广泛存在于人和哺乳动物体内的一种转录因子,在细胞的增殖、存活、血管发生、新陈代谢、肿瘤侵袭和转移等过程中起着重要作用。缺氧是实体瘤的一个重要特征,缺氧诱导因子与肿瘤的发生、发展关系密切,通过分析缺氧诱导因子与肺癌的关系,为研发新靶点的肺癌药物奠定一定的理论基础。     

缺氧诱导因子1研究进展

缺氧诱导因子１（ＨＩＦ－１）在缺氧诱导的哺乳动物细胞中广泛表达,为缺氧应答的全局性调控因子。ＨＩＦ－１由ＨＩＦ－１α和ＨＩＦ－１β两亚基组成,为异源二聚体转录因子。ＨＩＦ－１α的ｂＨＬＨ和ＰＡＳ结构域与二聚化及ＤＮＡ结合活性有关,ＴＡＤ结构域则主要参与转录激 活。ＨＩＦ－１α的全长基因已克隆并在人和小鼠中定位。通过作用于靶基因的缺氧反应元件（ＨＲＥ０,ＨＩＦ－１参与缺氧诱导的一系列基因的表达调控。     

缺氧诱导因子1研究进展

缺氧诱导因子１（ｈｙｐｏｘｉａ－ｉｎｄｕｃｉｂｌｅ ｆａｃｔｏｒ－１,ＨＩＦ－１）是由两个蛋白质亚基组成的二聚体转录因子,对缺氧具有特异感受性,它的表达受细胞内氧分压的严密调节。ＨＩＦ－１参与体内许多缺氧反应性基因的转录调节,是机体缺氧应答反应中的关键作用因子。     

缺氧诱导因子-1结构及功能的研究进展

缺氧诱导因子(hypoxia inducible factor-1,HIF-1)是一种介导机体对缺氧环境产生应答的转录因子。在炎症及实体肿瘤周围的组织大多存在缺氧现象。在缺氧条件下,HIF-1α和HIF-1β两个亚基结合,形成HIF-1并迅速活化,参与机体缺氧环境的适应,并在胚胎发育、多种肿瘤及心肺疾病等发生发展中起到重要作用。因此,更好地认识HIF-1的功能及意义,对进一步地认识与其相关生命过程和疾病本质以及研发新的治疗手段具有重要意义。     

缺氧诱导因子1

缺氧诱导因子1是缺氧诱导细胞所产生的一种蛋白质,由一个120 ku的α亚基和一个91～94 ku的β亚基组成的异源二聚体.在缺氧条件下,促进红细胞生成素和糖酵解酶等基因的转录和表达,维持机体氧稳态.     

缺氧诱导因子及相关circRNAs在肝细胞癌中的研究现状

肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)死亡率高、预后差,严重危害人类健康.HCC发生发展机制复杂多样.研究表明,缺氧诱导因子(hypoxia inducible factor,HIF)对HCC的发生发展具有重要作用,并且HIF相关环状RNA分子(circular RNAs,circRNAs...     

缺氧诱导因子(HIFs)在肾癌发生中的作用及其分子机制

肾癌是一种常见的泌尿系统肿瘤,但在临床上对转移性肾癌的治疗手段还非常有限。缺氧是实体肿瘤微环境的一个重要的基本特征。近年来基于分子机制和临床研究的数据表明,低氧诱导因子(hypoxia-inducible factors, HIFs)在肾细胞癌(renal cell carcinoma, RCC)的发生发展中发挥着至关重要的作用。HIF是一类介导细胞适应低氧状况必需的转录激活因子,由α亚基和β亚基组成。研究已经证实,在RCC中HIF-1α和HIF-2α具有相反的作用,前者作为肿瘤抑制因子,而后者作为癌基因发挥功能。本文综述了HIF信号通路在RCC发生发展中的作用及其分子机制,并对靶向HIF信号通路治疗RCC的进行了探讨,以期指导临床肾细胞癌的精准化治疗和进一步的研究。     

