电化学法快速检测微生物的发展现状及趋势

自1898年Stewart提出利用电化学法检测微生物,电化学法已发展成为一种微生物快速检测的方法。根据检测的参数不同,电化学微生物检测法可以分为阻抗微生物法和介电常数法。阻抗法主要用于食品工业中微生物的快速检测(≤10⁷ cfu/mL),尤其用于易腐食品的微生物快速检测,以期实现在其发生明显腐败之前得到检测结果。而介电常数则用于生物发酵过程中的微生物数量的快速测定,可以实现在线监测微生物数量及生物发酵过程的实时控制。电化学法由于其检测迅速、可以实现自动化检测,在工业化生产中具有广阔的应用前景。     

杨树木段内光肩星天牛幼虫数量的声学检测

光肩星天牛是重要的检疫性林木害虫,由于幼虫在树干内部取食,现有的方法很难检测到幼虫的为害情况。利用声音检测技术在室内对杨树木段中不同数量的光肩星天牛幼虫产生的声音信号进行检测,结果显示:不同数量光肩星天牛幼虫产生的声音信号在时域、频域方面均无显著差异,脉冲持续时间在3-6 ms范围内;信号的频率在7235.20-7924.20 Hz范围内,且主频为7725.00 Hz。但不同数量光肩星天牛幼虫产生的声音信号的脉冲个数之间存在显著的差异(P0.05),且脉冲个数与幼虫数量之间存在线性关系,即y=13.14x-3.55(R2=0.986),利用此数量关系可以在今后的检测中判断光肩星天牛幼虫的虫口数量和危害状况。     

内生真菌角担子菌B6对连作西瓜土壤尖孢镰刀菌的影响

建立了快速定量检测土壤中角担子菌(Ceratobasidum stevensii)B6的实时定量PCR方法,同时跟踪了土壤中尖孢镰刀菌数量的动态变化,以及不同的发酵组分对开花期西瓜土壤微生物区系的影响。PCR扩增分析表明引物Cf1/Cr1有很好的特异性,能对角担子菌B6特异性扩增得到371bp的条带,对其它10株真菌不能有效扩增。使用荧光定量PCR对施加角担子菌B6的土壤总DNA扩增,结果表明将活菌B6固体发酵物施加到土壤1周后,B6的数量有一定的增殖,达到7.4 log(pg DNA/g干土),随着时间推移,数量逐渐减少,在第5周的时候低于检测限;而液体发酵液处理从一开始施加到土壤后,B6的数量就开始逐渐减少,在第4周的时候就低于检测限。施加活的B6菌4周内能够有效地控制尖孢镰刀菌的数量(尖孢镰刀菌数量维持在5×103 CFU/g干土左右),之后随着B6数量的减少尖孢镰刀菌数量大量增加。活菌B6在土壤中能够存活1个月左右,不会过度影响土著微生物区系,是一株环境友好型菌株,对土壤微环境的干扰较小。     

用数量场描述方向敏感感受野

1965年Barlow ＆ Levick及我国科技工作者分别独立提出了原理大致相同的方向检测感受野模型,但其数学模型却一直未见有报道.本文用数量场方法给出了其数学模型,这是一个Gabor函数模型,并据此解释了方向检测感受野的方向调谐曲线以及方向检测通道数量问题.     

二级水灌溉对土壤及马铃薯块茎中大肠菌群数量的影响

采用多管发酵法检测二级水灌溉对马铃薯种植土壤中大肠菌群数量,结果表明:充分灌溉后的土壤中大肠菌群的数量均高于分根交替灌的土壤;地下滴灌的土壤中大肠菌群数量高于沟灌土壤的大肠菌群数量;二级水经加氯消毒后,土壤中大肠菌群数量明显下降。同样采用多管发酵法检测马铃薯块茎,结果发现:采用加氯消毒后的二级水灌溉的小区E和F中生长的马铃薯,其块茎组织中大肠菌群数量低于其他小区,采用地下滴灌灌溉的小区I和J所种植出的马铃薯块茎中大肠菌群的数量高于采用沟灌灌溉的小区K和L。结果表明:马铃薯块茎中大肠菌群的数量与其生境中大肠菌群的数量有密切关系。     

