依达拉奉对大鼠实验性自身免疫性脑脊髓炎的保护作用

目的：研究依达拉奉对实验性自身免疫性脑脊髓炎（Experimental Autoimmune Encephalomyelitis,EAE）的影响。方法：72只健康成年雌性Wistar大鼠随机分为：正常对照组、EAE组、EAE＋小剂量依达拉奉组、EAE＋大剂量依达拉奉组（n=18）。正常对照组注射生理盐水,其它组采用自制完全抗原诱导EAE模型。EAE组建模后不做任何处理,EAE＋小剂量依达拉奉组、EAE＋大剂量依达拉奉组分别在建模后给予依达拉奉4mg/k·d、10mg/k·d。比较各组发病率并行神经功能评分,取脊髓组织行HE染色、iNOS、OPN免疫组织化学染色观察。结果：依达拉奉干预组大鼠较EAE组发病率、神经功能缺损评分均明显降低（P〈0.05）。HE结果显示依达拉奉干预组较EAE组炎症反应减少,损伤程度减轻。依达拉奉组iNOS、OPN表达均明显小于EAE组（P〈0.05）。大剂量依达拉奉iNOS、OPN表达均低于小剂量依达拉奉组（P〈0.05）。结论：依达拉奉对EAE具有保护作用,可能与抑制小神经胶质细胞活化,减轻炎症反应,降低iNOS和OPN表达有关。     

大鼠脑缺血-再灌注损伤后Beclin-1和LC3的表达及依达拉奉的干预作用

目的:检测大鼠脑缺血-再灌注损伤模型中自噬相关蛋白Beclin-1和LC3在皮层和海马区表达以及依达拉奉的干预。方法:将SD大鼠(雄性)随机分为以下几组:假手术组、模型组、依达拉奉组。采用Zea Longa线栓法通过大脑中动脉阻塞2 h再灌注24 h制备脑缺血-再灌注模型,其中假手术组仅分离左侧颈总动脉。剂量为10 mg/kg的依达拉奉于再灌注前15 mim经腹腔注射。采用神经行为学评分评估大鼠脑神经损伤表现;TTC染色判断模型是否成功和脑部损伤程度;对大鼠神经元细胞进行HE染色,观察其在皮层和海马区的变化;免疫组化检测Beclin-1和LC3的表达。结果:脑缺血-再灌注24 h后,依达拉奉组神经行为学评分为(2.00±0.67),显著低于模型组的(2.50±0.53)(P0.05)。模型组大鼠脑部观察到梗死灶出现,皮层和海马区神经元受损伤,依达拉奉组上述症状减轻。皮层区假手术组、模型组、依达拉奉组的Beclin-1阳性表达率分别为(11.08±0.85)%、(33.42±1.57)%和(25.61±1.39)%,模型组与假手术组和依达拉奉组比较差异都有统计学意义(P0.05);海马区假手术组、模型组、依达拉奉组的Beclin-1阳性表达率分别为(10.34±0.21)%、(31.82±1.73)%和(22.74±1.26)%,模型组与假手术组和依达拉奉组比较差异都有统计学意义(P0.05)。皮层区LC3的阳性表达率分别为(15.33±0.47)%、(39.72±1.73)%和(28.53±1.61)%,模型组与假手术组和依达拉奉组比较差异都有统计学意义(P0.05);海马区LC3的阳性表达率分别为(13.74±0.37)%、(32.53±1.43)%和(25.38±1.23)%,模型组与假手术组和依达拉奉组比较差异都有统计学意义(P0.05)。结论:脑缺血-再灌注后Beclin-1和LC3表达水平增加,而依达拉奉可能通过下调它们的表达减少自噬发生,减轻脑损伤。     