缺氧诱导因子—1

氧是在细胞内呼吸氧化还原反应中电子的最终接受体。缺氧可以引起急性或长期的生理或病理生理反应,在这些过程中缺氧诱导了许多基因的转录。缺氧诱导因子－１（ＨＩＦ－１）是可与红细胞生成素基因（ＥＰＯ）３＇增强子特异结合的由缺氧诱导的ＤＮＡ结合蛋白,可激活Ｈｅｐ ３Ｂ细胞ＥＰＯ的基因转录。并且由于它可在很多细胞被缺氧诱导,包括生成ＥＰＯ和不生成ＥＰＯ细胞,以及许多缺氧诱导的基因都具有ＨＩＦ－１结合位点等特点     

缺氧诱导因子-1在非小细胞肺癌胸水中的表达及其与肿瘤血管生成的关系

目的探讨缺氧诱导因子-1(hypoxia inducible factor-1,HIF-1)在非小细胞肺癌胸水细胞中的表达及其与肿瘤血管生成的关系。方法利用免疫组织化学、免疫细胞化学分别检测1180例非小细胞肺癌标本中HIF-1α和HIF-1β蛋白的表达以及非小细胞肺癌胸水细胞中血管生成标记物CD34和VEGF的表达情况,其中包括1060例非小细胞肺癌胸水标本以及用于对照的120例肺穿刺非小细胞肺癌组织标本。结果 HIF-1α在非小细胞肺癌穿刺组织中的表达率72.50%(87/120)明显高于非小细胞肺癌胸水中表达率17.55%(186/1060),差异有统计学意义(P0.05);HIF-1β在非小细胞肺癌穿刺组织中的表达率为77.50%(93/120),而在非小细胞肺癌胸水中表达率为81.42%(863/1060),差异无统计学意义(P0.05);CD34、VEGF在非小细胞肺癌胸水细胞中阳性表达率分别为77.92%(826/1060)、82.92%(879/1060)。HIF-1α与HIF-1β的表达呈显著正相关(r=0.093,P=0.002),HIF-1α与VEGF的表达呈显著正相关(r=104,P=0.001),HIF-1β与VEGF的表达无相关性(P0.05)。结论 HIF-1α在非小细胞肺癌穿刺组织与非小细胞肺癌胸水中的差异性表达,可能与非小细胞肺癌胸水细胞缺氧适应性调节有关,HIF-1与肿瘤血管生成密切相关。     

低氧诱导因子和角质细胞生长因子双基因重组腺病毒的构建及其在肺泡上皮细胞中的表达

目的：构建同时携带低氧诱导因子-1α（HIF-1α）和角质细胞生长因子（KGF）N腺病毒载体（pAdxsi-GFP-HIF-KGF）,观察其在防治肺损伤潜在的应用前景。方法：低氧处理A549细胞后提取总RNA并逆转录为eDNA作为模板,依据GeneBank公布的HIF-1α cDNA设计引物,并分别引入KpnI和BamHI酶切位点,PCR扩增后将目的基因HIF-1α连接到载体pShuttle-CMV-EGFP上,构建重组质粒pShuttle-GFP—HIF。然后以质粒plRES2-EGFP-KGF为模板,用引入NheI和PmeI酶切位点的引物PCR扩增KGF基因并克隆到重组质粒pShuttle-GFP-HIF上,获得穿梭质粒重组质粒pShuttle—GFP-HIF—KGF。采用细菌内重组方法将目的序列重组到pAdxsi病毒骨架栽体上构建携带HIF．10t和KGF双基因的重组腺病毒载体pAdxsi-GFP-HIF-KGF。检测重组腺病毒滴度后,转染人肺泡上皮细胞A549,检测目的基因的转染表达。结果：通过对构建质粒克隆进行测序及酶切,证实携带HIF—lot和KGF双基因的重组腺病毒载体pAdxsi-GFP-HIF-KGF构建成功,且构建的重组腺病毒纯度好、滴度高。用pAdxsi-GFP-HIF-KGF以100MOI转染A549细胞后24h后在荧光显微镜下可观察到细胞有较强的绿色荧光表达,48h时荧光更强;转染48hELISA法检测培养上清中HIF-1蛋白表达水平为（56．36±4．53）ng／mL,KGF蛋白表达水平为（60．20±2．92）ng／mL。结论：成功构建了腺病毒栽体pAdxsi-GFP-HIF-KGF,其转染效率及目的基因的蛋白表达水平较高,具有潜在的进一步在肺损伤局部应用的前景,为后期制备可以同时发挥KGF、HIF-1作用的基因治疗药物打下基础,同时为高海拔地区应激性急性肺损伤的有效防治提供实验基础。     