磁纳米散射探针暗场超灵敏检测具核梭杆菌

【背景】具核梭杆菌（Fusobacterium nucleatum）作为机会致病菌,能够引起许多感染性疾病,已被证实是促直肠癌发展的潜在重要危险因素,临床检测中亟需一种快速简单检测F. nucleatum的方法。【目的】通过建立一种磁纳米探针结合暗场显微镜直接观察计数的方法,可方便快速地检测样本中具核梭杆菌的数量。【方法】在磁纳米颗粒（magnetic nanoparticle,MNP）表面修饰制备的抗F. nucleatum抗体,构建一种特异性结合F. nucleatum的MNP探针。此外,比较MNP探针-暗场显微计数法与实时荧光定量PCR （qPCR）方法检测F. nucleatum的灵敏度。【结果】该方法的检测限可低至3.42×10¹ copies/μL,比qPCR的灵敏度高5倍左右。在实际样本的检测中,该方法与qPCR方法所检测F.nucleatum数量保持一致。【结论】本研究建立的方法用于检测F.nucleatum,操作简单、检测快速（约30 min）、灵敏且成本低,有应用于临床样本检测的前景。     

香蕉试管苗混倍性变异的研究

首次报道了香蕉试管苗变异中一种重要的类型－混倍性变异体,并且以形态变异、染色体数量变异、同工酶（ＭＤＨ,ＥＳＴ,ＰＯＸ）变异和内源激素（ｉＰＡｓ和ＩＡＡ）变异等项检测为主要手段,研究了这种混倍性变异体在试管繁殖过程中的变异性质。用混倍性变异作外植体培养时,细胞水平染色体数量畸变具有起点高的前１５代增长快的特点,同工酶变异率比正常有显著增加。检测了用混倍性变异体作外植体培养所得的大棚苗的染色体数量畸     

板蓝根提取物对小鼠免疫功能的影响

目的 研究板蓝根提取物对小鼠免疫功能的影响.方法 称重法检测小鼠免疫器官指数,血球分析仪分析小鼠外周血免疫细胞数量,比浊法检测小鼠血清中溶菌酶含量,溶血空斑形成实验检测B淋巴细胞抗体形成.结果 板蓝根提取物能明显增加小鼠免疫器官指数,提高小鼠外周血中免疫细胞数量.与对照组相比,外周血中淋巴细胞和白细胞数量分别增加(8.4±1.42)％和(10.52±1.63)％,血清中溶菌酶含量增加(10.82±1.08)％,溶血空斑形成数量增加(13.9±1.3)个/107脾细胞.结论 板蓝根提取物可提高小鼠的体液免疫和细胞免疫等功能.     

利用实时定量PCR快速检测冷鲜猪肉新鲜度指标的方法研究

目前冷鲜猪肉新鲜度指标检测繁琐,探索快速检测冷鲜猪肉新鲜度指标新技术成为研究热点。利用国标法检测发性盐基氮(Total volatile basic n itrogen,TVB-N)含量,平板培养法和实时定量PCR技术分别检测腐败微生物数量。结果显示,冷鲜猪肉在4℃条件下,随储藏时间延长,微生物的菌落总数和TVB-N逐渐增加且呈线性相关,与猪肉品的腐败程度呈正相关;丙酮-氯仿法提取的细菌基因组条带清晰,提取效果好;基于SYBER GreenⅠ的实时定量PCR技术检测的菌落数量与平板培养测得菌落总数利用单因素方差分析结果没有显著性差异(P=0.7190),一致性较好;实时定量PCR方法缩短了检测时间,提高了检测灵敏度。微生物是冷鲜猪肉新鲜度评价的重要指标,实时定量PCR可以作为一种快速高效检测冷鲜猪肉新鲜度指标的新技术。     

肥大细胞及肠嗜铬细胞在人胃消化性溃疡发病中的作用

目的探讨肥大细胞与肠嗜铬细胞在人胃溃疡发病中的作用。方法收集胃溃疡标本90例,正常胃组织30例。采用甲苯胺兰检测肥大细胞的数量、分布,免疫组化染色检测类胰蛋白酶、5-羟色胺表达,另取5例新鲜胃溃疡组织进行电镜检测。结果溃疡组与对照组比较肥大细胞及肠嗜铬细胞数量均明显增加（P〈0.05）,肥大细胞在溃疡组脱颗粒现象明显,线性相关分析显示肥大细胞与肠嗜铬细胞数量呈正相关,相关系数为0.741。结论肥大细胞与肠嗜铬细胞在人胃溃疡发病中均发挥了作用。     