依达拉奉对毒死蜱所致大鼠脑损伤的保护作用及其机制

目的:探讨依达拉奉在毒死蜱诱导的神经元凋亡中的保护作用及其线粒体机制。方法:在随机双盲的原则下,将大鼠分为对照组、毒死蜱组、依达拉奉组(n=6);以毒死蜱(18 mg/0.7 ml/kg, sc.)造模,在注射毒死蜱1 h后用依达拉奉(10 mg/1.6 ml/kg, ip.)治疗。连续注射毒死蜱及依达拉奉28 d后,通过旷场和水迷宫试验测试大鼠学习记忆能力。在心脏灌流后取大鼠脑组织,通过HE染色检测大脑海马区的神经元损伤情况以及透射电子显微镜观察线粒体和细胞核损伤情况。测定Na⁺-K⁺-ATP酶、ATP含量判断线粒体损伤情况。用免疫组织化学和免疫印迹法测定线粒体分裂蛋白DRP1及DRP1的Ser 637位点磷酸化的表达。结果:与对照组相比,毒死蜱组大鼠在旷场实验的3 min内的总运动距离和平均速度明显减小(P<0.01),在水迷宫试验中的1 min内的逃避潜伏期明显延长、平台穿越次数明显减少(P<0.01),脑组织的ATP酶活性明显降低(P<0.01)且ATP含量下降(P<0.05)、线粒体DRP1的Ser637位点...     

长春西汀联合依达拉奉治疗急性脑梗死的临床价值分析

目的:观察长春西汀联合依达拉奉治疗急性脑梗死的临床疗效。方法:选取我院确诊的急性脑梗死96例患者随机分组,依达拉奉组给予单纯依达拉奉注射液治疗,联合组采用依达拉奉和长春西汀联合使用,疗程14天。结果:依达拉奉组与联合治疗组神经功能总有效率相当(67.39%vs.72.00%,p0.05)。进一步分析联合治疗组神经功能显效率高于依达拉奉组(38.00%vs.23.91%,p0.05)。神经功能缺损评分和日常活动能力评分显示,依达拉奉和长春西汀联合治疗更有优势。结论:长春西汀联合依达拉奉治疗急性脑梗死具有良好的临床应用价值。     

依达拉奉治疗急性脑出血的临床疗效及对血浆MMP-9水平的影响

目的:观察依达拉奉治疗急性脑出血的临床疗效和对血浆基质金属蛋白酶-9(MMP-9)水平的影响。方法:60例急性脑出血患者随机分为治疗组和对照组各30例。对照组给予常规治疗,治疗组在对照组治疗基础上加用依达拉奉,并在治疗后24h内和14d进行神经功能缺损评分及血浆MMP-9水平测定。结果:治疗组神经功能缺损评分、血浆MMP-9水平较对照组降低(P<0.05、P<0.01)。结论:依达拉奉可改善急性脑出血患者神经功能,可能与降低MMP-9水平有关。     

针刺联合依达拉奉对缺血再灌注大鼠视网膜自由基代谢的影响

目的:研究针刺联合依达拉奉对大鼠视网膜缺血再灌注时自由基代谢的影响.方法:大鼠随机分为五组:假手术组、模型组、针刺组、依达拉奉组和联合(针刺+依达拉奉)组.建立缺血再灌注模型,于造模后1d,行视网膜电流图(ERG)检查,取视网膜组织,测定各组MDA含量及T-SOD、GSH-Px、CAT活性的变化.结果:①ERG a、b波振幅相对恢复率:联合组、针刺组及依达拉奉组与模型组相比,a、b波振幅相对恢复率升高,差异有显著性(P＜0.05),与针刺组和依达拉奉组相比,联合组作用更为显著(P＜0.05).②MDA含量及T-SOD、GSH-Px、CAT活性:联合组、针刺组及依达拉奉组与模型组相比,MDA显著降低,SOD、GSH-Px、CAT显著升高,差异有显著性(P＜0.05),联合组作用显著优于针剌组或依达拉奉组(P＜0.05).结论:针刺联合依达拉奉具有干预自由基代谢作用,明显减轻缺血再灌注引起的视网膜氧化应激损伤,对视网膜功能起保护作用.     