Blood Levels of Carbonic Anhydrase 9 Correlate with Clear Cell Renal Cell Carcinoma Activity

Introduction  Biomarkers for early detection of renal cell carcinoma (RCC) may help diagnose minimal residual disease in patients at risk for RCC, can guide anti-angiogenic therapy, or may help identify candidates for adjuvant treatment. In this study, we investigated whether blood levels of carbonic anhydrase 9 (CA9) correlate with RCC tumor burden and therefore disease activity. Methods  CA9 is a von Hippel–Lindau–hypoxia inducible factor target upregulated in clear cell RCC. We used an anti-CA9 antibody (M75)-based enzyme-linked immunosorbent assay test to measure CA9 levels in blood obtained before and after nephrectomy for clinically localized disease in patients with: (1) clear cell RCC, (2) papillary and chromophobe RCC or oncocytoma, or (3) benign kidney lesions, and we compared these samples to blood drawn from normal control individuals. Results  We observed a significant (p < 0.006) decrease in the blood levels of CA9, after nephrectomy for localized disease, in the majority of patients with clear cell RCC (57%). In contrast, patients with nonclear cell RCC, benign disease, or those having undergone debulking nephrectomy for metastatic disease did not have a decrease in CA9 blood levels after nephrectomy. Preliminary longitudinal follow up measurements of CA9 levels in a small group of patients indicated that rising CA9 levels may correlate with disease progression. Conclusions  Plasma CA9 levels correlate with disease activity in a subset of clear cell RCC patients and should be considered in future multiplex RCC biomarker development algorithms.     

大鼠脑损伤后非损伤区域缺氧诱导因子与乳酸的变化研究

目的：研究大鼠脑损伤后非损伤区域缺氧诱导因子（hypoxia-inducible factor-1α,HIF-1α）与乳酸的表达变化。方法：取雄性SD大鼠36只,体重200-300g,参照统计学随机数字表将大鼠随机平均分为正常对照组（6只）、假手术组（6只）、造模组（24只）,3组,造模组分四个时间点12h、72h、1w、2w处死动物（每时间点6只）。使用立体定位仪和液压打击装置,靶向打击大脑中动脉,造大鼠脑外伤模型。采用免疫组织化学法检测脑外伤后不同时间点损伤临近区域脑组织中HIF-1α蛋白表达及乳酸含量的变化。结果：正常组和假手术组脑组织神经细胞HIF-1α表达和乳酸含量无明显变化,而模型组损伤临近区域HIF-1α的表达及乳酸含量的变化规律基本一致,12 h时增多,72h时达到高峰,1w表达下降至2w时恢复正常。造模组12h、72h、1w3个亚组与正常对照组比较差异具有统计学意义p〈0.01,造模组2w亚组与正常对照组比较差异无统计学意义p〉0.01。结论：脑外伤后非损伤区域也有缺血、缺氧的改变,可能与脑外伤后的脑萎缩有相关性。     