对比超声造影与磁共振在子宫肌瘤的检测和定性中的应用研究

摘要 目的：探讨超声造影（CEUS）之于磁共振（MRI）在子宫肌瘤的检测和定性中的应用价值。方法：选取2016年5月～2022年3月中国人民解放军总医院第一医学中心经病理证实的46例子宫肌瘤患者作为研究对象,所有患者术前均行CEUS和MRI检查,分析并记录子宫肌瘤的数量、大小、位置和有无强化。两种检查方法检测出子宫肌瘤的大小采用t检验进行比较。两种检查方法检测出子宫肌瘤的数量、位置和有无强化采用x²检验进行比较。采用Pearson相关系数分析MRI和CEUS两种检查方法检测出子宫肌瘤的数量、大小、位置和有无强化的相关性。结果：46例患者术后病理总共检测出115个子宫肌瘤。MRI检测出111个（96.52%）,CEUS检测出106个（92.17%）。MRI和CEUS检查测量子宫肌瘤大小的平均值分别为（4.66±1.83）cm、（4.51±1.74）cm。CEUS检测出的子宫肌瘤中有103个的位置无异议,MRI检测出的子宫肌瘤中有107个的位置无异议。在CEUS检查中,有99个子宫肌瘤显示有强化;在MRI检查中,有102个子宫肌瘤显示有强化。两种影像学方法检测出子宫肌瘤的数量、大小、位置和有无强化对比差异均无统计学意义（均P＞0.05）。通过Pearson相关系数分析MRI和CEUS两种影像学检查方法检测出子宫肌瘤数量、大小、位置和有无强化的相关性分别为0.95、0.96、0.94、0.97（均P＜0.001）。结论：CEUS对子宫肌瘤的检测和定性诊断具有与MRI相同的诊断价值,可作为评估子宫肌瘤的一种替代成像方法。     

基于ATP生物发光法的微生物数量快速检测技术的研究进展

微生物数量的快速检测一直是工业生产与食品行业需要解决的问题,腺嘌呤核苷三磷酸(adenosine triphosphate,ATP)生物发光法具有操作简便、检测周期短等优点,可满足一般微生物检测的需求。然而,ATP生物发光法的准确性也受到不同因素的影响,如微生物的ATP检测限值较高、微生物自身及其他因素(如非微生物ATP、提取剂种类、荧光素酶活性等)均对微生物数量的检测产生影响。本文简述了不同微生物数量检测方法的优缺点,介绍了ATP生物发光法的发展历程及原理,综述了非微生物ATP与游离ATP、微生物量、ATP提取剂、荧光素酶等因素对ATP生物发光法灵敏度与稳定性的影响,归纳总结了ATP生物发光法及检测设备在食品、医疗、污水处理等领域的应用现状,并就ATP生物发光法体系的优化及ATP在线检测的应用等方面进行了展望,以期为ATP生物发光法的高效应用提供新的思路。     

半双工PIT遥测技术的监测效果

PIT遥测技术作为鱼道过鱼效果监测的一种重要方法,其设备本身具有高可靠性、高精度、高自动化等优势,得到广泛应用。在野外过鱼效果监测中,受外界环境干扰下如何维持高精度的监测是保证数据准确性的难点之一。本文以鱼类通过PIT天线的视频数据为基础,验证半双工PIT遥测系统的监测效果,分析过鱼数量和运动方向对半双工PIT遥测系统准确率的影响。结果表明:半双工PIT遥测系统的监测效果较好,试验鱼通过大小天线(Ⅱ、Ⅰ)的误差时间为(0.40±0.46) s(Mean±SD),最大误差2.53 s;过鱼数量对大小天线的检测效率具有显著影响,当一尾鱼通过天线时,大小天线的检测效率分别高达97.3%和93.9%;当过鱼数量增加至8尾时,大小天线的检测效率分别降低至7.5%和3.1%;运动方向对天线Ⅰ的检测效率存在显著影响,对天线Ⅱ的检测效率不存在显著影响。提出了一些在实际监测中的可行性措施,以提高PIT遥测系统在鱼道过鱼效果监测中数据的准确性。     

应用qPCR方法快速定量检测阴道分泌物中乳杆菌的研究

目的建立快速、定量检测女性阴道分泌物中乳杆菌的方法。方法合成针对乳杆菌的特异性引物,建立乳杆菌qPCR标准曲线后,进一步对收集得到的健康女性及细菌性阴道病女性阴道分泌物样品中乳杆菌进行定量检测。结果引物仅扩增出乳杆菌特异性DNA条带,qPCR能够检测到各分泌物样本中乳杆菌的数量。结论建立了一种快速、定量女性阴道分泌物中乳杆菌检测方法。     

