球形幽门螺杆菌分子生物学研究

为研究幽门螺杆菌（ＨＰ）球形变异本质,作者通过延期培养和采用亚抑菌浓度抗生素,使３株ＨＰ发生球形变异,对弯曲形和球形ＨＰ作了ＳＤＳ－ＰＡＧＥ、免疫印迹及４个毒力基因片段ＰＣＲ和ＰＣＲ－ＳＳＣＰ分析。ＳＤＳ－ＰＡＧＥ图谱显示球形ＨＰ分子量在７４×１０４以上的蛋白含量减少,免疫印迹显示球形ＨＰ１２５×１０４蛋白条带反应减弱,而抗生素诱变的球形ＨＰ分子量为１１×１０４和６３×１０４的蛋白条带反应增强。ＰＣＲ及ＰＣＲ－ＳＳＣＰ结果表明球形ＨＰ的ｈｐａＡ,ＶａｃＡ,ＣａｇＡ和ＵｒｅＡ４个毒力基因片段未发生缺失,但在ｈｐａＡ或ＶａｃＡ基因中存在点突变     

幽门螺杆菌的球形变异及其特征和意义

幽门螺杆菌 (H elicobacter pylori,简称 Hp)在不利于其生长繁殖的环境中易发生球形变异 ,如延长培养时间、进入无营养成分的水中、改变环境氧浓度、接触抗生素等均可使Hp转变为球形菌。球形 Hp在体外常规培养条件下不能繁殖 ,但具有活力 ,具有低代谢活性 ,在水中可存活较长时间 ,进入动物体内可致动物模型胃炎 ,推测球形 Hp在体内适宜的环境下可回复转变为螺旋菌 ,从而导致胃炎等消化性疾病的发生 ,因而认为球形菌可能在 Hp感染的传播中起重要作用。临床化学治疗剂的应用 ,使 Hp在化学治疗压力作用下转化为球形 ,并潜伏于机体内 ,成为日…     

球形幽门螺杆菌对SGC-7901细胞增殖的影响

目的:了解球形幽门螺杆菌对体外培养细胞增殖的影响.方法:采用抗生素诱导幽门螺杆菌标准菌株NCTC11637球变,将弯曲形和球形菌的菌悬液(1×108个/ml)作5倍梯度稀释,而后分别加入胃癌上皮细胞SGC-7901,共孵育3 d后,用MTT法检测SGC-7901细胞增殖的情况.结果:高浓度的弯曲形和球形幽门螺杆菌(＞8×107个/ml)可明显抑制细胞的增殖(P＜0.05);低浓度的球形幽门螺杆菌(＜1.28×105个/ml)可明显促进细胞的增殖(P＜0.05).结论:球形幽门螺杆菌在体外可影响SGC-7901细胞的增殖.     

幽门螺杆菌依赖于生长期的表达图谱揭示了毒力基因表达调控

幽门螺杆菌(Hp)定植于胃部的苛刻环境,引起胃和十二指肠的多种疾病。对该菌的毒力因子已进行广泛的研究,但对其基因表达调控的综合机制及如何进行表达修饰来应对环境变化和引起慢性胃部感染方面知之甚少。本文使用高密度DNA微阵列分析体外培养Hp依赖于生长期的基因表达综合图     

幽门螺杆菌疫苗的研究现状

幽门螺杆菌（ＨＨ）是慢性胃炎和消化性溃疡的主要病因,并与胃癌的发生密切相关,其相关致病因子主要包括尿素酶、细胞粘附素、过氧化氢酶、脂酶、蛋白酶、细菌毒素和能导致炎症反应的物质。ＨＰ的致病机理与ＨＰ的致病性和宿主免疫应答有关,尤以细菌的毒性占主导地位。近年来国内外均关注ＨＰ的免疫预防和治疗。由于ＨＰ减毒活疫苗的研究条件尚不成熟,目前正重点进行全菌体死疫苗、组分疫苗及基因工程疫苗的研究,ＨＰ动物模型、疫苗的免疫途径、免疫佐剂的研究已取得了令人满意的进展,ＨＰ疫苗的治疗作用更引起了人们的关注。本文对ＨＰ的致病机理、疫苗的研究进展等做一综述。     

幽门螺杆菌致病性展望

<正>大约十年前在澳大利亚西部的佩斯市,Marrshall等偶然从一个延长培养物中发现了目前定名为幽门螺杆菌的弯曲杆菌样微生物。此杆菌及其与胃炎和胃溃疡相关联这一重大发现彻底改变了对胃十二指肠疾病的认识,迄今已积累了有关此种螺杆菌的大量研究资料。本文就目前对这些疾病发病机理的认识从生态学前景加以叙述并确定其进一步研究方向。     