大鼠脑损伤后非损伤区域缺氧诱导因子与乳酸的变化研究

目的:研究大鼠脑损伤后非损伤区域缺氧诱导因子(hypoxia-inducible factor-1α,HIF-1α)与乳酸的表达变化。方法:取雄性SD大鼠36只,体重200-300g,参照统计学随机数字表将大鼠随机平均分为正常对照组(6只)、假手术组(6只)、造模组(24只),3组,造模组分四个时间点12h、72h、1w、2w处死动物(每时间点6只)。使用立体定位仪和液压打击装置,靶向打击大脑中动脉,造大鼠脑外伤模型。采用免疫组织化学法检测脑外伤后不同时间点损伤临近区域脑组织中HIF-1α蛋白表达及乳酸含量的变化。结果:正常组和假手术组脑组织神经细胞HIF-1α表达和乳酸含量无明显变化,而模型组损伤临近区域HIF-1α的表达及乳酸含量的变化规律基本一致,12 h时增多,72h时达到高峰,1w表达下降至2w时恢复正常。造模组12h、72h、1w3个亚组与正常对照组比较差异具有统计学意义p<0.01,造模组2w亚组与正常对照组比较差异无统计学意义p>0.01。结论:脑外伤后非损伤区域也有缺血、缺氧的改变,可能与脑外伤后的脑萎缩有相关性。     

乏氧诱导因子及其与非小细胞肺癌的关系

乏氧诱导因子-1广泛存在于哺乳动物的细胞中,是调节细胞乏氧应答的关键因子,由于乏氧诱导因子-1能够在低氧的条件下促进血管的发生、红细胞生成、抑制肿瘤细胞的凋亡,同时能够诱导p-糖蛋白(p-glycoprotein,P-gp)和多药耐药相关蛋白(multidrug resistance related protein,MRP)等的表达,从而引起肿瘤细胞多药抗性,严重影响肿瘤患者的化疗效果。该文介绍乏氧诱导因子-1与非小细胞肺癌(NSCLC)的关系。     

乏氧和辐射诱导的miR-1290 促进宫颈癌细胞EMT发生

目的:研究mi R-1290在宫颈癌Hela细胞上皮间质转化中的作用。方法:模拟肿瘤放射治疗的分割疗法,单次2 Gyγ射线连续照射宫颈癌Hela、Siha细胞诱导辐射抗性细胞株;采用micro RNA芯片技术比较辐射抗性细胞与亲本细胞中mi RNA的表达谱差异;经不同条件乏氧和辐射处理宫颈癌Hela细胞后检测mi R-1290的表达水平;借助mi R-1290及mi R-1290-inhibition慢病毒表达载体,调变mi R-1290在Hela细胞的表达;调变mi R-1290后,划痕实验及Transwell侵袭实验比较Hela细胞的侵袭和转移能力;蛋白质印迹法检测细胞中E钙黏素(E-cadherin)和N钙黏素(N-cadherin)的表达。结果:在宫颈癌辐射抗性细胞中mi R-1290表达水平显著升高(P0.05);乏氧和辐射可诱导mi R-1290在宫颈癌Hela细胞中表达(P0.05);上调表达mi R-1290,Hela细胞出现了明显的间质细胞的形态改变,细胞的侵袭和转移能力明显增强(P0.05)。在Hela细胞中上调表达mi R-1290,降低了细胞中E-cadherin的表达,同时升高了N-cadherin的表达(P0.05)。结论:乏氧和辐射可诱导mi R-1290在宫颈癌Hela细胞中表达,mi R-1290通过调控E-cadherin和N-cadherin的表达促进宫颈癌Hela细胞发生EMT。     

肾癌患者血清VEGF的水平及其与临床病理分期的关系

目的:探讨肾癌患者血清血管内皮生长因子(VEGF)的水平及其与临床病理分期的关系。方法:选择2013年1月至2015年1月在我院行手术治疗的肾癌患者56例为观察组,选择同期在我院进行健康体检的正常成人50例作为对照,所有患者的诊断均经病理切片证实,对所有研究对象,采集其清晨空腹静脉血,用酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清中的VEGF和VEGF受体-1(VEGFR-1)。结果:观察组血清中VEGF和VEGFR-1的浓度分别为(132.75±68.31)ng/mL和(33.76±15.39)ng/mL,均显著高于对照组,差异有统计学差异(均P0.05);不同分期患者血清中VEGF和VEGFR-1浓度差异有统计学意义(均P0.05),病理分期增加,VEGF与VEGFR-1的浓度增加,VEGF与VEGFR-1呈正相关(r=0.625,P0.05)。结论:血清VEGF水平可用于诊断RCC,且对于预判RCC的病例分期具有重要价值。     