土壤中香蕉枯萎病菌FOC4的实时荧光定量PCR检测

香蕉枯萎病发病率与土壤中香蕉枯萎病菌FOC4的数量密切相关。为了在香蕉定植前准确检测土壤中FOC4的数量,本研究以本实验室克隆的FOC4特异性基因片段作为标准线性片段,设计特异性荧光定量引物:以标准线性片段为模板建立荧光定量标准曲线,以无FOC4的土壤配置FOC4孢子浓度梯度标准土样,采用MoBio土壤基因组DNA提取试剂盒提取总DNA,以各FOC4孢子浓度梯度(1.66×10~3～1.66×108)的标准土样所提取的总DNA为模板进行实时荧光定量PCR,测定各标准土样中FOC4数量。以标准土样FOC4线性片段基因拷贝数的结果与FOC4线性片段基因100%提取率时的理论拷贝数的比值作为该标准土样FOC4基因组的提取率,对待检测土样FOC4的定量检测值进行校正,建立了一套较准确检测土壤FOC4数量的实时荧光定量PCR技术,其检测下线可达400个孢子/克土。应用该项技术对南天黄品种蕉园10个枯萎病病株的土样和10个未发病植株的土样和巴西蕉园5个发病植株的土样进行实际定量检测。结果表明,南天黄发病植株、未发病植株和巴西蕉发病植株的土样中FOC4的数量分别为每克土5 100～11 000个孢子/克土,3 500～7 800个孢子/克土和11 800～101 000个孢子/克土。本研究可准确检测土壤中的FOC4含量,同时也为香蕉枯萎病的防控措施的制定提供了帮助。     

数学期望模型在样本混合检验中的应用

目的:对混合样本方法检测大量样本进行理论分析与模型设计。方法:以建立数学期望模型为准则,根据相应参数确定混合样本的数量。结论:依据感染率或患病率的预估值确定混合样本的数量,使总的检验数达到最小的研究思路而建立数学模型具有一定可行性。与传统的逐一检测方法相比,可以大大减少检测次数。提高工作效率。并且在现实中具有很强的操作性。     

RAPD技术及其在动物遗传育种中的应用

RAPD技术是在PCR基础上发展起来的一种DNA多态性检测技术,已广泛应用于基因组研究的各个领域。本文概述了RAPD反应的原理、特点,总结了其在遗传多样性检测、亲缘关系鉴定、遗传连锁分析和数量性状的辅助标记选择等方面的应用,并肯定了RAPD在动物遗传育种领域的应用前景。     

健康妊娠妇女阴道乳酸杆菌及pH变化的研究

目的研究健康妊娠妇女阴道乳酸菌数量及pH的变化与妊娠时间的关系。方法选择20例健康非妊娠妇女,60例健康妊娠妇女(其中早期妊娠、中期妊娠及晚期妊娠各20例)阴道分泌物进行乳酸杆菌数量检测及pH测定,并对乳酸杆菌产生过氧化氢的情况进行检测。结果随着妊娠时间的增加,乳酸杆菌的数量明显增高,伴随阴道分泌物的pH逐渐降低。结论乳酸杆菌与健康妊娠妇女阴道的生物屏障和酸性环境的维持有重要关系。     

生物发光协助净化环境

对释放入环境的工业污染物数量的关注激励科研人员研制用于检测毒素,特别是重金属的简便而又精确的方法。微生物学家现已提供了一种新的检测毒素和重金属的途径,即利用依据其所处环境中的金属浓度发光或不发光的生物发光细菌。 David Holmes及其在Clarkson大学(Potsdam,NY)的同事将一种生物发光海洋细菌费氏弧菌(Vibrio fischeri)的发光基因与其它相应于存在铜或汞的生物基因融合,制备了检测铜和汞的遗传工     

ELISA与IFA检测鸡血清ALV-A/B特异性抗体相关性比较

为了研究ELISA和IFA检测鸡血清中ALV-A/B特异性抗体的相关性,将A/B亚群禽白血病病毒接种到DF1细胞上,用ELISA检测过的鸡血清作为一抗进行IFA检测,比较ELISA检测的S/P值与IFA检测的血清效价之间的相关性。结果表明ELISA检测鸡血清中ALV-A/B抗体的S/P值与IFA检测ALV-A/B的血清效价之间存在显著正相关(r=0.974 35;P﹤0.001)。由此可推测ELISA检测鸡血清的S/P值与IFA检测的血清效价之间存在显著相关性,且呈正相关。IFA检测血清阳性率与ELISA检测结果完全一致,因此当血清样品数量少时,可用IFA检测替代ELISA检测,既节约检测成本也提高了检测的准确性。