不同剂量阿托伐他汀联合依达拉奉对急性脑梗死患者血脂、炎症因子和脑血流指标的影响

摘要 目的：探讨依达拉奉分别联合不同剂量的阿托伐他汀对急性脑梗死（ACI）患者血脂、炎症因子和脑血流指标的影响。方法：纳入2018年3月~2020年1月期间我院收治的81例ACI患者,采用随机数字表法分为低剂量组（依达拉奉联合10 mg/d阿托伐他汀治疗）、中剂量组（依达拉奉联合20 mg/d阿托伐他汀治疗）和高剂量组（依达拉奉联合40 mg/d阿托伐他汀治疗）,每组各27例。对比三组疗效、血脂、炎症因子、脑血流指标、相关量表评分及不良反应。结果：治疗14 d后,高剂量组、中剂量组总有效率高于低剂量组,且高剂量组高于中剂量组（P<0.05）。治疗14 d后,高剂量组、中剂量组美国国立卫生研究院卒中量表（NIHSS）、改良Rankin 量表（mRS）评分和总胆固醇 (TC ) 、三酰甘油 (TG )、低密度脂蛋白胆固醇 (LDL-C )、超敏C反应蛋白（hs-CRP）、白介素-8（IL-8）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）低于低剂量组,且高剂量组低于中剂量组（P<0.05）。治疗14 d后,高剂量组、中剂量组高密度脂蛋白胆固醇 (HDL-C )高于低剂量组,且高剂量组高于中剂量组（P<0.05）。治疗14 d后,三组平均血流速度较治疗前增加,外周阻力较治疗前降低（P<0.05）,但三组间平均血流速度和外周阻力比较差异无统计学意义（P>0.05）。三组不良反应发生率组间对比差异无统计学意义（P>0.05）。结论：40 mg/d阿托伐他汀联合依达拉奉治疗ACI患者,可更加有效控制疾病进展,改善机体血脂、炎症因子,较为安全可靠,但有关脑血流的改变可能与阿托伐他汀剂量无关。     

依达拉奉通过Nrf2信号分子调节氧化应激减轻脑缺血再灌注诱导的神经损伤

本研究旨在探讨依达拉奉(edaravone,ED)在脑缺血再灌注损伤中发挥神经元保护作用与Nrf2信号分子间的关系。体内实验利用脑内脑中动脉闭塞(middle cerebral artery occlusion model,MCAO)建立SD大鼠脑缺血再灌注损伤模型,体外实验采用过氧化氢(H2O2)损伤PC12细胞建立氧化应激模型。通过TTC染色、HE染色、Nissl染色来检测大脑的病理状态。测定活性氧(reactive oxygen species,ROS)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性,来反映氧化应激水平。此外,通过Hoechst 33342染色和线粒体膜电位(mitochondrial membrane potential,MTP)测定,探究细胞水平的损伤。采用免疫组织化学和蛋白质印记测定Nrf2的表达。构建Nrf2敲除的PC12细胞系,证实Nrf2信号分子抑制氧化应激损伤的作用。结果提示,经依达拉奉给药后,在动物体内水平,TTC染色证实,脑缺血再灌注损伤(cerebral ischemia reperfusion injury,CIRI)大鼠的脑组织梗死体积减小(P<0.001),ROS和MDA水平下降(P<0.01),SOD活性上升(P<0.01);在细胞水平,凋亡细胞减少(P<0.05),MTP上升(P<0.01),ROS和MDA水平下降,SOD活性上升(P<0.01);在分子水平,免疫组化和Western印迹结果均提示,Nrf2蛋白质含量较正常组增加。H2O2诱导Nrf2基因敲除的PC12细胞损伤加重,且依达拉奉的治疗效果明显削弱。综上所述,Nrf2在依达拉奉减轻脑缺血再灌注诱导的氧化应激损伤中发挥关键作用。     