幽门螺杆菌感染免疫逃逸机制的研究

研制有效的幽门螺杆菌疫苗,是防治该菌感染的有效途径。本文综述幽门螺杆菌感染的免疫逃逸机制的研究进展,以便深入了解幽门螺杆菌慢性感染的机制,为研制疫苗提供新的思路。     

幽门螺杆菌感染与冠心病

幽门螺杆菌感染与慢性胃炎、消化性溃疡的发病密切相关。近年来的研究还发现,幽门螺杆菌感染可能与冠心病发病也有关系,但其机制仍不清楚,可能与炎症免疫反应、高半胱氨酸血症、脂质代谢紊乱、促凝物质增加等因素有关。进一步探讨其作用机制将为冠心病的防治提供一条新的途径。     

幽门螺杆菌球形体回复原形的实验研究

目的对幽门螺杆菌（Helicobacter pylori,Hp）球形体进行体内、外回复原形的比较研究,揭示其潜在的传播途径。方法在布氏肉汤的基础上设计了4种Hp再生培养基,对Hp螺旋体、原生质体及球形体进行体外培养;同时采用30只蒙古沙土鼠（Mongolian gerbil）进行体内感染定植实验,对感染小鼠胃粘膜进行Hp定量培养和组织学检测。结果Hp球形体在4种再生培养基中均未能回复生长;而在感染小鼠的体内却观察到了Hp球形体的回复定植。Hp螺旋体感染组在小鼠胃内的定植密度较高,且胃粘膜下可见大量炎症细胞浸润;而球形体感染组并未见到小鼠胃粘膜组织的明显炎症损伤,且仅有少量回复的螺旋体定植。结论Hp球形体作为一种低水平代谢休眠体,代谢活性及毒力均有所减弱,但仍具有潜在的致病性。本研究支持部分Hp球形体具有活力但体外不能培养成活这一假说,提示＂粪-口＂传播应引起更多的关注。     

幽门螺杆菌球状体的研究进展

幽门螺杆菌在体内外各种不利因素的作用下可转变为球状体。该菌球状体是一种有活力但不能培养成活的幽门螺杆菌形态变异体,可能在幽门螺杆菌感染的传播途径及其相关性消化系统疾病的复发中发挥重要作用。本文拟对幽门螺杆菌球状体的诱变因素、超微结合、分子生物学特征、毒力以及与疾病的关系、与原生质球的区别等方面作一综述。     

幽门螺杆菌L型感染及血管生成素的表达与胃癌血管生成的关系

目的探讨幽门螺杆菌L型(Hp-L)感染和血管生成素(Ang)在胃癌中的表达及与肿瘤血管生成的关系。方法采用革兰染色和免疫组化方法检测84例胃癌和30例癌旁正常组织中Hp-L型感染,应用免疫组化方法检测Ang-1、Ang-2蛋白表达水平,计数微血管密度(MVD),结合临床病理因素进行分析。结果胃癌组织中Hp-L型感染率、Ang-2阳性表达率、MVD值明显高于正常组织(P0.05),胃癌中Hp-L型感染与肿瘤分化程度、侵袭深度、临床分期、淋巴结转移有关(P0.05),与Ang-2表达、MVD呈正相关。胃癌组织中Ang-2表达与肿瘤大小、侵袭深度、淋巴结转移有关(P0.05),与MVD呈正相关。Ang-1在胃癌中表达略低于对照组,但无统计学差异(P0.05),Ang-1表达与侵袭深度和MVD呈负相关。结果 胃癌Hp-L型感染在肿瘤血管生成中起重要作用,其机制与Ang-2表达上调,Ang-2/Ang-1比例失衡有关。     

幽门螺杆菌在牙菌斑及胃粘膜分布研究

目的:探讨幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)在牙菌斑及胃粘膜分布状况。方法:采用聚合酶链式反应(polym erase chain reaction,PCR)技术对80 例慢性胃溃疡患者的牙菌斑及胃粘膜组织进行Hp 检测。结果:48 例胃粘膜Hp 阳性的患者中12 例牙菌斑Hp 阳性;胃粘膜Hp 阴性的患者无一例牙菌斑Hp 阳性;胃Hp 阳性检出率大于牙菌斑。结论:幽门螺杆菌不仅存在于胃粘膜组织中,也存在于口腔牙周组织中。提示牙菌斑可能是Hp 的重要寄居地。     

幽门螺杆菌VacA真核表达载体的构建及其诱导细胞空泡化和凋亡

目的：研究幽门螺杆菌空泡毒素作为单一毒力决定簇对真核细胞的作用。方法：用PCR扩增VacA基因片段,克隆入真核表达载体pEGFP—N1,构建重组质粒pEGFP—VacA,转染HeLa细胞,通过相差显微镜和电子显微镜观察细胞形态与结构的变化。结果：重组质粒转染HeLa细胞24h,10％一20％细胞的胞质内出现明显空泡,其中少数细胞发生凋亡改变。结论：成功构建了用于真核表达的重组VacA质粒,转染真核细胞后,观察VacA作用导致的细胞形态结构的变化,为研究VacA作为单一毒力决定簇对真核细胞的作用奠定了基础。     