MiR-210在缺氧中调控机制的研究进展

MicroRNA(miRNA)是一类包含21-25个核苷酸的单链非编码小RNA.研究表明,miR-210可直接抑制线粒体内铁硫蛋白(Fe-S)的支架蛋白ISCUl/2的表达从而抑制线粒体代谢;miR-210对DNA损伤修复基因-RAD家族有抑制作用,减弱了DNA修复能力;miR-210可以通过调节E2F3、纤维母细胞生长因子受体1(FGFRL1)、同源域基因A1(HOXA1)等阻止细胞增殖,调控细胞周期;缺氧刺激可上调miR-210表达,这对促进血管再生有重要作用.miR-210的表达受缺氧诱导,调控缺氧反应相关基因的表达,提示miR-210有可能成为诊治包括缺血性损伤、肿瘤在内等多种疾病的新靶点.     

Hypoxia and inflammatory bowel disease

Inflammatory bowel disease (IBD) is a general term to describe inflammatory diseases of the gastrointestinal tract such as Crohn's disease and ulcerative colitis. IBD affects approximately 1 in 200 individuals and exerts a significant health and quality of life burden on patients. Surgical intervention can be curative in ulcerative colitis but there is currently no cure for Crohn's disease. Since this is the case, and the fact that patients are often diagnosed at a young age, IBD exerts a significant financial burden on the health care system, and society as a whole.The underlying pathology of IBD is complex and involves a combination of genetic, environmental and microbial factors. Regardless of the underlying causes of the condition, this disease is universally characterized by disruption to the protective epithelial barrier separating the intestinal lumen above from the mucosal immune system below. Once this barrier becomes compromised a sequence of events ensues, that can occur in repetitive cycles to ensure long-term and serious damage to the gut.The role of hypoxia and hypoxia-dependent signalling pathways are increasingly appreciated to play a role in the physiology and pathophysiology of the intestine. The intestinal epithelium normally exists in a state of physiological hypoxia, with additional tissue hypoxia a feature of active inflammatory disease. Furthermore, recent pre-clinical animal studies have clearly supported the rationale for pharmacologically manipulating the oxygen-sensitive hypoxia-inducible factor (HIF) pathway in models of IBD. Thus, this review will discuss the contribution of hypoxia sensitive pathways in the pathology of IBD. Finally we will discuss the emerging evidence for manipulation of hypoxia-sensitive pathways in the treatment of IBD.     

VM在NSCLC中的发生机制及其与化疗疗效关系的探讨

目的:研究血管生成拟态在非小细胞肺癌患者中的发生机制及其与化疗敏感性的关系。方法:收集42例NSCLC患者,分为早期组(I+II期,共19名)和晚期组(III+IV期,共23名)。20名接受手术治疗,22名仅行铂二联化疗,并且化疗组按2周期化疗疗效分有效组(疗效评价CR+PR,7名)和无效组(疗效评价SD+PD,15名)。对比分析VM与分期、化疗疗效、HIF-1α及各种临床病理特征是否有关。结果:早期组NSCLC患者VM阳性率明显高于晚期组(68.4%VS 26.1%,p=0.006),VM阳性组HIF-1α阳性率明显高于VM阴性组(P=0.034)。化疗有效组与无效组之间VM未见明显差异(P0.05)。淋巴结转移及无远处转移组分别较无淋巴结转移及远处转移组VM阳性率高(P0.05)。VM与患者性别、年龄、病理类型、肿瘤大小及分化程度无关(P0.05)。结论:VM作为一种新发现的肿瘤供血方式,其形成主要在NSCLC早期,并且VM的存在与淋巴结转移有关,随着疾病进展,VM逐渐减少。目前尚未发现VM与NSCLC化疗敏感性有关,但HIF-1α在VM形成中起重要作用,VM有可能成为一个新的靶向治疗的靶点,为临床分期及诊疗提供帮助。