依达拉奉对犬自体肾移植缺血再灌注损伤的保护作用研究

目的:探讨依达拉奉对犬自体肾移植缺血再灌注损伤的影响及机制。方法:将18只体重匹配的健康杂种犬随机分为假手术组(S组)、依达拉奉组(ED组)、生理盐水组(PS组),每组各6只。S组仅进行肾手术切除;ED组在阻断前在供体静脉内注入依达拉奉10 mg/kg,然后使用200 mL加入依达拉奉10 mg/kg的UW液灌洗供体肾并在同样的保存液中保存供体肾8小时,且再灌注开始时立即在受体静脉内给予依达拉奉10 mg/kg;PS组同法使用相同体积的生理盐水。再灌注4 h后检测MDA、MPO、SOD、iNOS、eNOS等活性;术后24 h检测血清肌酐(Cr)、尿素氮(BUN)浓度;光镜下观察肾组织病理学改变。结果:PS组MDA显著高于S组及ED组(P0.05),PS组MPO含量亦低于S组及ED组(P0.05)。PS组SOD、eNOS含量显著低于于S组及ED组(P0.05),PS组iNOS含量高于S组及ED组(P0.05),ED组的肾损伤明显减轻。结论:依达拉奉能减轻肾移植缺血再灌注损伤,其机制可能与减轻肾脂质过氧化反应有关。     

依达拉奉联合瑞舒伐他汀对高血压患者PCI术后对比剂肾病的预防作用

目的:探讨依达拉奉联合瑞舒伐他汀对高血压患者经皮冠状动脉介入治疗(PCI)后对比剂肾病的预防作用,旨在为高血压患者PCI术后的治疗提供参考。方法:选择120例择期行PCI术的高血压患者,随机分为依达拉奉组(ED组)、瑞舒伐他汀组(RO组)、依达拉奉与瑞舒伐他汀联合组(C组),各40例。ED组给予静脉滴注生理盐水100 mL+依达拉奉30 mg,每12小时一次;RO组给予瑞舒伐他汀10 mg口服,每晚一次;C组将2者联合应用。所有患者均于术前3天开始用药。观察3组患者入院时及术后第1天血尿素氮(BUN)、肌酐(Scr)、血清胱抑素(Cys C)、血清丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)以及对比剂肾病的发病率。结果:ED组、RO组、C组CIN的发病率分别为10%、7.5%、2.5%,C组CIN发病率明显低于ED组与RO组,差异有统计学意义(P0.05)。术后C组Scr、BUN、Cys C、MDA浓度明显低于ED组与RO组(P0.05),SOD含量高于ED组与RO组(P0.05)。结论:依达拉奉联合瑞舒伐他汀能明显降低高血压患者PCI术后对比剂肾病的发病率,机制可能与抗氧化应激反应有关。     

口服卡介菌诱导免疫耐受的CD4+CD25+调节性T 细胞机制研究

目的:研究口服卡介菌诱导免疫耐受对CD4+CD25+调节性T细胞的影响。方法:采用口服MPB制备EAE大鼠模型,随机分为BCG组(0.5mg/kg)和EAE模型组(PBS),每组各15只,连续经口灌服给药14d,同时选取15只健康大鼠作为对照组。分别于免疫后15d、27d流式细胞术检测外周血、胸腺及脾脏中CD4+CD25+T淋巴细胞百分率,ELISA检测血清IL-6、TGF-β、IgE、IgG含量。结果:与EAE模型组相比,免疫后BCG组大鼠外周血、胸腺及脾脏中CD4+CD25+T淋巴细胞百分率增加,血清IL-6、TGF-β含量上升,血清IgE、IgG抗体水平下降。结论:口服BCG通过上调淋巴器官中CD4+CD25+T淋巴细胞比例,抑制效应性T细胞活性,发挥免疫耐受作用。     

Recovery of malondialdehyde in urine as a 2,4-dinitrophenylhydrazine derivative after exposure to chloroform or hydroquinone