幽门螺杆菌耐甲硝唑基因分型与耐药性关系研究

目的：了解幽门螺杆菌（Hp）对甲硝唑的耐药株状况,探讨耐甲硝唑基因分型与耐药性的关系。方法：分离培养Hp,以纸片扩散法检测Hp对甲硝唑的耐药性,再用PCR方法扩增甲硝唑耐药基因,用RFLP方法进行基因分型,最后比较基因型与耐药性的关系。结果：武汉地区人群Hp对甲硝唑耐药率为67％,耐药株基因型与耐药性有相关性。结论：可以以基因型鉴定Hp对甲硝唑的耐药性,此方法,稳定可靠。     

VacA在幽门螺杆菌BCF中的表达及其与空泡毒作用的关系

目的 :研究幽门螺杆菌 (H elicobacter pylori,H .pylori)临床分离株的空泡毒作用及其与空泡毒素抗原 (Vacuolated cytotoxin antigen,Vac A)的关系。方法 :用细胞毒试验、SDS- PAGE结合薄层扫描研究H.pylori临床分离株空泡毒作用及其与 Vac A的关系。结果 :6 2株 H.pylori临床分离株 ,43株为空泡毒作用阳性 H .pylori(Toxin+) ,其余为空泡毒作用阴性的 H .pylori(Toxin- )。 30 .2 3% (13/ 43) H .pylori(Toxin+)临床分离株的肉汤培养滤液 (broth culture filter,BCF)含有分子量为 87k Da的 Vac A,而所有H .pylori(Toxin- )的 BCF不含有这种蛋白 ,二者之间差异有显著性 (P<0 .0 5 ) ;Vac A含量与 H .pylori(Toxin+) BCF的空泡毒作用滴度明显相关 (r=0 .6 7,P<0 .0 5 )。结论 :H.pylori(Toxin+)空泡毒作用是由 Vac A引起的。     

幽门螺杆菌对PCNA及HSP60在慢性胃炎中的表达的影响

目的研究HSP60与PCNA在幽门螺杆菌感染慢性胃炎组织中的表达及其意义。方法免疫细胞化学检测Hp 和Hp-慢性胃炎患者胃窦粘膜内的PCNA和HSP60。结果PCNA在浅表性胃炎以弱阳性或阳性表达为主,在萎缩性胃炎以阳性或强阳性表达为主。与Hp-患者相比,Hp 患者胃粘膜PCNA的表达显著增强,两者之间差异显著(P<0·05);HSP60在Hp 患者浅表性胃炎、萎缩性胃炎的阳性率分别为40·0%和76·9%,Hp 患者胃粘膜HSP60的表达比Hp-患者强(P<0·05)。结论幽门螺杆菌的感染增强了PCNA、HSP60在胃粘膜中的表达,与胃粘膜的病理特征有密切的关系,两者可能是胃粘膜病变趋势或临床病理特征的重要指标。     

幽门螺杆菌VacA+BCS致胃上皮细胞基因表达谱的改变

目的：通过观察VacA^ BCS作用胃癌来源的SGC7901细胞后,细胞基因表达谱的改变,分析VacA等分泌性细胞毒力因子的致病性和致病意义。方法：利用常规方法获得VacA^ BCS和VacA^-BCS,然后作用细胞,最后利用cDNA基因表达谱芯片技术观察细胞基因表达谱的变化。结果：发生明显表达差异的基因占基因总数的5％左右,其中已经明确功能的表达差异基因涉及许多重要的细胞功能和生命活动,如基因表达调控、信号转导相关基因的差异表达、细胞骨架相关蛋白表达的变化、细胞凋亡相关因子编码基因表达的变化、以及肿瘤发生相关基因的表达变化等。结论：VacA^ BCS可致细胞基因表达谱发生多层次和多方面的改变,几乎涉及H.pylori相关疾病所有重要病理过程,提示其在H.pylori致病机制中具有重要作用。     

猪胃螺杆样细菌与幽门螺杆菌的比较研究

我们检测１０例普通猪的胄组织,有８例分离到螺杆菌样细菌（ＨＬＯ）。其菌落、菌体形态和某些生化反应与幽门螺杆菌（ＨＰ）相似,但其尿素酶活性较低,ＨＬＯ全菌蛋白的ＳＤＳ一ｐＡＧＥ图谱也与ＨＰ的不同。本文就ＨＰ和ＨＬＯ及其伴发的人、猪慢性胃炎的特点,作了比较和讨论。