Malondialdehyde (MDA) excretion in urine as an index for toxicological effects of chloroform and hydroquinone was evaluated. In a first series of experiments three groups of rats were used: non-pretreated rats (group I), starved rats (group II) and starved plus phenobarbital pretreated rats (group III). Chloroform (0.15 or 0.30 ml/kg, p.o.) was given as a single dose. The MDA excretion was related to the pretreatment, and in group III to liver damage. In a second series of experiments control rats were administered hydroquinone (100 or 200 mg/kg, p.o.), which induced a dose-related MDA excretion. These data indicate that the MDA assay was a selective and accurate marker for toxicological effects induced by the tested compounds.     

Edaravone inhibits acute renal injury and cyst formation in cisplatin-treated rat kidney

Background: Although cis-diamminedichloroplatinum (II) (cisplatin) is an effective anticancer agent, its clinical use is highly limited predominantly due to its adverse effects on renal functions. The present work examined the therapeutic potential of edaravone, a free radical scavenger, for inhibiting cisplatin-induced renal injury.

Methods: Edaravone, 3-methyl-1-phenyl-pyrazolin-5-one, was administrated intravenously at a dose of 30 mg/kg of body weight to male Wistar rats (200-220 g). After 30 min, cisplatin was injected intraperitoneally at a dose of 5 mg/kg of body weight. At the indicated times after the treatment, functions and histological changes of the kidney were analyzed. To test the therapeutic potential of edaravone in chemotherapy, its effect on the anticancer action of cisplatin was examined in ascites cancer-bearing rats.

Results: We found that cisplatin rapidly impaired the respiratory function and DNA of mitochondria in renal proximal tubules, thereby inducing apoptosis of tubular epithelial cells within a few days and chronic renal dysfunction associated with multiple cysts one-year after the administration. Administration of edaravone inhibited the cisplatin-induced acute injury of mitochondria and their DNA and renal epithelial cell apoptosis as well as the occurrence of chronic renal dysfunction and multiple cyst formation. The anticancer effect of cisplatin remained unaffected by intravenous administrating of edaravone.

Conclusions: These results indicate that edaravone may have therapeutic potential for inhibiting the acute and chronic injury of the kidney induced by cisplatin.     

长期低剂量摄入烯草酮原药对大鼠的毒性作用

目的研究长期低剂量摄入烯草酮原药对大鼠的毒性作用,确定其最大无作用剂量,为安全生产及慢性毒性实验提供剂量参考。方法将80只SD大鼠（雌雄各半）按体重随机分为4组,分别为烯草酮原药14.9mg/kg.d体重组、89.6 mg/kg.d体重组、537.5 mg/kg.d体重和正常对照组。在实验结束后处死实验大鼠,同时检测血液学、血清生化、体重和脏器系数等指标,并对结果进行统计学处理。结果与结论烯草酮原药对雄、雌性大鼠经口染毒剂量为89.6 mg/kg.d体重及以上时,对大鼠有毒性效应;长期低剂量摄入烯草酮原药对大鼠最大无作用剂量为14.9 mg/kg.d体重。     

阿司匹林对去势大鼠腰椎骨密度及微观结构的影响

目的:研究阿司匹林对去势(卵巢切除)大鼠腰椎骨密度及微观结构的影响。方法:取48只3月龄SD雌性大鼠随机分为6组:去势组(OVX组)、对照组(Sham组)及4个阿司匹林治疗组(Aspirin组),每组8只。OVX组及Aspirin组采用卵巢切除法建立骨质疏松模型。去势后1周,阿司匹林治疗组剂量分别为2.25、4.46、8.92及26.75 mg/kg(A1、A2、A3及A4组),每天灌胃一次,OVX组及Sham组予同等量生理盐水灌胃。灌胃3个月后处死,剖取腰椎椎体,以双能X线吸收骨密度测量仪(DXA)和Micro-CT进行测量分析。结果:DXA分析结果显示:阿司匹林各剂量组BMD值较OVX组有统计学差异(P<0.01)。Micro-CT分析表明:与OVX组比较,阿司匹林各剂量组BV/TV、Tb.Th、Tb.N、BMD均显著性提高(P<0.01),BS/BV、Tb.Sp显著性降低(P<0.01),阿司匹林各剂量组BV/TV、BS/BV、Tb.Th、Tb.N、Tb.Sp、BMD与Sham组相比有统计学差异(P<0.01)。结论:阿司匹林可以改善去势大鼠骨小梁结构,增加骨质密度,对去势大鼠骨质疏松具有防治作用,其作用途径可能包括抑制骨吸收和刺激骨形成两方面。     

Copper deficiency and hyperlipoproteinemia induced by a tetramine cupruretic agent in rabbits

The effectiveness of a cupruretic agent, N,N'-bis-(2 amino ethyl)-1,3-propanediamine HCl or 2,3,2-tetramine HCl (TETA), in the induction of copper (Cu) deficiency and the ability of a Cu-deficient diet in the maintenance of the depressed Cu status 10 wk after TETA treatment were examined in this study. In the first experiment, 42 male New Zealand White rabbits, 35 d of age, were randomly divided into three dietary treatments: a copper (Cu)-deficient (2.3 mg Cu/kg diet), a Cu-adequate (13.5 mg Cu/kg diet), and a commercial ration (21.6 mg Cu/kg diet) group. A single oral dose of 100 mg of 2,3,2-tetramine HCl TETA/kg body wt/d were administered to half of the rabbits from each treatment group for 10 d while the remaining rabbits were untreated. In the second experiment, 10 similar rabbits were assigned to three treatments: Cu-deficient plus TETA (n = 4); Cu-adequate plus TETA (n = 3); and Cu-adequate alone (n = 3). The rabbits were fed a TETA dose of 100 mg/d for three 4-d periods over 3 wk, and thereafter maintained on the diets for another 10 wk. Rabbits from the first experiment fed Cu-deficient diet and treated with TETA demonstrated cardiac hypertrophy and markedly reduced plasma and liver Cu concentrations that indicated that the animals were Cu-deficient. Significant elevations (twofold) in low density lipoprotein (LDL) protein, cholesterol, triglyceride, and apolipoprotein B (apo B) concentrations were observed in TETA treated rabbits fed Cu-deficient diet. In the second experiment, the plasma LDL protein level remained elevated, the plasma Cu level was reduced 45%, and the Cu level of the heart when expressed as microgram/g dry tissue was reduced, 10 wk post TETA treatment in rabbits maintained on Cu-deficient diet. Thus, Cu deficiency and hyperlipoproteinemia was rapidly induced by TETA and was still evident 10 wk posttreatment in rabbits maintained on a Cu-deficient diet.     

口服卡介菌诱导免疫耐受的CD4^＋CD25^＋调节性T细胞机制研究

目的：研究口服卡介菌诱导免疫耐受对CD4^＋CD25^＋调节性T细胞的影响。方法：采用口服MPB制备EAE大鼠模型,随机分为BCG组（0.5mg/kg）和EAE模型组（PBS）,每组各15只,连续经口灌服给药14d,同时选取15只健康大鼠作为对照组。分别于免疫后15d、27d流式细胞术检测外周血、胸腺及脾脏中CD4^＋CD25^＋T淋巴细胞百分率,ELISA检测血清IL-6、TGF-β、IgE、IgG含量。结果：与EAE模型组相比,免疫后BCG组大鼠外周血、胸腺及脾脏中CD4^＋CD25^＋T淋巴细胞百分率增加,血清IL-6、TGF-β含量上升,血清IgE、IgG抗体水平下降。结论：口服BCG通过上调淋巴器官中CD4^＋CD25^＋T淋巴细胞比例,抑制效应性T细胞活性,发挥免疫耐受作用。